菊花的组织培养二Microsoft PowerPoint 幻灯片
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菊花的组织培养剖析30页PPT
菊花的组织培养剖析
•
6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
•
7、心急吃不了热汤圆。
•
8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
•பைடு நூலகம்
9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
•
10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
•
6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
•
7、心急吃不了热汤圆。
•
8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
•பைடு நூலகம்
9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
•
10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
菊花组织培养ppt课件
ABCDE
BADCE
ABCDE
Page 8
ABCDE
血红蛋白基因开启
红细胞
合成血红蛋白
肌动蛋白基因关闭 (不合成肌动蛋白)
肌细胞
血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 肌动蛋白基因开启 (不合成血红蛋白)
4、细胞分化的结果
细胞产生了不同种类的蛋白质 即出现了不同的结构和功能
Page 9
二、基础知识
胚状体
光照：菊花每日用日光灯照射12h。
pH： 不同植物对培养基最适pH的要求不 同，大多数控制在5～6.5。 菊花的组织培养控制在5.8左右。
Page 31
四、实验操作
制备MS固 体培养基
配制各种母液 配制培养基 灭菌
外植体消毒
冲洗—酒精—无菌水冲洗— 氯化汞—无菌水冲洗至少三
次之上
Page 32
栽培
Page 45
珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发 的酸性熔岩，经急剧冷却而成 的玻璃质岩石，有弧形或圆形 裂隙，如珍珠的结构，所以被 命名为珍珠岩 。
蛭石是一种天然、无毒的矿物质， 在高温作用下会膨胀的矿物。它 是一种比较少见的矿物，属于硅 酸盐。
离 体
愈伤组织
Page 10
1958，美国，斯图 尔德
植物组织培养
（一）植物组织培养概念
在无菌和人工控制条件下，将 离体的植物（ 器官、组织、细胞 ） 培养在人工配置的培养基上，给 予适宜的培养条件，诱导其脱分 化产生愈伤组织再分化形成丛芽 ，最终形成 完整的植株 。
又称：植物离体培养
关键词：
Page 1外1 植体、脱分化、再分化、愈伤组织
Page 35
1、植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高：
BADCE
ABCDE
Page 8
ABCDE
血红蛋白基因开启
红细胞
合成血红蛋白
肌动蛋白基因关闭 (不合成肌动蛋白)
肌细胞
血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 肌动蛋白基因开启 (不合成血红蛋白)
4、细胞分化的结果
细胞产生了不同种类的蛋白质 即出现了不同的结构和功能
Page 9
二、基础知识
胚状体
光照：菊花每日用日光灯照射12h。
pH： 不同植物对培养基最适pH的要求不 同，大多数控制在5～6.5。 菊花的组织培养控制在5.8左右。
Page 31
四、实验操作
制备MS固 体培养基
配制各种母液 配制培养基 灭菌
外植体消毒
冲洗—酒精—无菌水冲洗— 氯化汞—无菌水冲洗至少三
次之上
Page 32
栽培
Page 45
珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发 的酸性熔岩，经急剧冷却而成 的玻璃质岩石，有弧形或圆形 裂隙，如珍珠的结构，所以被 命名为珍珠岩 。
蛭石是一种天然、无毒的矿物质， 在高温作用下会膨胀的矿物。它 是一种比较少见的矿物，属于硅 酸盐。
离 体
愈伤组织
Page 10
1958，美国，斯图 尔德
植物组织培养
（一）植物组织培养概念
在无菌和人工控制条件下，将 离体的植物（ 器官、组织、细胞 ） 培养在人工配置的培养基上，给 予适宜的培养条件，诱导其脱分 化产生愈伤组织再分化形成丛芽 ，最终形成 完整的植株 。
又称：植物离体培养
关键词：
Page 1外1 植体、脱分化、再分化、愈伤组织
Page 35
1、植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高：
3.1菊花的组织培养(共35张PPT)
思考
3. 在植物组织培养过程中，为什么要进行 一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？
植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗 性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养 的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细 菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污 染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无 菌操作。
四宜）的、温培度养（18~220C），光照
(12h/天）
先打开封口膜生长几天， 清洗转移至消过毒的蛭
五石、或移珍珠栽岩中，幼苗长
壮后，移栽到土壤中
六、栽培
四、结果分析与评价
• 1、接种3~4天后观察外植体生长情况，统 计污染比例，分析污染原因。
• 2、培养出了愈伤组织吗？分化出根和芽了 吗？时间如何？
• 3、做好观察、记录。 • 4、移栽后能正常生长吗？
五、课题延伸
• 1、研究新材料进行组织培养。 • 2、研究生长素与细胞分裂素不同比例对实
验结果的影响
