革兰染色与镜检的质量控制

口腔螺旋体镜检湿片法与革兰染色法两种方法的比较

口腔螺旋体镜检湿片法与革兰染色法两种方法的比较发表时间：2018-03-02T14:12:18.223Z 来源：《医药前沿》2018年1月第3期作者：吴坤[导读] 口腔螺旋体检测湿片法和革兰染色法的检测结果有明显差异，主要是受多种因素影响。

（黔东南民族职业技术学院医药技术系贵州凯里 556000）【摘要】目的：探讨口腔螺旋体检测湿片法与革兰染色法的方法对比关系。

方法：以140例大学生作为检测对象，取牙垢涂片分别采用湿片法镜检和革兰染色法镜检对其牙垢标本进行检测，对比两种方法的口腔螺旋体检测结果。

结果：利用湿片法镜检口腔螺旋体的阳性率为20%，利用革兰染色法镜检口腔螺旋体的阳性率为52%，两组数据差异有统计意义（P＜0.001）。

结论：口腔螺旋体检测湿片法和革兰染色法的检测结果有明显差异，主要是受多种因素影响，建议临床口腔螺旋体的检测普遍用革兰染色法镜检，可以更大程度上提高检出阳性率，为临床口腔相关疾病提供有效的辅助诊断。

【关键词】口腔螺旋体；口腔；湿片法；革兰染色法【中图分类号】R781.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）03-0223-01 口腔螺旋体检测，在临床上为口腔相关疾病提供有效的辅助诊断，口腔螺旋体检测湿片法受到多种因素影响，降低了检测结果的准确性，出现检查误差，口腔螺旋体检测的准确性是为临床口腔相关疾病提供辅助诊断的重要依据。

本文主要对140例大学生作为检测对象通过湿片法与革兰染色法分别检测结果的差异性进行比较分析，使其更好的在临床口腔疾病检测中得到广泛应用。

现将检测方法与检测结果简述如下。

1.资料与方法1.1 一般资料以140例黔东南民族职业技术学院的在校大学生牙垢样本作为研究对象，其中男40例，女100例，年龄l8～22岁分别用湿片法与革兰染色法对标本进行口腔螺旋体检测观察，并及时、准确记录检测结果。

1.2 方法（1）湿片法。

载玻片上放一滴生理盐水用牙签挑取牙缝中的牙垢制成悬液，置(10×40)倍镜下观察口腔螺旋体。

革兰氏染色及镜检sop

革兰氏染色及镜检SOP1. 目的规范革兰氏染色及镜检的标准操作规程，确保试验的准确性。

2. 范围本标准适用于革兰氏染色及镜检的操作。

3. 定义3.1.革兰氏阳性菌（G+）：G+的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成。

在染色过程中，当用95%乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，细胞壁通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞壁内而不易脱色，因此呈蓝紫色。

3.2.革兰氏阴性菌（G-）：G-的细胞壁中肽聚糖含量低，脂类物质含量高。

当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物容易被乙醇抽提出来而脱色，然后又被染上了复染剂的颜色，因此呈现红色。

4. 职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行。

4.2.QA、QC组长、质量管理部经理负责本规程的审核。

4.3.质量总监负责本规程的批准。

4.4.QA负责本规程执行的监督。

5.引用标准无6. 材料6.1.仪器、实验用具：显微镜、载玻片、酒精灯、接种环。

6.2.试剂与配制革兰氏染色液、95%乙醇、香柏油、二甲苯和0.9%氯化钠溶液。

结晶紫溶液：称量2g结晶紫于研钵内研磨至粉末，将粉末倒入100ml烧杯中，量取95%乙醇20ml 将其溶解；草酸铵溶液：称量0.8g草酸铵于200ml烧杯中，量取80ml纯化水将其溶解；结晶紫染色液：将配好的结晶紫溶液倒入草酸铵溶液中，混匀，静置24h后过滤即成结晶紫染色液；此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。

碘化钾溶液：称量2gKI粉末，转移至200ml烧杯中，量取100ml的纯化水将其充分溶解；碘溶液：称量1g碘颗粒于研钵内研磨至粉末，将粉末倒入500ml烧杯中，量取200ml纯化水倒入并碘染液：将配好的碘化钾溶液倒入碘溶液中，混匀即成。

