小剂量雷帕霉素延缓小鼠糖尿病肾病进展的研究

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雷帕霉素及其相关分子靶点在糖尿病肾病发病机制中的研究进展

［］］６抑制胶原Ⅳ的产生［、血小板表达和ＥＣＭ的积聚１，［］５
减少Ｅ延缓肾小球硬化的发生。ＣＭ的积聚，发展中起重要作用。ＶＥＧＦ在ＤＮ的发生、ＶＥＧＦ基因的表达受低氧诱导因子（ＨＩＦ）１ α转［］１３的研究显示，刺激录因子调节，Ｈｕｄｓｏｎ等ｍＴＯＲ信号转导途径可以上调ＨＩＦ１ α 的表达，进而刺激ＶＥＧＦ的分泌和表达。而在糖尿病状态下，高血糖、糖基化终末产物和各种细胞因子如、血管紧张素 Ⅱ （等均可上ＴＧＦＰＤＧＦ、Ａｎｇ Ⅱ） β 调ＶＥＧＦ的合成和分泌。ＶＥＧＦ可以通过调节足细胞来改变肾小球基底膜的成分，进而改变肾小
［］４［］１
／ＶＥＧＦ可通过激活ＰＩ３ＫＡｋｔ轴刺激小鼠近端肾进而引起肾小管肥大。小管细胞从头合成蛋白质，在ＤＲＰＭ是ｍＴＯＲ特异的抑制剂，Ｎ小鼠中，［２］。ＲＰＭ已被证实能降低ＶＥＧＦ基因的高表达１在Ｄ肾脏肝细胞生长因子（）的表达Ｎ中，ＨＧＦ减少，结缔组织生长因子（）及ＴＣＴＧＦＧＦ１的表达 β
尽管可以延缓Ｄ但肾小球肥ｍＴＯＲ后，Ｎ的发展，大并未得到改善。这一矛盾的结果是否与ＲＰＭ
上海医学２００９年第３２卷第３期
·８７·
［，２］大鼠和小鼠肾脏中Ｔ，从而ＧＦ１表达的增高１１ β

雷帕霉素免疫抑制和抗肿瘤双重效应的研究进展

雷帕霉素免疫抑制和抗肿瘤双重效应的研究进展雷帕霉素（RAPA）是一种大环内酯类抗生素，最初RAPA在临床上主要作为一种强力的免疫抑制剂而广泛使用，其对多种自身免疫性疾病有显著疗效，而且在器官移植术后显示出良好的抗排斥反应活性，副作用较小，近年来又发现其具有抗肿瘤作用，是一种具有免疫抑制和抗肿瘤双重作用的药物。

本文就雷帕霉素（RAPA）双重药理作用的研究进展作一简要综述。

标签：雷帕霉素；免疫抑制剂；抗肿瘤传统的免疫抑制剂如硫唑嘌呤（AZA）、环孢素（CsA）等在临床上得到广泛应用，但其过敏反应、肝肾毒性、骨髓抑制等副反应屡见不鲜，尤其会带来一个严重的并发症，那就是增加肿瘤风险，Guba等[1]动物实验发现，环孢素A可诱发小鼠原发和转移性肿瘤发生，新型免疫抑制剂雷帕霉素免疫效应是环孢素10倍以上，而且还具备抗肿瘤效应，免疫抑制剂量（1.5mg/kg）的雷帕霉素（Rapamycin，RAPA）可以使小鼠肝脏原发与转移性肿瘤的体积缩小70%，使鼻咽部肿瘤的体积缩小87%，可显著延长带瘤小鼠的生存周期。

它的双重功效不仅可以使其单独针对性应用于临床，还可以应用于需免疫抑制和抗肿瘤联合治疗的交叉领域。

1 雷帕霉素RAPA是Vezina和She gal从加拿大Rapa Nui岛的土壤中分离的一种具有抗真菌作用的三烯大环内酯类化合物，分子式为C51H79NO13，化学结构与同类免疫抑制剂他克莫司（FK506）相似，为白色或微黄色固体结晶，熔点为183～185℃，亲脂性，易溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醇等有机溶剂，几乎不溶于乙醚和水。

最初被研究作为低毒性的抗真菌药物，从1977年发现其具有免疫抑制作用，1989年把RAPA首次作为治疗器官移植排斥反应药物，近年又发现其具有抗肿瘤的作用，其独特的双效性使其具有广阔的临床开发应用前景。

2 雷帕霉素的作用机制2.1 雷帕霉素的免疫抑制机制（1）雷帕霉素通过不同的细胞因子受体阻断信号传导，将免疫细胞（T细胞和B细胞）滞留于G1/S期，阻止免疫细胞进入S期及抑制DNA的合成，从而抑制免疫细胞的生长、增殖[2]。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及其抑制剂与肾脏疾病的研究进展

