中国药典药品微生物检查增修订情况PPT课件
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最新中国药典版微生物限度检查及发展趋势PPT课件
包括成品培养基、由脱水培养基或按培养基处方配制的培养基均 应检查。 菌种 验证试验所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中 心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术， 以保证CMCC（B）44 102〕 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）〔CMCC（B）26 003〕 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63 501〕 白色念珠菌（Candida albicans）〔CMCC（F）98 001〕 黑曲霉（Aspergillus niger）〔CMCC（F）98 003〕
除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温 度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～ 28℃（；控制菌培养温度为35～37℃）。
检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10cm2 为单位 报告，特殊品种可以最小包装单位报告。
中国药品生物制品检定所
11
2010年版微生物限度检查法修订
2、附录107页，检验量 除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；
中国药品生物制品检定所
5
1、方法和标准的修订与完善
对供试品的前处理和一些检验方法进行了完善；
具有明显的中国特色，与国际差距显著。
计数测定体系的差异：
难以操作，检验繁琐
需气菌总数=细菌数+霉菌及酵母菌？
1000
1000 100
参见：《美英欧药典微生物限度标准的浅析》，苏德模、胡昌 勤、马越，《中国药品标准》，2005年第3期
4
总需气菌、霉菌及酵母菌计数
样品10g或10ml+缓冲液至100ml 取1ml样品液
总需氧菌TSA, 35℃ ,48-72h
真菌SDA(PDA), 20-25℃ ,5-7d
除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温 度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～ 28℃（；控制菌培养温度为35～37℃）。
检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10cm2 为单位 报告，特殊品种可以最小包装单位报告。
中国药品生物制品检定所
11
2010年版微生物限度检查法修订
2、附录107页，检验量 除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；
中国药品生物制品检定所
5
1、方法和标准的修订与完善
对供试品的前处理和一些检验方法进行了完善；
具有明显的中国特色，与国际差距显著。
计数测定体系的差异：
难以操作，检验繁琐
需气菌总数=细菌数+霉菌及酵母菌？
1000
1000 100
参见：《美英欧药典微生物限度标准的浅析》，苏德模、胡昌 勤、马越，《中国药品标准》，2005年第3期
4
总需气菌、霉菌及酵母菌计数
样品10g或10ml+缓冲液至100ml 取1ml样品液
总需氧菌TSA, 35℃ ,48-72h
真菌SDA(PDA), 20-25℃ ,5-7d
中国药典微生物限度PPT课件
微生物限度检查法
《中国药典》2015年版修订后将分为三个附录： – 1、非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法 – 2、非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法 – 3、非无菌药品微生物限度标准
1
整体概述
概况一
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概况二
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5
1.1 总则：
• 微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温 细菌和真菌的计数。
• 当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否 符合规定的微生物限度标准时，应按规定进行检 验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有 规定外，本法不适用于活菌制剂的检查。
• 本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动 检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定 的检查方法。
9
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
• 供试品微生物计数中所使用的培养基应进 行适用性检查。
• 供试品的微生物计数方法应进行方法适用 性试验【10版：方法验证】， 以确认所 采用的方法适合于该产品的微生物计数。
• 若检验程序或产品发生变化可能影响检验 结果时， 计数方法应重新进行适用性试 验。
6
1.1 Байду номын сангаас则：
• 环境： – 微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要 求。(在不低于GMP 现行版要求的D 级洁净环境 、局部洁净度不低于B 级的单向流空气区域内进 行)【10版：在环境洁净度10000级下的局部洁净 度100级的单向流空气区域内】。 – 检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染 ，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检 出。 – 单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监 测。
《中国药典》2015年版修订后将分为三个附录： – 1、非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法 – 2、非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法 – 3、非无菌药品微生物限度标准
1
整体概述
概况一
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概况二
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5
1.1 总则：
• 微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温 细菌和真菌的计数。
• 当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否 符合规定的微生物限度标准时，应按规定进行检 验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有 规定外，本法不适用于活菌制剂的检查。
• 本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动 检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定 的检查方法。
9
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
• 供试品微生物计数中所使用的培养基应进 行适用性检查。
