比色法测定野菊花中总黄酮含量
菊花叶黄酮类化合物的实验分析-
药科技出版社 ,1994 :374
(收稿 :2001 - 04 - 12)
止 痛 奇 效 汤 治 疗 肝 癌 疼 痛 20 例
席玉才 李 竞 (黑龙江省黑河市中医院·黑河 164300)
1 一般资料 本组 20 例均为住院病人 ,其中男 16 例 、女 4 例 ;年龄 最小 45 岁 ,最大 72 岁 ,平均 5815 岁 ;治疗前本组病例 14 例有止痛剂 用药史 ;疼痛时间最长 1 年 ,最短 1w。
夏散结祛痰 、化瘀止痛 ; 肝癌晚期 ,其正气虚损 ,加用一味黄芪以补
充 ,并有预防行气散结而伤正之功效 ,诸药合用共奏疏肝理气 、活血
化瘀 、祛痰散结而使气血流通 ,通则不痛 ,故临床用于治疗肝癌疼痛
取得较好疗效 。
(收稿 :2001 - 10 - 12)
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中国中医药科技
2002 年第 9 卷第 Fra bibliotek 期菊花叶黄酮类化合物的实验分析
刘金旗 王 兰 刘劲松 吴德林 王举涛
(安徽中医学院药学系·合肥 230038)
摘 要 目的 :比较菊花叶和菊花的黄酮类化学成分 ,测定菊花叶中总黄酮的含量 。方法 :采用薄层层析和比 色法 。结果 :菊花叶和花的黄酮类化合物基本相似 ,总黄酮含量为 : 亳菊叶 5150 % ,滁菊叶 6143 % ,贡菊叶 3126 % ,杭白菊叶 9148 % ,结论 :菊花叶与花具有相似成分 ,可开发利用 。 主题词 菊花叶/ 化学 菊花/ 化学 总黄酮/ 分析
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菊花中总黄酮的含量测定
菊花中总黄酮的含量测定
菊花是一种常见的草本植物，被广泛用于中药和食品加工中。
菊花具有多种药用价值，其中菊花中总黄酮的含量是其重要的营养指标之一。
本文将从菊花的营养成分、总黄酮的定义和作用、测定总黄酮含量的方法以及菊花中总黄酮含量的研究进展等方面进行探讨。
一、菊花的营养成分
菊花富含多种营养成分，包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等。
其中，总黄酮是菊花中的重要成分之一，具有很高的生物活性。
二、总黄酮的定义和作用
总黄酮是一类具有黄酮骨架的化合物的总称，包括黄酮类、异黄酮类和花色苷类等。
总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性，对人体健康具有重要的保护作用。
三、测定总黄酮含量的方法
测定总黄酮含量的方法主要有比色法、高效液相色谱法和质谱法等。
其中，比色法是最常用的方法之一，通过与标准品的比色反应来确定总黄酮的含量。
四、菊花中总黄酮含量的研究进展
近年来，越来越多的研究关注菊花中总黄酮的含量及其健康功效。
研究表明，菊花中总黄酮的含量受多种因素的影响，如品种、生长环境、采摘时间等。
此外，研究还发现不同品种的菊花中总黄酮含量存在差异，有些品种的菊花中总黄酮含量较高，具有更好的保健效果。
五、总结
菊花中总黄酮的含量是其重要的营养指标之一。
测定菊花中总黄酮含量的方法多种多样，比色法是最常用的方法之一。
菊花中总黄酮的含量受多种因素影响，研究表明不同品种的菊花中总黄酮含量存在差异。
进一步的研究可以探索菊花中总黄酮的生物活性及其与其他成分的相互作用，为菊花的开发利用提供科学依据。
菊花中总黄酮的含量测定
菊花中总黄酮的含量测定
菊花中总黄酮的含量可以通过以下步骤进行测定：
1. 菊花样品的制备：将干燥的菊花样品磨成粉末，并通过筛网得到均匀的颗粒状样品。
2. 提取黄酮化合物：将菊花样品加入适量的溶剂（如乙醇、乙酸乙酯等），在适当条件下进行浸提，如使用超声波浸提或加热浸提。
3. 滤液处理：将浸提得到的溶液通过滤纸过滤，去除固体颗粒。
4. 冷却与浓缩：将滤液置于冷环境中，待其冷却，然后使用旋转蒸发器将溶液浓缩。
5. 与试剂反应：将浓缩后的溶液与适当的试剂反应，如添加醋酸铝试剂（亚铁试剂）、硼酸试剂等，进行反应产生颜色。
6. 测定吸光度：使用紫外可见光谱仪测定反应产生的颜色的吸光度。
7. 与标准曲线对比：使用已知浓度的黄酮标准溶液制作标准曲线，通过吸光度值与标准曲线的对比，确定菊花样品中黄酮的含量。
需要注意的是，在测定过程中应注意控制条件，如浸提时间、浓缩程度、反应时间等，以保证测定结果的准确性和可靠性。
同时，为了获得更精确的测定结果，可以重复进行多次测定，并取平均值。
野菊花中总黄酮含量测定
表 1 样品中总黄酮含量测定
样品 编号
总黄酮
平均值
吸光度
溶液中含量（g/ml） 原料中百分含量（%） （%）
1
2.767
213.78
6.95
2.744
211.94
6.89
2.775
214.37
6.97
2.752
212.61
6.91
2.744
211.94
6.89
2
2.775
214.37
6.97
2.752
经 过 试 验 摸 索 ， 发 现 羟 丙 甲 纤 维 素 K15M 的 量 为 主 药 的 30% 时，其释放度适中，最接近于国外产品烟酸的释放度。
参考文献 1 罗明生，高天惠.药剂辅料大全.成都：四川科学技术出版社，
2006. 2 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）附录.北京：化学
工 业 出 版 社 ，2005. 3 董志超，蒋雪涛.羟丙甲基纤维素的物理性质对口服骨架型制
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中国药物与临床 2009 年 7 月第 9 卷第 7 期 Chinese Remedies & Clinics，July 2009,Vol.9,No.7
表 2 洛伐他汀速释层处方筛选（100 片用量）
洛伐他汀 微晶纤维素 淀粉 乳糖 BHA 十二烷基 15%PVPk30 羧甲淀粉钠 硬脂酸镁
药 释 放 的 影 响 .国 外 医 学 制 剂 分 册 ，1995，16（2）：103-105. （收 稿 日 期 ：2009-02-23 ）
野菊花中总黄酮含量测定
樊点莲 严虹霞
野菊花为菊科植物野菊 Chrysanthemum indicum L. 的干 燥头状花序， 具有疏风清热、消肿解毒的功效，常用于上呼吸 道感染、扁桃体炎、高血压和冠心病等症状的治疗。 现代药理 研究表明野菊花总黄酮是其降压、抗菌、抗病毒的主要有效 成分，而药典中仅规定了绿原酸的含量，并没有总黄酮含量 的评价指标。 为了更好地开展野菊花的药材质量标准化研 究， 本文建立了分光光度法检测野菊花总黄酮含量的方法， 从而为野菊花的质量评价提供一种新的依据。 1 仪器与试剂