配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色即不能使用。

沙黄溶液：称量0.25g沙黄于200ml烧杯中，量取95%乙醇10ml将其溶解；沙皇（番红）复染液：待沙黄溶液完全溶解后加纯化水定容至100ml，混匀即成。

影响革兰氏染色结果的原因分析

影响革兰氏染色结果的原因分析洪庆华1，迟杰1，齐云1，孙浩2【摘要】为了提高革兰氏染色实验的教学效果，应用革兰氏染色法，探讨了菌种的菌龄、细菌涂片厚度、碘液媒染时间和乙醇脱色时间对革兰氏染色结果的影响。

实验结果表明获得正确染色结果的条件为：首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25h、13～17h和18～24h；然后是制作细菌涂片时，取菌量要少于1／3环，涂菌稀薄、均匀；最后是染色。

染色的第一步是用草酸铵结晶紫初染60s，再用碘液媒染60s，最后乙醇脱色时间是关键，应严格控制在30～45s为宜。

只有控制好影响革兰氏染色结果的各个环节，才能得到正确的染色结果。

【期刊名称】实验技术与管理【年(卷),期】2011(028)005【总页数】3【关键词】革兰氏染色；影响因素；形态观察在微生物学实验教学中，革兰氏染色法是每个学生必须掌握的实验操作技能。

在实验中如果控制不好菌种的菌龄、细菌涂片的取菌量、碘液媒染时间和乙醇脱色时间，常常会出现假阳性或假阴性的实验结果［1］，染色成功率低，因而极大地挫伤了学生的实验兴趣和积极性。

为此，探讨影响革兰氏染色结果的各种因素并对其原因进行分析，提高染色结果的准确性，显得尤为重要。

1 材料与方法1．1 染色液及试剂草酸铵结晶紫染色液：将2．0g结晶紫溶解在20 mL、质量分数为95%的乙醇中制成A溶液；将0．8g草酸铵溶解在80mL蒸馏水中制成B溶液；再将A溶液与B溶液混合，静置48h后使用［2］。

碘液：先将1．0g碘化钾溶解于少量蒸馏水中，再将0．5g碘溶解在碘化钾溶液中，使碘完全溶解后加蒸馏水至150mL并混匀。

番红染色液：将0．5g番红溶解于20mL的95%乙醇中，然后加蒸馏水至100mL并混匀。

1．2 菌种新培养10～27h的G一菌（大肠杆菌）和G＋菌（枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌）。

1．3 革兰氏染色法的实验步骤（1）取洁净载玻片一张，用记号笔分为3等份，各加一小滴无菌水，将接种环在火焰上烧红，冷却后从斜面上分别挑取少量大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌与玻片左侧、中间和右侧的水滴混匀后，涂成直径为10～15mm 稀薄而均匀的圆形菌膜。

化妆品微生物检验及安全技术规范比较

最终结果判断
增菌培养
供试液的制备
书写检验记录单
分离纯化
无菌落或无特征菌落
配培养基和稀释液
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验绿脓菌素试验生化试验硝酸盐还原试验 42℃生长试验明胶液化试验
人员培训能力掌握的检验重要指标。
有条件可做视具体样品测试结果。
在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方法的有效性。
推荐了解：
接种阳性菌计算回收率
未检出2天，检出3-4天
耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。
方法比较
2007版化妆品卫生规范与2015版化妆品安全技术规范对比：总则
总则重点
具有代表性。2.不少于2个包装单位的取样中共取10g或10mL。3.供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。4.应置于室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。4.宜先取出部分样品做微生物检验。5.严格上微生物无复测一说。（可能的因素多），因此对微生物检验人员要求严格。6.生物安全开始重视。
★铜绿假单胞菌检查流程图
SCDLP培养基
十六烷三甲基溴化铵琼脂
36±1℃
18~24h
36±1℃
18~24h
特征菌落
灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素
镜检
十六烷三甲基溴化铵平板 SCDLP培养基黄绿色菌膜灰白色湿润氧化酶试验粉红/紫红色
绿脓菌素试验盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色硝酸盐还原产气试验 N2 明胶液化试验明胶培养基（高层）明胶液化

