防腐剂的测定
食品中防腐剂-------苯甲酸含量的测定
4. 检测系统
? 作用：连续监测被色谱系统分离后的柱流出物组 成和含量变化的装置。其作用是将柱流出物中样 品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，完 成定性定量分析的任务。
（二）.液液分配色谱法（ LLC）
1.分离原理：利用组分在两相中溶解度的差异 2.固定相：载体+固定液（物理或机械涂渍法）
缺点：系统内部压力大，易流失，不实用 固定液——极性→NLLC 固定液——非极性→RLLC 3.正相色谱——固定液极性 > 流动相极性（NLLC）
极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱，适于分离极性组分 4. 反相色谱——固定液极性 < 流动相极性（RLLC）
正相——流动相与溶质排斥力强，作用时间↑ ， k↑，组 分tR↑
反相——流动相与溶质排斥力弱，作用时间↓， k↓，组 分tR↓
② 固定相：极性小的烷基键合相 C8柱，C18柱（ODS柱——HPLC约80%问题）
③ 流动相：极性大的甲醇-水或乙腈-水 流动相极性 > 固定相极性
底剂 + 有机调节剂（极性调节剂） 例：水 + 甲醇，乙腈，THF ④ 流动相极性与k的关系：
（4）梯度洗脱装置
? 梯度洗脱：通过改变流动相的组成来调整组分的k值，改 变分离因子α值，以达到最短时间内得到最佳分离的目的。
? 梯度洗脱的特点：改善分离, 加快分析速度；改善峰形, 减 少拖尾;可能引起基线漂移
? 类型：高压梯度与低压梯度
2.进样系统
? 进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，要求密封性 好，死体积小，重复性好，进样引起色谱分离系统的压力 和流量波动要很小。
食品中防腐剂检测报告
食品中防腐剂检测报告一、引言食品安全一直备受人们关注，而防腐剂作为食品添加剂之一，在食品加工中起着重要作用。
然而，过量使用防腐剂可能对人体健康造成危害，因此对食品中防腐剂的检测显得尤为重要。
二、常见防腐剂及其危害1. 防腐剂的种类常见的食品防腐剂包括亚硝酸盐、硫代硫酸钠、山梨酸钾等。
2. 防腐剂的危害过量摄入防腐剂可能导致食物中毒、过敏反应、免疫系统紊乱等健康问题，长期食用还可能增加患癌症的风险。
三、食品中防腐剂检测方法1. 生物传感技术生物传感技术是一种快速、灵敏的检测方法，通过生物传感器可以实现对食品中防腐剂的快速检测。
2. 色谱-质谱联用技术色谱-质谱联用技术结合了色谱和质谱两种分析方法的优势，能够准确地鉴定食品中的各种防腐剂成分。
3. 光谱分析技术光谱分析技术包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱等，可以对食品样品进行快速、无损的检测。
四、食品中防腐剂检测报告范例报告编号：2022001检测对象：某某食品有限公司生产的某某产品检测项目：亚硝酸盐、硫代硫酸钠、山梨酸钾含量检测检测标准：GB2760-2014《食品添加剂使用标准》检测结果如下：亚硝酸盐含量：未检出硫代硫酸钠含量：符合国家标准山梨酸钾含量：低于允许标准五、结论与建议经检测，本次样品中亚硝酸盐未被检出，硫代硫酸钠和山梨酸钾含量均符合国家标准，属于合格产品。
建议生产企业在生产过程中严格控制防腐剂的使用量，确保产品质量和安全。
通过本次食品中防腐剂检测报告范例，我们可以看到对于食品安全的重视以及对防腐剂使用的监管是非常必要的。
希望未来在食品安全领域能够有更多科学技术的应用，保障人民群众的身体健康。
食品中防腐剂苯甲酸和山梨酸的测定.
实验9.3 食品中防腐剂苯甲酸(钠和山梨酸(钾的测定薄层色谱法一、实验目的掌握薄层色谱定性和斑点面积半定量测定法。
学会制备聚酰胺薄层板。
二、仪器吹风机层析缸玻璃板10 ×18cm 玻璃板50×80 cm 微量注射器10μL喷雾器三、试剂与试样聚酰胺粉200目乙醚可溶淀粉无水硫酸钠盐酸溶液6mol ? L-14%氯化钠酸性溶液于4%氯化风俗溶液中加入少量mol ? L-1 盐酸溶液展开剂:(1 正丁醇:氨水:无水乙醇=7:1:2(2异丙醇:氨水:无水乙醇=7:1:2显色剂:0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液用0.1mol ? L-1氢氧化钠调至PH=8苯甲酸标准溶液:精密称取苯甲酸0.2000g ,用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中,并用乙醇稀释至刻度摇匀,此溶液每亳升相当于2mg苯甲酸。
山梨酸标准溶液:精密称取山梨酸0.2000g ,用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中,并用乙醇稀释至刻度摇匀,此溶液每亳升相当于2mg 山梨酸试样酱油、水果汁、果酱等四、实验步骤1、试样提取—试样溶液的制备称取 2.5g 混合均匀的试样,置于25mL 带塞量筒中,加0.5mL , 6 mol? L-1盐酸酸化,用乙醚提取两次(15mL 、10mL 每次振摇1min , 将上层乙醚提取液吸入另一25mL 带塞量筒中, 合并乙醚提取液。
用3mL4%氯化钠酸性溶液洗涤两次,静置15min ,乙醚层通过无水硫酸钠脱水后过滤于25mL 容量瓶中。
加乙醚稀释至刻度, 摇匀。
吸取10.00mL 乙醚提取液分两次置于10mL 离心管中, 在约40℃水浴上除去乙醚, 加入0.1mL 乙醇溶解残渣,制成试样测定液备用。
2、聚酰胺粉板的制备称取 1.6g 聚酰胺粉,加4g 可溶性淀粉,加15mL 水,研磨3~5min,使其均匀即可涂10×18cm 厚度0.3mm 的薄层板两块。
涂好的薄层板置于水平大玻璃板上, 于室温干燥后, 于80℃ 干燥1h 取出,置于干燥器中保存。
紫外光谱法测定食品中防腐剂
紫外光谱法测定食品中防腐剂实验目的1.进一步了解和熟悉紫外-分光光度计的结构和工作原理。
2.掌握利用苯甲酸和山梨酸的紫外吸收光谱图。
3.学会用标准曲线法测定样品中苯甲酸和山梨酸含量。
实验原理1．食品在储存、运输过程中易发生腐蚀、变质，因此常在食品中添加少量防腐剂。