但是，ＴＲ是一种普遍存在的激酶，ｍＯ雷帕霉素抑制剂同时
也阻止几乎所有的细胞类型，包括肾细胞。
个具有小ＧＰＳＴａｅ活性的蛋白．细胞中的Ｒｅｈｂ～ＧＰ呈活Ｔ性状态。，ＣＩ２是ＧＰｉ激活蛋白，作用于Ｒｅ１ｓＴｒｅｓ它ｈｂ—ＧＰ使Ｔ
用雷帕霉素ｌ－２。】１］
▲南方医科大学在读博士研究生
△通信作者。科主任，授，教博士研究生导师；Ｅ—ｍｉｗｉａｂ＠ａｌｅｌｎｏ：ｉ
１３ｃｒ６．ｏｎ
・
２６８０・
广东医学
２１９月第３０２年３卷第１８期
年，ｒｎＢｏ等证实并克隆了哺乳动物ＴＲ基因，ｗＯ其产物只有
一
抑制蛋白家族。非磷酸化时则抑制真核细胞翻译起始因子４（Ｉ４）ＥｅＦＥ活性。ｍＯＴＲ活化并磷酸化４Ｂ，ＥＰ然后由ｅＦＥ、ｌ４
ｅＦＧ一种支架蛋白）ｌ４ＲＡ螺旋酶）ｅＦ形成Ｉ４（、ｅＦＡ（Ｎ和ｌ３
诱导肾小管上皮细胞凋亡的双重作用 …。值得注意的
ＴＣ／Ｓ２复合物的调节，ｍＯＳ１ＴＣ是ＴＲ信号的正调节物］。生
长因子还可以通过细胞外调节蛋白激酶（ＲＥＫ）一ＲＫ— ＳＴＣＳ２一ｍＯＣ信号通路调节ｍＯＣＴＲ１ＴＲ１活性。ＥＫ或ＲＫＲＳ在一个特定的位置通过磷酸化ｒＣ。ｒｃ失去活性进而Ｉ２使ｒＳＳ

雷帕霉素的研究进展及临床应用

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讲座与综述
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雷帕霉素的研究进展及临床应用
陈丽平，段坤峰，王保兴
【关键词】雷帕霉素；作用机制；慢性肾脏病；应用；研究进展
【中图分类号】Ｒ９７９．５【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７４ — ３２９６（２０１３）０３Ｂ一０１６３ — ０２
积物、毛细血管外增生、间质浸润、小管萎缩和间质纤维化］。而在另一项研究中，ＲＡＰＡ抑制了狼疮鼠（ＮＺＢｘＮＺＷ）Ｆ１雌性
小鼠自身抗体的产生、免疫球蛋白在肾小球的沉积及蛋白尿的产生，小鼠的存活期也得到了延长Ｊ，说明ＲＡＰＡ能阻止狼疮
雷帕霉素（ｒａｐａｍｙｃｉｎ，ＲＡＰＡ）是一种新型大环内酯类免疫抑制剂。最新研究表明：ＲＡＰＡ通过不同的细胞因子受体阻断信号传导，阻断Ｔ淋巴细胞及其他细胞由Ｇ期至ｓ期的进程，从而发挥免疫抑制效应。ＲＡＰＡ已通过美国食品和药品管理局（ＦＤＡ）认证，临床上表现出强大的免疫抑制作用，可代替已有３Ｏ多年临床史的环孢素；而且与环孢素相比，ＲＡＰＡ口服液
鼠（ＮＺＢｘＮＺＷ）Ｆ１雌性小鼠发展成狼疮病。
３ＲＡＰＡ的临床研究进展
上市后，迅速成为世界各地器官移植者的常展做一综述。
１ＲＡＰＡ的作用机制

低剂量雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠肾组织中VEGF表达的影响

低剂量雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠肾组织中VEGF表达的影响胡晓舟;王琰;杨宏;王少亭;刘乃嘉;张燕;张瑾;王燕;卢永申;杨晓煜;宋春歌【摘要】Objective To investigate the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the renal tissue of diabetic rats and the effects of rapamycin on their expression. Methods SD rats were randomly divided into control group ( group A, n = 8 ) , diabetic nephropathy group ( group B, n = 8 ) and rapamycin group ( group C, re = 8). We induced diabetic rat model by a single intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ, 60mg/kg). The rats were sacrificed at 8 weeks, the urine sample in the last 24 hours was collected for analysis of albuminuria and creatinine. The expressions of VEGF in the renal tissue were assessed'Tising reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot. Urine albumin/creatinine ratio (ACR) , kidney weight index (KWI) and mean glomerular volume (GV) were observed. Results The expression of VEGF increased in the renal cortex in group B and group C compared to group A ( P < 0. 05) , and the expression of VEGF in group C was lower significantly than that in group B. The expression of VEGF was correlated positively with urine albumin/creatinine ratio and mean glomerular volume ( P < 0. 05 ) . Conclusions VEGF plays an important role in the development of early diabetic nephropathy. Rapamycin may exert a renal protection on diabetic nephropathy, which mechanism may be possibly partly through the reduction of expression of VEGF in kidney.%目的探讨糖尿病大鼠肾组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,以及雷帕霉素对其表达的影响.方法将SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)和雷帕霉素组(C组),用链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠制备糖尿病模型.治疗8周后处死大鼠,采用RT-PCR法检测3组大鼠肾脏组织中VEGF RNA表达,Western印迹法检测VEGF蛋白表达,同时测定大鼠尿白蛋白/肌酐、平均肾小球体积、肾质量指数等.结果 B组和C组大鼠肾组织中VEGF的表达水平均较A组升高(P＜0.05),而C组VEGF的表达水平低于B组(P ＜0.05);VEGF的表达水平与尿白蛋白/肌酐、平均肾小球体积呈正相关(P＜0.05).结论 VEGF参与糖尿病大鼠肾脏损害的发生,雷帕霉素可以通过下调VEGF的表达发挥肾脏保护作用.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2012(052)044【总页数】5页(P40-43,前插2)【关键词】血管内皮生长因子类;雷帕霉素;糖尿病肾病【作者】胡晓舟;王琰;杨宏;王少亭;刘乃嘉;张燕;张瑾;王燕;卢永申;杨晓煜;宋春歌【作者单位】郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学医学院;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052;郑州大学第五附属医院,郑州450052【正文语种】中文【中图分类】R692;R587.2糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见的微血管病变，病理学特征为肾脏肥大、肾小球基底膜增厚、细胞外基质积聚致系膜区扩张，最后导致肾小球硬化、间质纤维化。