革兰氏染色的实验报告（共9篇）

革兰氏染色的实验报告(共9篇)革兰氏染色实验报告革兰氏染色法的原理及其练习摘要：革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征，所以学习微生物学，进行革兰氏染色实验是很重要的。

为保证染色结果的正确性，采用规范的的染色操作方法是十分必要。

本实验主要对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）进行革兰氏染色，观察它们的染色特征，辨别是革兰氏阴性还是阳性，从而掌握其染色方法。

染色方法与过程很清晰，但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach）多组呈现假阴性。

本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理，但要想做出很好的染色得多加练习。

本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。

关键词：革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法，它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。

革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。

经过一定的染色过程后，革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高，脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。

革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，蓝色被洗脱，复染后变为红色。

革兰氏染色原理很简单，染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌，涂片不宜过厚，严格控制脱色时间。

大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌，金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach)与枯草杆菌(B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌，染色后在显微镜下容易区别。

同时它们的形态各异，可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。

本实验还涉及到高倍油镜的使用。

革兰染色实验报告记录

革兰染色实验报告记录————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：实验原理：1）G+菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；同时乙醇使细胞壁脱水形成一道屏障，阻止结晶紫—碘复合物从胞内渗出。

G-菌的细胞壁结构疏松，肽聚糖层很薄，而外膜、脂蛋白、脂多糖又均含大量脂质，易被乙醇溶解，导致细胞壁通透性增加，胞内结晶紫-碘复合物被乙醇溶解析出而脱色。

2）G+菌等电点（PI2~3）比G-菌（PI4~5）低，在相同PH条件下，G+菌所带负电荷比G-菌多，故与带电的结晶紫染料结合牢固，不易脱色。

实验步骤：一、标本的制备：1、涂片：取玻片在火焰上稍微加温，以清洁纱布擦净，放置桌上，左手握菌种管，有搜持接种环，用无菌接种环取生理盐水一滴，置于载玻片的中央，再用接种环在火焰上灭菌，待冷却后，取斜面培养的葡萄球菌或大肠杆菌少许与盐水混匀，直接取1~2环菌液作涂片即可，涂片应厚薄均匀。

接种环采菌后，要通过火焰灭菌才能放下。

2、干燥：目的是是菌体水分慢慢蒸发，固定菌形。

涂片最好在室温中自然干燥，必要是将标本面向上，小心断续在弱火高处略烘，以助水分蒸发；但切勿紧靠火焰，以致标本烤枯，不堪检视。

3、固定：手执玻片一端，标本面向上，在火焰外层快速地来回通过三次，共2-3秒，以玻片反面触及皮肤不觉过烫为度。

冷却后，染色。

目的是杀死细菌，是菌体与玻片粘附较牢以及改变对染料的通透性，因活的细菌一般不能使许多染料进入细胞。

二、染色1、初染：将涂片标本夹持于左手，滴加结晶紫溶液盖满涂抹面，染色1~3分钟，用流水缓缓冲洗（即将龙头打开使水缓慢流出，将玻片倾斜使水在玻片面上端沿玻片流下冲洗染液）直至无颜色流下为止。

2、媒染：加卢戈氏染液4~5滴作用30秒到一分钟，再按上法冲洗，并将片上积水轻轻洒净。

3、脱色：在95%酒精缸中脱色约3~5秒，拿出玻片使酒精由玻片流下，如此反复2~3次，直至流下酒精略呈淡紫色为止，现按上法以流水冲洗，并将玻片轻轻洒净。

革兰氏染色操作规程

1 目的
建立微生物实验室细菌形态和主要构造检验方法，以鉴定菌种。

2 范围
本规程适用于我司革兰氏染色测试实验。

3 职责
质量部微生物实验员负责按此规程进行革兰氏染色测试。

4 染液的配制
4.1 0.5%结晶紫染色液
称取1g结晶紫，放入250ml试剂瓶中，加95%乙醇2ml,溶解后加入200ml蒸馏水摇匀即可。

4.2 革兰氏碘液
分别称取碘 1g和碘化钾2g放入蒸馏水300ml中，溶解摇匀即可。

4.3 脱色剂
95%乙醇
4.4 复染液（番红染液）
称取番红0.25g，加入10ml 95%乙醇内，然后用90ml蒸馏水稀释，摇匀即可。

5 革兰氏染色程序
5.1 涂片
用纱布擦净载玻片，以无菌接种环取一小滴无菌生理盐水，然后用无菌接种环挑取少数菌苔（菌落）或液体培养物（不必加生理盐水），在玻璃片中央涂成一薄膜。