苯甲酸和山梨酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
苯甲酸具有芳香结构，在波长228nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
山梨酸具有α,β-不饱和羰基结构，在波长250nm处有π—π*跃迁的K吸收带，且吸光度与浓度的关系符合朗伯比尔定律，因此可根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。
2．由于食品中防腐剂用量很少， GB2760-2011 规定0.2-1.5g/kg，并且食品样品中其它的成分也可能对防腐剂的测定具有干扰作用，因此一般可预先将样品中的防腐剂与其它成分进行分离，再经过提纯和浓缩进行测定。
常用的分离方法包括蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用溶剂萃取法，先用HCl酸化样品，再用乙醚从样品中萃取出苯甲酸和山梨酸；萃取物经过碱性溶液（NaOH）溶解，用乙醚稀释后进行紫外光谱检测。
仪器和试剂1.紫外可见分光光度计 751G型（上海分析仪器厂），分析天平，1.0cm石英比色皿溶液（1%）、2.HCl溶液（0.05mol·L-1,0.1mol·L-12 mol·L-11:1）、NaHCO3NaCl 、乙醚、苯甲酸、山梨酸。
3.试样（酱油、果汁、果酱等流状食品）实验步骤1.样品预处理准确称取样品1.5-2.5g，置于150mL分液漏斗中，加入40mL蒸馏水，用蒸馏水冲洗取样器皿，将洗液并入分液漏斗。
加入适量粉状NaCl，待溶解后加入0.5mL1:1HCl。
依次用30mL、25mL、20mL乙醚萃取样品溶液，合并萃取液,弃去水相，用2份30 mL0.05mol·L-1HCl洗涤乙醚萃取液，弃去水相。
气相色谱-质谱法测定化妆品中17种防腐剂的含量
72上海市食品药品检验所/国家药品监督管理局化妆品监测评价重点实验室，上海 201203……………………………………许 勇 钟吉强 郑 荣#气相色谱-质谱法测定化妆品中17种防腐剂的含量为建立以气相色谱-质谱法测定化妆品中17种防腐剂含量的方法，根据化妆品的不同基质分别采用甲醇直接提取和沉淀试剂沉淀的方法对样品进行净化处理。
采用质量分数6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定相的DB-624毛细管色谱柱 （30 m × 250 μm × 1.4 μm ）进行气相分离，然后测定。
结果发现：三氯叔丁醇等16种化合物线性范围为0.2 ~ 10 μg/mL ；甲基氯异噻唑啉酮线性范围为0.02 ~ 1 μg/mL 。
它们的相关系数r 值均大于0.999。
三氯叔丁醇等16种化合物检出质量比为15 mg/kg ；甲基氯异噻唑啉酮检出质量比为1.5 mg/kg 。
平均加样回收率 （n = 9）范围为86.2% ~ 111.8%。
所建立方法灵敏度高、专属性好、操作简便、重现性优。
气相色谱-质谱法 防腐剂 化妆品 甲基氯异噻唑啉酮 三氯叔丁醇Determination of the Contents of Seventeen Kinds of Preservative in Cosmetic by GC-MS XU Yong ZHONG Jiqiang ZHENG Rong #(Shanghai Institute of Food and Drug Control/NMPA Key Laboratory for Monitoring and Evaluation of Cosmetics, Shanghai 201203, China)Abstract ： A method was developed for simultaneously determining the content of 17 kinds of preservative in cosmetic products by GC-MS. According to the different substrates of cosmetics, the samples were extracted by methanol or precipitated by precipitation reagent, then analyzed by GC-MS on the DB-624 column (30 m ×250 μm ×1.4 μm) with mass fraction of 6% cyanopropylphenyl-94% dimethyl polysiloxane as stationary phase. Test results showed that calibration curves of 16 compounds including chlorobutanol and others were linear in the ranges of 0.2 to 10 μg/mL, that of 5-chloro-2-methylisothiazolone was linear in the range of 0.02 to 1 μg/mL. The detection limit of 5-chloro-2-methylisothiazolone was 1.5 mg/kg. The detection limits of 16 compounds including chlorobutanol and others were 15 mg/kg. The average recoveries were 86.2% to 111.8% (n = 9). The method established is simple, sensitive, accurate, specific and reproducible.Keywords ：GC-MS preservative cosmetics 5-chloro-2-methylisothiazolone chlorobutanol作者简介许勇 （1976—），女，硕士，副主任药师，研究方向：化妆品质量。