总结植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂
离
素>生长素
体 组
脱分化
愈 伤
再分化
芽
织 或 细
细胞分 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
例1 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产
上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，
以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培
养获得种苗的过程不涉及细胞的
A.有丝分裂 B.分化 C.减数分裂
D.全能性
• 解析：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间后， 脱分化，通过细胞分裂，形成愈伤组织；脱分化的愈伤组 织继续培养，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成 的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。由愈 伤组织发育为完整的植物体体现了细胞的全能性。植物组 织培养的过程是无性繁殖的过程，不涉及减数分裂，减数 分裂是生物在进行有性生殖的过程中的一种分裂方式。 本题解决的关键是要了解植物的组织培养过程。
菊花的组织培养(PPT)
第四十一页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
〔四〕培养(péiyǎng) 无菌箱中培养(péiyǎng)，定期消毒，保持适宜的温度， 光照
第四十二页，共五十七页。
➢接种后的锥形瓶放在培 养箱或培养(péiyǎng)室中培养
。 (péiyǎng) ➢培养条件：18-22℃，
每日光照12小时。
2、培养基的配制(pèizhì)(MS培养基) ➢大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ➢微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co ➢有机物：甘氨酸、烟酸(yān suān)、肌醇、维生素、蔗糖等 ➢植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
第十五页，共五十七页。
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物 培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显(míngxiǎn)
第四十九页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
〔六〕栽培(zāipéi) 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况， 适时浇水、施肥(shī féi)，直至开花
〔三〕接种(jiēzhòng) 1、接种(jiēzhòng)室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子， 接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾 使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线照射 20分钟。
第三十三页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
2、无菌操作(cāozuò)要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械
使后代(hòudài)细胞形成完整植株个体的能力。
植物细胞表现(biǎoxiàn)出全能性的条件：
①离体状态
②在一定的营养物质、激素和其他外界条件〔光 照、温度〕
第五页，共五十七页。
二、实验原理
3、细胞(xìbāo)分化 ①定义： 在植物的个体发育过程中，细胞(xìbāo)在形
实验(shíyàn)具体操作过程
〔四〕培养(péiyǎng) 无菌箱中培养(péiyǎng)，定期消毒，保持适宜的温度， 光照
第四十二页，共五十七页。
➢接种后的锥形瓶放在培 养箱或培养(péiyǎng)室中培养
。 (péiyǎng) ➢培养条件：18-22℃，
每日光照12小时。
2、培养基的配制(pèizhì)(MS培养基) ➢大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ➢微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co ➢有机物：甘氨酸、烟酸(yān suān)、肌醇、维生素、蔗糖等 ➢植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
第十五页，共五十七页。
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物 培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显(míngxiǎn)
第四十九页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
〔六〕栽培(zāipéi) 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况， 适时浇水、施肥(shī féi)，直至开花
〔三〕接种(jiēzhòng) 1、接种(jiēzhòng)室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子， 接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾 使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线照射 20分钟。
第三十三页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
