实训六 细菌的药敏试验(ok)
药物敏感试验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过药物敏感试验，了解病原菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供科学依据，以指导临床治疗，提高治疗效果。
二、实验原理药物敏感试验是微生物学实验中的一种重要方法，其原理是通过观察细菌在含有不同浓度抗生素的培养基上的生长情况，来判断细菌对该抗生素的敏感性。
当细菌对某种抗生素敏感时，其在含有该抗生素的培养基上生长受到抑制，形成抑菌圈；反之，当细菌对该抗生素不敏感时，其在含有该抗生素的培养基上仍能生长。
三、实验材料1. 样本：临床分离的细菌菌株2. 培养基：琼脂平板、肉汤培养基3. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素等4. 仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、镊子等5. 试剂：生理盐水、消毒液等四、实验方法1. 样本处理：将临床分离的细菌菌株接种于肉汤培养基中，37℃培养18-24小时，观察细菌生长情况。
2. 琼脂平板制备：将肉汤培养基加热融化，待冷却至50-55℃时，加入抗生素纸片，轻轻摇匀，倒入平板，待凝固。
3. 抑菌圈测定：将培养好的细菌菌株接种于琼脂平板上，37℃培养18-24小时，观察抑菌圈的形成情况。
4. 结果记录：记录不同抗生素对细菌的抑菌圈直径，并按抑菌圈直径大小进行敏感性分级。
五、实验结果1. 青霉素：抑菌圈直径为20mm，敏感；2. 链霉素：抑菌圈直径为15mm，中敏感；3. 红霉素：抑菌圈直径为10mm，低敏感。
六、实验讨论1. 通过本实验，我们了解到青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的抗生素选择。
2. 链霉素对所检测的细菌菌株具有中敏感，可以作为一种辅助治疗药物。
3. 红霉素对所检测的细菌菌株具有低敏感，不建议作为首选治疗药物。
4. 在临床治疗过程中，应根据药物敏感试验结果，合理选用抗生素，以减少耐药菌株的产生。
七、实验结论本实验通过药物敏感试验，成功检测了细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供了科学依据。
实验结果表明，青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的首选抗生素。
细菌药物敏感试验实验报告
细菌药物敏感试验实验报告药物敏感性试验的基本原则1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。
天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。
部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。
常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。
实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。
2药敏试验测试的前提条件：实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。
标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。
临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。
错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。
3测试结果应准确：实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。
质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。
建议保留菌株，以便复核。
具体的专业要求1标本类型临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。
标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。
在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。
实际工作中需重点考虑的标本如下。
1．脑脊髓液：正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。
报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。
2．尿液：有些药物如呋喃妥因，仅限于测试和报告尿分离株，其他标本的分离株，不应报告此药；尿道标本常规不应报告氯霉素。
细菌的药物敏感性试验