雷帕霉素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中对自然杀伤T细胞的调控作用论文

ｔｈａｎｔｈａｔｉｎＩＲ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ
８±０．００１３）％，Ｐ＜０．０５］．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆＣＸＣｃｈｅｍｏｋｉｎｅＮＫＴｃｅｌｌｉｎｔｈｅｋｉｄｎｅｖｗａｓ（１．５６１０±０．０６２８）％ａｎｄｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ３（ＣＸＣＲ３）ｐｏｓｉｔｉｖｅ
尚未完全清楚。近年多项研究结果显示，自然杀伤Ｔ（ＮＫＴ）细胞在多种器官的缺血再灌注损伤中发挥保护作用”“。。而雷帕霉素是否可通过调控ＮＫＴ细胞以
规苏木素．伊红（ＨＥ）染色，随机选择１０个１００倍高倍
镜视野进行评分以评估组织病理学变化。
５．细胞凋亡检测：采用原位缺口末端标记法
（ＴＵＮＥＬ）检测肾脏细胞凋亡情况。以细胞核染褐黄
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】
ｍｏｋｉｎｅｓ
Ｒａｐａｍｙｃｉｎ；
Ｋｉｄｎｅｙ；Ｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｆｆｕｓｉｏｎ
ｉｎｊｕｒｙ；
Ｆｕｎｄｐｒｏｇｒａｍ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１２７０８３２）；ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｏｆＳｈａｎｇｈａｉＭｕｎｉｃｉｐａｌｉｔｙ（１２ＺＲｌ４０５５００）
０．００２８）％．ｗｈｉｃｈｉＳａｕｇｍｅｎｔｅｄｉｎ
・２６７９・
（０．１３２０±０．００ｌ２）％，Ｐ＜ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｔｈｔｈａｔｉｎＩＲｇｒｏｕｐ０．０５］．Ｓｉｍｉｌａｒｌｙ．ｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆＮＫＴｃｅｌｌｓｉｎｒｅｎａｌｌｙｍｐｈｏｅｙｔｅｓｗａｓ（０．１１６９４－０．０００６）％，ｍｏｒｅ

雷帕霉素靶分子在糖尿病肾病发病机制中的作用

Ｈｆ３０１２Ｄｐｒｅｔｆｅｈｏｇ，ｅｉｇＵｉｎＭｄｃｌｏｅｅＨｓｉｌＢｉｎ０７０Ｃｉａｅｉ００；ｅａｍｎｐｒｌｙＰｋｎｎｏｅｉｌｇｏｐｔ，ｅｉｇ１０３，ｈｎｅ２ｔｏＮｏａＣｌａｊＡｂｔａｔＴｅｍｍｉａｅｆｒａｙｉ（ＴＲ）ｐａｓａｃｎｒｌｏｅｒｇｌｉｎｏｃｌｇｏｔｓｃ：ｈａａａｔｇｔｏａｍｃｒｌｎｒｐｎｍＯｌｅｔｌｉｔｅｕａｏｆｅｒｗｈｙａｒｅｎｈｔｌ．
（ｎＪＩｔＭｅ，０７３：７．８Ｉｔｎｍｄ２０，４３５３）ｅ７
糖尿病肾病是糖尿病的严重并发症之一，占约糖尿病患者中的４％，西方发达国家，尿病肾０在糖
表达Ｊ。本文综述ｍＯＴＲ在２型糖尿病。肾病发病中的作用及ｍＴＲ抑制剂治疗２型糖尿病。的现Ｏ肾病
ＴｈｅｒｅｏｆｍａｍａｉａｒｅｆｒａｍｙｄｎｎｈｅｐａｈｏｎｓｓｏｆｄｉｏｌｍｌａｎｔｇｔｏａｐｉｔｔｇｅｅｉａｂｅｉｅｔｃｎｐｈｒｐａｔＷＡＮＧ — ｏｈｙＤｅｇａｇｕｎ。ＬＩＸｕｅｗａｇ．１ — ｎＤｅａｔｎｏｐｈｏｏｇｐｒｍｅｔｆＮｅｒｌｙ，Ａｎｉｐｒｖｎｉｌｏｐｉａ，ＡｎｈｅｉａｉｅｓｔｈｕｏｉｃａｈｓｔｌｕｉＭｄｃＵｎｖｒｉｙ，ｌ
ｍＴＯＲｅｅｖｓｉｕｒｍｎｓｌｎｎｕｉ —ｉｅｇｏｈｆｃｏｓｎｄｎｒｅｓ，ｔｔｕｍｌｔｒｔｉｙｈｉｂｒｃｉｅｎｐｔｆｏｉｕｉ／ｉｓｌｎｌｋｒｗｔａｔｒａｕｔｉｎｔｏｓｉａｅｐｏｅｎｓｎｔｅｓｓｙ

雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6_表达的影响及其机制

雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL -6表达的影响及其机制赵学慧1，王淮淮1，李维维2，李迎婕1，贾军利11河北北方学院附属第二医院肾内科，河北张家口075000；2张家口市第二医院肾内科摘要：目的　观察雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL -6表达的影响，并基于磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K ）/丝氨酸-苏氨酸激酶（AKT ）信号通路探讨相关机制。

方法　体外培养人肾小球足细胞系HGPC ，分为对照组、高糖组、实验组，对照组不做干预，高糖组、实验组加入30 mmol /L D -葡萄糖，实验组在此基础上分别加入2.5、5、10 µmol /L 雷帕霉素，检测各组细胞活力，筛选雷帕霉素最适浓度。

将HGPC 细胞分为对照组、高糖组、实验组、抑制剂组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组；对照组不加药物，高糖组加入30 mmol /L D -葡萄糖，抑制剂组加入30 mmol /L D -葡萄糖+10 µmol /L PI3K /AKT 信号通路抑制剂LY294002，实验组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组加入30 mmol /L D -葡萄糖+10 µmol /L 雷帕霉素，雷帕霉素+抑制剂组再加入10 µmol /L LY294002，雷帕霉素+激动剂组再加入10 µmol /L PI3K /AKT 信号通路激动剂SC79；各组给药后培养24 h 。

采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷法检测细胞增殖能力，Hoechst 33258染色检测凋亡细胞；采用ELISA 法检测细胞培养液上清中的白细胞介素6（IL -6）；Western blotting 法检测细胞中的细胞周期素D1（Cyclin D1）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase -3）及PI3K /AKT 通路相关蛋白。

结果　高糖组细胞增殖率、Cyclin D1表达低于对照组，实验组和抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达高于高糖组；与实验组相比，雷帕霉素+抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达增高，雷帕霉素+激动剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达降低（P 均<0.05）。

细胞自噬诱导剂雷帕霉素对小鼠小胶质细胞线粒体ROS 表达及炎性细胞因子分泌水平的影响

细胞自噬诱导剂雷帕霉素对小鼠小胶质细胞线粒体ROS 表达及炎性细胞因子分泌水平的影响刘娜;董晓莉;叶俊丽;姜忠信【摘要】目的：观察细胞自噬诱导剂雷帕霉素（ RAPA）对脂多糖（ LPS）激活的小鼠小胶质细胞线粒体ROS表达及肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-1β（ IL-1β）、白介素-6（IL-6）、白介素-12（IL-12）等炎性细胞因子分泌水平的影响。

方法小鼠小胶质细胞分为A、B、C组，分别加入100 ng／mL LPS＋10 nmol／L RAPA 、100 ng／mL LPS、等量细胞培养液培养24 h。

采用MitoSOX RED荧光染色测定各组线粒体ROS水平采用ELISA法检测各组细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12水平。

结果 A、B、C组细胞线粒体ROS水平（RFU值）分别为36．417±3．456、74．939±1．906、14．784±0．898。

组间两两比较，P＜0．05。

B组细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-12水平均高于C组（P均＜0．05）。

A组细胞上清液TNF-α、IL-1β、 IL-6及 IL-12水平均低于B组（ P均＜0．05）。

结论 RAPA可降低LPS诱导的小胶质细胞线粒体ROS表达及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12等炎性细胞因子的分泌水平。

【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)027【总页数】3页(P33-35)【关键词】细胞自噬;自噬诱导剂;雷帕霉素;小胶质细胞;炎性细胞因子;线粒体;活性氧簇【作者】刘娜;董晓莉;叶俊丽;姜忠信【作者单位】青岛大学附属医院，青岛266003;香港理工大学深圳研究院;青岛大学医学院;青岛大学附属医院，青岛266003【正文语种】中文【中图分类】R363小胶质细胞是神经胶质细胞的一种，其适度活化对神经突触的发生、神经元结构和功能的维持及调节血脑屏障的完整性具有重要作用。