护色剂的测定——防腐剂的测定
护色剂的测定——防腐剂的测定护色剂是能与肉及肉制品中呈色物质作用，使之在食品加工、收藏等过程中不致分解、破坏，展现良好色泽的物质。
我国食品添加剂用法标准中公布的发色剂有硝酸钠（钾）和亚硝酸钠（钾），它们主要用于肉类加工，用于固定和增加肉的红色，充实肉的感官性状，并兼具抑制细菌，尤其是肉毒梭状芽孢杆菌生长的作用。
但摄入多量亚硝酸盐进入血液后，可使正常的血红蛋白变成高铁血红蛋白，从而失去携氧功能，导致组织缺氧，浮现头晕、恶心，严峻者浮现呼吸困难、昏迷等症状，且在一定条件下，亚硝酸盐可与二级胺形成具有致癌作用的亚硝胺类化合物，而硝酸钠（钾）的毒性主要是在食品中、水中或胃肠道内被还原成亚硝酸盐所致。
因此，食品标准除规定了发色剂的用法量外，还规定了残留量标准。
在GB2760-2011中，目前亚硝酸钠（钾）在允许用法的食品中的最大添加量为0.15g/kg，残留量≤30mg/kg（西式火腿类残留量≤70mg/kg)；硝酸钠（钾）在允许用法的食品中的最大添加量为0.5g/kg，残留量≤30mg/kg（以亚硝酸钠计）。
硝酸盐和亚硝酸盐测定办法无数，公认的测定办法为格里斯试剂比色法测定亚硝酸盐含量，锡柱法测定硝酸盐含量。
其他还有示波极谱法、气相色谱法、荧光法和离子挑选性电极法等。
一、亚硝酸盐的测定亚硝酸盐的测定办法包括盐酸萘乙二胺比色法、极谱法、荧光法等。
此外，还包括离子交换色谱法、流淌分析法、差示脉冲极谱法、毛细管电泳法、导数光度法、催化动力学法、气相色谱法以及各种联用技术等。
我国的国家标准办法为离子色谱法（GB/T5009.33-2010第一法）、分光光度计法（GB/T5009.33一一2010其次法）、乳及乳制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定。
1.离子色谱法试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，采纳相应的办法提取和净化，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分别，电导检测器检测。
以保留时光定性，外标法定量。
不同样品处理办法如下。
食物中的防腐剂含量测定实验
食物中的防腐剂含量测定实验为了确保食品的安全和营养价值，对食物中的防腐剂含量进行准确测定显得十分重要。
本文将介绍一种测定食物中防腐剂含量的实验方法。
1. 实验材料和仪器- 食物样品：选择含有可能添加防腐剂的食物，如果蔬制品、肉类制品等。
- 防腐剂标准品：选择常见的几种防腐剂标准品，如亚硝酸盐、苯甲酸等。
- 高效液相色谱仪：用于分离和检测食物样品中的防腐剂。
2. 样品处理- 食物样品制备：将食物样品去皮或去壳，经过彻底洗净后，将其均匀切碎或研磨成细粉末。
- 防腐剂提取：取适量食物样品，加入适量的溶剂（如乙腈），在摇床上以适当条件进行提取，使防腐剂充分溶解于溶剂中。
3. 样品分析- 高效液相色谱条件设置：根据不同的防腐剂，设定相应的色谱条件，如流动相的组成、检测波长等。
- 标准曲线绘制：选取防腐剂的标准品，制备不同浓度的标准溶液，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
- 食物样品检测：将样品提取液进行适当稀释，通过高效液相色谱仪进行检测，记录峰面积。
- 计算防腐剂含量：根据峰面积与标准曲线的关系，计算出食物样品中防腐剂的含量。
4. 结果分析- 防腐剂含量对比：将不同样品的防腐剂含量进行对比分析，判断其是否符合食品安全标准。
- 食品安全评估：根据防腐剂含量结果，评估食物的安全性和合格性。
5. 实验注意事项- 操作规范：操作过程需严格按照实验流程和仪器操作说明进行，以确保结果准确可靠。
- 重复实验：进行多次实验，以确保结果的可靠性和确定性。
- 校准仪器：及时校准液相色谱仪，保证仪器的准确性。
- 标准品保存：将防腐剂标准品保存在适当的条件下，避免其与外界环境接触。
通过以上实验步骤，我们可以准确测定食物中防腐剂的含量，并对食品的安全性进行评估。
这将有助于消费者选择更加安全和健康的食物，也对食品生产企业提出了更高的要求。
希望这个实验方法对相关研究和监管工作能够提供参考和指导。
食品添加剂的测定—防腐剂的测定
防腐剂的主要种类及特性
目前，我国食品加工中允许使用的防腐剂主要有苯甲酸及其盐类、山梨酸及其 盐类、对羟基苯甲酸酯类、脱氢乙酸等，最常用的是前两种，常用于酱油、食醋、 酱菜、面酱、蜜饯类等食品中。
因为苯甲酸和山梨酸难溶于水，因此常用的防腐剂是苯甲酸钠和山梨酸钾。
防腐剂的主要种类及特性
1.苯甲酸钠 苯甲酸钠为酸性防腐剂，在碱性介质中无杀菌和抑菌作用，其防腐最佳pH为2.54.0。苯甲酸钠亲油性较大，易穿透细胞膜进入细胞体内，干扰细胞膜通透性，抑制其 对氨基酸的吸收。进入细胞体内电离酸化细胞内的储碱，抑制细胞的呼吸酶系的活性， 从而起到防腐作用。
操作步骤
吸取试样处理液2.0mL于相应的 10mL比色管中，按照标准溶液测定 方法，于530nm处测定吸光度，以 标准曲线定量，计算样品中山梨酸 （钾）含量。
Part 04
结果计算
结果计算
式中：X1---样品中山梨酸钾的含量，g/kg； X2---样品中山梨酸的含量，g/kg； ρ---试液中含山梨酸钾的浓度，mg/ml； m---称取匀浆相当于试样质量，g；
2.山梨酸钾 山梨酸钾也是酸性防腐剂，具有较高的抗菌性能，主要是通过抑制微生物体内 的脱氢酶系统，从而达到抑制微生物的生长和起防腐作用，能抑制细菌、霉菌和酵 母菌的生长，效果显著。其效果随pH的升高而减弱，pH为3时抑菌作用最强，pH达 到6时仍有抑菌能力。
防腐剂的主要种类及特性
2.山梨酸钾 山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。山梨酸是一种不 饱和脂肪酸，在机体内可参加正常的新陈代谢，最后被氧化为二氧化碳和水。因此， 山梨酸钾的毒性远低于其他防腐剂，几乎没有毒性，安全性高于苯甲酸钠。
仪器与试剂