细菌的药物敏感性试验目的要求掌握圆纸片扩散法测定细菌对抗生素等药物的敏感试验的操作方法和结果判定，明确药敏试验在实际生产中的应用。
仪器及材料接种环、酒精灯、试管架、眼科镊子、温箱、普通琼脂平板、抗菌药物纸片、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养物。
方法与步骤1．制备固体培养基磺胺类药物用无蛋白胨的培养基。
2．涂菌或涂病料无菌操作取细菌培养物或病料，在培养基平板上均匀密集划线。
3．放置药物纸片用灭菌小镊子夹取抗菌药物圆纸片（每次取一片），轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面，一次放好，不能移动，放好后轻压纸片以固定。
纸片间的距离：约为2-4cm。
纸片距平皿边缘的距离：约为1.5cm。
4.培养、观察平皿倒置，37℃温箱中培养18～24h，观察结果。
根据纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，按下列标准确定细菌对抗生素等药物的敏感度及药物间的相互关系。
细菌对不同抗菌药物敏感度标准药物名称抑菌圈直径（mm）敏感度青霉素（50μg/ml）无抑菌圈＜1011～26＞26不敏感低度敏感中度敏感高度敏感链霉素（500μg/ml）无抑菌圈＜1011～15＞15不敏感低度敏感中度敏感高度敏感新霉素（300μg/ml）无抑菌圈＜1011～25＞25不敏感低度敏感中度敏感高度敏感附：干燥抗菌纸片的制备取直径6mm的无菌滤纸片，浸于一定浓度的抗菌药液中，一般每毫升抗菌药液中，装滤纸片100片，浸泡1～2h后，37℃干燥或真空干燥，密封冷藏备用，药剂可维持1～2月有效。
实验6 细菌的药敏试验
依据不同药物的抑菌标准，判断敏感、中度敏感、 抗性。
美国临床实验室标准研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)
三、EMB接种
伊红美兰培养基（EMB）
• 乳糖，伊红和美兰（抑制阳性菌），弱选择性， 发酵乳糖产生的酸使两种染料结合成复合物， 产生带金属光泽的菌落
实验六 细菌的药敏实验 （含水中大肠ຫໍສະໝຸດ 群的测定结 果）本次实验内容
生化实验结果判定 平皿培养基的倾注 药敏实验 EMB培养基接种
目的要求
学会平皿培养基的制备
掌握滤纸法测定细菌对各种药物的敏感性 p93
理解药物敏感试验的使用原则 掌握水中总大肠菌群的测定
一、平皿培养基制备 取出已高压灭菌的培养基，每8个人为一组，擦干 三角烧瓶外面的水珠 在微波炉上加热至沸腾，但不能溢出，注意安全
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌 领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌， 而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关 的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完 全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在 37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽 胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希 氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠 杆菌等。
慢慢冷却至手可以握住，但还有一点烫手感觉
严格的无菌操作，三角烧瓶的口一定要灼烧，在 酒精灯旁倾注平皿，每个平皿6ml左右，不能太厚， 不能太薄 冷却平皿，待琼脂凝固后，将平皿倒置，以备用
二、药敏实验的原理 一种微生物在代谢过程中产生的分泌到细胞外、对多 种微生物产生抑制作用的物质为抗生素(Antibiotic) 。 是由某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍 生物，它们在很低浓度时就能抑制或影响它种生物的 生命活动，如抑制其生长。 各种微生物对每种抗生素的敏感性是不同的，凡能被 抗生素抑制微生物在滤纸圈外出现不同程度的抑菌圈， 根据抑菌圈的大小可以判定细菌对药物的敏感度。
细菌培养药敏实验报告
细菌培养药敏实验报告细菌培养药敏实验报告引言细菌培养药敏实验是一种常见的生物学实验，旨在研究不同细菌对抗生素的敏感性。
通过该实验，我们可以了解细菌对抗生素的抵抗能力，为临床治疗提供指导。
本次实验我们选择了常见的致病菌大肠杆菌作为研究对象，通过不同抗生素的培养试验，探究其对抗生素的敏感性。
实验方法1. 细菌培养首先，我们从实验室的细菌库中取出保存的大肠杆菌菌株。
将菌株接种到含有营养物质的琼脂平板上，利用无菌的铁环将菌株均匀地涂抹在琼脂平板上。
然后，将琼脂平板放入恒温培养箱中，在37摄氏度下培养24小时，使细菌能够充分生长。
2. 制备抗生素试验板在实验室中，我们准备了包含不同抗生素的试验板。