雷帕霉素延缓老年小鼠脊柱退变的实验研究

雷帕霉素延缓老年小鼠脊柱退变的实验研究谭清梅;张从新;廖坚文;杨诚【摘要】目的探讨雷帕霉素(Rap)对老年小鼠自发性脊柱退变的保护作用.方法将20只老年C57B6小鼠(27月龄)随机分为实验(30 m+Rap)和对照(30 m)两组,实验组小鼠每天灌胃1次西罗莫司(2 mg/(kg.d)),对照组灌等量生理盐水,均持续灌胃3个月后取材,通过μCT观察椎体结构和进行骨小梁分析,组织切片行HE和阿尔新蓝染色观察椎体和椎间盘情况,还进行TRAP染色检测破骨细胞数目和免疫组织检测二型胶原(COLⅡ)表达及分布.结果 Micro-CT检查测量,发现雷帕霉素能缓解脊柱椎体骨皮质变薄和骨小梁减少,主要表现在喂雷帕霉素后椎体的BV/TV及骨小梁数量增加,骨小梁分离度减少,但骨小梁厚度无明显改变.HE染色和阿尔新蓝染色显示雷帕霉素能缓解老年小鼠椎间盘退变,表现在30 m+Rap组小鼠椎体骨小梁较30 m组多,30 m+Rap组小鼠椎间隙较30 m组大,30 m组纤维环结构紊乱,向髓核内生长替代部分髓核组织,生长板和软骨终板软骨退变明显.TRAP染色检测,发现30 m+Rap组破骨细胞减少,免疫组化检测显示COLⅡ在30 m组小鼠的软骨终板和生长板表达明显较30 m+Rap组减少.结论雷帕霉素能通过mTORC1调控破骨细胞和软骨细胞,延缓老年小鼠脊柱退行性病变.%Objective To study the protection effect of rapamycin on spontaneous spinal degeneration in aged mice.Methods Twenty aged C57B6 mice (27 months) were divided into experimental group (30 m + Rap) and control group (30 m).Mice in the experimental group were lavaged with sirolimus (2 mg/kg/d),and mice in the control were filled with saline.After 3 months of continuous lavaging,Micro-CT and tissue slice staining were used to observe vertebrae and intervertebral discs and for the analysis of trabeculae.TRAP stainingdetection of osteoclasts and immunohistochemical detection of type II collagen (COL II) expression were conducted.Results Micro-CT detection found that rapamycin could alleviate the thinning of cortical bone and the decrease of trabeculae of vertebral body,mainly showing as an increase in BV/TV and number of trabeculae and reduced degree of trabeculae separation,but the thickness of trabeculae had no obvious changes.HE staining and alcian blue staining showed that the number of vertebral trabeculae in mice in the 30 m + Rap group was greater than that of the 30 m group,consistent with the result of MicroCT.The intervertebral space of the 30 m + Rap group mice was greater;the fiber ring structure of the 30 m group was in disorder,with the fiber grew into nucleus pulposus and replaced part of nucleus pulposus tissue.Growth plate and cartilage endplate cartilage degenerated obviously in the 30 m group.TRAP and COL Ⅱ immunohistochemical staining found that osteoclasts decreased obviously in KO mice and COL Ⅱ expression in growth plate and cartilage endplate in the 30 m + Rap group was higher than that in the 30 m group.Conclusion Rapamycin could regulate chondrocytes and osteoclasts to delay spine degenerative diseases in aged mice through mTORC1 signaling pathway.【期刊名称】《中国骨质疏松杂志》【年(卷),期】2017(023)012【总页数】5页(P1564-1568)【关键词】mTOR信号通路;脊柱;椎间盘;退变;雷帕霉素【作者】谭清梅;张从新;廖坚文;杨诚【作者单位】深圳市福田区第二人民医院,广东深圳518049;广州医科大学附属第三医院荔湾医院,广东广州510145;南方医科大学第三附属医院(广东省骨科医院),广东广州510630;南方医科大学第三附属医院(广东省骨科医院),广东广州510630【正文语种】中文【中图分类】R681.5随着老龄化社会的到来，脊柱退变性病变例如骨质疏松和腰椎间盘退变等疾病越来越常见。

雷帕霉素对PAN肾病小鼠肾脏病变和VEGF及受体表达的影响

雷帕霉素对PAN肾病小鼠肾脏病变和VEGF及受体表达的影响王丽华;钱家麒;顾乐怡;梁馨月;严玉澄;校丽芳;高嘉元;张敏芳;戴慧丽;倪兆慧【摘要】目的探讨雷帕霉素对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病模型小鼠肾脏病变和肾小球VEGF及受体(VEGFR)表达的影响.方法 24只BALB/c小鼠随机分为PAN组(单次尾静脉注射PAN造模,n=8)、雷帕霉素干预组(单次尾静脉注射PAN造模+雷帕霉素干预,n=8)和对照组(单次尾静脉注射PBS,n=8).各组动物留取24 h尿液,BCA蛋白定量试剂盒测定24 h尿蛋白排泄量.于造模后第10天处死动物取肾脏制备肾组织标本,透射电子显微镜观察各组肾小球足突结构改变;分别采用Real-time PCR、Western b1otting和免疫组织化学方法检测各组肾组织VEGF、VEGFRI、VEGFR2 mRNA以及VEGF、VEGFR2蛋白表达.结景24 h尿蛋白排泄量为PAN组>雷帕霉素干预组>对照组,组间差异均有统计学意义(P<0.05).电子显微镜观察发现PAN 组肾小球上皮细胞足突广泛融合.各组肾组织VEGF、VEGFRI、VEGFR2 mRNA及蛋白表达为PAN组>雷帕霉素干预组>对照组(P<0.05),且各组VEGF、VEGFRI、VEGFR2 mRNA及VEGF蛋白表达与24 h尿蛋白排泄量呈正相关(P<0.05).结论雷帕霉素能减轻PAN肾病小鼠蛋白尿的程度,作用机制可能与下调肾小球VEGF及其受体基因表达有关.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(030)004【总页数】6页(P375-380)【关键词】嘌呤霉素氨基核苷肾病;血管内皮细胞生长因子;血管内皮生长因子受体;蛋白尿;雷帕霉素;小鼠【作者】王丽华;钱家麒;顾乐怡;梁馨月;严玉澄;校丽芳;高嘉元;张敏芳;戴慧丽;倪兆慧【作者单位】上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001;上海交通大学医学院仁济医院肾脏内科,上海200001【正文语种】中文【中图分类】R692;Q786血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)在正常肾小球中主要由足细胞合成和分泌，而在肾脏发生病变时系膜细胞也高表达VEGF。