• 供试品的微生物计数方法应进行方法适用 性试验【10版：方法验证】， 以确认所 采用的方法适合于该产品的微生物计数。
• 若检验程序或产品发生变化可能影响检验 结果时， 计数方法应重新进行适用性试 验。
6
1.1 Байду номын сангаас则：
• 环境： – 微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要 求。(在不低于GMP 现行版要求的D 级洁净环境 、局部洁净度不低于B 级的单向流空气区域内进 行)【10版：在环境洁净度10000级下的局部洁净 度100级的单向流空气区域内】。 – 检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染 ，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检 出。 – 单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监 测。
中国药典微生物检查方法的主要增修订内容
中国药典微生物检验附录的主要增修订内容王知坚•微生物限度检查法•无菌检查法•抑菌剂效力检查法•非无菌药品微生物限度检查指导原则•微生物实验室受控洁净环境的监控指导原则•无菌检查用隔离系统验证指导原则•微生物鉴定指导原则微生物限度检查法•修订的背景•修订的主要过程•制订过程中的热点问题•修订的背景–国外的情况ICH有关各方于2002~2004年期间就无菌检查法开展了充分的协调，并相继于2005年在USP、EP、BP和JP中收载。
关于化学药品、原料药的微生物检查方法和标准，有关各方于2007年达成一致（第四阶段），并相继在USP30、EP5.6和JP15第一增补本中收载了协调一致的微生物计数法、控制菌检查法和限度标准由于中药产品的复杂性，其微生物限度标准目前尚未进行协调–国内的情况2008年，启动2010年版中国药典微生物限度检查法的增修订工作，设置了采用ICH协调案收载的培养基体系开展预研的课题，并考虑在该版药典中直接收载与协调案高度一致的检验方法，但没有最终实施2010年版药典执行1年后，考虑到国际交流的需要，在接受了国内有关企业的反馈意见后，决定在微生物检验方法上与国际标准进行统一•修订的主要过程–2011年3月，根据2015年药典附录编制大纲的要求，确定了微生物限度检查法修订的主要工作内容和任务分工，分别由陕西所、中检院和广东所负责起草初稿–2011年12月，经过3次较大篇幅的修改，基本确定了微生物计数法、控制菌检查法和限度标准这三个文件的征求意见稿–2012年3月和9月，先后两次在药典会网站上向全国公开征求意见，并对收集到的意见进行梳理，根据合理化的意见建议对讨论稿再次进行了修改–2012年12月，在杭州会议上对稿件进行了审议，基本定稿–2013年2月，将定稿在药典会网站上再次公示–何时执行注：《中国药典》2015年版拟对“附录XIII C微生物限度检查法”做出全面修订，修订后的方法包括三个附录，即“计数法”、“控制菌”、“标准”。
药典微生物检验变化总结(课堂PPT)
菌素的直接试验。 2.12 取消了金黄色葡萄球菌的选择性增菌，改为无选择性增菌，同时变更
了分离培养基。 2.13梭菌检验流程基本无变化，仅取消了对3%过氧化氢酶试验的检验要求。 2.14 白色念珠菌的检验取消了牙管试验，其余方法未变，但所用培养基配
方有所调整。
9
二、培养系统的重大修订
3. 纯化水和注射用水微生物限度检查
4
二、培养系统的重大修订
1. 无菌检查法
1.5胰酪胨大豆肉汤支持广泛微生物的生长，包括需氧菌、兼性厌氧菌 、真菌（主要是需氧菌和真菌）； 改良马丁培养基主要用于培养真菌； 硫乙醇酸盐流体培养基培养需氧、厌氧和微需氧微生物（是厌氧菌的 首选培养基）。
5
二、培养系统的重大修订
2. 非无菌产品微生物度检查
同时：2015版中使用“需氧菌”取代了以往的“细菌”，从而使得胰酪 胨大豆琼脂计数所得不仅仅代表细菌，而是还包含真菌等其它在此培 养基上生长的微生物菌落。
8
二、培养系统的重大修订
2. 非无菌产品微生物限度检查
2.7 增加了耐盐革兰氏阴性菌的检验项目。 2.8 简化了大肠埃希氏菌的检验流程。 2.9 取消了对大肠菌群的检验。 2.10 变更了沙门氏菌检验中前增菌、增菌、分离用的所有培养基类别。 2.11 变更了铜绿假单胞菌检验中增菌、分离用的培养基类别，取消了绿脓
部100级单向流空气区域内进行。 级）的局部不低于B级单向流空
气区域内进行。
3
二、培养系统的重大修订
1. 无菌检查法
变更内容 1.1无菌检查方面，使用胰酪胨大豆肉汤（胰酪胨大豆液体培养基/大 豆酪蛋白肉汤培养基）取代改良马丁培养基与硫乙醇酸盐流体培养基 配合进行细菌和真菌的全面微生物检测。 1.2菌液制备环节，使用胰酪胨大豆肉汤、胰酪胨大豆琼脂取代营养肉 汤、营养琼脂进行金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和 大肠埃希氏菌的菌液制备。 1.3菌液制备环节，使用沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养 基取代改良马丁培养基、改良马丁琼脂进行白色念珠菌和黑曲霉菌液 的制备，同时对沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂的配方进行 了变更（动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物替代蛋白胨） 1.4适用性试验中，胰酪胨大豆肉汤使用枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和 黑曲霉进行灵敏度检查；硫乙醇酸盐流体培养基使用金黄色葡萄球菌 、大肠埃希氏菌、生孢梭菌、铜绿假单胞菌进行灵敏度检查。
了分离培养基。 2.13梭菌检验流程基本无变化，仅取消了对3%过氧化氢酶试验的检验要求。 2.14 白色念珠菌的检验取消了牙管试验，其余方法未变，但所用培养基配
方有所调整。
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二、培养系统的重大修订
3. 纯化水和注射用水微生物限度检查
4
二、培养系统的重大修订
1. 无菌检查法
1.5胰酪胨大豆肉汤支持广泛微生物的生长，包括需氧菌、兼性厌氧菌 、真菌（主要是需氧菌和真菌）； 改良马丁培养基主要用于培养真菌； 硫乙醇酸盐流体培养基培养需氧、厌氧和微需氧微生物（是厌氧菌的 首选培养基）。
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二、培养系统的重大修订
2. 非无菌产品微生物度检查
同时：2015版中使用“需氧菌”取代了以往的“细菌”，从而使得胰酪 胨大豆琼脂计数所得不仅仅代表细菌，而是还包含真菌等其它在此培 养基上生长的微生物菌落。
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二、培养系统的重大修订
2. 非无菌产品微生物限度检查
2.7 增加了耐盐革兰氏阴性菌的检验项目。 2.8 简化了大肠埃希氏菌的检验流程。 2.9 取消了对大肠菌群的检验。 2.10 变更了沙门氏菌检验中前增菌、增菌、分离用的所有培养基类别。 2.11 变更了铜绿假单胞菌检验中增菌、分离用的培养基类别，取消了绿脓
部100级单向流空气区域内进行。 级）的局部不低于B级单向流空
气区域内进行。
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二、培养系统的重大修订
1. 无菌检查法
变更内容 1.1无菌检查方面，使用胰酪胨大豆肉汤（胰酪胨大豆液体培养基/大 豆酪蛋白肉汤培养基）取代改良马丁培养基与硫乙醇酸盐流体培养基 配合进行细菌和真菌的全面微生物检测。 1.2菌液制备环节，使用胰酪胨大豆肉汤、胰酪胨大豆琼脂取代营养肉 汤、营养琼脂进行金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和 大肠埃希氏菌的菌液制备。 1.3菌液制备环节，使用沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养 基取代改良马丁培养基、改良马丁琼脂进行白色念珠菌和黑曲霉菌液 的制备，同时对沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂的配方进行 了变更（动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物替代蛋白胨） 1.4适用性试验中，胰酪胨大豆肉汤使用枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和 黑曲霉进行灵敏度检查；硫乙醇酸盐流体培养基使用金黄色葡萄球菌 、大肠埃希氏菌、生孢梭菌、铜绿假单胞菌进行灵敏度检查。
