沿海养殖场海水中致病性弧菌的调查研究
海水养殖贝类中四种常见微生物疾病研究概述
中国动物保健2022.02科研动态海水养殖贝类中四种常见微生物疾病研究概述倪妍，王梦轩，王丽君，贺君，曲江勇，王绪敏，刘秀梅*（烟台大学生命科学学院山东烟台264005）海水贝类养殖产业在海水养殖总产量中名列前茅。
在贝类养殖业不断发展的过程中，贝类常受到严重的病害影响，导致贝类养殖过程中发生大批的死亡，制约着贝类养殖业的发展。
在贝类的养殖中，常见的微生物疾病种类包括四类：细菌性、病毒性、真菌性、原核生物样微生物疾病。
本文分别对四类疾病中的典型疾病副溶血弧菌病、牡蛎疱疹病毒病、壳病以及立克次体样微生物导致的疾病进行介绍。
殖贝类；副溶血弧菌；牡蛎疱疹病毒；壳病；立克次体样微生物近年来，海水养殖贝类的规模逐渐扩大，但由各种微生物疾病所致的贝类死亡，每年都造成重大的经济损失。
据统计，2001年福建安海湾南岸滩涂养殖的贝类发生大面积死亡。
其中泥蚶的养殖面积约为37.5hm 2，但死亡面积却高达26.67hm 2[1]。
1995年，仅长海县海水养殖的各种贝类死亡，直接经济损失达1亿元人民币[2]。
1989年七月下旬至八月初，庄河海洋村滩涂文蛤发生大规模死亡，仅几日文蛤损失200～300t ，折合人民币150万～200万元[3]。
从现有资料可知，大多数养殖贝类死亡都是由微生物性病原体引起的，特别是一些长期存在的或呈周期性暴发的流行性疾病。
其中常见的微生物性疾病种类包括如下：细菌性、病毒性、真菌性和原核生物样微生物疾病。
1细菌性疾病———副溶血弧菌病副溶血弧菌病，作为养殖贝类中最常见的致病性弧菌病，其致病菌副溶血弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐无芽孢细菌，天然存在于沿海水域，是海产品携带细菌性疾病的主要来源，会导致养殖贝类的大批死亡，如：副溶血弧菌病导致广西沿海文蛤大规模死亡[4]；鲍鱼感染副溶血弧菌病时会出现萎凋综合征的症状（图1）[5]。
温度、盐度都会对副溶血弧菌产生影响，如：当温度在≤5℃时可以控制浙生牡蛎中副溶血弧菌的危害[6]；感染了副溶血弧菌的牡蛎分别被转移到高盐度和中等盐度中，发现与中等盐度相比，高盐度可使副溶血性弧菌在牡蛎中的总密度和致病性密度降低[7]。
秦皇岛沿海主要海产品副溶血性弧菌及其毒力基因的检测
况及毒力特征提供科学依据。
１ 材料方法
１． １ 材料 １． １． １ 样品采集 ２０１８ 年夏季（７ 月）、秋季（９ 月末）、冬季（１２ 月）和２０１９ 年春季（４ 月）分别在秦皇岛 的山海关区、海港区、北戴河区、昌黎县水产品市场采集当地主要鲜活海产品，包括鱼类、虾类、蟹类、贝类， 加冰带回实验室立即进行副溶血弧菌检测。共采集各类当地主要海产品１４９ 份，涉及鱼类１２ 种（鲈鱼、 蓝点马鲛、大黄鱼、银鲳、斑?、、六线鱼、半滑舌鳎、许氏平、斑尾复虎鱼、黑鲷、绿鳍鱼）、虾类４ 种（南美白对虾、日本对虾、脊尾白虾、口虾蛄）、蟹类２ 种（三疣梭子蟹、日本鑚）和贝类１１ 种（栉孔扇 贝、虾夷扇贝、海湾扇贝、长牡蛎、菲律宾蛤仔、中国蛤蜊、贻贝、皱纹盘鲍、缢蛏、毛蚶、美国硬壳蛤）。
： ＤＯＩ １０． ３９６９ ／ Ｊ． ＩＳＳＮ． １６７２７９８３． ２０１９． ０４． ００８
秦皇岛沿及海其主毒要力海基产因品的副检溶测血性弧菌
葛慕湘，张文香，任 海，高桂生，靳晓敏
（河北科技师范学院动物科技学院，河北秦皇岛，０６６６００）
摘要：为了解秦皇岛主要海产品副溶血弧菌污染状况及其毒力特征，依据国家标准ＧＢ ４７８９． — ７ ２０１３ 检测方
耐热直接溶血素（ ， ）、耐热直接相关溶血素（ ， ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅ ｄｉｒｅｃｔ ｈｅｍｏｌｙｓｉｎ ＴＤＨ
ＴＤＨｒｅｌａｔｅｄ ｈｅｍｏｌｙｓｉｎ
ＴＲＨ）和不耐热直接溶血素（ｔｈｅｒｍｏｌａｂｉｌｅ