雷帕霉素对糖尿病大鼠肾脏病变和VEGF及其受体表达的影响

雷帕霉素对糖尿病大鼠肾脏病变和VEGF及其受体表达的影响校丽芳;顾乐怡;梁馨月;王丽华;张敏芳;钱家麒;倪兆慧;戴慧莉;严玉澄【摘要】目的研究雷帕霉素对糖尿病大鼠早期肾脏病变的影响,探讨血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾病发病中的作用.方法 SD大鼠经链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)一次性腹腔注射建立糖尿病模型.建模成功后分为雷帕霉素治疗组(建模后12周开始用雷帕霉素治疗4周,n=9)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)受体拮抗剂L-158809治疗组(阳性对照组,建模后12周开始用L-158809治疗4周,n=5)和糖尿病肾病组(建模12周后用等量蒸馏水灌胃4周,n=9),以未建模SD大鼠作为正常对照组(n=9).采集各组大鼠血、尿样本和肾脏组织标本,观察和分析各组大鼠肾小球结构和功能的改变;Western blotting和免疫组织化学法检测肾脏组织VEGF及其受体VEGFR2的表达.结果与正常对照组比较,糖尿病肾病组大鼠24 h尿白蛋白增加、内生肌酐清除率升高、肾小球体积增大、肾小球基膜增厚,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01).与糖尿病肾病组比较,雷帕霉素治疗组和阳性对照组大鼠24 h尿白蛋白较少,且肾小球体积增大和基膜增厚均不明显.大鼠肾脏组织VEGF和VEGFR2表达,糖尿病肾病组明显高于正常对照组(P<0.01),雷帕霉素治疗组和阳性对照组显著低于糖尿病肾病组(P<0.01).结论雷帕霉素具有减少糖尿病肾病大鼠蛋白尿和缓解肾小球肥大和基膜增厚的作用.抑制肾脏组织VEGF和VEGFR2蛋白表达可能是雷帕霉素延缓糖尿病肾病发病的可能机制之一.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2009(029)009【总页数】5页(P1040-1044)【关键词】糖尿病肾病;雷帕霉素;血管内皮细胞生长因子;血管内皮细胞生长因子受体【作者】校丽芳;顾乐怡;梁馨月;王丽华;张敏芳;钱家麒;倪兆慧;戴慧莉;严玉澄【作者单位】上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院肾脏科,上海,200127【正文语种】中文【中图分类】R692;R587.1;R-332糖尿病肾病是糖尿病的严重并发症，为慢性肾脏疾病的常见原因之一，同时是糖尿病患者死亡的主要原因之一。

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究【摘要】目的：探讨新型免疫抑制药物雷帕霉素（RAPA）对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的抑制作用,并与传统免疫抑制药物比较作用效果。

方式：用主要组织相容性抗原(MHC) 完全不合的纯种近交系小鼠［供鼠为雄性C57BL/6J (H-2b) 鼠,受鼠为雌性BALB/c (H-2d) 鼠］成立allo-BMT/aGVHD动物模型，随机分5组，第一、2和3组别离给予RAPA、环孢菌素A(CsA)加甲氨蝶呤(MTX)、RAPA加CsA加MTX联合用药作为aGVHD抑制方案，第4组为空白对照，第5组为未移植组。

观察各组小鼠骨髓移植后aGVHD的出现情形。

结果：移植小鼠出现典型的aGVHD症状，未用aGVHD预防方案的移植小鼠(第4组) 死亡顶峰在移植后第5～7天,死亡率达100 %。

用不同aGVHD预防方案的第1～3组小鼠aGVHD症状明显减轻,平均生存时刻(MST) 较第4组显著延长(别离延长、和d,P<。

不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间，移植后外周血常规转变不同无显著性。

经用各预防方案后,移植小鼠aGVHD病理表现减轻,且RAPA、CsA和MTX联合用药组的病理分级轻于RAPA 单药组或CsA加MTX标准方案组。

结论：RAPA能够显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应，增强小鼠对骨髓移植的免疫耐受，对小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病（GVHD）有明显抑制作用，可减轻GVHD 症状和病理损害程度，延长平均生存时刻。