5.2 干燥
涂片后放室温中自然干燥。

5.3 固定
将载玻片迅速通过火焰三次（其目的是杀死细菌），使菌体与载玻片粘附牢固，以及改变对染料的通透性。

5.4 初染
滴加结晶紫染液于已固定的载玻片上，染1min，水洗。

微生物质量控制盲样结果分析

微生物质量控制盲样结果分析提高微生物检验人员的技术水平，使检验结果准确可靠。

方法参加省一级质量控制盲样考核，从10g奶粉中检出1～3种致病菌，并对结果进行分析。

结果从样品中检出沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎肠杆菌各1株，通过比对，正确率100%。

结论本实验室检验技术水平进一步得到了提高。

为提高微生物室检验质量，在做好实验室内部质量控制的同时，每年都积极参加全省卫生检测检验实验室间的质量控制。

现将2010年本实验室参加河南省疾控中心对地市级实验室进行室间质量控制考核的结果分析如下。

1、材料与方法1.1 质控样品塑料管包装10g奶粉，本底清楚，不含有目标微生物，混合一定量的1～3种致病性细菌纯培养物。

1.2 检验要求鉴定到种或属。

1.3 检测标准按GB 4789-2010.4、GB 4789-2010.10、GB 4789-2010.30、GB 4789-2010.40中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验方法[1]。

1.4 检验试剂营养琼脂、营养肉汤、增菌培养基、分离培养基、TSI等生化试剂由环凯科技有限公司提供，VITEK32鉴定卡由法国梅里埃生物有限公司提供，显色培养基由博赛生物技术股份有限公司提供。

1.5 方法：1.5..1 样品处理、增菌将10g奶粉以无菌方式倒入100ml无菌生理盐水中，充分混匀。

各吸取25ml分别加入225 ml7.5%NaCl肉汤、LB1、BPW、BPW中。

LB1经300C24h培养后吸取0.1ml转入10ml LB2中培养，其中1份BPW经360C、12h培养后吸取1ml转入10ml TTB中增菌，另1份BPW经360C、18h培养后吸取1ml转入10ml mLST-Vm中增菌。

1.5.2 划线分离7.5%NaCl肉汤增菌液经360C、24h培养后划线于金黄色葡萄球菌显色平板，LB2增菌液经360C、24h培养后划线于单核细胞增生李斯特菌显色平板，TTB增菌液经360C、24hr培养后划线于沙门菌显色平板，mLST-Vm增菌液经440C、24h培养后划线于阪崎肠杆菌显色平板。

微生物的质量控制

临床微生物实验室的质量控制作者：魏衍超临床微生物检验，在感染性疾病及相关病患的诊断治疗预防及研究工作中起者越来越重要的作用，为了保障检验结果的准确性和可靠性，日常工作中要注意开展质量控制，包括室间质量控制和室内质量控制。

室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式，也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段。

参加由各省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控，会遇见一些平时罕见或未见过的菌株，通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下形态等有了较深的感性认识。

日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检。

室间质控建立在一个较好的室内质控的基础上的，做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。

室内质控主要包括几个方面：实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、染色液及染色方法质量控制、常用仪器的质量控制、药敏实验的质量控制、及发报告前的质量控制。