野菊花总黄酮及蒙花苷含量测定方法研究
野菊花总黄酮及蒙花苷含量测定方法研究发表时间：2014-02-19T09:28:01.873Z 来源：《中外健康文摘》2013年第35期供稿作者：吕定刚[导读] 供试样品溶液制备：取野菊花药材粉末0.25g左右，置于锥形瓶中，添加100mL甲醇，加塞，称定重量后加热回流3 h。
吕定刚（广西桂林市兴安县人民医院 541300）【摘要】目的研究野菊花总黄酮和蒙花苷含量的测定方法。
方法选取不同产地的野菊花药材作为研究对象，分别利用紫外分光光度法和HPLC法测定总黄酮和蒙花苷含量。
结果经测定，不同来源的野菊花在具体的总黄酮和蒙花苷含量上差异较显著，其中，蒙花苷和总黄酮含量均相对较高的野菊花大多来自安徽和湖北地区。
结论在测定野菊花中总黄酮和蒙花苷的具体含量的时候，可以采用HPLC法和紫外分光光度法，且最终的测定结果较为准确可靠，可为临床评估药草质量提供有力的依据。
【关键词】野菊花总黄酮蒙花苷含量测定方法【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）35-0013-02 本研究中，笔者选取不同产地的野菊花药材作为研究对象，分别利用紫外分光光度法和HPLC法测定总黄酮和蒙花苷含量。
现将研究结果进行如下报告。
1材料与用品1.1材料选取不同产地（安徽、湖北、河北等地）的野菊花干燥花蕾若干作为研究对象，并由西南大学植物学教研室王海洋教授鉴定，确定为野菊（Chrysanthemum indicum L．）的干燥花蕾。
1.2仪器（1）高效液相色谱仪：型号LC一20AB (SPD-20紫外检测器，日本岛津)；（2）紫外分光光度计：型号U-3010 (日本日立)；（3）电子天平：型号EL-2046 (梅特勒一托利多仪器有限公司)；（4）电热恒温水浴锅：型号 HHSYZI-NI (北京市风仪器仪表公司)。
1.3试药蒙花苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号111528-200303)，水为自制重蒸水，乙腈和甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。
野菊花提取液中总黄酮含量测定分析
野菊花提取液中总黄酮含量测定分析宋德海;徐倩倩;孙迎东;李保院;郭时金;张金杰【摘要】目的测定野菊花提取液经聚酰胺色谱柱分离后不同洗脱层总黄酮含量.方法采用60%浓度乙醇水加热回流提取野菊花供试品,经聚酰胺色谱柱分离纯化得到不同浓度乙醇洗脱层.采用紫外可见分光光度法对不同洗脱层总黄酮含量进行测定.结果野菊花提取液50%乙醇洗脱液干膏得率为0. 975 3% ,干膏得率最高. 70%乙醇洗脱层黄酮类化合物含量为46. 51% ,含量最高.结论聚酰胺色谱柱分离纯化法准确、灵敏、简便、重复性好,为野菊花黄酮类化合物富集纯化提供了科学基础.【期刊名称】《滨州医学院学报》【年(卷),期】2019(042)001【总页数】3页(P27-29)【关键词】野菊花;色谱柱;总黄酮;紫外可见分光光度法【作者】宋德海;徐倩倩;孙迎东;李保院;郭时金;张金杰【作者单位】滨州医学院附属医院药学部滨州 256603;滨州市畜牧兽医研究院;绿都安特动物药业有限公司;滨州医学院附属医院药学部滨州 256603;滨州医学院附属医院药学部滨州 256603;滨州市畜牧兽医研究院;绿都安特动物药业有限公司;滨州医学院附属医院药学部滨州 256603【正文语种】中文【中图分类】R917野菊花为菊科植物野菊(Chrysanthemi Indicum L)干燥头状花序。
其味苦、辛，性微寒，归肝心经，具有疏风清热，消肿解毒之功效。
野菊花主要产于江苏、四川、广西、山东、安徽等地，主要含有挥发油、萜类、黄酮类等成分[1]。
黄酮类成分主要包括蒙花苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷等黄酮苷类，木犀草素、槲皮素等黄酮苷元。
黄酮类化合物的抗炎、镇痛、抗氧化活性作用明显，多种黄酮协同作为野菊花药效组分，并且对免疫肝脏损伤具有一定保护作用[2-5]。
前期研究通过聚酰胺色谱柱对野菊花蒙花苷进行了初步富集纯化研究[6]。
本研究用60%乙醇水对野菊花药材进行加热回流提取[5]，并用聚酰胺树脂对提取液进行富集纯化，采用紫外可见分光光度法[7]对野菊花提取液的聚酰胺不同富集部位的总黄酮含量进行测定，以确定聚酰胺色谱法对总黄酮富集效果及不同部位总黄酮含量，为下一步野菊花黄酮类化合物研究奠定基础。
野菊花总黄酮的提取工艺研究
野菊花总黄酮的提取工艺研究作者：白现广王惠平刘永莹郝丽亚齐闪闪范卫卫来源：《甘肃科技纵横》2020年第08期摘要：目的：优化野菊花总黄酮的提取工艺，为野菊花总黄酮的开发和利用提供基础。
方法：通过正交试验的方法，以野菊花的总黄酮含量作为指标，从溶剂浓度、料液比、提取温度、提取时间4个因素，筛选野菊花总黄酮的最佳提取工艺。
结果：乙醇法提取野菊花总黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度80%、料液比1：25、温度80℃、提取时间2h，提取率为4.90%。
结论：通过正交试验对野菊花总黄酮的提取工艺进行优化，可提高野菊花总黄酮的提取率。
关键词：野菊花;总黄酮;提取中图分类号：R284.2 文献标志码：A野菊花是菊科植物野菊（Chrysanthemum indiellm）的干燥头状花序，性微寒，具有散风热、平肝明目之功效，是临床常用中草药。
研究表明，野菊花中含有黄酮类、三萜类和挥发油等化学成分。
其中，总黄酮是野菊花发挥药理作用的最重要的活性成分之一，具有保护心脑血管系统、抗氧化、保肝、抗炎、抗肿瘤等药理作用。
目前野菊花总黄酮提取工艺主要包括：有机溶剂提取法、微波提取法、酶辅助提取法及超声波提取法等。
本实验使用乙醇为有机溶剂提取野菊花中的总黄酮，通过单因素考察和正交试验优化确定野菊花总黄酮乙醇提取法的最佳工艺条件，为野菊花总黄酮的进一步研究、开发和利用奠定基础。
1实验材料与仪器1.1实验材料与试剂实验材料：野菊花于2018年10月采自平顶山市新华区落凫山南坡，经平顶山学院医学院范卫卫博士鉴定为菊科植物野菊（Chrysanthemum indicum）。
实验试剂：芦丁标准品（纯度≥98%）购自合肥博美生物科技有限责任公司;亚硝酸钠（分析纯）购自洛阳吴华化学试剂有限公司;硝酸铝（分析纯）购自国药集团化学试剂有限公司;氢氧化钠（分析纯）购自天津市大茂化学试剂厂;乙醇（分析纯）购自天津市德恩化学试剂有限公司。