， ），分别由 ， ， ｈｅｍｏｌｙｓｉｎ ＴＬＨ
ｔｄｈ ｔｒｈ ｔｌｈ
基因编码［８］。目前普遍认
基收金通稿项讯日目作期：者：２金河０，１项北女９目科，１副１（技教２项师１授；目范修。编学改主号院稿要：海收Ｃ研２洋到０究１科日８方４学期０向７研０：２：４０水究９１）９产专。１动项２物（１１项养目殖编及号病：害２０防１８控ＨＹ。００Ｅ１；ｍ２ａ０ｉｌ１：８ｐＨｉｇＹｅ０ｏｎ０３２１）９；＠河１北６３省． ｃ自ｏｍ然。科学基金青年科学基
华南地区海水养殖鱼类弧菌病
华南地区海水养殖鱼类弧菌病及其免疫学研究吴灶和叶剑敏李凌湛江海洋大学湛江524088摘要我国自二十世纪八十年代初期开展海水鱼类网箱养殖以来，由于高密度集约化养殖所带来的多种负因子影响，其病害种类、发病频率及其危害性亦逐年增加，其中弧菌病是海水鱼类养殖过程中主要病害之一，严重时死亡率可高达70—80％，甚至全部死亡，造成巨大的经济损失。
本文仪介绍华南地区海水养殖鱼类中几种主要的孤葱病和免疫学与防治研究的结果。
关键词海水养殖鱼弧菌病免疫防治一、南海养殖鱼类的主要弧菌病及其流行情况石斑鱼、笛鲷溃疡症由溶藻弧菌感染所引起，主要发生在养殖的赤点石斑鱼和红鳍笛绸，在鱼种阶段和养成阶段均有流行，但以10—15公分的鱼种最为敏感。
主要症状是外表皮肤出现大小不等的溃疡面，严重感染个体；溃疡可深达肌肉，内脏可见脾脏肿大，肝脏色泽偏淡，不论从体表溃疡部位或肝、脾、肾均能分离到病原菌。
该病在华南地区常年均有流行，死亡率在50％左右，最高可达90％。
宝石斑鱼烂鳍烂尾病由创伤弧菌引起，主要发生在青石斑鱼，主要症状是鳍条出现溃烂，特别是尾鳍，鳍条基部出血，突眼，眼睛水晶体混浊，内脏可见脾脏肿大。
该病在华南地区主要流行于5—10月，死亡率在50％左右。
真鲷溃疡症由最小弧菌感染引起。
发病初期的真鲷游动缓慢，游泳无力，经常游出水面，摄食量降低或不摄食；随着病程的加重，体表鳞片脱落，表皮溃疡严重时溃疡面深达肌肉。
内脏点状出血。
肝脏明显缺血，有的地方出现瘀血，呈花斑状。
该病主要危害真鲷鱼种阶段，50－100克鱼最易感染，死亡率在50％以上。
尖吻鲈弧菌病由河流弧菌生物I型所引起。
该病主要流行于低温季节，由于尖吻鲈为热带性鱼类，低温季节引起体表冻伤，继发细菌感染而致病。
症状是，体表出现溃疡，鳍条末端溃烂，游动迟钝。
该病一旦暴发，死亡率超过50%。
二、赤点石斑鱼溶藻弧菌脂多糖（LPS）研究分析结果表明：溶藻弧菌粗制脂多糖粗蛋白质占20.56％。
致病性灿烂弧菌的分离鉴定及药敏特性研究
１ 株致病 菌 Ｗ 一 １ 。 通过微量生化鉴定 管和 茵体 常规形 态特征 、 生理生化反应指标测定 以及 １ ６ Ｓ ｒ ＲＮＡ测序分析等进行 综合 鉴定 ； 再通过人 工感染健康 刺参测定 该菌株对 其的半数 致死量（ Ｌ Ｄ ） ； 最后进行 药敏 试验确 定其药敏特性 。【 结果】 致病 菌 ｗ一 １为革 兰氏阴性菌 ， 茵落呈米 色， 边缘光滑 ， 中间略有 隆起 。序列分析结果 显示 ， 该 菌株 与灿 烂弧茵的亲缘关 系最近 ， 相 似 率达 ９ ９ ． ８ ％， 综合鉴 定该茵为灿 烂弧 茵（ Ｖ ｉ ｂ ｒ ｉ ｏ ｓ ｐ ｌ ｅ ｎ ｄ ｉ ｄ ｕ ｓ ） 。该 茵对苯唑青 霉素 、 头孢氨苄 、 头孢唑 林、 头孢拉定 、 头孢 呋 新、 菌必治、 先锋 必素、 麦迪霉素、 氟哌 酸 、 环 丙沙星 、 万古霉素 、 痢特灵 、 丁胺 卡那、 庆 大霉素 、 强力霉 素、 氯 洁霉素等抗 生素 高度敏 感 ， 对氨 苄青霉素、 羧苄青霉素 、 氧哌嗪 青霉素 、 复达欣 、 新霉素、 四环素等 药物 中度敏 感。 【 结论】 该研 究对防治由灿 烂 弧 茵引起 的海水养殖动物疾病具有积极意义 。 关键词 ： 刺参 ；灿烂弧 茵；致病性 ；药敏特性 ；半数致死量
王淑娴 ， 于晓清 ， 魏 鉴腾 ｚ 一 ， 许 拉 ， 李 乐 ， 叶海斌 ， 李天保 ， 王 勇强