2、无菌操作(cāozuò)要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械
使后代(hòudài)细胞形成完整植株个体的能力。
植物细胞表现(biǎoxiàn)出全能性的条件：
①离体状态
②在一定的营养物质、激素和其他外界条件〔光 照、温度〕
第五页，共五十七页。
二、实验原理
3、细胞(xìbāo)分化 ①定义： 在植物的个体发育过程中，细胞(xìbāo)在形
菊花的组织培养ppt2
1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更失败。1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。14、成长是一场和自己的比赛，不要担心别人会做得比你好，你只需要每天都做得比前一天好就可以了。 15、最终你相信什么就能成为什么。因为世界上最可怕的二个词，一个叫执着，一个叫认真，认真的人改变自己，执着的人改变命运。只要在路上，就没有到不了的地方。 16、你若坚持，定会发光，时间是所向披靡的武器，它能集腋成裘，也能聚沙成塔，将人生的不可能都变成可能。 17、人生，就要活得漂亮，走得铿锵。自己不奋斗，终归是摆设。无论你是谁，宁可做拼搏的失败者 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更5、别着急要结果，先问自己够不够格，付出要配得上结果，工夫到位了，结果自然就出来了。 6、你没那么多观众，别那么累。做一个简单的人，踏实而务实。不沉溺幻想，更不庸人自扰。 7、别人对你好，你要争气，图日后有能力有所报答，别人对你不好，你更要争气望有朝一日，能够扬眉吐气。 8、奋斗的路上，时间总是过得很快，目前的困难和麻烦是很多，但是只要不忘初心，脚踏实地一步一步的朝着目标前进，最后的结局交给时间来定夺。 9、运气是努力的附属品。没有经过实力的原始积累，给你运气你也抓不住。上天给予每个人的都一样，但每个人的准备却不一样。不要羡慕那些总能撞大运的人，你必须很努力，才能遇上好运气。 10、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。失败。11、学会学习的人，是非常幸福的人。——米南德 12、你们要学习思考，然后再来写作。——布瓦罗 13、在寻求真理的长河中，唯有学习，不断地学习，勤奋地学习，有创造性地学习，才能越重山跨峻岭。——华罗庚 14、许多年轻人在学习音乐时学会了爱。——莱杰 15、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基 16、我们一定要给自己提出这样的任务：第一，学习，第二是学习，第三还是学习。——列宁 17、学习的敌人是自己的满足，要认真学习一点东西，必须从不自满开始。对自己，“学而不厌”，对人家，“诲人不倦”，我们应取这种态度。——毛泽东 18、只要愿意学习，就一定能够学会。——列宁 19、如果学生在学校里学习的结果是使自己什么也不会创造，那他的一生永远是模仿和抄袭。——列夫· 托尔斯泰 20、对所学知识内容的兴趣可能成为学习动机。——赞科夫 21、游手好闲地学习，并不比学习游手好闲好。——约翰· 贝勒斯 22、读史使人明智，读诗使人灵秀，数学使人周密，自然哲学使人精邃，伦理学使人庄重，逻辑学使人善辩。——培根 23、我们在我们的劳动过程中学习思考，劳动的结果，我们认识了世界的奥妙，于是我们就真正来改变生活了。——高尔基 24、我们要振作精神，下苦功学习。下苦功，三个字，一个叫下，一个叫苦，一个叫功，一定要振作精神，下苦功。——毛泽东 25、我学习了一生，现在我还在学习，而将来，只要我还有精力，我还要学习下去。——别林斯基、学习外语并不难，学习外语就像交朋友一样，朋友是越交越熟的，天天见面，朋友之间就亲密无间了。——高士其 2、对世界上的一切学问与知识的掌握也并非难事，只要持之以恒地学习，努力掌握规律，达到熟悉的境地，就能融会贯通，运用自如了。——高士其 3、学和行本来是有联系着的，学了必须要想，想通了就要行，要在行的当中才能看出自己是否真正学到了手。否则读书虽多，只是成为一座死书库。——谢觉哉、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。 13、你想过普通的生活，就会遇到普通的挫折。你想过最好的生活，就一定会遇上最强的伤害。这个世界很公平，想要最好，就一定会给你最痛。
菊花的组织培养优质课件ppt
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（三）植物组织培养的理论基础---细胞全能性
ABCDE
BADCE
ABCDE
ABCDE
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
血红蛋白基因开启
红细胞
合成血红蛋白
肌动蛋白基因关闭 (不合成肌动蛋白)
肌细胞
血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 肌动蛋白基因开启 (不合成血红蛋白)
2、稳定性
造血干细胞 原红细胞 早幼红细
胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成
熟红细胞 死亡
3、不可逆性
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
细胞分化是
否意味着细胞
中遗传物质的
植物组织培养
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（一）植物组织培养概念
在无菌和人工控制条件下，将离体的 植物器官、组织、细胞，培养在人工配置 的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导 其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽， 最终形成完整的植株。
讲课—菊花组织培养公开课PPT课件
➢2-3周，愈伤组织开始形成。
第9页/共36页
(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、 组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行 离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重 新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构 和功能，成为具有未分化特性的细胞。)