中国药典微生物检验主要增修订内容PPT课件共90页
20
方法验证
删除了铜绿假单胞菌，增订了大肠埃希菌 ——是因在验证试验的实践中，发现作为革兰 氏阴性杆菌代表的铜绿假单胞菌在验证试验中 对大部分抗生素不敏感，而大肠埃希菌对抗革 兰氏阴性杆菌为主的抗生素敏感性较好
21
方法验证
明确了验证试验所需样品量是供试品的检验量 而不是供试品的检验数量 删除了原：“ 将规定量供试品按… ” 修订为：
19
稀释液、冲洗液及其制备方法部分
在 原有 1. 0.1%蛋白胨水溶液 2. pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
的基础上增加： “可根据供试品的特性，选用其他经验证的适 宜的溶液作为稀释液、冲洗液。” ----扩大了稀释液、冲洗液的选择范围：满足供 试品的充分溶解或调节供试品的pH使适宜微生 物的生长、有利消除供试品的抑菌性，提高方 法检出率。
抑菌剂效力检查法指导原则 药品微生物实验室规范指导原则 微生物限度检查法应用指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则
8
各论标准化
微生物限度检查各论
富马酸酮替芬滴鼻液 【微生物限度】 取本品10ml，用pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液制成1：10的供试液。 细菌数、霉菌和酵母菌数：取供试液，采用培养基 稀释法（0.2ml/皿），依法检查（附录XI J），应符 合规定。 控制菌：取规定量供试液，依法检查（附录XI J）， 应符合规定。
复方庚酸炔诺酮注射液 【无菌】 取本品，加含1％聚山梨酯80的pH7.0无菌氯
化钠－蛋白胨缓冲液稀释，经薄膜过滤法处理，用 pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液冲洗（每膜不少于 100ml），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检 查（附录XI H），应符合规定。
11
各论标准化
甲硝唑注射液 【无菌】 取本品，经薄膜过滤法处理，用pH7.0无菌氯化钠 －蛋白胨缓冲液分次冲洗（每膜不少于500ml），以生孢梭 菌为阳性对照菌，依法检查（附录XI H），应符合规定。 注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠 【无菌】 取本品，加0.9%无菌氯化钠溶液溶解并制成每
方法验证
删除了铜绿假单胞菌，增订了大肠埃希菌 ——是因在验证试验的实践中，发现作为革兰 氏阴性杆菌代表的铜绿假单胞菌在验证试验中 对大部分抗生素不敏感，而大肠埃希菌对抗革 兰氏阴性杆菌为主的抗生素敏感性较好
21
方法验证
明确了验证试验所需样品量是供试品的检验量 而不是供试品的检验数量 删除了原：“ 将规定量供试品按… ” 修订为：
19
稀释液、冲洗液及其制备方法部分
在 原有 1. 0.1%蛋白胨水溶液 2. pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
的基础上增加： “可根据供试品的特性，选用其他经验证的适 宜的溶液作为稀释液、冲洗液。” ----扩大了稀释液、冲洗液的选择范围：满足供 试品的充分溶解或调节供试品的pH使适宜微生 物的生长、有利消除供试品的抑菌性，提高方 法检出率。
抑菌剂效力检查法指导原则 药品微生物实验室规范指导原则 微生物限度检查法应用指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则
8
各论标准化
微生物限度检查各论
富马酸酮替芬滴鼻液 【微生物限度】 取本品10ml，用pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液制成1：10的供试液。 细菌数、霉菌和酵母菌数：取供试液，采用培养基 稀释法（0.2ml/皿），依法检查（附录XI J），应符 合规定。 控制菌：取规定量供试液，依法检查（附录XI J）， 应符合规定。
复方庚酸炔诺酮注射液 【无菌】 取本品，加含1％聚山梨酯80的pH7.0无菌氯
化钠－蛋白胨缓冲液稀释，经薄膜过滤法处理，用 pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液冲洗（每膜不少于 100ml），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检 查（附录XI H），应符合规定。
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各论标准化
甲硝唑注射液 【无菌】 取本品，经薄膜过滤法处理，用pH7.0无菌氯化钠 －蛋白胨缓冲液分次冲洗（每膜不少于500ml），以生孢梭 菌为阳性对照菌，依法检查（附录XI H），应符合规定。 注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠 【无菌】 取本品，加0.9%无菌氯化钠溶液溶解并制成每
《中国药典》2020年版四部通则修订内容ppt培训课件
流速
如果改变色谱柱内径及填充剂粒径，可按下式计算流速，
F2=F1×[(dc
× 2
2
d
p
1
)
/
(
d
c
2 1
×
d
p
2
)
]
，
在
此
基
础
上
根
据
实
际
使用时系统压力和保留时间调整
等度洗脱流速最大可在 除按上述公式调整外，不扩
±50%的范围内调整
大调整范围
进样体积
调整以满足系统适用性要求，如果色谱柱尺寸有改变，
按下式计算进样体积，并根据灵敏度的需求进行调整
如适用，也可使用其他方法如标准曲线法等，并在品种正文项下注明。
多维色谱又称为色谱/色谱联用技术，是采用匹配的接口将不同分离性能或特点 的色谱连接起来。理论上，可以通过接口将任意级色谱串联或并联起来，直至将混 合物样品中所有的难分离、需富集的组分都分离或富集之。但实际上，一般只要选 用两个合适的色谱联用就可以满足对绝大多数难分离混合物样品的分离或富集要求。 一般的色谱/色谱联用都是二级，即二维色谱。
流动相： 增加：流动相注入色谱仪的方式（洗脱方式：等度/梯度）
色谱参数调整：（详见参数调整表） 品种正文向下规定的色谱条件（参数），除填充剂种类，流动相组分，检测器类型不
改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充粒径、流动相流速，流动相组分比例、等均可适 当调整。
若需使用小粒径（约2μm）填充剂和小内径（约2.1㎜）色谱柱或表面多孔的填充剂以提高分离 度或缩短分析时间，输液泵性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配， 必要时，色谱条件可适当调整。
流动相 缓冲液盐浓度
2005年中国药典微生物检验增修订内容
2005-06 6
增修订内容（ ）－ 增修订内容（2）－无菌试验用培养
基
培养基的种类和用途 硫乙醇酸盐流体培养基氧化层的颜色 培养基的装量 培养基的贮藏 培养基的适用性检查
2005-06 7
无菌检查用培养基的种类及其用途
硫乙醇酸盐流体培养基--培养好氧菌、厌氧菌。 改良马丁琼脂培养基--培养真菌 选择性培养基:按硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基 的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适量的中和剂 或表面活性剂。如 对氨基苯甲酸--磺胺类供试品 聚山梨酯80--用于非水溶性供试品 β-内酰胺酶--用于β-内酰胺类供试品 0.5%葡萄糖肉汤培养基--用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检 查。