1.2仪器设备FAl004N型电子天平（上海菁海仪器有限公司）;DZKw-4型电子恒温水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司）;DHG-9202-1S型电热恒温干燥箱（上海鸿都电子科技有限公司）;SHZ-D （Ⅲ）型循环水式真空泵（河南省予华仪器有限公司）;T6型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）;XT-350型高速多功能粉碎机（浙江永康市红太阳机电有限公司）;1830c型纯水机（重庆摩尔水处理设备有限公司）。
菊花黄酮实验报告
（正交试验）菊花黄酮提取与测定【实验报告】操作者姓名：张伊班级生物技术102 专业生物技术及应用前言1、实训的背景、目的和意义：菊花具有疏风清热、消肿解毒的功效, 常用于上呼吸道感染、扁桃体炎、高血压和冠心病等治疗。
文献报道[1] 野菊花中含有木犀草素、槲皮素、木犀草素、葡萄糖苷、槲皮素苷类等黄酮类化合物, 而药典中仅规定了绿原酸的含量, 并没有总黄酮含量的评价指标。
为了更好地检验菊花中黄酮的含量，比较哪种方法更好,本次试验应用超声波提取菊花黄酮，分光光度法检测菊花总黄酮含量的方法, 从而使学生掌握菊花黄酮的提取与测定工艺。
2、实训要解决的问题：1）在何种情况下提取黄酮效率高？2）影响提取效率的有哪些因素？3）比较提取时间、提取次数不同所带来的影响。
3、实训操作关键技能吸取样品量（根据样品的吸光度调整）1.0ml，放入10毫升容量瓶内（写明标记），用60%乙醇加到2.0ml；加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝，溶液0.5ml，放置6min后；加入4%氢氧化钠溶液4.0ml，摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min；在510nm处测定吸光度。
根据标准曲线计算总黄酮的含量。
（加入药品时的次序不能搞错）材料及方法1、实训材料及配制、预处理技术➢材料：杭白菊干花、芦丁对照品➢试剂：75%乙醇、蒸馏水➢仪器：电热恒温鼓风干燥箱、提取装置、温度计、超声波发生（带加热功能）、真空泵、紫外分光光度计、低速离心机等。
➢样品溶液的制备：称取10g菊花，剪碎，加入75%热乙醇80ml, 超声波提取10min（我们组的）2次,过滤。
转移至容量瓶中备用。
➢对照品溶液的制备：精密称取在120摄氏度减压干燥至恒重的芦丁( 对照品) 1.00mg , 置于100ml 容量瓶中, 加乙醇溶解刻度, 作为对照品贮备液。
➢标准曲线绘制:精密吸取对照品贮备液0.50ml、1.00ml、2.00m l、3.00ml、4.00ml、5.00ml分别置于10ml容量瓶中, 吸取样品量（根据样品的吸光度调整）1.0ml，放入10毫升容量瓶内（写明标记），用60%乙醇加到2.0ml；加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝，溶液0.5ml，放置6min后；加入4%氢氧化钠溶液4.0ml，摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min；以试剂作空白,于510nm处分别测其吸收度。
野菊花总黄酮的含量测定_林春蕊
广西植物Guihaia 22(5):467-468 2002年9月 野菊花总黄酮的含量测定林春蕊(广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林541006)摘 要:对不同产地、不同加工方法的野菊花中总黄酮进行了含量测定和筛选研究,结果首选了湖北省麻城市采摘、烘干法加工的野菊花。
并检测了其六批野菊花浸膏的总黄酮含量,结果均达11%以上,符合质量要求。
关键词:野菊花;总黄酮;分光光度法中图分类号:Q946 文献标识码:A 文章编号:1000-3142(2002)05-0467-02The determination of flavonoid content offlowers of Chrysanthemum indicumLIN Chun-rui(Guangx i I nstitute of Botany,Guangx i Zhuangz u A utonomous Region and T he ChineseA cademy of Sciences,Guilin541006,China)Abstract:The determination and sc reening st udy of flavonoid content of f low ers of Chrysanthemum indicum L. from different place of production and different processing methods w ere examined.T he analytic al results show ed that t he be st flow er of Chrysanthemum indicum w as collected in M acheng city of Hubei Province and processed by baking m ethod.The flavonoid content is m ore t han11%in six batches f low ers and the qualit y accord w ith de-mands.Key words:Chrysanthemum indicum L.flow ers;total f lavonoids;spectrophotometry 野菊花是菊科植物野菊(Chry santhemum in-dicum L.)的干燥头状花序,功效清热解毒、降血压〔1〕,药理作用有抗毒、改善血液循环、抑制血小板聚集和增强吞噬细胞等功能〔2〕,现临床将野菊花浸膏制成栓剂,对慢性盆腔炎、宫颈糜烂、慢性前列腺炎等有显著疗效〔3〕,其主要有效成分为总黄酮。
野菊花总黄酮的含量测定
Ｔｈｅ ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏｎ ０ｆ ｆ ｏ ｉ ｏｎｔ ｎｔ ０ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｌ ａｖ ｎｏ ｄ ｃ ｅ ｆ ｆ ｗｅ ｓ ０ ｌ ０ ｒ ｆ Ｃｈｒ ａｎ ｍ ｕ ｉ ｄｉｕｍ ｙｓ ｔ ｈｅ ｍ ｎ ｃ
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野菊花总黄酮的提取与纯化
文献标志码： Ａ
文章编号： １００５－ ９９８９（２００８）０７－ ０１７９－ ０４