根据实验需求，我们选择了青霉素、氨苄西林、四环素和庆大霉素四种常用抗生素。
将这四种抗生素分别溶解在无菌的培养基中，制备成不同浓度的试验液。
然后，将试验液均匀地涂抹在琼脂平板上，形成抗生素试验板。
3. 药敏实验将培养好的大肠杆菌菌株分别划线于抗生素试验板上，确保每个抗生素试验板上都有菌株。
然后，将试验板放入恒温培养箱中，在37摄氏度下培养24小时。
在培养结束后，观察试验板上的菌落生长情况，记录下不同抗生素对细菌的抑菌效果。
结果与讨论根据实验结果，我们观察到不同抗生素对大肠杆菌的抑菌效果存在差异。
其中，青霉素对大肠杆菌的抑菌效果最好，形成了明显的抑制圈，表明大肠杆菌对青霉素敏感。
而氨苄西林和四环素对大肠杆菌的抑菌效果较差，形成的抑制圈较小，表明大肠杆菌对这两种抗生素的抵抗能力较强。
庆大霉素对大肠杆菌的抑菌效果也较好，但较青霉素稍差。
通过对实验结果的分析，我们可以得出以下结论：1. 大肠杆菌对青霉素敏感，对氨苄西林和四环素的抵抗能力较强，对庆大霉素的敏感性适中。
2. 不同抗生素对细菌的抑菌效果存在差异，这与抗生素的作用机制和细菌的耐药性有关。
3. 抗生素的选择应根据细菌的敏感性进行，以提高治疗效果。
结论细菌培养药敏实验是一种常见的生物学实验，通过该实验可以研究细菌对抗生素的敏感性。
细菌药物敏感试验实验报告
药物敏感试验又称药敏。
目的是指导临床针对性使用抗生素，减少细菌耐药的产生。
使感染能够及时控制，做到有的放矢。
测定细菌在体外抗菌药物敏感性（以下称药敏试验）的试验方法很多。
绝大多数临床实验室以琼脂扩散法作为常规方法测定常见的快速生长的病原菌。
本文介绍的是标准纸片扩散法。
本文提出的一系列建议有助于药敏试验的标准化。
具体地叙述了现行推荐方法的操作步骤，及其适应性和局限性。
本文还重温了国际协作研究会（ics）的有关建议和食品药物管理局（fda）的有关规定，并采纳了其中的有关章节。
只根据是否出现抑菌环而不考虑其大小来判断细菌对抗菌药物敏感性的试验方法，结果是不准确的。
纸片扩散法试验必须遵循标准的方法学原理，并根据抑菌环与最低抑菌浓度的相关性，并结合临床上已知敏感或耐药菌株的状况进行标准化，结果才能可靠。
要得到可靠结果，必须严格地按照本文的方法进行操作。
美国临床实验室标准化委员会（nccls）下设的纸片扩散法药敏试验分委员会推荐的标准方法，以bauer等介绍的方法为基础，是目前叙述最完整的试验方法。
其中的解释标准是综合临床和实验室的数据发展而来，并得到证实。
要测定和报告给哪些药物，须与感染科医生、医院的药品委员会及感染控制委员会协商，然后由实验室制定最合适的方案。
表1和表1a列出了治疗各类细菌感染有效的药物，其体外药敏试验结果也有助于感染的控制及流行病学研究。
做药敏试验，应从分离平板上挑选各种疑为致病菌的单个菌落，同时做菌种鉴定。
不同菌种不可在同一平板上做混合细菌药敏试验。
一般避免用临床标本（如无菌体液和尿液）直接做药敏，除非临床上急需且革兰氏染色只见到单一菌种，但随后应再以标准方法重做。
对感染性质不同，标本中混有浑浊细菌或正常菌群的情况，其中的细菌也许与感染治疗关系不大，常不必做药敏，不然反会招致错误的引导。
细菌药敏试验实验报告
细菌药敏试验实验报告细菌药敏试验实验报告细菌药敏试验是一种常用的实验方法，用于评估细菌对不同抗生素的敏感性。
本次实验旨在探究不同抗生素对细菌的抑菌效果，并比较不同细菌株对抗生素的敏感性差异。
下面将对实验的背景、方法、结果和讨论进行详细描述。
一、背景细菌感染是常见的健康问题，而抗生素是治疗细菌感染的主要手段之一。
然而，随着时间的推移，细菌对抗生素的耐药性不断增强，这给临床治疗带来了很大的挑战。
因此，了解细菌对抗生素的敏感性情况，对于合理选择抗生素和制定治疗方案具有重要意义。
二、方法1. 实验材料：- 不同种类的细菌培养物- 不同种类的抗生素药片- 灭菌培养基- 培养皿和培养瓶- 恒温培养箱- 显微镜和显微镜玻片2. 实验步骤：a) 准备工作：将培养皿和培养瓶经过高温高压灭菌处理，保证无菌环境。
b) 细菌培养：将不同种类的细菌接种于灭菌培养基中，置于恒温培养箱中，保持适宜的温度和湿度，培养细菌至适宜的菌落数量。
c) 制备抗生素试验板：将灭菌培养基均匀地倒入培养皿中，使其凝固成试验板。
d) 涂布法：用无菌的棉签，将不同细菌培养物均匀涂布在试验板上。
e) 抗生素药片放置：将不同种类的抗生素药片放置在试验板上，注意不同药片之间的距离，避免相互干扰。
f) 培养：将试验板置于恒温培养箱中，培养一定时间，使细菌在抗生素的作用下生长。
g) 观察结果：观察试验板上细菌生长情况，记录不同抗生素对细菌的抑制效果。
三、结果经过一段时间的培养，观察试验板上的细菌生长情况，得出以下结果：1. 不同细菌对不同抗生素的敏感性差异明显。
某些细菌株对某种抗生素表现出很高的敏感性，而对另一种抗生素则表现出耐药性。
2. 某些抗生素对多种细菌株均具有较好的抑菌效果，而另一些抗生素则只对特定的细菌株有效。
3. 部分细菌株对多种抗生素均表现出耐药性，这说明这些细菌株可能已经产生了抗药性基因。
四、讨论通过本次实验，我们发现不同细菌株对抗生素的敏感性差异很大。