培养基的贮藏
2000版 ：未作要求。 2005版：制备好的培养基应在2-25℃保存， 保存在非密容器中，应在3周内使用；保 存在密闭容器中，可在1年内使用。
2005-06
11
培养基的适用性检查
2000版 ：灵敏度检查 2005版：无菌性及灵敏度检查
2005-06
12
灵敏度检查
增加灵敏度检查用菌种 硫乙醇酸盐流体培养基 -金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯 草芽孢杆菌、生孢梭菌。 改良马丁琼脂培养基 -白色念珠菌 、黑曲霉。 增加菌种传代要求：菌株传代次数不得超过5代，采用适宜的 5 菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物特性。 对菌液制备方法不做具体要求。 加菌量：小于100cfu。 培养时间：硫乙醇酸盐流体培养基 3天；改良马丁琼脂培养基 5天。
29
增修订内容（11）－结果判断
• 所有供试品管均无菌生长，方可判供试品
符合规定。
• 2000版：若有菌生长，可复试。 • 2005版：以一次检出为准，除非有证据充
增修订内容（ ）－ 增修订内容（2）－无菌试验用培养
基
培养基的种类和用途 硫乙醇酸盐流体培养基氧化层的颜色 培养基的装量 培养基的贮藏 培养基的适用性检查
2005-06 7
无菌检查用培养基的种类及其用途
硫乙醇酸盐流体培养基--培养好氧菌、厌氧菌。 改良马丁琼脂培养基--培养真菌 选择性培养基:按硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基 的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适量的中和剂 或表面活性剂。如 对氨基苯甲酸--磺胺类供试品 聚山梨酯80--用于非水溶性供试品 β-内酰胺酶--用于β-内酰胺类供试品 0.5%葡萄糖肉汤培养基--用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检 查。
培养基的贮藏
2000版 ：未作要求。 2005版：制备好的培养基应在2-25℃保存， 保存在非密容器中，应在3周内使用；保 存在密闭容器中，可在1年内使用。
2005-06
11
培养基的适用性检查
2000版 ：灵敏度检查 2005版：无菌性及灵敏度检查
2005-06
12
灵敏度检查
增加灵敏度检查用菌种 硫乙醇酸盐流体培养基 -金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯 草芽孢杆菌、生孢梭菌。 改良马丁琼脂培养基 -白色念珠菌 、黑曲霉。 增加菌种传代要求：菌株传代次数不得超过5代，采用适宜的 5 菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物特性。 对菌液制备方法不做具体要求。 加菌量：小于100cfu。 培养时间：硫乙醇酸盐流体培养基 3天；改良马丁琼脂培养基 5天。
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增修订内容（11）－结果判断
• 所有供试品管均无菌生长，方可判供试品
符合规定。
• 2000版：若有菌生长，可复试。 • 2005版：以一次检出为准，除非有证据充
最新版药典微生物限度检查法增修订ppt课件
展望：
1、结合GMP管理的步伐，进一步合理制定含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准
2、在开展课题积累数据、区分用法的基数上完善中药提取物、中药饮片、草药的微 生物限度标准
2015年版药典抑菌剂效力检查法
2010版 抑菌剂效力检查法指导原则
2015版 抑菌剂效力检查法
将在2015年版药典附录I制剂通则项中相关的制剂项下“生产与贮藏期间应符合 下列规定”中，增加：“加入抑菌剂（防腐剂）的制剂，应符合抑菌剂（防腐剂） 效力检查法的有关要求”
药典委员会微生物专业委员会的修订思路
修订思路
(1) 2010版中国药典一、二、三部微生 物限度本中项目的对比、整合
（2）与美、欧、日药典比较，修订中 国药典的微生物限度标准
整合：采用一部的项目作为合并后限 度标准的基础
1、参照欧、美、日药典一致的表示形 式，采用较清晰直观的表格形式列出 各类药品和原敷料的微生物限度标准 2、菌数计数结果以10n表示； 3、以“需氧菌总数”取代“细菌数”， 以“耐胆盐革兰阴性菌”取代“大肠 菌群”
2、修订后限度标准的总体结构（共9项、4个表）
1、制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂和原辅料应符合无菌检查 法的规定 2、用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法的规定 3、非无菌化学药品及生物制品制剂的微生物限度标准 4、非无菌不含药材原粉的中药制剂微生物限度标准 5、非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准 6、非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准 7、中药提取物及中药饮片的微生物限度标准 8、有兼用途径的制剂应符合各给药途径的标准 9、霉变、长螨者以不合格论
2015版药典微生物限度检查 法增修订
目录
一、2015版药典微生物学检验体系的发展 二、2015年版微生物学检验中的重大修订及意义 三、2015版限度标准的特点及展望 四、2015版药典纯化水标准公示内容 五、2015版药典注射用水标准公示内容
1、结合GMP管理的步伐，进一步合理制定含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准
2、在开展课题积累数据、区分用法的基数上完善中药提取物、中药饮片、草药的微 生物限度标准
2015年版药典抑菌剂效力检查法
2010版 抑菌剂效力检查法指导原则
2015版 抑菌剂效力检查法
将在2015年版药典附录I制剂通则项中相关的制剂项下“生产与贮藏期间应符合 下列规定”中，增加：“加入抑菌剂（防腐剂）的制剂，应符合抑菌剂（防腐剂） 效力检查法的有关要求”
药典委员会微生物专业委员会的修订思路
修订思路
(1) 2010版中国药典一、二、三部微生 物限度本中项目的对比、整合
（2）与美、欧、日药典比较，修订中 国药典的微生物限度标准
整合：采用一部的项目作为合并后限 度标准的基础
1、参照欧、美、日药典一致的表示形 式，采用较清晰直观的表格形式列出 各类药品和原敷料的微生物限度标准 2、菌数计数结果以10n表示； 3、以“需氧菌总数”取代“细菌数”， 以“耐胆盐革兰阴性菌”取代“大肠 菌群”
2、修订后限度标准的总体结构（共9项、4个表）
1、制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂和原辅料应符合无菌检查 法的规定 2、用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法的规定 3、非无菌化学药品及生物制品制剂的微生物限度标准 4、非无菌不含药材原粉的中药制剂微生物限度标准 5、非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准 6、非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准 7、中药提取物及中药饮片的微生物限度标准 8、有兼用途径的制剂应符合各给药途径的标准 9、霉变、长螨者以不合格论
2015版药典微生物限度检查 法增修订
目录
一、2015版药典微生物学检验体系的发展 二、2015年版微生物学检验中的重大修订及意义 三、2015版限度标准的特点及展望 四、2015版药典纯化水标准公示内容 五、2015版药典注射用水标准公示内容
《中国药典》微生物限度检查修订内容(PPT 54页)
微生物限度检查：粉雾剂、口服溶液剂、口服混悬剂 、 口服乳剂、搽剂、洗剂、局部用片剂、酊剂、栓剂、 糖浆剂、膜剂、贴剂 、灌肠剂 、糊剂 、涂剂、涂膜 剂。