Ｅｘｔｒａ ｃｔｉｏｎ ａ ｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａ ｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａ ｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｃｈｒｙｓ ａ ｎｔｈｅ ｍｕｍ ｉｎｄｉｃｕｎ
ＬＵＯ Ｘｉａｎ－ ｈｕａ， ＹＵ Ｊ ｉａｎ－ ｓｈｅｎｇ＊
（Ｔｏｎｇｒｅ ｎ Ｖｏｃａ ｔｉｏｎａ ｌ Ｉｎｓ ｔｉｔｕｔｅ ， Ｔｏｎｇｒｅ ｎ ５５４３００）
菊花总黄酮静态饱和吸附量为 １１４．６５ ｍｇ／ｇ（干树脂）， 洗脱 率 ９４．９％， 动态饱和吸附量为 ９４．５ ｍｇ／ｇ（干
树脂）， 总黄酮回收率在 ９２．６％、纯度在 ９０％以上， 是实验树脂中分离纯化野菊花总黄酮的最佳大孔
吸附树脂。分离纯化野菊花总黄酮最佳工艺条件为 ＡＢ－ ８ 型大孔吸附树脂， 洗脱剂为 ７０％乙醇， 洗脱
２．３ 野菊花总黄酮纯化用样品液的制备（验证试验）
取野菊花干品粗粉 ５ ｋｇ， 根据 ２．２ 正交设计 Ｌ９（３４） 筛选出的野菊花总黄酮乙醇浸提最优水平组合工艺
１８０ Ｎｏ． ７． ２００８
提取物与应用
Ａ１Ｂ３Ｄ３Ｃ３ 进行验证提取， 提取率 ６．２３％， 与正交试验 方案中的最优方案相同， 说明优化是成功的， 适合于 生产应用。并按 ２．２ 项下方法制取样品液后冷藏备用 （总黄酮含量 ９．５ ｍｇ／ｍＬ）。 ２．４ 大孔吸附树脂的筛选［５－ ６］
７．３７２
Ｆ ３２．５４６ １９．２５７ １．０００ ３．５４２
Ｐ ＜０．０５ ＜０．０５
注： Ｆ０．１０（２，２）＝９．００， Ｆ０．０５（２，２）＝１９．００， Ｆ０．０１（２，２）＝９９．００。
方差分析表明， 在不考虑交互作用的情况下，
比色法测定总黄酮含量-操作流程图-简易图解-李熙灿-Xican Li
比色法测定总黄酮含量：操作流程图2017.11【检测方法与实验流程图】图1实验流程图【溶液配制】1.5%亚硝酸钠溶液配制：称取0.5g亚硝酸钠（NaNO2）固体，加蒸馏水至10mL，即得。
2. 10%硝酸铝溶液配制：称取1g硝酸铝固体，加蒸馏水至9mL，即得。
3. 4% 氢氧化钠溶液配制：称取2g氢氧化钠固体，加蒸馏水至48mL，即得。
4. 芦丁标准液配制：精密称取芦丁10.4 mg置25mL容量瓶中，加80%乙醇溶液溶解、定容。
5. 样品液配制：视样品的溶解性，可选用甲醇、乙醇、95乙醇、水作溶液。
浓度尽量高，但要有精确的数值。
【文献依据】Xican Li, Dongfeng Chen, Ying Mai, Bi Wen, Xiaozhen Wang. Concordance between antioxidant activities in vitro and chemical components of Radix Astragali. Natural Product Research.2012;26:1050-1053.【简介】黄酮包括黄酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇、双黄酮等，他们大多同时存在于某一种中药及其他植物中。
为了测定这些黄酮的总含量，便建立了总黄酮的检测方法。
其原理是：黄酮中的处于相邻羰基、羟基可以共同络合金属而显色。
根据显色之深浅（即吸光度A值之大小），判断的总黄酮含量之高低。
常用的显色剂是亚硝酸钠-硝酸铝，检测波长是508nm。
采用分光光度计，并以某种标准品绘制工作曲线，依该曲线所建立的回归方程，计算其含量。
【标准曲线绘制】（芦丁）精密量取0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL 芦丁标准液，代替上图中的 “样品液0.5mL ”，依“实验流程图”，测A 508nm值：绘制标准曲线如下：A 508n m Concentration (mg/ml)总黄酮测定的标准曲线（芦丁）y = -0.00339 + 11.92871 x r=0.99926。
野菊花不同部位总黄酮含量的比较
野菊花不同部位总黄酮含量的比较白少岩,蓝静(山东省医学科学院药物研究所济南250062)摘要:目的测定野菊花不同部位中总黄酮的含量。
方法选用山东蒙山产野菊花,采用比色法进行测定。
结果叶中总黄酮含量最高。
结论野菊花不同部位中总黄酮的含量有较明显的差异。
关键词:野菊花黄酮含量测定中图分类号:R28412文献标识码:A文章编号:1672-7738(2005)06-0355-02C ontents compare of Flavonoids in different parts of C hrysanthemum indicum L1Bai Shao-yan,Lan Jing(Institute of M ateria M edica,Shandong Academy o f M edical Science,Ji'nan,250062)Abstract:Objective T o compare the contents of Flav onoids in different parts o f Chrysanthemum indicum L11Methods Chrysanthemum indicum L1in M eng shan of Shandong Prov ince w as selected1T he contents of Flavonoids were deter mined by spec-trophotometry1Results T he F lavonoids content in leaves is highest1Conclusion T he contents differed greatly in different parts of Chrysanthemum indicum L11Key words:Chrysanthemum indicum L1;Flavonoids;determination野菊花为菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L1)的干燥头状花序,具有清热解毒、疏风明目之功效,为常用中草药之一[1],野菊花的成分较为复杂,黄酮类成分是其主要有效成分[2]。
野菊花中黄酮类物质的提取和鉴定
野菊花中黄酮类物质的提取和鉴定蔡定建,柳茶花,钟鸿鸣,刘慧,毛林春(江西理工大学材料与化学工程学院,赣州341000)摘要:采用碱溶酸析法和微波间歇加热提取法,成功地提取了野菊花中黄酮类物质。
经HC l-锌粉反应和红外光谱鉴定,提取物为黄酮类物质。