实验六、抗菌药物的体外药效试验
实验六、抗菌药物的体外药效试验(药敏试验）各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。
此外,通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。
药敏试验的方法很多，普遍使用的有滤纸片扩散试验(Kirby —Baueer Dice Diffusion）;最低抑菌浓度试验（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）和最低杀菌浓度试验(Minimum Bactericidal Concentration, MBC）.［目的要求］1、熟悉体外抗菌试验操作技术。
2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途.［实验原理］常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类：琼脂渗透法与浓度系列稀释法.琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能，将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板；或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面,然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。
根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。
经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力.浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度，混入培养基内,加入一定量的试验菌，经适宜温度培养后观察结果，求得药物的最低抑菌浓度（MIC）.1、细菌:所用细菌应包括主要致病菌。
革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌，链球菌、肠球菌等。
革兰氏阴性球菌如淋球菌等。
革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8～10种，绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等，厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等.对临床应用有代表性的菌株数量，创新药应不小于1000株。
其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200—500株。
试验时应包括有国际公认质控菌株(如金葡菌ATCC25925，大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853等)。
细菌药敏鉴定实验报告
细菌药敏鉴定实验报告1. 引言细菌药敏鉴定是一项用于判断细菌对不同抗生素的敏感性的实验技术。
在医疗领域，了解细菌的药敏性能够帮助医生选择适当的药物治疗感染疾病。
本实验旨在通过药敏试验方法对不同细菌株的耐药性进行评估。
2. 实验步骤2.1 细菌培养首先，我们选择了多种不同的细菌菌株，包括XX菌、YY菌和ZZ菌。
分别从它们的冻存液中接种于含有50ml营养琼脂培养基的培养皿中，并在恒温恒湿条件下（37C，24小时）培养。
2.2 制备抗生素试验板我们选取了多种常见的抗生素药物，包括A、B、C和D。
首先，按照厂家说明书的建议，将抗生素药物溶解于生理盐水中，制备出不同浓度的抗生素药液。
接下来，将含有琼脂和50ml培养基的琼脂平板抗生素试验板均匀涂布抗生素药液，使得每个试验格均匀含有相应浓度的抗生素。
2.3 细菌接种与观察将已经培养好的细菌菌株用微量匀色刷接种于刚制备好的抗生素试验板上。
利用垫片按压细菌，使其均匀分布于试验板上。
将接种完成的试验板放入培养箱中，以37C恒温恒湿条件下培养24小时。
观察培养结果，记录每个试验格的细菌生长情况，包括有无菌落，菌落的形状和大小。
2.4 分析结果根据观察到的细菌培养结果，可以初步判断细菌对不同抗生素的敏感性。
3. 结果与讨论对观察结果进行整理和分析后，我们发现不同细菌对抗生素的敏感性存在差异。
以XX菌为例，我们观察到在抗生素A的试验格上出现了菌落生长，而在抗生素B、C和D的试验格上没有菌落生长。
这表明XX菌对抗生素A具有抗性，而对抗生素B、C和D敏感。
对于YY菌和ZZ菌的实验结果，我们发现它们对不同抗生素的敏感性也存在差异。
具体结果请见附表1。
根据实验结果，我们可以根据细菌对抗生素的敏感性来选择合适的抗生素进行治疗。
例如，对于感染XX菌的患者，我们可以选择抗生素A进行治疗，而应避免使用抗生素B、C和D。
4. 结论通过本次细菌药敏鉴定实验，我们成功评估了不同细菌对抗生素的敏感性。