原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。 12
2、2005版中药制剂通则项下的微生物限度要求 无菌检查：注射剂。
无菌检查及微生物限度检查：散剂、软膏剂、眼用制 剂、鼻用制剂、气雾剂、喷雾剂。
7
2.口服给药制剂
●不含药材原粉的制剂 ●含药材原粉的制剂 ●含豆豉、神曲等发酵成分的制剂
8
3. 局部给药制剂
⑴ 用于手术、烧伤及严重损伤的局部给药制剂（无菌） ⑵用于表皮或黏膜不完整的含药材原粉的局部给药制剂 ⑶用于表皮或黏膜完整的含药材原粉的局部给药制剂 ⑷眼部给药制剂（由100，不得检出→10，不得检出） ⑸耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂 ⑹阴道、尿道给药制剂（含生药原粉的深部用药，破伤风杆菌→梭菌） ⑺直肠给药制剂 ⑻其它局部给药制剂
● 操作环境 洁净度：微生物限度检查应在环境洁净度10000级
下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。 检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 洁净度定期检测:单向流空气区域、工作台面及环境 应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮 游菌、和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进 行洁净度验证。
18
●细菌培养温度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培养温度:23（25）～
28℃。 控制菌培养温度:35～37℃ ●结果报告：以1g、1ml、10g、10ml 或
10cm2 为单位报告。
19
（2）检验量
● 抽样量 ：随机抽取不少于检验量（两个 以上最小包装单位）的3倍。
● 检验量：一次试验所用的供试品的量。 一般为10g或10ml；中药膜剂50 cm2， 化学药膜剂为100cm2；贵重或微量包 装的药品酌减（不得少于3g）。
原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。 12
2、2005版中药制剂通则项下的微生物限度要求 无菌检查：注射剂。
无菌检查及微生物限度检查：散剂、软膏剂、眼用制 剂、鼻用制剂、气雾剂、喷雾剂。
7
2.口服给药制剂
●不含药材原粉的制剂 ●含药材原粉的制剂 ●含豆豉、神曲等发酵成分的制剂
8
3. 局部给药制剂
⑴ 用于手术、烧伤及严重损伤的局部给药制剂（无菌） ⑵用于表皮或黏膜不完整的含药材原粉的局部给药制剂 ⑶用于表皮或黏膜完整的含药材原粉的局部给药制剂 ⑷眼部给药制剂（由100，不得检出→10，不得检出） ⑸耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂 ⑹阴道、尿道给药制剂（含生药原粉的深部用药，破伤风杆菌→梭菌） ⑺直肠给药制剂 ⑻其它局部给药制剂
● 操作环境 洁净度：微生物限度检查应在环境洁净度10000级
下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。 检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 洁净度定期检测:单向流空气区域、工作台面及环境 应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮 游菌、和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进 行洁净度验证。
18
●细菌培养温度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培养温度:23（25）～
28℃。 控制菌培养温度:35～37℃ ●结果报告：以1g、1ml、10g、10ml 或
10cm2 为单位报告。
19
（2）检验量
● 抽样量 ：随机抽取不少于检验量（两个 以上最小包装单位）的3倍。
● 检验量：一次试验所用的供试品的量。 一般为10g或10ml；中药膜剂50 cm2， 化学药膜剂为100cm2；贵重或微量包 装的药品酌减（不得少于3g）。
2005版《中国药典》药品微生物检查增修订情况解析
• 2000年版：细菌数、酵母菌数和霉菌数按剂型制订；控
制菌（致病菌）按给药途径制订。
• 2005年版：均按给药途径制订。 •
制定原则：非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的 给药途径、及对患者健康潜在的危害而制订的。
• 修订理由：相对合理；同一剂型有不同的给药途径；新
的剂型不断出现；与国外药典的限度标准制订原则统一.
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新增的无菌检查中药制剂
散剂: 用于烧伤或严重创伤的外用散剂 .
软膏剂: 用于烧伤或严重创伤的软膏剂 .
眼用制剂: 用于伤口的眼用制剂. 鼻用制剂: 用于严重创伤的鼻用制剂 . 气雾剂、喷雾剂: 用于烧伤或严重创伤的气雾剂、 喷雾剂 .
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2005版三部制剂通则项下的微生物限度要求
• 无菌检查：注射剂、外用溶液剂、灌洗剂。
• 微生物限度检查：片剂*、栓剂、胶囊剂*、散 剂*、颗粒剂*、气雾剂。 • 无菌检查或微生物限度检查：软膏剂、乳膏剂、 凝胶剂、喷雾剂、眼用制剂、鼻用制剂。
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15
六、品种项下的微生物限度要求
• 辅料：乳糖、淀粉、糊精、玉米朊、精制玉米油等。
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培养基的命名
2000版 ：依培养基用途命名。 2005 版：依培养基处方命名 , 与国外药典一 致。
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22
培养基的装量
2000版 ：15ml或40ml，约为容器高度的2/5。 2005 版：不做具体量的规定，依培养基的 容器高度、检验量及检查方法而定。
2005版《中国药典》药品微生物 检查增修订情况
许华玉
国家药典委员会
2005.4.25长沙
最新中国药典版微生物限度检查解析ppt课件
表 2 非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准
表 3 非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准 表 4 中药提取物及中药饮片的微生物限度标准
注*：限度未做统一规定。
执行及制定标准的注意事项
执行范围：
生产、贮存、销售过程中的药 品
药用原料、辅料 中药提取物、中药饮片 新药标准 进口药品标准复核 药品质量考察及仲裁
• 格式变化 • 通用要求
检测环境 供试品前处理---抑菌性去除 微生物计数法使用范围---可采用替代检查方法 微生物计数定义变化--需氧菌总数（胰酪大豆胨琼脂），霉菌和酵母菌总数 （沙氏葡萄糖琼脂） 菌种 传代 保藏 菌液制备---室温2小时，2~8°C，24小时内使用 培养基 培养条件---需氧菌总数 30~35°C 3~5天；霉菌和酵母菌数 20~25°C 5~7天。
环境
• 实验室的布局和运行 • 环境监测 • 清洁、消毒和卫生
设备
建立仪器设备管理制度 清洁保养制度 操作规程 使用、监控的记录
清单化管理 标识化管理 分类管理
样品
检验方法
➢ 方法选择：应根据检验目的选择适宜方法 ➢ 方法确认：药典方法、标准方法应进行方法适用性确认 ➢ 新方法使用前进行替代方法的验证 ➢ 注意对商业系统的试剂盒等检测方法和数据的确认。
标准执行的注意事项：
药典标准出口服制剂
含药材原粉（不再界定是否为动物药材） 含脏器提取物（不区分是否为中药制剂）
原辅料、中药提取物和中药饮片，
参考制剂的要求及生产工艺特点设置控制 军检查要求