１ ．山东省海水养殖研 究所 病害防治重点实验 室， 山东 青岛 ２ ６ ６ ０ ０ ２ ；
２ ．中科院兰州化学物理研 究所 ， 甘肃 兰州 ７ ３ ０ ０ ０ ０ ；
３ ． 青岛市资源 化学与新材 料研究 中心， 山东 青岛 ２ ６ ６ １ ０ ０ 摘 要 ：［ 目的］ 分 离鉴定患病刺参（ Ａ ｐ ｏ ｓ ｔ ｉ ｃ ｈ ｏ ｐ ｓ ａ ｊ ａ ｐ ｏ ｎ ｉ ｃ ａ ｓ ） 的致病 茵 ， 并研究其 药敏特性。 ［ 方法】 从 患病 的刺参体 内分 离出
海产品中溶藻弧菌的筛选及其致病因子的研究
海产品中溶藻弧菌的筛选及其致病因子的研究彭喜春，张宁，冉艳红，桂博，陈龙（暨南大学理工学院食品科学与工程系，广东 广州 510632）摘要：溶藻弧菌能引起人类食物中毒。
溶血毒素、耐热性肠毒素（ST）和不耐热性肠毒素（LT）是致病性微生物中常见的致病因子。
本文对从扇贝、牡蛎、贻贝、沙虾、虾蛄等海产品中筛选的溶藻弧菌的种属和致病因子进行了研究，生化鉴定显示分离到的两株溶藻弧菌来源不同，基因测定显示它们同属于溶藻弧菌（V. alginolyticu s）；血琼脂平板法、兔小肠结扎法和乳鼠灌胃法显示来源不同的溶藻弧菌其产毒种类也不同，两株溶藻弧菌都能产生不耐热性肠毒素（LT）和耐热性肠毒素（ST），但只有1株能产生溶血毒素。
关键词：溶藻弧菌；HSP60基因；耐热性肠毒素；不耐热性肠毒素；溶血毒素中图分类号：Q935；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2008)04-0312-04Screening of Vibrio Alginolyticus in Sea Foods and theirPathogenic FactorsPENG Xi-chun, ZHANG Ning, RAN Y an-hong, GUI Bo, CHEN Long （Department of Food Science and Engineering, College of Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou510632, China）Abstract: Hemolysin, heat-stable eterotoxin (ST) and liable- heat enterotoxin (LT) were common pathogenic factors in pathogeinc microbes, such as Vibrio Alginolyticus. In this study, two strains of Vibrio Alginolyticu were screened from several kinds of sea foods and identified by different methods. Both of the two strains could produce LT and ST, one of which showed hemolysin activity. It was inferred that Vibrio alginolyticus from different sources could produce different toxins.Key words:Vibrio Alginolyticus; heat-stable enterotoxin; heat-liable enterotoxin; hemolysin.溶藻弧菌属专性嗜盐性弧菌是引起牙鲆和鳗鲡等许多名贵经济鱼类发生细菌性鱼病的致病菌之一，威胁着我国的水产养殖业发展，它的大面积发病会给发病区渔业和养殖业带来巨大的经济损失[1]。
溶藻弧菌对水产动物致病性及其防治的研究进展
ｕ０ ｄ
ｎ 。 ０ ｎ ， 。 等 嗯 染溶藻弧菌病的主要症状表现为 ： 。 表皮发生溃疡 、 出血 、 常有黑斑 ， 眼球 凸起 、