重铬酸钾-硫酸混合液：以0.02mol/L重铬酸钾和0.15mol/L硫酸以1：1 的比例混合均匀，备用。 山梨酸钾标准溶液：准确称取250mg山梨酸钾于250mL容量瓶中，用蒸 馏水溶解并稀释至刻度，该溶液为1mg/mL的山梨酸钾标准溶液。 山梨酸钾标准使用液：准确移取山梨酸钾标准溶液25mL于250mL容量 瓶中，稀释至刻度，充分摇匀，使之成为0.1mg/mL的山梨酸钾标准使 用液。
反相色谱法测定尼泊金甲酯（防腐剂）
反相色谱法测定尼泊金甲酯（防腐剂）一、实验目的：了解反相色谱法分离尼泊金甲酯（防腐剂）、掌握利用标准曲线法（外标法）进行色谱定量分析的实验方法二、实验原理：1、尼泊金甲酯：对羟基苯甲酸甲酯或4-羟基苯甲酸甲酯（C8H7O3），分子量:151.1399 ，又叫尼泊金甲酯。
物理性质：白色结晶粉末或无色结晶，易溶于醇，醚和丙酮，极微溶于水，沸点270-280℃。
主要用途：在医药工业中用作药剂的防腐杀菌剂，也用于有机合成及食品、香料、胶片等的护腐添加剂。
用类似的生产方法生产的同类产品对羟基苯甲酸乙酯（尼泊金乙）、对羟基苯甲酸丙酯（尼泊金丙），也都是消毒防腐药。
该品对皮肤有刺激性。
2、实验测定尼泊金甲酯的意义：尼泊金甲酯在食品中被作为防腐剂使用，但尼泊金对人体具有类雌激素的作用，可能对人体还存在一些潜在的危害，因此，我们要对食物中尼泊金甲酯的含量进行测定。
3、反相色谱法：（Reversed-phase chromatography，RPC）包含了任何一种使用非极性固定相（stationary phase在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。
）的色谱学方法。
“反相”这个词有着其历史背景。
在1970年代，大多数液相色谱是在未修饰的氧化硅或氧化铝上完成的，他们表面的化学性质是亲水性的，对于极性化合物具有更强的亲和力，因此也叫做“正相”（正常）色谱。
若采用烷基链共价键合到支持表面上，则会倒换洗脱顺序。
在反相色谱法中，极性化合物先被洗脱出来，而非极性化合物被保持住，因为它们亲和于反相表面。
在其他色谱方法中所使用的所有数学与试验研究在反相色谱中亦适用（例如色谱分辨率与柱长成正比）。
如今，反相柱色谱法在分析型液相色谱中占绝大多数比例。
正相色谱中极性最小的组分最先洗出，因为大多数情况下是溶于流动相中，流动相极性增加，溶质洗出时间减少。
相反，反相色谱中极性最强的组分首先洗出，流动相极性增强，溶质洗出时间增加。
3.1高效液相色谱法的特点：1）分析速度快。
液相色谱法（HPLC）测定食品中防腐剂
表 1 方法线性范围、检出限
线性范围（mg/L）
线性方程
0.1~50.0
Y=53.12x+3.10
0.1~50.0
Y=115.49x-4.87
0.1~50.0
Y=88.14x-2.89
0.1~50.0
Y=67.01x-2.07
00.0
Y=73.87x-2.68
关键词：液相色谱法；食品；防腐剂测定
1 检测材料与方法
1.1 试剂与材料
测定试剂以及材料的确定是进行 防腐剂测定的基础，在本次豆制品防 腐 剂 测 定 实 验 中， 所 选 用 的 甲 醇、 乙 腈 均 来 自 于 Merck 公 司 的 HPLC 级，所测定的七种防腐剂含量均大于 98.0%， 为 确 保 实 验 结 果 的 精 度， 故 所选取的七种防腐剂均来自于同一家 公司。试验中分析纯：CH3COONH4 溶 液。在实验过程中所使用的溶液均通 过 0.45 μm 滤膜过滤处理，七种防腐 剂的贮备液均为 1.0 mg/mL，首先量 取 10.0 mL 作为备用。由于本次需要 对七种防腐剂进行检测，故本次实验 将样品放入 7 个 10 mL 容器内，分别 添加少量的甲醇溶液，并将其进行均 匀混合，之后利用甲醇确定其容量，
作者简介：周广红（1990—），女， 湖南常宁人，本科，标签组主管。研 究方向：预包装食品标签、化妆品标签、 食品防腐剂。
109 Apr. 2019 CHINA FOOD SAFETY Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
流 速 1.0 mL/min， 色 谱 柱 温 度 35 ℃， 流 动 相 使 用 0.02 mol/L 的 乙 酸 铵 溶 液 和 甲 醇， 梯 度 洗 脱（ 甲 醇 0~4.0 min，10%；4.0~8.0 min，
实验紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
实验紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂实验目的：1．掌握蒸馏操作；2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
实验原理：为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
仪器与试剂：紫外分光光度计，蒸馏装置；无水硫酸钠，磷酸，硫酸，氢氧化钠，重铬酸钾，苯甲酸；鲜橙多。
操作步骤：1、样品前处理：准确称取10.0g均匀的样品，置于250 mL蒸馏瓶中，加1mL H3PO4，20g无水Na2SO4，70mL水，三粒玻璃珠进行第一次蒸馏。
用预先加有5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收馏出液，当蒸馏液收集到45mL时，停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL 0.033mol﹒L-1 K2Cr2O7溶液,6.5mL 2mol﹒L-1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10min，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mL H3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
根据样品中苯甲酸含量，取第二次蒸馏液5～20mL，置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1 NaOH定容，以0.01mol﹒L-1 NaOH作为对照液，于紫外分光光度计225nm处测定吸光度。