同时,采用分光光度法,以芦丁标准品绘制标准曲线对野菊花中的总黄酮类物质进行了测定,其质量分数为21290m g/g。
并讨论了时间对测定方法的影响,结果表明,显色时间在40m i n内稳定。
此结果为进一步开发利用野菊花这一天然的宝贵资源以及野菊花与黄酮类物质药效功能的综合利用提供了科学依据。
关键词:野菊花;黄酮类物质;提取;测定中图分类号:TS20211文献标识码:A文章编号:1006-2513(2010)02-0143-05M easure ment fl a vone to extracti o n fro mchrysanthe mu m i n dicu m L.CA I D ing-jian,LIU Cha-hua,ZHONG H ong-m ing,LI U Hu,i MAO L in-chun (Depart m ent ofM aterial a nd Che m i s try,Jiangx iUniversity of Science and Techno l o gy,Ganzhou341000)Ab stract:So m e flavone c l ass substances were successf u lly extracted fro m w ild chrysant he m u m w it h a m ethod o f a l kali disso l u ti on-ac i d separation and m i crowave i nter m ittent hea ti ng,and the fl avone c lass substances w ere identifi ed through reacti ng w ith HC l-Zn powder.T he i r contents i n the w ild chrysanthemu m w ere m easured w ith a dispersi on of light lu m i no sity m ete r and a standard flavone.There got resu lts o f21290m g/g.M o reover,the effec t of ti m e on stab le m easur i ng w as discussed i n this paper,and the resu lt i ndicated that a s u itable co l o red ti m e is40m i n.T hese resu lts are expected to prov i de scien tific basis for furthe r developi ng m edic i nal effects o f t he precious na t ure source of chrysanthe-m u m.K ey w ords:chrysanthe m u m i nd i cu m L;flavone;ex tracti on;m easure m en t野菊花(Flos Chrysanthe m i I ndici),别名野黄菊花、苦薏、山菊花、甘菊花,为菊科植物野菊(Chrysanthe m um ind icu m L)的干燥头状花序,具有清热解毒,平肝降压的作用,用于治疗疮肿痛、头痛眩晕、咽喉肿痛等[1]。
总黄酮含量测定-比色法
总黄酮（Flavonoid）含量(铝盐显色法酶标仪96样)（一）检测原理：总黄酮，即黄酮类化合物，包括黄酮，黄酮醇，黄烷酮，橙酮，异黄酮，黄烷醇，花青素等，是植物重要的一类次生代谢产物，具有有较强的抗氧化活性，可捕捉活性氧自由基，降低氧化伤害，在果实中影响其色泽和风味；对植物的抗逆性（比如抗紫外）和抗病虫害方面有重要作用。
实验采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定黄酮总含量，即在碱性亚硝酸盐溶液中，黄酮类化合物与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定反应产物在510nm处的吸光值，即可计算样品中总黄酮含量。
（二）试剂组分与配制：试剂名称规格保存要求备注试剂一液体1.6m L×1支4℃保存试剂二液体3m L×1瓶4℃保存试剂三液体12m L×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存做标曲，则用到该试剂（三）所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、粉碎仪、筛子、60%乙醇、离心机、蒸馏水。
（四）总黄酮测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①组织样本：称取约0.1g新鲜样本(若水分充足，可增加样本取样质量)；或者称取约0.03g烘干样本（将样本在105℃下杀青3min，然后60℃烘干至恒重，粉碎，过40-60目筛，得到烘干样本），加入1.5mL的60%乙醇（若鲜样需研磨均质），60℃振荡提取2h（若蒸发用60%乙醇定容至1.5mL），25℃×12000rpm，离心10min，取上清待测。
【注】：若样本量较少，可同比例缩减样本量，如取0.02g干样，加入1mL60%乙醇，60℃振荡提取2h。
25℃×12000rpm，离心10min，取上清，用60%乙醇定容至1mL待测。
②液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：①酶标仪预热30min，调节波长至510nm。
HPLC测定野菊花药材中8种黄酮和有机酸的含量
HPLC测定野菊花药材中8种黄酮和有机酸的含量建立同时测定野菊花药材中绿原酸、咖啡酸、1，3-二咖啡酰奎宁酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3，4-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷及木犀草素等8 种成分含量的方法。
采用HPLC，Shim pack VP-ODS色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以甲醇（A）-0.3%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL·min-1；检测波长326 nm；柱温35 ℃。