第32页/共36页
课题延伸
一般来说容易进行无性繁殖的植物， 也容易进行组织培养。
第33页/共36页
• 课后练习解答：P37 • 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。
用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的 生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格 的无菌操作。 • 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生 理状况好，容易诱导脱分化和再分化。
第21页/共36页
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段 时间。
第22页/共36页
• 5、pH、温度、光照 • 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光
菊花的组织培养
项城市第二高级中学 FSRC
第1页/共36页
一.植物组织培养的基本过程
组织培养： 是指在人工培养基上，离
体培养植物的器官、组织、细胞， 并使其生长、增殖、分化以及再 生植株的技术。
思考： 1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性
第2页/共36页
第9页/共36页
(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、 组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行 离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重 新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构 和功能，成为具有未分化特性的细胞。)
第32页/共36页
课题延伸
一般来说容易进行无性繁殖的植物， 也容易进行组织培养。
第33页/共36页
• 课后练习解答：P37 • 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。
用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的 生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格 的无菌操作。 • 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生 理状况好，容易诱导脱分化和再分化。
第21页/共36页
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精 灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段 时间。
第22页/共36页
• 5、pH、温度、光照 • 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光
菊花的组织培养
项城市第二高级中学 FSRC
第1页/共36页
一.植物组织培养的基本过程
组织培养： 是指在人工培养基上，离
体培养植物的器官、组织、细胞， 并使其生长、增殖、分化以及再 生植株的技术。
思考： 1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性
第2页/共36页
课题1菊花的组织培养(PPT31页)
菊花组织培养的PH？温度？光照？
植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂素>
离
生长素
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分裂素 ≈生长素
组 织
根 细胞分裂素
植 物 体
胞
<生长素
不需要光?
需要光
植物组织培养的过程
离体的植 脱分化 物组织或 细胞
愈伤组织
再分化
根和芽
完整的植 物体
四、实验操作
（哪6步？） 1、配制各种母液（大量元素、微量元素 各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）
MOMODA POWERPOINT 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。2022年8月9日星期二下午1时30分18秒13:30:1822.8.9 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。。2022年8月下午1时30分22.8.913:30August 9, 2022
16、业余生活要有意义，不要越轨。2022年8月9日星期二1时30分18秒13:Leabharlann 0:189 August 2022
看
11、越是没有本领的就越加自命不凡。22.8.913:30:1813:30Aug-229-Aug-22
12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。13:30:1813:30:1813:30Tuesday, August 09, 2022
13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。22.8.922.8.913:30:1813:30:18August 9, 2022
菊花的组织培养
一、植物组织培养的概念
植物的组织培养又叫离体培养，指植物的组织、 器官或细胞等在离体条件下，通过无菌操作， 在人工控制条件下（一定的营养物质、激素、 温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的 完整植株的技术。
植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂素>
离
生长素
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分裂素 ≈生长素
组 织
根 细胞分裂素
植 物 体
胞
<生长素
不需要光?