食品中防腐剂的测定
文献综述论文题目：食品中防腐剂的测定方法学院名称：化学工程学院专业：化学工程与工艺班级：姓名：学号指导教师：2012年3月14日摘要：食品防腐剂作为食品添加剂的一个类别，可以抑制微生物的生长，从而保证食品在保质期内不发生腐败变质，并延长食品的保存期，其在食品工业中已被广泛应用。
本文主要介绍了山梨酸和苯甲酸等食品防腐剂的测定方法。
关键词：食品防腐剂气相色谱法液相色谱法1 引言由于食品在生产、运输、销售及贮存的过程中，会因物理、化学、酶及生物等因素引起腐败变质，其中微生物作用最为严重。
食品中含有丰富的营养成分及大量的水分，使微生物易于生长，微生物的生长是最终导致食品腐败变质的根本原因[1]。
为了防止食品腐败变质，可通过腌渍、罐藏、冷藏等多种方法来保藏食品。
但在一定条件下，为了保证其在保质期内不发生腐败变质，延长食品的货架期，防腐剂作为食品添加剂之一，在食品工业中广泛应用。
我国目前普遍使用的防腐剂主要有三类：苯甲酸与苯甲酸钠、山梨酸与山梨酸钾和对经基苯甲酸醋类。
随着经济与社会的发展，食品安全问题越来越突出，尤其是对食品加工中使用防腐剂的安全性问题。
为保障食品防腐剂能得到正确的使用与发展，多方面力量应共同努力，发挥各自的积极作用。
本文主要介绍了山梨酸和苯甲酸等食品防腐剂的测定方法。
2防腐剂的测定方法2.1 气相色谱内标法山梨酸和苯甲酸是常甩的食品防腐剂，广泛使用在饮料、酱油等多种食品中，它们具有杀死微生物或抑制微生物增殖的作用，但过量对人体有一定毒性，国家标准详细规定了各类食品防腐剂最大使用限量及其检测方法，该检测方法采用标准曲线定量法，配制一系列不同浓度山梨酸和苯甲酸标准溶液，用气相色谱仪测定其标准曲线，与样品色谱比较定量[2]。
选用癸酸作内标物，气相色谱内标法同时测定食品中防腐剂山梨酸和苯甲酸，定量准确，标准回收率均在96%~103 %之间，样品测定的变异系数小，山梨酸为0.529 %，苯甲酸为0.311% [2]。
防腐剂检测
防腐剂检测目前常用的食品防腐剂检测可分为两大类，即有机防腐剂检测和无机防腐剂检测。
我国允许的有机防腐剂检测种类主要包括苯甲酸及其钠盐，山梨酸及其钾盐，脱氢乙酸和乙酸衍生物;无机防腐剂检测种类包括亚硫酸及其盐，过氧化氢，游离氯和次氯酸盐等。
食品防腐剂的检测方法有很多，主要针对于几种常见防腐剂的检测方法如下：1、防腐剂-过氧化氢检测方法目前，国内外检测过氧化氢的常用方法有两种，分别是化学溶剂滴定分析法和仪器分析法。
（1）化学滴定法我们国家常用的检测方法是化学溶剂滴定分析法，如高锰酸钾滴定法、间接碘量滴定法、硫酸铈滴定法。
高锰酸钾滴定法最为简单，成本较低，而且由于自带颜色，不需要使用其他指示剂，但有些食品中含有某些有机物，会被高锰酸钾氧化，从而导致检测结果出现较大的误差。
间接碘量法也较为经济，过氧化氢酶的使用量较少，但由于要保证酶的活性，试验的环境选择较为严格，比较难控制，测定的结果也极易出现误差。
硫酸铈法测定结果比较的准确，硫酸铈标准溶液稳定，试验过程中反应比较少，不生成中间产物，环境要求也不高，但是成本较高。
总而言之，化学滴定分析法存在众多不足，费时费料，试验终点颜色变化不明显，不能进行微量分析。
（2）仪器分析法食品中检测过氧化氢常用的仪器分析法有钛溶液分光光度法、原子吸收法、荧光分析法、色谱法等等。
钛溶液分光光度法简单易行，便于操作，准确度高，主要利用了酸性溶液中过氧化氢与钛离子发生化学反应，生成稳定的橙色的络合物，在一定浓度范围内，这种络合物的吸光度与样品中过氧化氢含量呈现线性关系，从而可以计算出过氧化氢的含量。
原子吸收法相对而言操作比较复杂，试验条件也比较苛刻，检测结果容易受到影响，形成误差。
荧光分析法是常见的灵敏度高、选择性强的分析方法，通过双氧水和二价铁离子在酸性条件下发生反应生成羟基自由基，然后与本身不产生荧光的苯甲酸反应生成荧光物质羟基苯甲酸，根据荧光反应间接测出过氧化氢含量。
2、防腐剂-山梨酸、苯甲酸检测方法山梨酸、苯甲酸在食品防腐处理中使用非常广泛，厨房调味品酱油、饮品水果汁等食品中山梨酸、苯甲酸的检测方法主要使用气相色谱法以及高效液相色谱法。
防腐剂检测方法
防腐剂主要分为以下几大类：酸类、酯类、酚类、卤化物类及季胺盐类等。
目前在化妆品中应用最多的防腐剂是毒性低、杀菌效果好的对羟基苯甲酸酯类。
防腐剂的测定方法有吸光光度法、滴定法、气相色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法。
吸光光度法多用于原料分析，例如4-氨基安替比林比色法适用含有羟基化合的定量。
滴定法主要用于季胺盐类防腐剂的定量。
气相色谱法在用于测定含有羟基和羧基等极性物质时，一般需经过甲基硅烷化、衍生化后再用气相色谱定性，定量。
因此，在防腐剂检测中受到一定限制。
薄层色谱法是防腐剂分析中最广泛应用的方法之一。
本法最大特点是能进行多种组分的定性，并且不需要特殊仪器设备，便于推广。
高效液相色谱法是当前使用最广泛的方法。
因为防腐剂大多是大分子有机物，并且有紫外吸收方法:采用HPLC法、FPD-GC法、分光光度法分析分妆品中9种防腐剂.采用ICP-MS 法分析化妆品中的Pb As Cd Hg.结果:化妆品中最常用的防腐剂是对羟基苯甲酸酯类:祛斑类化妆品样品中汞含量严重超标;FPD-GC法测定卡松的检出浓度为0.75μg/g,HPLC法测定卡松的检出浓度为4μg/g;甲醛检出率37%.结论:FPD-GC法测定卡松灵敏度较高.甲醛检出率较高,可能与某些防腐剂释放甲醛有关.特性，最适于用高效液相色谱分析。
该法具有操作简便、灵敏度高等优点。
气相色谱法(Gas ChromatograPhy，GC)是一种以气体为流动相采用冲洗法的柱色谱分离技术。
陈伟光等建立了化妆品中同时测定7种防腐剂的方法。
样品经甲醇溶解、超声提取离心，采用大口径非极性毛细管色谱柱DB一l(15m×0.53mm×0.5um)气相色谱法进行定性和定量分析，并探讨最佳实验条件。