8种成分在40 min 内均达到基线分离，线性关系良好（r>0.999 5，n=7）；平均回收率均在97.03%～102.3% （RSD1 材料Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；BP211D型电子天平（1/10万，德国Sartarius公司）；Milli-Q超纯水机（美国Millipore公司）；KQ-500E型医用数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；8453型紫外-可见分光光度计（美国Agilent公司）；中药粉碎机（瑞安市永历制药机械有限公司）。
对照品绿原酸（批号110753-200413）、咖啡酸（批号110885-200102）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（批号111720-200604）、蒙花苷（批号111528-200303）、木犀草素（批号111520-200201）均购自中国食品药品检定研究院。
对照品1，3-二咖啡酰奎宁酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸、3，4-二咖啡酰奎宁酸由本单位天然药物化学室分离得到，经HPLC峰面积归一化法测定其纯度大于98.0%；甲醇（色谱纯，天津四友精细化学品有限公司）、乙腈（色谱纯，TEDIA，USA），醋酸（分析纯，国药集团化学试剂公司）、磷酸（分析纯，上海苏懿化学试剂有限公司）。
5批野菊花药材分别购于南京医药合肥大药房连锁有限公司（批号20120806）、合肥国大药房（批号20110901）、合肥百姓缘大药房（批号20120301）、合肥北京同仁堂合肥药店（批号200007937）和合肥德康大药房（批号20120622），其产地分别为安徽、湖北、湖南、河北和山西，经安徽医科大学药学院中药学教研室张群林副教授鉴定为Ch. indicum的干燥頭状花序。
野菊花总黄酮的提取及萃取精制研究
2013 年6 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities June 2013 文章编号：1003-9015(2013)03-0393-06野菊花总黄酮的提取及萃取精制研究陈菡1, 罗能镇2, 沈剑1, 相咸高2, 何潮洪1, 徐义明2, 陈新志1(1. 浙江大学生物质化工教育部重点实验室, 浙江大学化学工程与生物工程学系, 浙江杭州310027;2. 中建安装工程有限公司, 江苏南京210046)摘要：用乙醇水溶液从野菊花中提取总黄酮，再用液-液萃取法进行萃取精制。
提取阶段考察了乙醇浓度、液固比、温度、提取时间和提取次数对提取得率的影响，萃取阶段则考察了萃取剂种类、原料液浓度、相比和萃取次数对萃取率和萃取物纯度的影响。
通过工艺优化，建立了一条从野菊花中提取总黄酮的工艺路线，即取40~50目的野菊花粉，加入70％的乙醇水溶液，液固比为20:1 mL⋅g−1，在60℃下搅拌回流提取1 h，将提取液蒸干得野菊花浸膏；将野菊花浸膏重新溶解制成15 g⋅L−1的水溶液作为原料液，加入水饱和的正丁醇作为萃取剂，相比为1，在25℃下振荡萃取1 h，萃取3次，所得萃取物的总黄酮纯度为32.4%。
在多次萃取时还发现，第2、3次萃取物的总黄酮纯度较高(大于60%)，可作为进一步分离提纯黄酮单体的原料。
关键词：野菊花；总黄酮；提取；萃取中图分类号：TQ028.32；TQ463.24 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-9015.2013.03.005Process for Leaching and Extracting Total Flavonoids from Buds of theChrysanthemum indicum LCHEN Han1, LUO Neng-zhen2, SHEN Jian1, XIANG Xian-gao2, HE Chao-hong1,XU Yi-ming2, CHEN Xin-zhi1(1. Key Laboratory of Biomass Chemical Engineering of Ministry of Education, Department of Chemical andBiological Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China;2. China Construction Installation Engineering Company Limited, Nanjing 210046, China)Abstract:In this study, ethanol-water solution was used to leach flavonoids from the flower buds of Chrysanthemum indicum L, and the crude leaching-out products were purified by liquid-liquid extraction. In the leaching process, the influences of ethanol concentration, ratio of solid to liquid, temperature, leaching time and leaching times on yield of the total flavonoids were investigated; while in the liquid-liquid extraction process, a suitable extractant was chosen and the influences of feed concentration, phase ratio and extraction times on the yield of the total flavonoids and purity were studied. It turns out that the suitable conditions are as follows: 1) leaching process: ethanol-water (7:3, v/v) as leaching solution, temperature of 60℃, ratio of solid to liquid of 20:1 mL⋅g−1, leaching time of 1 hour, leaching times of one; 2) extraction process: temperature of 25℃, extractant of water-saturated n-butanol, feed concentration of 15 g⋅L−1, phase