药敏实验实验报告
药敏实验实验报告药物敏感性实验报告引言：药物敏感性实验是通过使用不同类型的药物，评估它们对某种特定疾病或病原体的抑制作用。
在本实验中，我们将使用不同浓度的抗生素，评估对细菌的药物敏感性。
通过实验结果，我们可以确定最佳的药物浓度，以及了解不同细菌株对药物的敏感性。
材料与方法：1. 细菌培养基：使用卫生室提供的含有适当营养物质的培养基。
2. 细菌株：在本实验中，我们选择使用大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）两种常见的细菌株。
3. 青霉素、头孢菌素和利福平：三种常用的抗生素药物。
4. 恒温培养箱、培养皿、培养液、移液器等基本的实验器材。
实验步骤：1. 在无菌条件下，将细菌接种于含有适当营养物质的培养基中。
2. 使用平板法，将细菌均匀涂布在含有抗生素的培养基上。
3. 将不同浓度的抗生素分别添加到不同的培养皿中，以形成梯度浓度。
4. 将涂菌的培养皿放入恒温培养箱中培养一段时间。
5. 观察并记录每个培养皿上细菌生长状态。
结果与讨论：通过观察实验结果，我们可以得出以下结论：- 对于大肠杆菌而言，适宜的青霉素浓度范围为10μg/ml -50μg/ml，而头孢菌素和利福平的适宜浓度均在50μg/ml - 100μg/ml 之间。
- 对于金黄色葡萄球菌而言，青霉素的适宜浓度在50μg/ml - 100μg/ml之间，而头孢菌素和利福平的适宜浓度范围分别为100μg/ml - 200μg/ml和200μg/ml - 300μg/ml。
- 在高浓度的抗生素下，我们观察到对细菌的生长明显抑制。
而在低浓度下，细菌的生长状态与未添加抗生素的对照组相似。
通过本次实验，我们了解到了不同细菌株对抗生素的敏感性差异。
同时，我们也发现了不同抗生素的药效范围，并得出了适宜的药物浓度。
这些发现对于临床上的抗菌治疗具有重要的指导意义。
结论：药物敏感性实验是评估药物对疾病治疗效果的重要手段之一。
细菌药敏试验报告
细菌药敏试验报告试验目的：本次试验旨在了解不同细菌对不同抗生素的敏感性情况，为制定治疗方案提供参考。
试验原理：通过对不同品种的细菌进行耐药性测试，可以确定其对各类抗生素的敏感性情况。
常用的药敏试验方法包括扩散法、碟扩散法、荧光染色法等。
本次试验采用了碟扩散法，将抗生素置于小型圆形纸片上，贴于培养基表面，观察形成的菌落周围的抑制圆来判断细菌对该抗生素的敏感性情况。
试验过程：1.准备工作：制备不同浓度的抗生素和培养基。
2.取样：将不同类型的细菌分别提取复制，并用增殖培养基培养。
3.打药敏试验：将抗生素置于小型圆形纸片上，贴于培养基表面。
4.观察结果：观察形成的菌落周围的抑制圆来判断该细菌对该抗生素的敏感性。
试验结果：根据本次试验结果，不同类型的细菌对不同抗生素的敏感性情况如下：菌种青霉素红霉素头孢菌素氯霉素大环内酯金黄色葡萄球菌敏感中度敏感抗性抗性中度敏感肺炎链球菌敏感中度敏感中度敏感抗性中度敏感大肠杆菌中度敏感抗性抗性敏感中度敏感沙门氏菌中度敏感抗性抗性敏感中度敏感结论：根据上述结果，我们可以得出以下结论：1.在治疗金黄色葡萄球菌时，不推荐使用头孢菌素或氯霉素，应优先考虑青霉素或红霉素。
2.肺炎链球菌对头孢菌素和氯霉素的反应不如青霉素，建议优先使用青霉素。
3.大肠杆菌和沙门氏菌对许多常见抗生素耐药，建议在治疗时注意综合考虑，选择适当的治疗方案。
提示：为保证试验结果准确可靠，建议在试验过程中注意以下事项：1.使用无菌器皿和工具，以免污染培养基和细菌样本。
2.制备完善、严格控制抗生素的浓度，避免因药效差致使结果不准确。
3.在选择抗生素和制定治疗方案时，应根据不同的病原菌和临床情况综合考虑。
药敏实验实训报告
一、实验目的通过本次药敏实验实训，了解药敏试验的基本原理和方法，掌握药敏实验的操作流程，学会正确解读药敏实验报告，为临床合理用药提供科学依据。
二、实验原理药敏试验是一种体外实验，用于检测细菌对各种抗生素的敏感性。
通过将抗生素与细菌共同培养，观察细菌的生长情况，判断细菌是否对某一种抗生素敏感、中介或耐药。
药敏试验结果对于临床合理选择抗生素具有重要意义。
三、实验材料1. 细菌菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗生素：青霉素、头孢菌素、阿莫西林、红霉素等。
3. 药敏纸片：含不同抗生素的纸片。
4. 普通肉汤培养基。
5. 紫外线灯。
6. 移液器、培养皿、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验方法1. 细菌培养：将细菌接种于普通肉汤培养基，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
2. 药敏纸片法：将培养好的细菌均匀涂布于琼脂平板上，将药敏纸片贴在平板表面，放入培养箱中培养18-24小时。
3. 观察结果：观察药敏纸片周围是否出现抑菌圈，判断细菌对相应抗生素的敏感性。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌对青霉素敏感，出现明显的抑菌圈；对头孢菌素中介，抑菌圈较小；对阿莫西林耐药，无抑菌圈；对红霉素敏感，出现明显的抑菌圈。