该方法的线性范围为苯甲醇100一500ug·mL-1，，山梨酸200一600ug·mL-1，苯甲酸200一600ug·mL-1，对轻基苯甲酸酷类均为25一500ug·mL-1，其相关系数在0.9983一0.9999之间;方法最低检出限分别为5.5、57.1、29.6、6.2、5.5、6.2、6.2ng·mL-1，;样品加标回收率为91.6%一102.7%，相对标准偏差为2.2%一10.2%(n=3)。
防腐剂的测定方法
（GB/T 5009. 苯甲酸钠易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。
（GB/T 5009.29—2003） 高效液相色谱法——同时测这两种及糖精钠。
知识点：几种常用防腐剂的检测
苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)的测定方法： 一、苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)的检测 为白色有丝光的鳞片或针状结晶，微溶于水， 使用不便，实际生产多用其钠盐。
情景六：食品中添加剂的检测
一人体后，大部分与甘氨酸结合形成无害的马尿酸，其余部分与葡萄糖醛酸结合生成苯甲酸葡萄糖醛酸甙从尿中排出，不在人体积累。
苯甲酸进入人体后，大部分与甘氨酸结合形成无害的马尿酸，其余部分与葡萄糖醛酸结合生成苯甲酸葡萄糖醛酸甙从尿中排出，不在人体积累。
滴定法测苯甲酸 （适于样品中苯甲酸 含 0.1 %以上）
苯甲酸 微溶于水，用乙醚从样品中提取，蒸去乙醚， 以标准NaOH滴定。
若样品中是苯甲酸钠，先让其与酸作用成苯甲酸， 再按上法测定。
水。
山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。 比苯甲酸更安全，在体内最后成CO2和水。
苯甲酸及其钠盐主要用于酸性食品的防腐，在pH 2. 滴定法测苯甲酸 （适于样品中苯甲酸 含 0. 山梨酸又名花楸酸，(CH3CH=CHCH=CHCOOH） 山梨酸又名花楸酸，(CH3CH=CHCH=CHCOOH）
5时，抑茵效果明显减弱。
气相色谱法——氢焰检测器，两种同时测。 山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。
气相色谱法——氢焰检测器，两种同时测。
高5时效，液抑相茵色效谱果法明—显—减同高弱时。测效这两液种及相糖精色钠。谱法——同时测这两种及糖精钠。 薄层色谱法。 山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。
常见饮料中防腐剂及其测定
饮料中防腐剂1.防腐剂种类食品防腐剂是用于防止食品因微生物引起的变质，提高食品保存性能，延长食品保质期而使用的食品添加剂。
由于防腐剂能延长食品保质期，我国《食品卫生法》规定，允许食品加入适量的防腐剂。
常用食品防腐剂种类繁多，可以分为化学防腐剂和天然防腐剂两大类。
化学防腐剂又分为无机防腐剂和有机防腐剂。
有机化学防腐剂主要有苯甲酸（苯甲酸钠）、山梨酸（山梨酸钾）、对羟基苯甲酸脂类、脱氢醋酸、双乙酸钠、柠檬酸和乳酸等；无机化学防腐剂主要包括亚硫酸（亚硫酸钠）、二氧化硫、硝酸盐及亚硝酸盐类、游离氯及次氯酸盐、磷酸盐等。
2.饮料中常见防腐剂苯甲酸又名安息香酸，稍溶于水，溶于乙醇，酸性条件下对多种微生物（酵母、霉菌、细菌）有明显抑菌作用，对产酸菌作用较弱。
在直接饮用的饮料内的最大使用量为0.2克/ 公斤。
因为苯甲酸溶解度低，使用不便，实际生产中大多是使用其钠盐，其钠盐的抗菌作用是转化为苯甲酸后起作用的。
山梨酸，又名花楸酸，微溶于水，易溶于乙醇。
对光、对热稳定，长期放置易被氧化着色。
对霉菌、酵母菌和好气性细菌均有抑菌作用。
山梨酸是酸性防腐剂，适用范围在pH 值5.5以下，而毒性为苯甲酸的1/4，所以从国外发展动向看，有逐步取代苯甲酸及其钠盐的趋势。
最大使用量:0.6克/公斤。
3.食品防腐剂的检测方法目前使用的大多数防腐剂对人体都有一定的毒性，一旦过量会对健康产生危害。
因此，各个国家对防腐剂的用量和残留量都有严格的规定，防腐剂的准确检测对食品卫生安全具有重要意义。
目前食品防腐剂的检测主要有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外光分光光度法、薄层色谱法，滴定法等。
其中气相色谱法、高效液相色谱法、紫外光分光光度法准确度高，分析快捷，是目前最常用的检测方法。
高效液相色谱法原理：配制苯甲酸钠、山梨酸钾和安赛蜜的标准溶液，以230nm为检测波长，绘制标准曲线；样品经超声波脱气、膜过滤后直接进样，按上述条件进行色谱测定，得到各种组分的回归方程及相关系数。
防腐剂检验
1主题内容与适用范围本标准规定了酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定方法。
本标准适用于酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定。
最低检出浓度：气相色谱法最低检出量为1μg，用于色谱分析的样品为1g时，最低检出浓度为1mg/kg。
第一篇气相色谱法(第一法)2原理样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。
3试剂3.1乙醚：不含过氧化物。
3.2石油醚：沸程30～60℃。
3.3盐酸。
3.4无水硫酸钠。
3.5盐酸(1＋1)：取100mL盐酸，加水稀释至200mL。
3.6氯化钠酸性溶液(40g/L)：于氯化钠溶液(40g/L)中加少量盐酸(1＋1)酸化。
3.7山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100mL容量瓶中，用石油醚—乙醚(3＋1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸或苯甲酸。
3.8山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液，以石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50，100，150，200，250mg山梨酸或苯甲酸。