ratio of 1 and extraction times of three. Under the above conditions, the purity of total flavonoids in the extract after liquid-liquid extraction is 32.4%. Furthermore, it was found that the purities of extracts obtained at the second and third times of extraction are higher than 60%, thus these extracts can be used as raw material for the further separation and purification of flavonoid monomer.Key words: Chrysanthemum indicum L; total flavonoids; leaching; extraction1前言野菊花是菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L)的干燥头状花序，为常用清热解毒中药。
野菊花不同部位总黄酮含量的比较
野菊花不同部位总黄酮含量的比较
白少岩;蓝静
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2005(024)006
【摘要】目的测定野菊花不同部位中总黄酮的含量.方法选用山东蒙山产野菊花,采用比色法进行测定.结果叶中总黄酮含量最高.结论野菊花不同部位中总黄酮的含量有较明显的差异.
【总页数】2页(P355-356)
【作者】白少岩;蓝静
【作者单位】山东省医学科学院药物研究所,济南,250062;山东省医学科学院药物研究所,济南,250062
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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[9] 周 炜,王国杰,韩正康.亚麻籽木脂素研究进展[J ].动物医学进展,2007,28(3):89294.[10] Sch ttner M ,Sp iteller G,Gansser D.L ignans interferingwith 5al pha 2dihydr otest oster one binding t o hu man sex hor mone 2binding gl obulin[J ].J Nat Pr od,1998,61(61):1192121.[11] 冯 耀,潘连军,夏欣一,等.植物雌激素大豆黄酮对大鼠前列腺生长发育及形态结构的影响[J ].生殖与避孕,2008,28(4):2102214.(收稿日期:2009207213) 文章编号:167322995(2009)0520268203・论 著・比色法测定野菊花中总黄酮含量冯东辉1,褚宏山1,曹露露1,王立明1,陈传千2,沈艳平3,冯 波43 (吉林医药学院:1.药学院2006药剂专业,2.药学院2007药剂专业,3.护理学院2007英护专业,4.药学院药分教研室,吉林吉林 132013)摘 要:目的 建立比色法测定野菊花中总黄酮含量的方法。
方法 以芦丁为对照品,采用Na NO 22A l (NO 3)32Na OH 显色,在508n m 波长处比色法测定不同显色条件下野菊花中总黄酮的吸光度。
结果 比色法测定的最佳条件:5%Na NO 225%A l (NO 3)324%Na OH;总黄酮的含量为2.29%,平均回收率为102.8%,RS D =2.60%。
结论 本方法稳定、准确,重复性好,灵敏度高,是用于比色法测定野菊花中总黄酮含量切实可行的方法。
关 键 词:野菊花;总黄酮;含量测定;比色法中图分类号:R927.2 文献标识码:AThe deter m i n ati on of fl avonoi ds content i n Chrys anthe mu m i n di cu m L.by colori m etryFENG Dong 2hui 1,CHU Hong 2shan 1,CAO Lu 2lu 1,WANG L i 2M ing 1,CHEN Chuan 2qian 2,SHEN Yan 2p ing 3,FE NG Bo 43 (J ilin Medical College:1.2006Student fr om Phar macy Depart m ent of Phar macy College,2.2007Student fr o m Phar macy Depart m ent of Phar macy College,3.2007Student fr om English Nursing Depart m ent of Nursing College, 4.Depart m ent of Phar maceutical Analysis,J ilin City,J ilin Pr ovince,132013,China )Abstract:O b j e c tive To establish the way of deter m ining flavonoids content in Chrysanthe mum indicum L.by col or 2i m etry .M e tho d s Compared with rutin,content of t otal flav onoids was deter m ined in the 508n m wavelength by col 2ori m etry and Na NO 22A l (NO 3)32Na OH was adop ted t o devel ope col or .R e su lts The op ti m al conditi on f or deter m i 2ning by col ori m etry was as foll ows:5%Na NO 225%A l (NO 3)324%Na OH;content of t otal flavonoids was 2.29%,the average recovery was 102.8%,RS D was 2.60%.Co nc lu s i o n The method was stable,accurate,rep r oducible,highly sensitive and thus was a realistic and p ractical app r oach for deter m ining flavonoids content in chrysanthe mu m by col or 2i m etry .Key words:Chrysanthe mum indicum;t otal flavonoids;deter m inati on;Col ori m etry 野菊花为菊科植物野菊(Chrysanthe mum indicum基金项目:吉林医药学院大学科研基金项目.通讯作者:冯 波(1966-),男(汉族),副教授,硕士.作者简介:冯东辉(1987-),男(汉族),在读本科.L.)的头状花序,其主要有效成分是总黄酮、挥发油等。