充 血 ， 部 充水 肿 胀 ， 腹 肾脏 发 白 ， 脏 肿 大 、 脾 常有 小 瘤 伴 生 ， 肝脏 充 血 、 伤 ； 损 平鲷 Ｒ ａｄ ｓｒｕ ａｂ、 状 ｈｂ ｏａｇｓ ｒａ鲵 ｓ 黄 姑鱼 Ｎｉ ｍｉｈｈｏｄｓ１３ ｂ ｉ ｔｉｉ ［２ 。 ｅ ２ ］ 染溶 藻 弧菌 后导 致溃 疡病 ， 染 初期 病 鱼体 色变 深 ， ￣等感 感 感染 组织 常 发生 充
ｍａ ｙ ｓ ｒｓｏ ｉ ｌ ｎ ｅ ｆ ｃｏ ｓ ｔ ａ ａ ｅ ｏ ｉ ｌ ｎ ｅ ｇ ｎ ｉ ｌ ｅ ｕ ｔｉ ｔ ａ ｈ ｇ ｎ ｃ ｔ ． ｈ ｓ ｔ ｄ ｅ ｆ ｎ ｏ ｔ ｆｖｒ ｅ ｃ ａ ｔ ｒ ｈ ｔｂ ｓ ｎ ｖ ｒ ｅ ｃ ｅ ｅ ｍａｎ ｙ ｒ ｓ ｌ ｎ ｉ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｉ Ｔ ｅ ｅ ｓｕ ｉｓ ｏ ｕ ｕ ｓ ｙ ｅｉ ｌｇ ， ａｈ ｇ ｎ ｓｓｍｅ ｈ ｎ ｓ ｐ ｏ ｈ ｘ ｓａ ｄ ｔｅ ｔ ｎ ｂ ｕ ａｇ ｎ ｌｔ ｕ ｒ ｕ ｕ ｎ ｔ ｉ ｒ ｖ ｅ ｔ ｏ ｙ ｐ ｔ ｏ ｅ ｅ ｉ ｃ ａ ｉｍ， ｒ ｐ ） ａ ｉ ｎ ａｍｅ ｔａ ｏ ｔＶ． ｌ ｉｏ ｙｉ ｓｗｅ ｅ ｓ ｍ ｐ ｉ ｈ ｓ ｅ ｉｗ． ｏ ｌ ｒ ｃ
文章 编号 ： ０ ８ ８ ０ （０ ２０ — ２ ６ ０ １０ — ３ Ｘ ２ １ ）３ ０ ５ — ９
・
综
述・
溶 藻 弧菌 对 水产 动 物 致病 性 及 其 防治 的研 究进 展
苑淑 宾 ， 朱爱意
（ 浙江海洋 学院海洋科学学院 ， 浙江舟山 ３６０ ） ０ ４ １
华南地区海水养殖水域中哈维氏弧菌的抗药性分析
华南地区海水养殖水域中哈维氏弧菌的抗药性分析刘开放;步君;章翔;谢珍玉【摘要】In the study,the resistance to antibiotic of Vibrio harveyi isolates collected from mariculture area in South China was investigated.The antibiotic resistance profiles of 41 strains were tested with 40 common antibiotics,and the antimicrobial susceptibility data were used to analyze correlations between antibiogram and subgroup types.41 V.ha rveyi were resistant to amikacin,the resistance rate of 40 kinds of antibiotics to the strain was 4.9％～ 100％,the multiple resistant rate of strains to 40 kinds of antibiotics was 27.5％～95.0％,among which there are 15 strains resistant to more than 30 antibiotics.41 V.harveyi strains formed 41 antibiogram types,the isolates originating fromSanya,Wenchang,Shenzhen,Lingao,Lingshui and Zhanjiang possessed 11,11,3,3,1,12 of the antibiogram types,respectively,and all shared the type AMO/AMP/DOX/PG/AZL/AK.The isolates in 2010,2011,2012,2013,and 2015 