2. 大肠杆菌对青霉素耐药，无抑菌圈；对头孢菌素敏感，出现明显的抑菌圈；对阿莫西林中介，抑菌圈较小；对红霉素耐药，无抑菌圈。
3. 肺炎克雷伯菌对青霉素耐药，无抑菌圈；对头孢菌素敏感，出现明显的抑菌圈；对阿莫西林中介，抑菌圈较小；对红霉素耐药，无抑菌圈。
六、实验分析1. 通过药敏实验，可以了解不同细菌对不同抗生素的敏感性，为临床合理选择抗生素提供依据。
2. 药敏实验结果对于指导临床用药具有重要意义，可以避免滥用抗生素，降低细菌耐药性。
3. 在药敏实验过程中，应注意无菌操作，避免污染，确保实验结果的准确性。
七、实验总结本次药敏实验实训，让我了解了药敏试验的基本原理和方法，掌握了药敏实验的操作流程。
药敏试验
菌棉签、无菌水、接种环、药敏 纸片、无菌镊子、标签纸等。
四、实验内容及步骤
（一）药敏试验的概念
测定细菌对抗菌药物的敏感性
试验称药敏试验。
（二）药敏试验的意义
在给传染病畜进行治疗前，测定细
菌对药物的敏感性，有助于选择合 适的药物，达到好的治疗效果。
（三）药敏试验步骤
1、准备琼脂平板 2、加入1毫升生理盐水于琼脂斜面菌种 管，用接种环将菌苔洗下，做成菌液备 用。 3、用无菌棉签取菌液涂匀涂于琼脂平 板表面，盖好平皿，在室温下干燥5分 钟。
实验六
细菌的药敏试验
实训目的 掌握药敏试验的概念、意义
一、实验目的
掌握药敏试验的方法、意义
二、实验原理
将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌
的琼脂平板上，抗菌药物向四周扩散， 抑制纸片周围一定距离内细菌的生长， 根据抑菌圈的大小来判断细菌对不同 药物的敏感性。
三、实验材料
琼脂平板、酒精灯、菌种管、无
5、用灭菌镊子以无菌操作取出药
敏纸片贴在涂有细菌的平板培养 基表面，轻轻按压，以保证与培 养基密切接触。
6、贴好标签，将平皿放37℃温箱培养
24小时，观察结果。
五、实验结果
结果判定：根军抑菌圈的有否及抑菌
圈的大小来判定试验菌对某一抗生素 是否敏感及敏感程度。
药物敏感试验实习报告
一、实习背景随着抗生素的广泛应用，细菌耐药性日益严重，给临床治疗带来了巨大挑战。
药物敏感试验是临床微生物学检验的重要项目之一，通过对细菌进行药物敏感试验，可以了解细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理使用抗生素提供依据。
本次实习旨在通过药物敏感试验的学习，掌握实验原理、操作步骤和结果判定，提高临床微生物学检验能力。
二、实习内容1. 实验原理药物敏感试验主要采用纸片扩散法，通过观察细菌在含有不同抗生素的琼脂平板上的生长情况，判断细菌对药物的敏感性。
根据抑菌圈的大小，可以判断细菌对药物的敏感程度。
2. 实验操作（1）制备琼脂平板：将熔化的琼脂平板冷却至50℃左右，倒入无菌平皿中，待凝固。
（2）接种细菌：用无菌接种环取适量细菌，均匀涂布在琼脂平板上。
（3）贴药片：将含有不同抗生素的纸片贴在琼脂平板上，确保纸片与平板紧密贴合。
（4）培养：将平板置于适宜的培养箱中，培养一定时间。
（5）观察结果：观察抑菌圈的大小，判断细菌对药物的敏感性。
3. 结果判定根据抑菌圈的大小，将细菌对药物的敏感性分为敏感、中度敏感和耐药三种情况。
（1）敏感：抑菌圈直径≥21mm。
（2）中度敏感：抑菌圈直径15-20mm。
（3）耐药：抑菌圈直径≤14mm。
三、实习体会通过本次药物敏感试验实习，我深刻认识到以下几点：1. 药物敏感试验是临床微生物学检验的重要项目，对于指导临床合理使用抗生素具有重要意义。
2. 实验操作要严格按照规程进行，确保实验结果的准确性。
3. 结果判定要客观、公正，避免人为因素的影响。
4. 在实际工作中，要关注细菌耐药性的变化，及时调整抗生素的使用策略。
四、实习总结本次药物敏感试验实习，使我掌握了药物敏感试验的实验原理、操作步骤和结果判定，提高了临床微生物学检验能力。
在今后的工作中，我将继续努力学习，为临床合理使用抗生素贡献自己的力量。
药敏实验实验报告
药敏实验实验报告药敏实验实验报告引言：药敏实验是一种常见的临床实验，用于评估不同药物对细菌的敏感性。
通过该实验，可以为医生选择最合适的药物治疗感染提供参考。
本实验旨在探究不同抗生素对细菌的抑制效果，以及细菌对抗生素的敏感性。
实验方法：1. 收集细菌样本：从临床患者的感染部位采集细菌样本，并进行纯化处理，得到纯净的细菌菌株。
2. 制备药物溶液：选择常用的抗生素，如青霉素、头孢菌素等，按照规定浓度制备药物溶液。
3. 扩散法测定药敏性：将培养基倒入培养皿中，待其凝固后，在培养基表面均匀涂抹细菌悬液。
然后，在培养皿上分别滴加不同抗生素溶液，使其均匀分布。
4. 培养细菌：将培养皿倒置放入恒温培养箱中，以适当温度孵育细菌。
观察细菌在不同抗生素下的生长情况。
5. 结果分析：根据观察结果，判断细菌对不同抗生素的敏感性。
实验结果：在本次实验中，我们选择了两种常用的抗生素：青霉素和头孢菌素。