黄酮类化合物对心血管疾病、癌症、免疫系统疾病有显著的药理作用。
总黄酮含量测定一般采用比色法、高效液相色谱法等。
野菊花中总黄酮的含量测—862—第30卷 第5期2009年10月 吉 林 医 药 学 院 学 报Journal of J ilin Medical College Vol .30 No .5Oct .2009定经常采用以芦丁为对照品通过比色法进行测量,但《中国药典》[1]中野菊花项下没有规范其总黄酮成分含量测定方法,致使报道文献中出现多种不同的测定方法。
经查阅数个有关总黄酮含量测定的质量标准与相关文献[225],本试验结合实际分析比色法测定总黄酮含量的方法学考察要点,优选出测定含量的最佳条件,为野菊花中总黄酮及其他中药材中总黄酮含量测定方法建立提供参考。
1 仪器与试剂 岛津UV21700、UV21600型紫外2可见分光光度计;芦丁对照品(购自上海融禾医药科技发展有限公司,含量:99.56%;批号:080526);乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯;野菊花(经本院李景华博士鉴定)。
2 结 果2.1 溶液的制备2.1.1 对照品贮备液精确称取芦丁对照品0.0104g,置于50m l容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,制成浓度为208μg/ m l的溶液,作为对照品贮备液。
2.1.2 供试品溶液精密称取研细的野菊花乙醇回流提取物1.0004g,置于50m l容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,超声溶解10m in,摇匀,过滤,取滤液作为供试品溶液。
2.2 波长的选择 吸取对照品贮备液0.5m l,置于10m l容量瓶中,以Na NO22A l (NO3)3在碱性条件下显色,加60%乙醇至刻度,制成待测液。
以试剂为空白,将上述溶液在400～700n m波长范围内进行扫描。
结果表明,总黄酮在508n m波长处有最大吸收峰,故选定508nm为检测波长。
2.3 标准曲线绘制 精密吸取对照品贮备液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00m l分别置于10m l容量瓶中,分别加5% Na NO2溶液0.30m l,摇匀,静置6m in,然后加入10%A l(NO3)3溶液0.3m l,摇匀,静置6m in,再加4%Na OH溶液4.00m l,用60%乙醇溶液稀释到刻度,摇匀静置13m in,以试剂作空白,于508n m波长处分别测其吸光度。
以对照品浓度C(mg/m l)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程:A=10.401C+0.0197(r=0.9993),线性范围为104～1040μg。
2.4 显色条件优化 在供试品溶液显色过程中,有许多因素,如显色剂的种类、浓度与用量、显色温度、显色时间等,对测得的吸光度值都会有一定的影响,但各因素影响的程度不一,本试验主要考虑显色剂浓度,显色时间,显色温度,碱性溶液浓度。
2.4.1 显色剂浓度精密吸取供试品溶液0.5m l于10m l容量瓶中,按照“2.3标准曲线绘制”项下的方法,分别加入不同浓度A l(NO3)3,制成待测液。
以试剂为空白,在508nm波长处测定吸光度(结果见图1)。
结果表明,在不同显色剂浓度下测定吸光度差别明显,在5%A l(NO3)3条件下,测定的吸光度比较稳定。
2.4.2 显色时间,碱性溶液浓度,显色温度影响精密吸取供试品溶液0.5m l于10m l容量瓶中,照“2.3标准曲线绘制”项下的方法,制备待测液,依次考察显色时间,Na OH溶液浓度,显色温度对吸光度值的影响(结果见图2～4)。
结合图分析,供试品溶液在不同显色时间或不同Na OH浓度条件下测定的吸光度值差异明显。
分别在13m in、4%Na OH溶液显色条件下,测得的数据比较稳定。
供试品溶液在不同显色温度测定的吸光度差异不明显,从试验效率及成本等出发,显色温度选在室温条件下进行。
图1 A l(NO3)3浓度影响 图2 显色时间影响 图3 Na OH浓度影响 图4 显色温度影响—962—第5期 冯东辉,等.比色法测定野菊花中总黄酮含量2.5 重复性试验 取供试品溶液,分别于10、15、30、45、60、75m in 时在508n m波长处测定吸光度,结果供试品溶液的RS D=2.30%(n=6)。
2.6 精密度试验 精密吸取对照品贮备液5份,每份1.0m l,分别置于10m l容量瓶中,照“2.3标准曲线绘制”项下方法,制备待测溶液,在508n m处测定其吸光度。
结果RS D=1.81%(n=5)。
2.7 重现性试验 精密吸取供试品溶液1.0m l,置于10m l容量瓶中,照“2.3标准曲线绘制”项下方法,制备待测溶液。
用不同型号的仪器在508nm波长处测定其吸光度。
结果RS D=2.12%(n=5)。
2.8 加样回收率试验 精密吸取供试品溶液0.3m l,置于10m l容量瓶中,分别再加入不同量的芦丁对照品溶液(100μg/ m l),照“2.3标准曲线绘制”项下方法,制备待测溶液,在508n m处测定其吸光度,并计算回收率。
结果见表1。
表1 加样回收率试验结果本底量(μg)加入量(μg)测得量(μg)回收率(%)平均值(%)RS D(%)234.9100344.4109.6234.9100336.8101.9234.9100340.6105.8234.9200444.5104.8234.9200432.999.0102.8%2.60%234.9200438.7101.9234.9300529.198.1234.9300539.7101.6234.9300541.6102.22.9 不同产地野菊花中总黄酮含量 取不同产地野菊花乙醇回流提取物,按“2.1.2供试品溶液”方法,制备供试品溶液,照“2.3标准曲线绘制”项下方法,制备待测溶液,以试剂为空白,在508nm处测定其吸光度,并计算总黄酮含量。