要想获得可靠的检验结果，首先要取得一份合格的标本，所以实验室前的质量控制是保障检验结果准确性的关键。

包括标本采集时间（时机）、采集方法与运送等。

采集时间一般应在发病早期，应用抗生素前或下次用药前（血药浓度相对较低）。

呼吸道标本的采集要尽量减少上呼吸道正常菌群干扰，如采集晨痰、随意痰要用清水漱口2～3次后深呼吸用力咳出气管内之痰块直接吐于无菌器皿内，迅速盖上器皿盖、送检。

注意收集浓痰或粘稠液而非唾液。

咽拭子、湿润无菌生理盐水、湿润无菌拭子，越过舌根到达咽后壁或悬雍垂后侧或咽喉部发红、灰白色可疑假膜部位，反复涂抹数次后小心退出，随即置于无菌试管内塞紧塞子送检。

拭子退出时注意避免接触口腔黏膜、舌头等部位。

泌尿道标本的采集要尽量避免或减少尿道口正常菌群干扰。

采集中段尿，无论男性、女性、儿童病人均应先冲洗尿道口，弃去开始排出的尿液，留取中段尿4～6毫升于无菌试管内塞紧塞子，尽快送检。

尿量不宜太多，试管塞子与尿液不应直接接触。

留取导尿管尿要排空导尿管内陈旧尿液，接取新引出尿液4～6毫升。

革兰染色质控片制备流程

革兰染色质控片制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!一、实验材料和设备。

1. 菌种，金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和大肠埃希菌（Escherichia coli）。

医疗器械的微生物检验方法及质量控制措施

医疗器械的微生物检验方法及质量控制措施摘要：现阶段我国社会经济发展的速度比较快，医疗事业得到了不断的发展，在这个过程中也出现了各种各样的医疗器械。

从目前情况看来，医疗器械在医院发展当中占据着非常重要的地位，不同医疗器械制造单位往往有着不同的资质，这样就会出现相关安全事故，目前人们日常生活水平得到了提高，所以会对食品、药品、医疗器械等安全问题予以重视。

相关工作人员要严格按照相关要求和规定来对医疗器械进行选择利用，这样才可以对微生物检测质量进行合理的控制，后续相关工作也能够正常的开展。

关键词：医疗器械；微生物检测；质量控制措施前言：根据相关调查表明，医疗器械在检测过程中会涉及到较多的项目，其中不可缺少的就是微生物指标，部分医疗器械会要求微生物指标始终处于可控范围之内，还有一部分则要求无菌。

为了能够将医疗器械检测质量控制落实到位，那么相关工作人员要对各种质量体系进行充分的分析，结合实际的情况来开展各种操作，从而才能够让各种试验与规定标准相符合，检验结果也更加具有准确性。

一、医疗器械的微生物检验方法（一）采用显微镜观察法众所周知，显微镜作为一种观察设备可以有效观察到人眼无法分辨的个体或微小细菌，在通常的情况下会将显微镜划分为两种，这两种分别是光学显微镜和电子显微镜。

工作人员可以利用光学显微镜来对一般形态结构的微小个体及其微小细菌进行观察，通过电子显微镜才可以观察到全新的内部结构。

光学显微镜往往会对多个部分共同组成，其中包括普通光学显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜等，电子显微镜可以分为透射电子显微镜、扫描电子显微镜等，工作人员要根据实际的微生物检测要求来选择显微镜，这样才可以达到良好的检测效果。

（二）采用染色标本检查法工作人员可以对细菌及其周围环境进行染色处理，在这种方法的作用下会形成更加明显的对比，通过光学显微镜能够观察到各种细菌的大小、排列等特征，对细菌的结构也能够充分的了解。

工作人员要严格按照相关的要求和规定来远取相应的细菌样本，采取有效措施来对该样本进行干燥处理，在这固定样本之后要进行媒染，并且在脱色之后还要进行复染。

化妆品中微生物检验能力验证结果分析与质量控制探讨

化妆品中微生物检验能力验证结果分析与质量控制探讨摘要:目的探讨化妆品中微生物检验能力验证结果分析与质量控制。

方法参考《化妆品安全技术规范》检验化妆品样品中的耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、菌落总数，总结质量控制措施。

结果耐热大肠菌群染色镜检结果是革兰氏阴性短杆菌。

金黄色葡萄球菌CODE0110样品未检出，CODE0098样品检出。

铜绿假单胞菌CODE0135样品是革兰氏阴性杆菌，CODE0107样品未检出。

菌落总数CODE0071是110000CFU/g，Z是0.69；CODE0003是65000CFU/g，Z是1.12。

结论实验室具有检验化妆品中微生物的能力，通过加强化妆品检验的质量控制，提高检验能力。

关键词：化妆品；微生物检验；能力验证；质量控制；能力验证结果的展现形式较多，数据分析的统计方法应当适应于数据类型。

在化妆品的微生物检验中应用能力验证，能保障检验的稳定性，进一步完善质量控制措施，最终提高微生物检验能力[1]。

本文将探究化妆品中微生物检验能力验证结果与质量控制，详细如下：1资料与方法1.1样品化妆品微生物检验能力验证项目共四项，各项目样品是2瓶，分别是白色小球、蓝色小球，对应项目与样品标识是耐热大肠菌群（CODE0144、CODE0107）、金黄色葡萄球菌（CODE011、CODE0098）、铜绿假单胞菌（CODE0135、CODE0107）、菌落总数（CODE0071、CODE0003）。