representative antibiogram types was 4,5,5,2,and 4,respectively.The strains clustered into seven subgroups (i ～ vi) when the Squared Euclidean was 2 and each subgroup contained 9,5,9,5,2,10,and 1 kinds of antibiogram types.The tolerance dose of subgroup v was the lowest,which included 11 species,the tolerance dose of subgroup vii was the highest,which included 19 species.When the Squared Euclidean was 8,the strains were clustered into Group Ⅰ and Group Ⅱ,and there were significant differences in the sensitivity of the eight antibiotics MID/RIF/RT/LEV/CIP/STP/ENR/CTC/NEO.Our results indicated that the V.harveyi strain isolates from Mariculture area in south China had serious multidrug resistance,the antibiogram of V.harveyi strains were difference,and the resistance patterns of different strains were also different.Clustering analysis is an effective method for these strains.%为了解和分析中国华南地区主要海水养殖水域中哈维氏弧菌的抗药性,本文研究了该地区海水养殖水域的41株哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)对40种常见抗生素的耐药性,并作了聚类分析,探讨了耐药性同菌株的时空分布关系.结果显示:41株菌均对阿米卡星耐药,其对40种抗生素的耐药率为4.9％～ 100％,所有菌株对40种抗生素的多重耐药比率在27.5％～ 95.0％之间,对30种以上抗生素耐药的菌株有15株;耐药谱型有41种,三亚、文昌、深圳、临高、陵水、湛江等地区的分离菌株分别含有11,11,3,3,1,12种耐药谱型,这5个地区的共同耐药谱为:莫/氨/强/青/咪/丁;2010年、2011年、2012年、2013年、2015年的分离株分别具有4,5,5,24,3种耐药谱型.于聚类分析中,在欧式距离的平方为2时,实验菌株可分为Ⅰ～Ⅶ7个亚群,分别含有9,5,9,5,2,10,1种耐药谱型,耐药量最少的是亚群V,共11种,最多的是亚群Ⅶ,共19种;在欧式距离的平方为8时,菌株可聚类为Group Ⅰ、Group Ⅱ两个组群,这两个组群的菌株对麦/利/罗/左/环/壮/恩/吩/新9种抗生素的敏感性存在明显差异,Group Ⅰ菌株的耐药种类明显多于Group Ⅱ菌株的耐药种类,并且其耐药谱型更多.实验结果表明:中国华南地区海水养殖水域中的哈维氏弧菌具有严重的多重耐药性,哈维氏弧菌分离株的耐药谱型多样性,对于来源不同的菌株,其耐药谱型存在差异,耐药性聚类分析方法是对这些菌株的一种有效分型手段.