【关键词】雷帕霉素；移植物抗宿主病；异基因骨髓移植；小鼠造血干细胞移植( hemopoietic stem cell transplantation, HSCT) 是目前医治血液系统恶性肿瘤和非恶性遗传性缺点的重要手腕。

对于许多没有相关全相合或无关全相合骨髓供者的恶性血液病患者来讲，用半相合的亲属或部份相合无关供者的骨髓作为干细胞来源，成为医治恶性血液病的必然选择。

雷帕霉素作用机制研究及在肾移植中的应用进展

雷帕霉素作用机制研究及在肾移植中的应用进展
黄赤兵;张银甫
【期刊名称】《中国药房》
【年(卷),期】2006(17)7
【摘要】雷帕霉素（Rapamycin，RPM）于1975年从加拿大Easter岛的吸水
链酶芮中提取，当时被作为一种大环内酯类抗生素，1989年才发现其具有强大的免疫抑制作用，经过10年的研发，美国食品和药品管理局（FDA）于1999年批准其相关产品首先应用于临床肾移植。

目前，国外已应用其于以肾移植为主的各类器官移植，近年国内也开始应用于肾移植。

临床应用结果显示，RPM是一种高效、低毒的免疫抑制药，因其有别于其它免疫抑制药的特殊作用机制，不仅在预防、治疗。

肾移植排斥反应中取得较好效果，而且在慢性移植物。

肾病的控制以及移植后肿瘤的预防、治疗方面取得较好效果。

本文就RPM作用机制研究以及在。

肾移植中的临床应用进展综述如下。

【总页数】3页(P547-549)
【作者】黄赤兵;张银甫
【作者单位】第三军医大学新桥医院肾移植中心,重庆市,400037;第三军医大学新
桥医院肾移植中心,重庆市,400037
【正文语种】中文
【中图分类】R978.1+5
【相关文献】
1.雷帕霉素及其在肾移植中的应用 [J], 张雁钢;滕东海;卢一平
2.雷帕霉素联合环孢霉素A在肾移植受者中的应用 [J], 王平;戴澄;李正源;于立新
3.雷帕霉素及其在肾移植中的应用 [J], 涂响安;郑克立
4.雷帕霉素在儿童肾移植中的临床应用 [J], 张彦选;曲青山;王振璞;陈鹏;苗书斋
5.雷帕霉素在肾移植中的应用 [J], 王长安;韩林;陈鑫
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Science子刊！哈佛医学院科学家发现在生命早期服用雷帕霉素可延长10%的寿命

Science子刊！哈佛医学院科学家发现在生命早期服用雷帕霉素可延长10%的寿命近年来，雷帕霉素在抗肿瘤、抗衰老和改善神经退行性疾病中的作用被不断报道，被人们称作“神药”。

雷帕霉素是雷帕霉素(mTOR) 抑制剂的一个充分表征的靶点，是延长小鼠寿命的最有效药物干预措施之一。

一些间接证据表明在发育过程中靶向抑制生长信号与寿命之间的因果关系，然而目前没有实验表明仅在发育过程中直接抑制生长途径会影响寿命结果。

近期，来自哈佛大学医学院的科学家在Science Advances杂志发表题为“Rapamycin treatment during development extends life span and health span of male mice and Daphnia magna”的文章，该文章发现在生命早期进行短期雷帕霉素治疗是一种新的长寿干预措施。

为了评估雷帕霉素对寿命的影响，研究人员将130 只新生UMHET3小鼠纳入实验，其中实验组喂养少量雷帕霉素，对照组正常进食。

幼鼠在20至22日龄时与母鼠分开，实验组继续服用雷帕霉素饮食直至45日龄然后将这些动物转移到常规的食物中，并持续到生命后期。

研究发现经过雷帕霉素处理的小鼠体积小于对照组，治疗组和对照组之间的营养消耗量没有差异，本实验说明两组之间的生长差异是雷帕霉素治疗的直接后果，而不是营养不足。

随后研究人员想探究生命早期雷帕霉素治疗对小鼠健康寿命的影响，结果表明雷帕霉素治疗将UMHET3小鼠的中位寿命延长了10%。

值得注意的是，这种延长寿命的现象主要表现在雄性小鼠中，在雌性小鼠中没有观察到类似的现象。

紧接着，研究人员又将无脊椎动物水蚤纳入研究，结果表明与小鼠一样，在生命早期用雷帕霉素处理的水蚤体积更小，并且效果是剂量依赖性的。

虽然用1和10nM雷帕霉素处理的动物在其整个生命周期中保持较小，但用 0.1 nM 雷帕霉素处理的水蚤随着年龄的增长体积变大，到83天时与对照组的体积几乎无差异。