1.2 试剂本研究使用试剂包括革兰氏染色液、伊红美兰琼脂、双倍乳糖胆盐、兔血浆凝固酶、氧化酶试剂、血琼脂平板等。

1.3 仪器设备本研究使用仪器设备包括恒温恒湿培养箱、生物安全柜、压力蒸汽灭菌器、全自动微生物分析系统、显微镜等。

1.4 检验参考《化妆品安全技术规范》检验化妆品样品中的耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、菌落总数。

由经验丰富检验人员进行检查。

1.5观察指标记录耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、菌落总数。

医疗器械微生物检测质量控制措施

医疗器械微生物检测质量控制措施摘要：我们国家医疗器械有很多种类，其制造厂家的资质也参差不齐，因医疗器械质量问题引发的医疗事故屡见不鲜，对于医疗器械的质量与安全性必须予以足够的重视，对于医疗器械制造厂家的监管面也需要进一步加强。

本文围绕医疗器械关于微生物检测方面的质控要求进行了系统性的分析，就其环境方面、实验室条件、仪器设备、操作人员、培养基要求，以及菌种、样品，还有记录等多方面的质量控制标准展开探讨，以使医疗器械在继续微生物检测时，能够得到一个准确可靠的结果，确保临床所用医疗器械的安全性。

关键词：医疗器械；微生物检测；质量控制1微生物的概念微生物指的是那些无法用人的肉眼进行分别的微小生物。

微生物的数目十分庞大，具有结构简单、活性强的特点。

在上世纪的中后期出现了一门独立学科，那就是微生物学检验，除需要应用显微技术，还要用到培养技术，其基本设备有显微镜跟培养皿等。

2.利用微生物学对医疗器械进行检验2.1显微镜检查显微镜通常用于观察那些无法用人眼分辨的、特别微小的对象。

它包括两个组成部分：其一是用来观察一般结构、形态的光学显微镜；其二是用来观察新内部结构的电子显微镜。

光学显微镜也有很多种类，除了一般的光学显微镜之外，还有荧光显微镜，采用微分干涉原理制成的差显微镜，还有暗视野显微镜等；电子显微镜也有透射显微镜跟扫描显微镜之分。

2.2染色标本的微生物学检查对染色标本进行微生物学检查时可选用以下几种方法为：2.2.1单染色法用某种染料把细菌连同周围其它物体一起染上这种颜色。

染色后，就能够观察细菌的大小、形态，还有排列形式，及其具体结构，不过不同细菌染色性之间的差异却显示不出来。

2.2.2复染色法用不止一种染料对细菌进行染色。

常用的复染色法有革兰跟抗酸两种染色法。

在细菌学中，革兰染色法使用频率最高，一般标本在进行分离培养前（极少数的粪便、血液标本除外），都要做一次革兰染色与镜检。

通过革兰染色能对细菌进行初步识别，可缩小进一步鉴定的范围。

革兰氏染色实验总结[技巧]

