芳酸类及其酯类药物的分析

第四章芳酸类药物的分析§4-1 典型药物分类与理化性质一、水杨酸类（一）典型药物（二）理化性质具有酸性具有酚羟基可与三氯化铁试液作用显色具有酯结构在碱性条件下易水解产生酚羟基和羧酸盐具有芳伯氨基UV和IR光谱特溶解性游离酸难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水二、苯甲酸类（一）典型药物（二）理化性质1.溶解性: 除钠盐溶于水，其余不溶。

2.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。

3.具有酚羟基特性4.分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸；丙磺舒分解为SO25.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基，可用NaOH直接滴定测定其含量。

三、其它芳酸类药物典型药物：氯贝丁酯（降血酯药）、布洛芬（解热、镇痛）§4-2 鉴别试验一、三氯化铁反应1. 水杨酸类药物以下是一些具有酚羟基或潜在酚羟基的物质与三氯化铁的反应2、苯甲酸碱性或中性溶液，与三氯化铁生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。

3、丙磺舒其钠盐在pH5.0～6.0水溶液中与三氯化铁产生米黄色沉淀 二、水解反应 1、阿司匹林 2、氯贝丁酯酯结构，经碱水解后与盐酸羟胺生成异羟肟酸盐，在弱酸性条件下加三氯化铁即呈紫色异羟肟酸铁。

三、重氮化-偶合反应 1、对氨基水杨酸钠2、贝诺酯：酸水解后，与亚硝酸钠反应生成重氮盐与碱性β-萘酚偶合生成橙红色沉淀。

四、分解产物的反应药物 实验方法结果水杨酸水溶液与三氯化铁试液反应 紫堇色 水杨酸二乙胺水溶液与三氯化铁试液反应 紫堇色 阿司匹林 加热水解后与三氯化铁试液反应紫堇色 对氨基水杨酸 加稀盐酸呈酸性后与三氯化铁试液反应紫红色 贝诺酯 加氢氧化钠试液煮沸水解后加盐酸呈微酸性后反应紫堇色 双水杨酸 稀溶液与三氯化铁反应紫色1、苯甲酸盐分解成苯甲酸升华物（白色）用于鉴别2、含卤素或硫的药物，可分解后鉴别eg ：丙磺舒，含 S ，与氢氧化钠熔融，分解生成亚硫酸钠，经硝酸氧化成硫酸，显硫酸盐反应3、丙磺舒高温加热时，产生SO2臭味 五、紫外吸收光谱法 1、紫外特征吸收法eg. 贝诺酯无水乙醇液λmax=240nm, 760~730%11 vcm E2、双波长吸收度比法 六、红外吸收光谱法 § 4-3 特殊杂质检查 一、阿司匹林中特殊杂质检查 1、合成工艺 2、检查（1）一般杂质：炽灼残渣、重金属（2）特殊杂质：溶液澄清度、水杨酸、易碳化物● 溶液的澄清度：检查碳酸钠试液中不溶物，包括：未反应完全的酚类、苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯以上杂质不溶于碳酸钠，而阿司匹林可溶于碳酸钠，利用溶解行为的差异来检查这些杂质。

● 水杨酸生产过程中或贮存过程中产生，对人体有毒性，而且分子中酚羟基在空气中逐渐被氧化成一系列醌型有色物质，如淡黄、红棕甚至深棕色，使阿司匹林成品变色。

（原料药和制剂均要检查）● 易炭化物：检查被硫酸炭化呈色低分子有机杂质 二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查 1、合成工艺与间氨基酚杂质的产生（间氨基酚为原料为主要生产路线）● 间氨基酚易导致药物变色，且有毒性2、检查方法：双相滴定法与原理原理：对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚易溶于乙醚，使两者分离后，在乙醚中加入适量水，用盐酸滴定液（0.02mol/L）滴定，以消耗一定量盐酸控制其限量。

所生成的盐酸盐在乙醚中不溶，而转溶于水相中。

(Chp2000 版)方法：见书三、氯贝丁酯中特殊杂质的检查1、合成工艺2、检查项目：（1）酸度（主要是为了控制对氯苯氧异丁酸和其它酸性试剂，如硫酸、盐酸等）用NaOH滴定，来控制其限量。

（2）对氯酚（起始原料，有毒）的检查：GC法、HPLC（3）挥发性杂质：GC法——峰面积归以化法§4-4 含量测定一、酸碱滴定（一）直接滴定法•原理（以阿司匹林为例）：方程见书•注意的问题1、需在杂质限量合格前提下做2、溶剂：中性乙醇3、指示剂：酚酞4、条件：0～40℃5、速度：不断振摇、稍快•计算供试品含量（%）=[（V×T×F）/（W×1000）] ×100%式中：V —样品消耗的NaOH滴定溶液的体积，mLT —滴定度(T阿司匹林/氢氧化钠=18.02mg)，mg/mL；F — NaOH滴定溶液的浓度校正因子（NaOH实际度/标准浓度）；W —待测药物的称样量，g。