观察发现，在青霉素的作用下，细菌的生长受到了明显的抑制，呈现出较小的菌落直径。
而在头孢菌素的作用下，细菌的生长也受到了一定的抑制，但相对于青霉素而言，菌落直径较大。
细菌对不同抗生素的敏感性是由多种因素决定的。
首先，细菌的种类会对其敏感性产生影响。
不同种类的细菌对抗生素的敏感性有所差异，这与其细胞壁结构、代谢途径等有关。
其次，细菌的耐药性也会影响其对抗生素的敏感性。
长期暴露在抗生素中的细菌可能会产生耐药基因，使其对抗生素产生抵抗力。
此外，抗生素的浓度和使用方式也会对细菌的敏感性产生影响。
讨论与结论：药敏实验是临床医学中非常重要的实验之一，可以为医生选择合适的药物治疗感染提供依据。
通过本次实验，我们发现细菌对不同抗生素的敏感性存在差异，这与细菌的种类、耐药性以及抗生素的浓度和使用方式等因素有关。
因此，在临床治疗中，医生需要根据患者的具体情况选择合适的抗生素，以提高治疗效果。
然而，需要注意的是，药敏实验只是一种参考，不能完全代表细菌在人体内的反应。
药敏实验报告实验内容
药敏实验报告实验内容药敏实验报告实验内容引言：药敏实验是一种常见的实验方法，用于评估不同药物对细菌的抗菌活性。
通过该实验，可以确定不同药物对细菌的敏感性，从而为临床治疗提供指导。
本文将介绍药敏实验的实验内容，包括实验材料、实验步骤和实验结果的分析。
一、实验材料：1. 细菌培养物：选择需要测试的细菌菌株，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，并在适宜的培养基上进行预培养。
2. 药物：选择需要测试的药物，如抗生素、抗菌药物等，并按照规定的浓度进行配制。
3. 培养基：选择适宜的培养基，如琼脂、肉汤等，用于培养和生长细菌。
4. 培养皿：用于装载培养基和药物的培养皿，可以选择普通培养皿或96孔微孔板。
二、实验步骤：1. 制备细菌悬液：从预培养的细菌培养物中取出适量的细菌，转移到无菌培养基中，摇匀后得到细菌悬液。
2. 稀释细菌悬液：将细菌悬液进行适当稀释，以获得合适的菌液浓度，一般为0.5 McFarland浓度。
3. 涂布培养基：将稀释后的细菌悬液均匀涂布在培养基上，可以使用无菌的玻璃棒或无菌的吸管进行涂布。
4. 药物斑点法：在涂布的培养基上滴加一定浓度的药物溶液，形成不同浓度的药物斑点。
5. 培养：将涂布好药物的培养基放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一定时间，一般为18-24小时。
6. 结果观察：观察培养基上细菌生长的情况，记录不同药物斑点周围的细菌生长情况。
三、实验结果分析：通过观察实验结果，可以得出以下结论：1. 抗菌活性：根据不同药物斑点周围的细菌生长情况，可以判断该药物对该细菌菌株的抗菌活性。
若细菌周围无生长，则说明该药物对该细菌菌株具有较好的抗菌活性；若细菌周围有生长，则说明该药物对该细菌菌株的抗菌活性较差。
2. 最小抑菌浓度（MIC）：通过观察不同药物斑点的浓度，可以确定该药物对该细菌菌株的最小抑菌浓度。
最小抑菌浓度是指能完全抑制细菌生长的最低药物浓度，一般以药物斑点周围无细菌生长为标准。
3. 药物敏感性：根据最小抑菌浓度，可以将细菌对药物的敏感性分为敏感、中度敏感和耐药等级。
细菌药敏试验
细菌药敏试验
抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于使用过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，造成了很大的经济损失。
随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。
并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。
长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。
药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。
在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给病人用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果。
所以在用药时，药物一定要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
细菌药敏试验
实训细菌的药物敏感性试验教学目标使学生掌握细菌药物敏感性试验的操作方法，能够利用本试验方法选择敏感药物治疗兽医临床常见的细菌性传染病。
材料准备1．器材：温箱、天平、打孔机、滤纸、无菌试管及吸管、镊子、接种环、酒精灯等。
2．试剂：蒸馏水。
3．培养基：普通琼脂平板。
4．菌种：金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的固体培养物。
5．药品：链霉素、金霉素、新霉素、红霉素等抗菌药物。
6．硫酸钡标准管：取1%~1.5%氯化钡0.5ml加1%硫酸溶液99.5ml，充分混匀即成，用前充分振荡。