革兰氏染色实验总结[技巧]革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立。

细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌(G+)，后者为革兰氏阴性菌(G—)。

为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。

阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。

有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。

可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。

现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。

另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。

所以染色时的条件要严格控制。

例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应;PH很低时，则可都呈负反应。

此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。

所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。

G，菌:细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。

呈紫色。

Gˉ菌:肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是: ,)涂片固定。

革兰氏染色实验注意事项

革兰氏染色实验注意事项1.实验前准备：-准备好所需的试剂和设备，包括水洗瓶、稀释盘、热源、革兰染色各液、镜片、显微镜等。

-检查试剂的保存期限，确保试剂的有效性。

-按要求进行无菌操作，保证实验环境的清洁。

2.样品处理：-选择新鲜细菌培养物作为样品，确保细菌的新鲜度。

-为了避免脏染色，应在菌培养基上挑选单纯菌落。

-对于液体培养物，可以通过离心法将菌细胞沉淀下来，然后进行革兰氏染色。

3.实验步骤：-充分清洗玻璃片，以免杂质对实验结果产生干扰。

-均匀涂取菌液于干燥的玻璃片上，切勿用手触摸菌液，以免污染样品。

-确保菌液均匀涂满玻璃片，避免过多或过少，以防染色效果不理想。

-染色时间要控制好，过长或过短都会导致结果错误，通常为30秒至1分钟不等。

-染色液要均匀地覆盖于菌液上，并避免气泡的产生。

-完成染色后，将玻璃片轻轻漂洗，去除多余染色液。

4.镜检操作：-将染色后的玻璃片置于显微镜载物架上进行观察。

-根据细菌形态、染色性质以及结构特征进行初步鉴定。

-鉴定时要注意放大倍数的选择，以保证观察到细菌的细节。

-观察时要仔细观察细菌的形态、大小、排列方式等信息，并进行记录。

5.清洁工作：-实验结束后，应及时清洗试管、显微镜载架、显微镜物镜等设备，防止细菌的交叉污染。

-废液和废弃物应按规定处理，避免对环境和人员健康造成危害。

6.安全操作：-在进行实验时，应遵守实验室的安全操作规程，佩戴好个人防护用品，如实验服、手套和护目镜等。

-对于有毒性或刺激性的试剂，应注意避免直接接触。

-实验中注意火源和电源的使用安全，防止发生火灾或电击事故。

总之，进行革兰氏染色实验时，除了掌握正确的操作步骤外，还要注意实验前的准备和实验过程中的清洁工作，确保实验结果准确无误，并保证实验过程的安全进行。

化妆品中微生物检验能力验证结果分析与质量控制探讨

化妆品中微生物检验能力验证结果分析与质量控制探讨摘要：随着经济水平和人们需求的提高，，化妆品行业得到快速发展。

然而其安全问题也不容忽视，除了物理化学因素外，微生物也是威胁化妆品安全的重要因素。

化妆品中富含营养成分，极其适合微生物的生长，在其制造、运输和使用中容易滋生微生物。

一旦受到污染后，化妆品就会腐败变质，其含有致病微生物，会对人体健康造成极大危害。

本文对化妆品微生物检验现状及质量控制进行了分析。

关键词：化妆品；微生物；检验；控制1、试剂、仪器设备与检验方法1.1 材料1.1.1 样品化妆品微生物检验项目的能力验证共有4个项目，每个项目为2瓶样品，装在棕色的西林瓶内，内含由乳白色膏状物包裹的1个白色小球和1个蓝色小球。

对应项目以及样品标识分别为菌落总数CODE 0003和CODE0071、耐热大肠菌群CODE0107和COD E0144、铜绿假单胞菌 CODE0107和 CODE0135、金黄色葡萄球菌CODE0098和CODE011，标识由中国食品药品检定研究院提供。

1.1.2 试剂2，3，5－三苯基氯化四氮唑（TTC）卵磷脂-吐温80-营养琼脂培养基（批号20170918）、营养琼脂培养基（20170622）、大豆酪蛋白琼脂（TSA）培养基（20170810）、双倍乳糖胆盐（含中和剂）培养基（2016 1129）、大豆酪蛋白葡萄糖卵磷酯吐温80（SCDLP）液体培养基（20170512）、伊红美蓝琼脂（EMB）（2016 1020）、靛基质试剂（20180418）、革兰氏染色液（2018 0330）、溴化十六烷基三甲胺琼脂（20171206）、1%TTC溶液（20180411）、Baird Parker平板（BP 平板）（2018 0321）、血琼脂平板（20180405）、兔血浆凝固酶（2017 0823）、氧化酶试剂（20170617）（青岛高科园海博生物技术有限公司）。

1.2 仪器设备RT3369型生物安全柜（Thermo公司）；HCP246型恒温恒湿培养箱（memmert公司）；HWS-250型恒温恒湿培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；LDZX-50KBS型立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）；VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统（法国生物梅里埃公司）；CX31型显微镜（日本奥林巴斯光学工业）。