（二）水解后剩余滴定法（USP23）方法：取阿司匹林约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml的NaOH液(0.5mol/L)相当于45.04mg的C9H9O4（三）两步滴定法•原理：以阿司匹林片和肠溶片的含量测定为例阿司匹林片中加有约1%的酒石酸或枸橼酸作为稳定剂，本品在生产和储存过程中水解产生水杨酸和醋酸，这些酸性物质在反应中能消耗氢氧化钠，导致结果偏高。

采用两步滴定法可以消除这些物质带来的干扰。

第一步：10片，称m总。

研细，称约0.3g（ms），中性乙醇（20mL）中，酚酞，0.1mol/LNaOH滴定至粉红色，所耗NaOH用于消除干扰，不用于结果计算。

酒石酸酒石酸钠枸橼酸枸橼酸钠水杨酸 + 氢氧化钠→水杨酸钠 +水醋酸醋酸钠第二步：上述溶液+40mL0.1mol/LNaOH，水浴加热15min，放冷，用0.05mol/LH2SO4回滴剩余NaOH，以空白实验校正。

本方法操作要点：第一步滴定碱不能过量，第二步水解应完全，空白实验应遵循平行原则。

按标示量计算阿司匹林的百分含量：①阿司匹林 + 40mLNaOH →（水解反应）剩余的NaOH + H2SO4→V%100WTF)VV(%0⨯⨯⨯-=含量②空白实验：40mL NaOH + H 2SO 4 → V 0 由以上知道：（1）先求出m s g 供试品中所含阿司匹林的克数：n （阿司匹林）= n （40mLNaOH - 剩余的NaOH ） m （阿司匹林）=（V 0-V ）×T ×F（2）再求出每片所含阿司匹林的平均克数：（实测含量/m s ）×（m 总/10）（3）求出按标示量表示的阿司匹林的百分含量：供试品标示量（%）=1000)(0⨯⨯⨯-W F T V V ×）标示量（）平均片重（g g ×100%以上式子中：V 0——空白实验消耗硫酸滴定溶液的体积，mLV ——回滴消耗硫酸滴定溶液的体积，mLF ——浓度校正因子T ——硫酸的滴定度，mg/mL 注意：T 要用NaOH 的滴定度来求：∵T （阿司匹林/NaOH ）=18.02mg/mL ，T （A/B ）=1000AB MC （mg/mL ）（浓度、摩尔质量要标明基本单元） ∴ M （阿司匹林）=180.2g/molT （阿司匹林/H 2SO 4）= C （1/2 H 2SO 4）×M （阿司匹林）×10-3=0.1×180.2×10-3 =18.02 mg/mL 从以上可以看出：在计算中基本单元要对应或者：每1ml0.1mol/LNaOH ≈18.02mgASA 由于氢氧化钠与硫酸的反应为2：1，而此法中硫酸的浓度为0.05mol/L 为NaOH0.1mol/L 的1/2。

因此 1ml0.05mol/LH2SO4 ≈1mol/l0.1mol/LNaOH ≈18.02mgASA★按标示量表示的百分含量：标示量，%=[实测含量（g）×平均片重（g）]/[供试品重（g）×标示量（g）]二、双相滴定法（P67）三、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法丙磺舒盐酸乙醇溶液λmax = 249nmCh.P2000和BP（1998）：吸收系数法测定片剂中丙磺舒USP（23）：以氯仿为溶剂，用碳酸钠（1%）提取，稀盐酸酸化后，再用氯仿提取后，与对照品比较测其含量。

（二）离子交换-紫外分光光度法氯贝丁酯和对氯酚等杂质对紫外具有吸收，因此采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，方可测定氯贝丁酯的含量。

（三）柱分配-紫外分光光度法USP（24）阿司匹林胶囊：同时测定SA和ASA•SA的限量测定：利用水杨酸与三氯化铁生成水杨酸铁配位化合物，保留在色谱柱上，用氯仿将ASA以及酯溶性物质洗脱以后，再用酸化的乙醚将水杨酸游离出来，氯仿洗脱。

对照品比较，既可限量测定，也可定量测定。

•ASA的测定：在硅藻土－碳酸氢钠色谱柱中，ASA、SA成钠盐保留在柱上，洗去有机中性和碱性杂质，再醋酸酸化使ASA、SA游离被氯仿洗脱，对照品比较测得其含量。

四、高效液相色谱法（一）阿司匹林栓剂的含量测定（Ch.P2000版)色谱条件：填充剂为十八烷基键合硅胶，流动相为甲醇－0.1%二乙胺水溶液－冰醋酸（40：60：4），检测波长280nm，内标物质为咖啡因。

（二）丙磺舒原料药色谱条件填充剂为苯基键合硅胶，色谱柱300mm×3.9mm；流动相为：磷酸二氢钠的1%冰醋酸（0.05mol/L）（磷酸调pH3.0）－1%冰醋酸乙腈溶液（50：50）；检测波长254nm，流速1.0ml/min。

方法：对照品比较法复习思考题•根据阿司匹林的合成工艺及化学结构，说明阿司匹林杂质检查项目的制订依据与检查原理。

•试述两步滴定法测定阿司匹林制剂的原理和方法特点以及计算公式。

•试述双相滴定法的原理与应用。

•紫外分光光度法用于鉴别芳酸及其酯类药物的方法有哪几种？。