方法步骤将抗菌药物置于接种待检菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的生长，从而出现抑菌环。
由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，由此可根据抑菌环的大小，判定细菌对药物的敏感度。
（一）含药纸片的制备1．滤纸片最好选用新华1号定性滤纸，用打孔机打成直径6mm的滤纸片，放在小瓶中或平皿中，在121.3℃灭菌15min，再置100℃干燥箱内烘干备用。
2．药液的配制用无菌蒸馏水将各药稀释成以下浓度：磺胺100mg/ml、青霉素100IU/ml、链霉素、金霉素、新霉素、红霉素、多粘菌素1000μg/ml。
3．含药纸片的制备将灭菌的滤纸片用无菌的镊子摊布于灭菌平皿中，按每张滤纸片饱和吸水量为0.01ml计算，50张滤纸片加入药液0.5ml。
要不时翻动，使纸片充分吸收药液，浸泡1~2h后于37℃温箱中烘干备用。
对青霉素、金霉素纸片的干燥宜采用低温真空干燥法，干燥后立即放入瓶中加塞，放干燥器内或置-20℃冰箱中保存。
纸片的有效期一般为4~6个月。
（二）测验方法1．钩取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌落各4~5个，分别接种于肉汤培养基中，37℃培养4~6h。
2．用灭菌生理盐水稀释培养菌液，使其浊度相当于硫酸钡标准管。
装有以上两种成分的试管须相同，硫酸钡应用前需充分振动。
3．用无菌棉拭子蘸取上述肉汤培养液，在试管壁上挤压除去多余的液体，在琼脂培养基表面均匀涂抹。
实训六细菌的药物敏感性试验.
1 无菌操作取菌 2 接种平板 3 贴药敏片 4 培养
· 将平板倒置于37℃温箱培养 18～24小时后取出，观察抑 菌圈。
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
24小时后
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
药敏试验结果
抑菌圈 根据药敏片周围抑菌圈的大小，判定药物的敏感度
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
注意事项
1. 纸片法适合快生长菌和少数苛养菌检测，有些菌无标准化的药敏试验。 2. 操作全程应注意无菌操作。 3. 抑菌圈直径：以肉眼见不到细菌明显生长的边缘为限。
– 变形杆菌属菌株可漫延生长至某些抗微生物药物的抑菌圈内，表现为一种细 薄微弱的生长，形成一层明显的抑制性生长环，对于这种情况应忽略不计。
· 接种环取菌后在平板表面密集划线
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
纸片法药敏试验的方法步骤
1 无菌操作取菌
平板
2 接种平板
纸片
3 贴药敏片
4 培养
· 各纸片中心距大于24mm，纸片距 平皿边缘大于15mm。
· 药敏片贴好后压实
· 药敏片一次贴好，不得移动
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
– 对于磺胺类药物，应忽略抑菌圈内轻微的细菌生长（少于20%的菌苔），以明 显的边缘为抑菌圈直径。
4. 体内、体外试验的不一致性：药敏试验是一种体外试验，细菌在体外对 抗生素耐药到体内也耐药，而在体外敏感的，体内就不一定敏感。
项目四 消毒与灭菌---细菌的药物敏感试验
谢谢
药物敏感度定义
敏感 表示被测菌株所引起 的感染可以用该抗菌药 物的常规剂量治愈。
中介 表示被测菌株对常规 用药体液或组织中的药 物浓度的反应率低于敏 感菌株，使用高于常规 剂量有疗效。
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实训六细菌的药物敏感性试验
目的要求掌握圆纸片扩散法测定细菌对抗生素等药物的敏感试验的操作方法和
结果判定，明确药敏试验在实际生产中的应用。
仪器及材料接种环、酒精灯、试管架、眼科镊子、温箱、普通琼脂平板、抗菌药
物纸片、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养物。
方法与步骤
1．制备固体培养基磺胺类药物用无蛋白胨的培养基。
2．涂菌或涂病料无菌操作取细菌培养物或病料，在Array培养基平板上均匀密集划线。
3．放置药物纸片用灭菌小镊子夹取抗菌药物圆纸片
（每次取一片），轻轻贴在已接种细菌的琼脂培养基表面，
一次放好，不能移动，放好后轻压纸片以固定。
纸片间的距离：约为2-4cm。
纸片距平皿边缘的距离：约为1.5cm。
4.培养、观察平皿倒置，37℃温箱中培养18～24h，观察结果。
根据纸片周围有
无抑菌圈及其直径大小，按下列标准确定细菌对抗生素等药物的敏感度及药物间的相互
关系。
细菌对不同抗菌药物敏感度标准
附：干燥抗菌纸片的制备
取直径6mm 的无菌滤纸片，浸于一定浓度的抗菌药液中，一般每毫升抗菌药液中，装滤纸片100片，浸泡1～2h 后，37℃干燥或真空干燥，密封冷藏备用，药剂可维持1～2月有效。