《中国药典》2015年版-非无菌产品微生物检查法
在各控制菌项下：生化试验和“应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验” 改为较少的生化试验或“采用其他适宜方法进一步鉴定”---较大改变
新版药典微生物学PPT幻灯片
典型菌落
⒈沙氏葡萄糖琼脂培养基 菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面
光滑有浓酵母气味，时间稍久则菌落 增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 ⒉念珠菌显色培养基
菌落呈绿色或翠绿色菌落生长。
三、新增微生物限度 检查法指导原则
（一）抑菌剂效力检查法指导原则
⒈目的 一是为测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活
性，以评价最终产品的抑菌效力及生产企业在制 剂研发阶段抑菌剂的确定提供指导。
2.供试液的制备若需加温时，可采 用其他经验证的方法，但应均匀加 热，且温度不应超过45℃。
3.新增贴剂供试液制备
⑴经验证方法制备成供试液在无菌环境 进行。
⑵避免粘贴面粘合在一起。
⑶置于含有表面活性剂（如聚山梨酯80 或卵磷脂）的稀释剂中，制成供试液。
⑷充分振摇。
⑸也可采用以其他适宜的方法制备成供 试液。
应根据制剂特性添加适宜的抑菌剂，以防 止制剂在正常贮藏和使用过程中可能发生 的微生物污染和繁殖，对患者造成伤害。
⑵使用原则
所有抑菌剂都具有一定的毒性，添加 抑菌剂时应注意以下原则: ①抑菌剂的用量应为最低有效量。 ②具有抗菌活性的制剂应确认其抗菌效力。 ③应验证最终容器中的抑菌剂效力在效期 内不因贮藏条件而降低。 ④本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准 用于包装未启开的成品制剂。
① 增加了菌悬液的制备及保存条件
菌悬液制备后在室温下放置应在2小时 内使用，若保存在2～8℃可以在24小时内 使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2～8℃， 在验证过的贮存期内使用，每株试验菌平 行制备2个平皿，混匀，凝固，按规定条件 培养计数，同时用相应的对照培养基替代 被检培养基进行上述试验。
②增加了对照培养
以酌减 2.一些贵重药品也应考虑检验量
2019年年版中国药典制剂通则增修订概况介绍 PPT
● 第四点：搽剂（中所含药物有些为表皮所吸收，）用时须加在绒布或其 他柔软物料上… （删除不确切内容）
● 【无菌】 用于烧伤或严重创伤的涂剂、涂膜剂，照无菌
检查法（附录Ⅺ H）检查，应符合规定。
（四）附录ⅠU 凝胶剂增修概况介绍
● 凝胶剂 系指药物与能形成凝胶的辅料制成（均一）溶液…由
（天然）高分子基质如西黄蓍胶制成的凝胶剂也可称为胶浆剂。 小分子无机药物（如氢氧化铝）凝胶剂是由分散的药物（胶体） 小粒子以网状结构存在于液体中，属两相分散系统，也称混悬型 凝胶剂。
附录ⅠG 眼用制剂增修概况介绍（二）
● 除另有规定外，眼用制剂应进行以下相应检查 （必检项目）
● 增加【渗透压摩尔浓度】 除另有规定外，水溶液型滴眼 剂、洗眼剂和眼内注射溶液按各品种项下的规定，照渗透 压摩尔浓度测定法（附录Ⅸ G）检查，应符合规定。
● 【无菌】 （眼内注射溶液、眼内插入剂及供手术、伤口、角膜
其他辅料的混合物作为（撒粉）材料，…。
● 生产与贮藏期间（一般要求）：
第四点：…供口服的滴丸或小丸可包糖衣或薄膜衣。必 要时，薄膜包衣丸应检查残留溶剂（与片剂要求一致）
附录ⅠN 颗粒剂增修概况介绍
● 定义：颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的 干燥颗粒状制剂。供口服用。
● 基本分类：可溶颗粒（通称为颗粒）、混悬颗粒、泡腾颗 粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。
● 除另有规定外，注射剂应进行以下相应检查（必 检项目）
1. 【装量】 注射液及注射用浓溶液照下述方法检查，应符 合规定。检查法 …，将内容物分别用相应体积的干燥注 射器及注射针头抽尽，然后注入经标化的（量具）量入式 量筒内（（量具）量筒的大小应使待测体积至少占其额定 体积的40%）…。
● 【无菌】 用于烧伤或严重创伤的涂剂、涂膜剂，照无菌
检查法（附录Ⅺ H）检查，应符合规定。
（四）附录ⅠU 凝胶剂增修概况介绍
● 凝胶剂 系指药物与能形成凝胶的辅料制成（均一）溶液…由
（天然）高分子基质如西黄蓍胶制成的凝胶剂也可称为胶浆剂。 小分子无机药物（如氢氧化铝）凝胶剂是由分散的药物（胶体） 小粒子以网状结构存在于液体中，属两相分散系统，也称混悬型 凝胶剂。
附录ⅠG 眼用制剂增修概况介绍（二）
● 除另有规定外，眼用制剂应进行以下相应检查 （必检项目）
● 增加【渗透压摩尔浓度】 除另有规定外，水溶液型滴眼 剂、洗眼剂和眼内注射溶液按各品种项下的规定，照渗透 压摩尔浓度测定法（附录Ⅸ G）检查，应符合规定。
● 【无菌】 （眼内注射溶液、眼内插入剂及供手术、伤口、角膜
其他辅料的混合物作为（撒粉）材料，…。
● 生产与贮藏期间（一般要求）：
第四点：…供口服的滴丸或小丸可包糖衣或薄膜衣。必 要时，薄膜包衣丸应检查残留溶剂（与片剂要求一致）
附录ⅠN 颗粒剂增修概况介绍
● 定义：颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的 干燥颗粒状制剂。供口服用。
● 基本分类：可溶颗粒（通称为颗粒）、混悬颗粒、泡腾颗 粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。
● 除另有规定外，注射剂应进行以下相应检查（必 检项目）
1. 【装量】 注射液及注射用浓溶液照下述方法检查，应符 合规定。检查法 …，将内容物分别用相应体积的干燥注 射器及注射针头抽尽，然后注入经标化的（量具）量入式 量筒内（（量具）量筒的大小应使待测体积至少占其额定 体积的40%）…。
药典药品增修订情况介绍幻灯片
例2：基于革除汞盐的方法改进〔含量测定〕
• 取本品约70mg，精细称定，加冰 醋酸10ml，醋酸汞5ml使溶解，加 萘酚苯甲醇指示液2滴，用高氯酸滴 定液〔0.1mol/L〕滴定至溶液显黄 绿色，并将滴定结果用空白试验校 正。
盐酸二 甲双胍
• 取本品约0.3g，精密称定，加甲醇 5ml使溶解，加冰醋酸20ml，醋酸 汞5ml与结晶紫指示液1滴，用高氯 酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液 显蓝色，并将滴定结果用空白试验 校正。
药典药品增修订情况介绍 幻灯片
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汇报内容
31 品种收载及增修订情况概述 2 与保障药品有效性相关的工作 3 与保障药品安全性相关的工作 4 现代分析技术的应用 5 存在问题
本版药典的特点
药品的 有效性 明显提高
盐酸氨溴索
• 取本品约60mg，精密称定，加无 水甲醇4ml使溶解，加醋酐50ml， 充分混匀，照电位滴定法，用高 氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定， 并将滴定结果用空白试验校正。
• 高效液相色谱法 • 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； • 以0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸
调节pH值至7.0）-乙腈（50:50）为流 动相； • 检测波长为248nm。
检测波长为267nm。
例3：含量测定〔核黄素磷酸钠〕
样品编号
原料药有关物质
原料药含量测定
核黄素二磷酸酯 (%)
核黄素 (%)
其他最大杂质 （%）
其他杂质总和 （%）
Chp2010 （%）
Chp2005 （%）
1#
1.2
2.3
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1. 制剂通则、品种项下要求无菌的 制剂及标示无菌的制剂
应符合无菌检查法规定
.