雷帕霉素减缓大鼠被动 Heymann 肾炎的进展

雷帕霉素减缓大鼠被动 Heymann 肾炎的进展杨凤杰;周建华;吕倩影;蒲金赟;张瑜【摘要】AIM: To determine the effect of rapamycin on the progression of passive Heymann nephritis (PHN), and whether autophagy is involved in this process .METHODS:Male Sprague-Dawley rats (n=24) were ran-domly divided into 3 groups:control group , PHN group and rapamycin treatment group .The rat PHN model was induced by injection of anti-Fx1A serum through penile vein , and all rats were sacrificed on day 21.Automatic biochemical analyzer was used to detect 24 h urine protein , blood urea nitrogen and serum creatinine .Renal damage was observed through per-iodic acid-silver methenamine staining .The number of podocyte was estimated by Weibel-Gomez method .The glomerular deposition of C5b-9, the expression of caspase-3 and expression of autophagy marker LC 3 in glomeruli were examined by immunofluorescence staining , immunohistochemical staining and Western blotting ,respectively.RESULTS: Rapamycin significantly reduced proteinuria in the PHN rats (P<0.05), while the renal functions in 3 groups were normal, without significant difference .Although rapamycin limited weight gain in the rats , the health of the rats during drug treatment was notaffected .Rapamycin retarded glomerular basement membrane thickening in the PHN rats .Rapamycin significantly re-duced the podocyte deletion by preventing podocyte apoptosis .Rapamycin enhanced the level of autophagy of glomerular in-herent cells .CONCLUSION:In the diseaseprocess of PHN , appropriate strength of autophagy plays a protective role . Rapamycin appropriately enhances autophagy and prevents podocyte apoptosis , thus reducing nephropathy and proteinuria . This may be one of the important mechanisms of rapamycin to slow down the progress of PHN .%目的：观察雷帕霉素对大鼠被动Heymann肾炎（ PHN）的影响，并探讨自噬在其中的作用。

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・５０２・空旦壁堡痘盘查！！！！堡！旦箜！！鲞筮！塑鱼堕！』望！！！！塑！』！！ｚ！！！！：∑！！：！！：丛！：！
二、小剂量雷帕霉素对ＫＫＡｙ小鼠ＧＢＭ厚度的影响
治疗８周后，Ｃｏｎ组ＫＫＡｙ小鼠ＧＢＭ明显增厚，显著高于雷帕霉素组［（２８４．４１士８３．７３）ｎｍ口ｓ（１４４．５８±１２．７０）ｎｍ，Ｐ（０．０１］和Ｉｎｓ组［（１８５．８２±１８．２４）ｎｍ，Ｐ＜０．０１３（图１）。

图１雷帕霉素治疗８周后对ＫＫＡｙ小鼠ＧＢＭ厚度的影响（×１５０００）
Ｆ幢ＩＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒａｐａｍｙｅｉｎＯｎＧＢＭｔｈｉｃｋｎｅｓｓａｆｔｅｒ８－ｗｅｅｋｓｔｒｅａｔｍｅｎｔ（Ｘ１５０００）
三、雷帕霉素对ＫＫＡｙ小鼠肾皮质ＶＥＧＦ蛋白
表达的影响
Ｃ５７ＢＬ、ＫＫＡｙ小鼠肾皮质均表达ＶＥＧＦｌ８８与
ＶＥＧＦｌ６４两种异构体。

１６周ＫＫＡｙ小鼠肾组织
ＶＥＧＦｌ８８、ＶＥＧＦｌ６４蛋白表达明显升高，分别为同周
龄Ｃ５７ＢＬ小鼠的１．６９倍、２．３３倍，差异有统计学意
义（图２）。

雷帕霉素可显著抑制ＫＫＡｙ小鼠肾皮质
ＶＥＧＦｌ８８和ＶＥＧＦｌ６４表达。

治疗４周和８周时，雷
帕霉素组肾皮质ＶＥＧＦｌ８８蛋白表达分别为Ｃｏｎ组的
７２％、５１％，差异有统计学意义；ＶＥＧＦｌ６４表达分别
为对照组的５５％、５８％，差异有统计学意义。

治疗４
周和８周时，雷帕霉素组ｖＥＧＦｌ８８、ＶＥＧＦｌ６４表达也
低于Ｉｎｓ组，差异有统计学意义（图３）。

田２１６周Ｃ５７ＢＬ小鼠和ＫＫＡｙ小鼠肾皮质ＶＥＧＦ蛋白表达的比较Ｆｉｇ２ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＶＥＧＦｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＣ５７ＢＬａｎｄＫＫＡｙｍｉｃｅａｇｅｄ１６ｗｅｅｋｓ
田３雷帕霉素治疗对ＫＫＡｙ小鼠肾脏ＶＥＧＦ蛋白表达的影响Ｆｉｇ３ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒａｐａｍｙｃｉｎｏｎｒｅｎａｌＶＥＧＦｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓ—ｓｉｏｎｏｆＫＫＡｙｍｉｃｅａｆｔｅｒ４一ｏｒ８－ｗｅｅｋｓｔｒｅａｔｍｅｎｔ
Ａ：４周４ｗ；Ｂ：８ｗ８周；与Ｃｏｎ组比较＂ｓＣｏｎｇｒｏｕｐ，。

Ｐ＜０．０１；与Ｉｎｓ组比较ｗＩｎｓ
ｇｒｏｕｐ，＃Ｐ＜Ｏ．０５，牮＜Ｏ．０１。