4仪器气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。
5分析步骤5.1样品提取称取2.50g事先混合均匀的样品，置于25mL带塞量筒中，加0.5mL盐酸(1＋1)酸化，用15，10mL乙醚提取两次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中。
合并乙醚提取液。
用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两次，静止15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。
加乙醚至刻度，混匀。
准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂溶解残渣，备用。
5.2色谱参考条件5.2.1色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内装涂以5%(m/m)DEGS＋1%(m/m)H3PO4固定液的60～80目Chromosorb W AW。
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常用化学防腐剂及其作用机理（1）合成有机防腐剂∙苯甲酸和苯甲酸钠∙山梨酸和山梨酸钾∙对羟基苯甲酸酯∙脱氢醋酸和胶氢醋酸钠∙丙酸盐（2）无机防腐剂∙亚硫酸及其盐类∙硝酸盐和亚硝酸盐（3）天然防腐剂及其应用∙酒精∙有机酸∙甲壳素和壳聚糖∙乳酸链球菌素防腐剂的测定防腐剂是一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的化学物质。
如果按照国家规定的数量使用，不仅可以防止食品生霉，而且可以防止食品防腐剂是一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的化学物质。
如果按照国家规定的数量使用，不仅可以防止食品生霉，而且可以防止食品变质或腐败，并能延长保存时间，同时对食用者也不会引起什么危害。
因此，对防腐剂的使用必须控制一定的使用量，而且应具备以下特点：⑴凡加入食品中的防腐剂，首先是对人体无毒、无害、无副作用的；⑵长期使用添加防腐剂的食品，不应该使机体组织产生任何的病变，更不能影响第二代发育、生长；⑶加入防腐剂之后，对食品的质量不能有任何的影响和分解；⑷食品加入防腐剂之后，不能掩蔽劣质食品的质量或改变任何感官性状。
我国允许使用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸乙酯及丙酯等。
其中前两种应用广泛。
苯甲酸及其盐类使用范围：酱油、醋、果汁类、果酱类、葡萄糖、罐头，最大使用剂量1g／公斤；汽酒、汽水、低盐酱菜、面酱类、蜜饯类、山楂糕、果味露，每公斤最多使用0.5g。
山梨酸及其盐类在酱油、醋、果酱类中，每公斤最多允许使用1 g；对低盐酱菜类、面酱类、蜜饯类等使用0.5g/㎏。
苯甲酸随食品进入体内时与甘氨酸结合成马尿酸，从尿液中排出体外，不再刺激肾脏；山梨酸进入机体后参与新陈代谢，最后生成CO2和H2O，被排出体外，由于山梨酸及其盐类价格贵一般不常用，多数用在出口食品中。
苯甲酸又名安息香酸，为白色有丝光的鳞片或针状结晶，熔点1 22℃，沸点249.2℃，100℃开始升华。
在酸性条件下可随水蒸汽蒸馏，微溶于水，易溶于氯仿、丙酮、乙醇、乙醚等有机溶剂，化学性质较稳定。
苯甲酸钠易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。
山梨酸为无色、无臭的针状结晶，熔点134℃，沸点228℃。
山梨酸难溶于水，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂，在酸性条件下可随水蒸汽蒸馏，化学性质稳定。
山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，于酸作用生成山梨酸。
苯甲酸与山梨酸两种防腐剂主要用于酸性食品的防腐。
一、苯甲酸及其盐类的测定测定方法：（1）中和法（碱滴定法）--应用广泛（2）紫外分光光度法（3）薄层层析法（4）气象色谱法（5）高压液相色谱法（一）中和法1、原理在弱酸条件中，用乙醚将样品中的苯甲酸提取出来，将乙醚挥发后，用中性酒精或醇醚混合物溶解内容物，用酚酞做指示剂，采用0.1N标准N a OH滴定至终点，然后根据氢氧化钠消耗的体积计算苯甲酸或苯甲酸钠的含量。
2、试剂3、样品的处理⑴固体或半固体样品（各种果酱）称100g样→与500ml容量瓶中→加200ml水→加AR NaCl 直到不溶解为止（降低苯甲酸在水中溶解度）→用10%NaOH调为碱性（这时苯甲酸生成苯甲酸钠，并以苯甲酸钠状态存在）→用饱和NaCl定容500ml→静置2小时→过滤→弃去初液→收集滤液⑵含酒精样品（各种汽饮料等）取250ml样→于烧杯中→加10%NaOH呈碱性→置水浴蒸发至100ml（除去C2H5OH）→移入250ml容量瓶→加30gNaCl溶解后→用饱和NaCl定容→放置2小时→过滤→收集滤液⑶含多量脂肪样品于上述制备好的滤液中→加NaOH使之成为碱性→加50ml乙醚提取→静置分层后→弃去醚层→溶液供测定用4、操作方法吸滤液100ml→于500ml分液漏斗→加1︰1 HCl 5ml酸化→用1 50ml乙醚分三次提取→每次振荡不能太激烈以防乳化→合并醚层→连接蒸馏装置→回收乙醚（50℃水浴）→用10ml中性乙醇+10ml 水溶解残渣→加2滴酚酞→用0.1N NaOH滴出微红色（同时要求做空白实验）5、计算苯甲酸含量%=(N·V×0.122/W)×100= (N·V×0.1441/W)N : 标准氢氧化钠的浓度V: 标准氢氧化钠消耗的体积W : 样品重量0.122 : 1ml0.1N 氢氧化钠约等于苯甲酸的克数0.1441 : 1ml0.1N 氢氧化钠约等于苯甲酸钠的克数采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法测定误差较大。