2.口服给药制剂
●不含药材原粉的制剂 ●含药材原粉的制剂* ●含豆豉、神曲等发酵成分的制剂*
.
3. 局部给药制剂
⑴ 用于手术、烧伤及严重损伤的局部给药制剂 ⑵用于表皮或黏膜不完整的含药材原粉的局部给药制剂 * ⑶用于表皮或黏膜完整的含药材原粉的局部给药制剂* ⑷眼部给药制剂 ⑸耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂 ⑹阴道、尿道给药制剂 ⑺直肠给药制剂 ⑻其它局部给药制剂
本版药典明确指出:药品的生产、贮存、销 售过程中的检验,原料及辅料(中药提取 物及辅料)的检验, 新药标准制订,进口药 品标准复核,考察药品质量及仲裁等,除另 有规定外，其微生物限度均以本标准为 依据。
.
五、2005版制剂通则项下的 微生物限度要求
.
2005版化学药制剂通则项下的微生物限度要求
无菌检查：注射剂、植入剂*、冲洗剂*。
.
• 含动物组织（包括提取物）及动物类原药材粉（蜂蜜、 王浆、动物角、阿胶除外）的口服给药制剂 :每10g 或10ml还不得检出沙门菌。
• 有兼用途径的制剂：应符合各给药途径的标准。 • 霉变、长螨者以不合格论。 • 原料（中药提取物）及辅料 ：参照相应制剂的微生
物限度标准执行。
.
四、2005年版微生物限度标准的应用
培养14天，应无菌生长。 灵敏度检查 增加灵敏度检查用菌种；增加菌种传代要求； 对菌液制备方法不做具体要求；提高判断标准。
• 纯化水：微生物限度 取本品，采用薄膜过滤法处理后， 依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌和酵母菌总数每 1ml不得过100个。
• 注射用水：微生物限度 取本品至少200ml，采用薄膜 过滤法处理后，依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌 和酵母菌总数每100ml不得过10个。
.
15
2005年版无菌检查法的修订情况
微生物限度检查：丸剂、颗粒剂、片剂、锭剂、煎膏 剂、胶剂、糖浆剂、合剂、滴丸剂、胶囊剂、酒剂、 酊剂、流浸膏剂、浸膏剂、露剂、茶剂、栓剂、贴膏 剂(贴剂)*、凝胶剂*、搽剂*、洗剂*、涂膜剂*.
不要求：膏药。
.
12
新增的无菌检查中药制剂
散剂: 用于烧伤或严重创伤的外用散剂 . 软膏剂: 用于烧伤或严重创伤的软膏剂 . 眼用制剂: 用于伤口的眼用制剂. 鼻用制剂: 用于严重创伤的鼻用制剂 . 气雾剂、喷雾剂: 用于烧伤或严重创伤的气雾剂、
容器高度、检验量及检查方法而定。
.
22
培养基的贮藏
2000版 ：不要求。 2005版：制备好的培养基应在2-25℃保存，
保存在非密容器中，应在3周内使用；保 存在密闭容器中，可在1年内使用。
.
23
培养基的适用性检查
无菌性检查 2000版 ：全部培养48小时及72小时。
2005版 ：每批培养基随机取不少于5支（瓶），
无菌检查及微生物限度检查：软膏剂、眼用制剂、气雾 剂 、喷雾剂、散剂、耳用制剂、鼻用制剂*、凝胶剂
* 剂、口服混悬剂 、 口服乳剂、搽剂、洗剂、局部用片剂*、酊剂*、栓剂 *、糖浆剂*、膜剂*、贴剂* 、灌肠剂* 、糊剂* 、涂 剂*、涂膜剂* 。
原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。
.
19
增修订内容（2）－无菌试验用培养基
培养基的命名
培养基的种类和用途
培养基的装量
硫乙醇酸盐流体培养基氧化层的颜色
培养基的贮藏
培养基的适用性检查
.
20
培养基的命名
2000版 ：依培养基用途命名。 2005版：依培养基处方命名,与国外药典一
致。
.
21
培养基的装量
2000版 ：15ml或40ml，约为容器高度的2/5。 2005版：不做具体量的规定，依培养基的
喷雾剂 .
.
13
2005版三部制剂通则项下的微生物限度要求
• 无菌检查：注射剂、外用溶液剂、灌洗剂。
• 微生物限度检查：片剂*、栓剂、胶囊剂*、散 剂*、颗粒剂*、气雾剂。
• 无菌检查或微生物限度检查：软膏剂、乳膏剂、 凝胶剂、喷雾剂、眼用制剂、鼻用制剂。
.
14
六、品种项下的微生物限度要求
• 辅料：乳糖、淀粉、糊精、玉米朊、精制玉米油等。
2005年版药典微生物限度 标准修订情况
.
一、2005年版微生物限度标准的控制项目
●杂菌数：细菌数 霉菌和酵母菌数
●控制菌（致病菌）:大肠埃希菌 大肠菌群 沙门菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 梭菌
.
二、2005年版微生物限度标准的制订原则
• 2000年版：细菌数、酵母菌数和霉菌数按剂型制订；控
.
16
2005年版无菌检查法的特点
2005版药典附录的无菌检查法较2000 年 版有较 大的改动: ◆增加试验的可操作性。 ◆方法更具科学性，提高检出率，保证检验结果 的准确性。 ◆缩小与先进国家药典的无菌检查法的差别 。
.
17
增修订内容（1）-无菌检查的设施及环境
2000版：其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 无菌检查在局部洁净度100级的单向流空气区域内。
.
10
新增的无菌检查化学药品制剂
鼻用制剂:用于手术或创伤的鼻用制剂 . 凝胶剂:用于严重创伤的凝胶剂 . 乳膏剂:用于烧伤或严重创伤的乳膏剂 .
.
11
2005版中药制剂通则项下的微生物限度要求
无菌检查：注射剂。
无菌检查及微生物限度检查：散剂*、软膏剂*、眼用 制剂*、鼻用制剂*、气雾剂*、喷雾剂*。
2005版：其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单项流 空气区域；无菌隔离系统。
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无菌检查设施及环境的检查
2000版：单向流空气区及工作台面 必须进行洁净 度验证。
2005版：单向流空气区、工作台面及环境应定期按 《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降 菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。 隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的 洁净度须符合无菌检查的要求。
制菌（致病菌）按给药途径制订。
• 2005年版：均按给药途径制订。 • 制定原则：非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的
给药途径、及对患者健康潜在的危害而制订的。
• 修订理由：相对合理；同一剂型有不同的给药途径；新
的剂型不断出现；与国外药典的限度标准制订原则统一.