需要光
植物组织培养的过程
离体的植 脱分化 物组织或 细胞
愈伤组织
再分化
根和芽
完整的植 物体
四、实验操作
（哪6步？） 1、配制各种母液（大量元素、微量元素 各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）
MOMODA POWERPOINT 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。2022年8月9日星期二下午1时30分18秒13:30:1822.8.9 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。。2022年8月下午1时30分22.8.913:30August 9, 2022
16、业余生活要有意义，不要越轨。2022年8月9日星期二1时30分18秒13:Leabharlann 0:189 August 2022
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菊花的组织培养
一、植物组织培养的概念
植物的组织培养又叫离体培养，指植物的组织、 器官或细胞等在离体条件下，通过无菌操作， 在人工控制条件下（一定的营养物质、激素、 温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的 完整植株的技术。
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菊花的组织培养
菊花的组织培养
实验操作：
制备MS固体培养基
外植体消毒栽培移栽 Nhomakorabea培养
接种
（一）制备MS固体培养基：
MS培养基包括20多种营养成分，实验室 一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备。 1、配制各种母液： 2、配制培养基：计算-称量-熔化-调pH-分装
#由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素
本课题内容小结
细胞分化 植物体的 组织培养 细胞全能性 组织培养过程 营养 影响组织培 养的因素 激素 环境条件
基础知识
菊花 组织 培养
实验操作
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
结果分析与评价
• 四、生根苗的移栽是否合格 • 生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根 系表面的培养基，又不能伤及根系。一般 使用无土栽培的办法。培养基质要提前消 毒，可以向培养基质喷洒质量分数为5%的 高锰酸钾，并用塑料薄膜覆盖12小时。掀 开塑料薄膜24小时后才能移栽。新移栽的 组培苗要在温室过渡几天，等壮苗后再移 植到大田或进行盆栽。
3、灭菌
问题：高等植物是光能自养型生物，为什么在植 物组织培养过程中还需提供有机培养基和植物激 素？
（二）外植体消毒
1、选材：未开花植株茎上部新生的侧枝或生长旺 盛的嫩枝
作业：P36在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？
外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要 条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易 诱导脱分化和再分化。 2、消毒
①对外植体进行表面消毒时，既要考考虑药剂的消毒效果，
又要考虑植物的耐受能力。不同药剂、不同植物材料，甚至 不同的器官要区别对待。
②菊花茎段的消毒：流水冲洗- 酒精处理（70%、 6～7S、2～3次）-无菌水冲洗-氯化汞处理 （0.1%、1～2min）-无菌水至少处理3次
（三）接种： 1．接种室消毒：
接种前用体积分数为70％的酒精将工作台擦拭
一遍，然后点燃酒精灯。因为污染的主要来源是空
气中的细菌和孢子。
2．无菌操作要求：
所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁完成， 每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。
3．材料的切取和接种： 将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿 中切成0.5～1cm的小段，用镊子夹取 菊花茎段接种。
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
（四）保证接种与培养环境清洁
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
思考：你打算做几组重复？你打算设置 对照实验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
正常苗
污染苗
污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
结果分析与评价
• 二、是否完成了对植物组织的脱分化和再 分化 • 观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组 织，记录多长时间长出愈伤组织。统计更 换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽 的比例和时间。
结果分析与评价
• 三、是否进行了统计、对照与记录 • 做好统计和对照，填好结果记录表，培养 严谨的科学态度。从实验的第一步开始就 做好实验记录，分析分组配制不同的培养 基，然后做不同配方的比较。
4．接种注意事项：
① 每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火 焰上烧一遍，冷却后再接种。
② 外植体在培养基中要分布均匀，放置外植 体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝 卜3～4块，菊花6～8块，也不要太少，以 充分利用培养基中的营养成分和光照条件。 ③ 插入时应注意茎段方向，形态学上端朝上， 形态学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分。
（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长 情况，适时浇水、施肥，直至开花
结果分析与评价
• 一、对接种操作中污染情况的分析 • 接种3～4天后，在接种操作中被杂菌污染 的培养物会表现出被污染的现象。 • 一般情况下，细菌的污染可能是由接种人 员造成的，如未戴口罩，接种时说话或手 及器械消毒不严等。真菌污染可能是植物 材料消毒不当造成的。