（二）紫外分光光度法1、原理样品中苯甲酸在酸性溶液中可以用水蒸汽蒸馏的方法蒸馏出来，与样品中不挥发性成分分离，然后用强酸氧化，使苯甲酸以外的其它有机物氧化分解，氧化后的溶液再次蒸馏，蒸馏液中除苯甲酸外的其它杂质基本都被分解了，根据苯甲酸的吸收波长225nm下测定消光值。
样品中加1ml磷酸经水蒸汽蒸馏，得到的馏液主要是苯甲酸，还有其它酸物，再加入0.2N的K2Cr2O7和4N的H2SO4，将其它酸性物质氧化，再经过蒸馏，得到无杂物的苯甲酸，在225nm下测定。
苯甲酸用紫外的原因是甲酸同苯形成p-π共轭体系，适合紫外分光光度仪测定。
此实验要求做空白，空白中不加磷酸，因苯甲酸在碱性溶液中不能被蒸馏出来的特点（样品+1N NaOH5ml）→蒸馏苯甲酸（g/㎏）= C / W * 1000（三）薄层层析法原理：样品经过酸化后，用乙醚提取苯甲酸，然后将样品浓缩，浓缩后点样于聚酰胺薄层板上，经展开，显色后，根据比移值与标准比较定性，并进行定量。
（四）气相色谱法原理：用乙醚提取后，采用氢火焰离子检测器进行分离测定，然后与标准系列比较定量。
（五）高压液相色谱法原理：样品处理后，注入高效液相色谱仪中，利用被测组分在固定相和移动相中分配系数的不同，使被测组分分离，用紫外检测器在特定波长下测定被测组分的吸光度，与标准比较定性和定量。
二、山梨酸及其盐的测定测定方法：（1）比色法（硫代巴比妥酸比色法）（2）紫外分光光度法（3）薄层层析法（4）气相色谱法（5）高压液相色谱法（一）硫代巴比妥酸比色法1、原理样品中的山梨酸在酸性溶液中，用水蒸汽蒸馏出来，然后用K2Cr2O 7氧化成丙二醛和其它产物，丙二醛与硫代巴比妥酸反应，生成红色物质，颜色的深浅与山梨酸含量成正比。
（530nm下测定）2、操作方法⑴样品制备称取100g左右的样品→加蒸馏水250ml→在高速捣碎机上打浆→定容500ml→过滤→收集滤液⑵山梨酸的提取准确吸取两份滤液各20ml→分别放入两个250ml蒸馏瓶中→一个瓶加1ml磷酸、无水硫酸钠20g、水70ml、玻璃珠3粒→另一瓶加1 N NaOH5ml、无水硫酸钠20g、水70ml、玻璃珠3粒→蒸馏→分别用装有10ml0.1N NaOH的100ml容量瓶接收馏液→当馏液收集到80ml停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝管→定容→分别吸10ml溶液→分别置于两个100ml容量瓶→用0.01N NaOH定容→供样液、空白测定用⑶测定准确吸样液、空白液2ml→于25ml比色管中→加水3ml→加2ml（KCr2O7+硫酸）混合液→在100℃水浴5分钟→加0.5%硫代巴比妥2酸2ml→沸水浴加热7分钟→冷却→定容→于1cm比色杯在530nm 处比色⑷ 标准曲线绘制=食品中对羟基苯甲酸酯类的测定方法中华人民共和国国家标准GB 11672-89食品中对羟基苯甲酸酯类的测定方法Method for determination of p-hydroxybenzoic acid esters in foods1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中对羟基苯甲酸酯类的测定方法。
本标准适用于酱油、醋、水果汁及果酱中对羟基苯甲酸酯类的测定。
2 原理样品酸化后, 对羟基苯甲酸酯类用乙醚提取浓缩后, 用具氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定, 与标准系列比较定量。
3 试剂除特别注明外, 本标准所用试剂均为分析纯试剂, 水为蒸馏水。
3.1 乙醚, 重蒸。
3.2 无水乙醇。
3.3 无水硫酸钠。
3.4 饱和氯化钠溶液。
3.5 1g/100 mL碳酸氢钠溶液。
3.6 1∶1盐酸: 量取50mL盐酸, 用水稀释至100mL。
3.7 对羟基苯甲酸乙酯、丙酯标准溶液: 准确称取对羟基苯甲酸乙酯、丙酯各0.050g, 溶于50mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,该溶液每毫升相当于1mg对羟基苯甲酸乙酯、丙酯。
3.8 对羟基苯甲酸乙酯、丙酯使用溶液：取适量的对羟基苯甲酸乙酯、丙酯标准溶液用无水乙醇分别稀释至每毫升相当于50,100,200,400,600,800μg的对羟基苯甲酸乙酯、丙酯。
4 仪器4.1 气相色谱仪:具有氢火焰离子化检测器。
4.2 KD浓缩器。
5 操作方法5.1 提取净化酱油、醋、果汁吸取5g预先均匀化的样品于125mL 分液漏斗中,加入1mL1∶1盐酸酸化, 10mL饱和氯化钠溶液,摇匀,分别以75,50,50mL乙醚提取三次,每次2min,放置片刻,弃去水层, 合并乙醚层于250mL分液漏斗中,加10mL饱和氯化钠溶液洗涤一次,再分别以1g/100mL碳酸氢钠溶液30,30,30mL洗涤三次,弃去水层。
用滤纸吸去漏斗颈部水分,塞上脱脂棉,加10g无水硫酸钠于室温放置30min,在KD浓缩器上浓缩近干,用吹氮除去残留溶剂。
用无水乙醇定容至每毫升含1毫克对羟基苯甲酸乙酯、丙酯供气相色谱用。
果酱称取5g事先均匀化的样品于100mL具塞试管中,加入1mL1∶1盐酸, 10mL饱和氯化钠溶液, 摇匀, 用50,30,30mL乙醚提取三次, 每次2min, 用吸管转移乙醚至250mL分液漏斗中, 以下按上法操作。
5.2 色谱条件5.2.1 色谱柱, 玻璃柱, 内径3mm, 长2.6m内涂以3％SE-30固定液的60-80目Chromosorb W AW DMCS., 柱温170℃, 进样口220℃, 检测器220℃。
5.2.2 气流条件: 氢气, 50mL/min; 氮气, 40mL/min; 空气, 500mL/min。
5.3 测定进样1μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱中, 测定不同浓度对羟基苯甲酸乙酯、丙酯的峰高。
以浓度为横坐标，峰高为纵坐标绘制标准曲线。
同时进样1μL样品溶液, 测定峰高与标准曲线定量比较。
5.4 计算A×1 000X= ───────V2m×──×1 000V1式中:X--样品中对羟基苯甲酸酯类含量, g/kg; A--测定样品中对羟基苯甲酸酯类含量, μg; V1--样品制备液体积, mL; V2--样品进样体积,μL; m--样品质量, g。