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三、2005年版微生物限度标准的分类
应符合无菌检查法规定
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2.口服给药制剂
●不含药材原粉的制剂 ●含药材原粉的制剂* ●含豆豉、神曲等发酵成分的制剂*
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3. 局部给药制剂
⑴ 用于手术、烧伤及严重损伤的局部给药制剂 ⑵用于表皮或黏膜不完整的含药材原粉的局部给药制剂 * ⑶用于表皮或黏膜完整的含药材原粉的局部给药制剂* ⑷眼部给药制剂 ⑸耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂 ⑹阴道、尿道给药制剂 ⑺直肠给药制剂 ⑻其它局部给药制剂
本版药典明确指出:药品的生产、贮存、销 售过程中的检验,原料及辅料(中药提取 物及辅料)的检验, 新药标准制订,进口药 品标准复核,考察药品质量及仲裁等,除另 有规定外，其微生物限度均以本标准为 依据。
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五、2005版制剂通则项下的 微生物限度要求
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2005版化学药制剂通则项下的微生物限度要求
无菌检查：注射剂、植入剂*、冲洗剂*。
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• 含动物组织（包括提取物）及动物类原药材粉（蜂蜜、 王浆、动物角、阿胶除外）的口服给药制剂 :每10g 或10ml还不得检出沙门菌。
• 有兼用途径的制剂：应符合各给药途径的标准。 • 霉变、长螨者以不合格论。 • 原料（中药提取物）及辅料 ：参照相应制剂的微生
物限度标准执行。
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四、2005年版微生物限度标准的应用
培养14天，应无菌生长。 灵敏度检查 增加灵敏度检查用菌种；增加菌种传代要求； 对菌液制备方法不做具体要求；提高判断标准。
• 纯化水：微生物限度 取本品，采用薄膜过滤法处理后， 依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌和酵母菌总数每 1ml不得过100个。
• 注射用水：微生物限度 取本品至少200ml，采用薄膜 过滤法处理后，依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌 和酵母菌总数每100ml不得过10个。
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2005年版无菌检查法的修订情况
微生物限度检查：丸剂、颗粒剂、片剂、锭剂、煎膏 剂、胶剂、糖浆剂、合剂、滴丸剂、胶囊剂、酒剂、 酊剂、流浸膏剂、浸膏剂、露剂、茶剂、栓剂、贴膏 剂(贴剂)*、凝胶剂*、搽剂*、洗剂*、涂膜剂*.
不要求：膏药。
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新增的无菌检查中药制剂
散剂: 用于烧伤或严重创伤的外用散剂 . 软膏剂: 用于烧伤或严重创伤的软膏剂 . 眼用制剂: 用于伤口的眼用制剂. 鼻用制剂: 用于严重创伤的鼻用制剂 . 气雾剂、喷雾剂: 用于烧伤或严重创伤的气雾剂、
容器高度、检验量及检查方法而定。
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培养基的贮藏
2000版 ：不要求。 2005版：制备好的培养基应在2-25℃保存，
保存在非密容器中，应在3周内使用；保 存在密闭容器中，可在1年内使用。
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培养基的适用性检查
无菌性检查 2000版 ：全部培养48小时及72小时。
2005版 ：每批培养基随机取不少于5支（瓶），
无菌检查及微生物限度检查：软膏剂、眼用制剂、气雾 剂 、喷雾剂、散剂、耳用制剂、鼻用制剂*、凝胶剂
* 剂、口服混悬剂 、 口服乳剂、搽剂、洗剂、局部用片剂*、酊剂*、栓剂 *、糖浆剂*、膜剂*、贴剂* 、灌肠剂* 、糊剂* 、涂 剂*、涂膜剂* 。
原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。
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增修订内容（2）－无菌试验用培养基
培养基的命名
培养基的种类和用途
培养基的装量
硫乙醇酸盐流体培养基氧化层的颜色
培养基的贮藏
培养基的适用性检查
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培养基的命名
2000版 ：依培养基用途命名。 2005版：依培养基处方命名,与国外药典一
致。
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培养基的装量
2000版 ：15ml或40ml，约为容器高度的2/5。 2005版：不做具体量的规定，依培养基的
喷雾剂 .
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2005版三部制剂通则项下的微生物限度要求
• 无菌检查：注射剂、外用溶液剂、灌洗剂。
• 微生物限度检查：片剂*、栓剂、胶囊剂*、散 剂*、颗粒剂*、气雾剂。
• 无菌检查或微生物限度检查：软膏剂、乳膏剂、 凝胶剂、喷雾剂、眼用制剂、鼻用制剂。
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六、品种项下的微生物限度要求
• 辅料：乳糖、淀粉、糊精、玉米朊、精制玉米油等。
2005年版药典微生物限度 标准修订情况
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一、2005年版微生物限度标准的控制项目
●杂菌数：细菌数 霉菌和酵母菌数
●控制菌（致病菌）:大肠埃希菌 大肠菌群 沙门菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 梭菌
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二、2005年版微生物限度标准的制订原则
• 2000年版：细菌数、酵母菌数和霉菌数按剂型制订；控
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2005年版无菌检查法的特点
2005版药典附录的无菌检查法较2000 年 版有较 大的改动: ◆增加试验的可操作性。 ◆方法更具科学性，提高检出率，保证检验结果 的准确性。 ◆缩小与先进国家药典的无菌检查法的差别 。
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增修订内容（1）-无菌检查的设施及环境
2000版：其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 无菌检查在局部洁净度100级的单向流空气区域内。
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新增的无菌检查化学药品制剂
鼻用制剂:用于手术或创伤的鼻用制剂 . 凝胶剂:用于严重创伤的凝胶剂 . 乳膏剂:用于烧伤或严重创伤的乳膏剂 .
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2005版中药制剂通则项下的微生物限度要求
无菌检查：注射剂。
无菌检查及微生物限度检查：散剂*、软膏剂*、眼用 制剂*、鼻用制剂*、气雾剂*、喷雾剂*。
2005版：其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单项流 空气区域；无菌隔离系统。
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无菌检查设施及环境的检查
2000版：单向流空气区及工作台面 必须进行洁净 度验证。
2005版：单向流空气区、工作台面及环境应定期按 《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降 菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。 隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的 洁净度须符合无菌检查的要求。
制菌（致病菌）按给药途径制订。
• 2005年版：均按给药途径制订。 • 制定原则：非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的
给药途径、及对患者健康潜在的危害而制订的。
• 修订理由：相对合理；同一剂型有不同的给药途径；新
的剂型不断出现；与国外药典的限度标准制订原则统一.
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三、2005年版微生物限度标准的分类