（四）培养
• 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养， 培养期间应定期消毒 • 培养温度控制在18-22℃ • 每日用日光灯光照12h
（五）移栽
操作：打开封口膜-清洗转移-移栽
试管苗在移栽前进行一系列操作，使 幼苗生长健壮，耐环境变化能力增强， 这一过程叫炼苗。
珍珠岩： 珍珠岩是一种火山喷发的 酸性熔岩，经急剧冷却而成的 玻璃质岩石，有弧形或圆形裂 隙，如珍珠的结构，所以被命 名为珍珠岩 。 蛭石： 是一种天然、无毒 的矿物质，在高温作用下 会膨胀的矿物。它是一种 比较少见的矿物，属于硅 酸盐。
菊花的组织培养
实验操作：
制备MS固体培养基
外植体消毒栽培移栽 Nhomakorabea培养
接种
（一）制备MS固体培养基：
MS培养基包括20多种营养成分，实验室 一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备。 1、配制各种母液： 2、配制培养基：计算-称量-熔化-调pH-分装
#由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素
本课题内容小结
细胞分化 植物体的 组织培养 细胞全能性 组织培养过程 营养 影响组织培 养的因素 激素 环境条件
基础知识
菊花 组织 培养
实验操作
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
结果分析与评价
• 四、生根苗的移栽是否合格 • 生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根 系表面的培养基，又不能伤及根系。一般 使用无土栽培的办法。培养基质要提前消 毒，可以向培养基质喷洒质量分数为5%的 高锰酸钾，并用塑料薄膜覆盖12小时。掀 开塑料薄膜24小时后才能移栽。新移栽的 组培苗要在温室过渡几天，等壮苗后再移 植到大田或进行盆栽。
3、灭菌
问题：高等植物是光能自养型生物，为什么在植 物组织培养过程中还需提供有机培养基和植物激 素？
（二）外植体消毒
1、选材：未开花植株茎上部新生的侧枝或生长旺 盛的嫩枝
作业：P36在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？
外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要 条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易 诱导脱分化和再分化。 2、消毒
①对外植体进行表面消毒时，既要考考虑药剂的消毒效果，
又要考虑植物的耐受能力。不同药剂、不同植物材料，甚至 不同的器官要区别对待。
②菊花茎段的消毒：流水冲洗- 酒精处理（70%、 6～7S、2～3次）-无菌水冲洗-氯化汞处理 （0.1%、1～2min）-无菌水至少处理3次
（三）接种： 1．接种室消毒：
接种前用体积分数为70％的酒精将工作台擦拭
一遍，然后点燃酒精灯。因为污染的主要来源是空
气中的细菌和孢子。
2．无菌操作要求：
所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁完成， 每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。
3．材料的切取和接种： 将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿 中切成0.5～1cm的小段，用镊子夹取 菊花茎段接种。
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
（四）保证接种与培养环境清洁
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
思考：你打算做几组重复？你打算设置 对照实验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
正常苗
污染苗
污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
结果分析与评价
• 二、是否完成了对植物组织的脱分化和再 分化 • 观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组 织，记录多长时间长出愈伤组织。统计更 换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽 的比例和时间。
结果分析与评价
• 三、是否进行了统计、对照与记录 • 做好统计和对照，填好结果记录表，培养 严谨的科学态度。从实验的第一步开始就 做好实验记录，分析分组配制不同的培养 基，然后做不同配方的比较。
4．接种注意事项：
① 每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火 焰上烧一遍，冷却后再接种。
② 外植体在培养基中要分布均匀，放置外植 体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝 卜3～4块，菊花6～8块，也不要太少，以 充分利用培养基中的营养成分和光照条件。 ③ 插入时应注意茎段方向，形态学上端朝上， 形态学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分。
（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长 情况，适时浇水、施肥，直至开花
结果分析与评价
• 一、对接种操作中污染情况的分析 • 接种3～4天后，在接种操作中被杂菌污染 的培养物会表现出被污染的现象。 • 一般情况下，细菌的污染可能是由接种人 员造成的，如未戴口罩，接种时说话或手 及器械消毒不严等。真菌污染可能是植物 材料消毒不当造成的。
（四）培养
• 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养， 培养期间应定期消毒 • 培养温度控制在18-22℃ • 每日用日光灯光照12h
（五）移栽
操作：打开封口膜-清洗转移-移栽
试管苗在移栽前进行一系列操作，使 幼苗生长健壮，耐环境变化能力增强， 这一过程叫炼苗。
珍珠岩： 珍珠岩是一种火山喷发的 酸性熔岩，经急剧冷却而成的 玻璃质岩石，有弧形或圆形裂 隙，如珍珠的结构，所以被命 名为珍珠岩 。 蛭石： 是一种天然、无毒 的矿物质，在高温作用下 会膨胀的矿物。它是一种 比较少见的矿物，属于硅 酸盐。