【期刊名称】《海南大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(035)002【总页数】9页(P131-139)【关键词】哈维氏弧菌;海水养殖;耐药性;耐药谱;聚类分析【作者】刘开放;步君;章翔;谢珍玉【作者单位】海南大学海洋学院,海南省热带水生生物技术重点实验室,南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海洋学院,海南省热带水生生物技术重点实验室,南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海洋学院,海南省热带水生生物技术重点实验室,南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海洋学院,海南省热带水生生物技术重点实验室,南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228【正文语种】中文【中图分类】S948哈维氏弧菌是一种发光的革兰氏阴性菌，它广泛分布于海洋环境中[1]，是引起水产动物细菌性疾病的主要病原菌[2-4]，常给海水养殖业造成巨大的经济损失.目前，我国水产养殖业给药的合理性欠缺，存在抗生素滥用的现象[5]，这很可能导致养殖环境中产生多重抗药性的哈维氏弧菌菌株.邓传燕等[6]从患病的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) 中筛选出了哈维氏弧菌的耐药谱：庆大霉素/四环素/氯霉素/呋喃唑酮/阿莫西林/恩诺沙星；王春艳等[7]研究了分离自环境中的哈维氏弧菌的耐药谱：先锋必素/先锋霉素Ⅳ/先锋霉素Ⅵ/美福仙/萘啶酸；Raissy等[8]从海产品中筛选出了哈维氏弧菌的主要耐药谱：多西环素/氨苄西林/青霉素/庆大霉素/环丙沙星/诺氟沙星/阿米卡星；耿玉静等[9]对广东省分离出的哈维氏弧菌的耐药性进行了试验，并得出：54株受试菌中，77.8%的菌株具有耐药性，且主要表现为多重耐药(耐药率为68.5%)；可见，以上不同来源的哈维氏弧菌具有丰富的耐药谱.鉴此，本研究测定了分离自我国华南地区海水养殖环境中的41株哈维氏弧菌的耐药性，分析了菌株的耐药谱与其来源的相关性，并以抑菌圈直径为变量，对菌株的耐药谱进行了聚类分析，探讨了菌株耐药性之间的同类性关系, 旨在为该地区在防治因哈维氏弧菌引发的海水养殖动物细菌性疾病时提供参考.1.1 材料采自中国华南沿海地区海水养殖环境中的41株哈维氏弧菌，由本实验室分离、鉴定及保种，菌株的具体来源及分离日期见表1.1.2 试剂药敏纸片购自杭州滨和微生物试剂有限公司，40种抗生素及其含量见表11.3 方法1.3.1 菌株的药敏测定药敏实验是采用K-B琼脂法来进行，即每个平板贴6个药敏纸片，每种药敏纸片设2个重复.根据杭州滨和微生物试剂有限公司提供的标准来判断药敏实验的结果，同时根据药敏纸片抑菌圈的平均直径大小，将药物敏感性分为敏感(S)、中介(I)、耐药(R)三种.1.3.2 哈维氏弧菌的耐药谱分析以 S、I、R 对应记录菌株对抗生素的耐药情况,于是得到了菌株对所试抗生素的耐药谱，然后对全部耐药谱进行命名和归类，并统计其耐药率.1.3.3 基于耐药谱的哈维氏弧菌分型采用SPSS19.0软件对菌株耐药谱进行聚类分析,即以抑菌圈直径作为变量,并采用ward 聚类法.相关性以欧式距离的平方来表示,聚类分析结果则以树状图来显示[10].2.1 药敏结果 41株哈维氏弧菌对40种抗生素的药敏试验结果显示：全部菌株均对11种以上的抗生素耐药；对20种以上抗生素耐药的菌株有37株；对30种以上抗生素耐药的菌株有15株，其中，三亚地区有3株，文昌有3株，临高有1株，湛江有8株，分别占本地区所分离菌株总数的27.3%，27.3%，33.3%和66.7%，而分离自文昌的13号菌株，其对抗生素的耐药高达38种.所有分离的菌株均对阿米卡星耐药，对青霉素G、阿洛西林、阿齐霉素、氨苄西林、强力霉素、乙酰螺旋霉素、罗红霉素、阿莫西林、头孢拉定耐药、麦迪霉素、头孢唑啉的耐药率在90%以上；对红霉素、头孢呋辛、卡那霉素的耐药率在80%以上；对妥布霉素、磺胺异恶唑、呋喃唑酮、头孢他啶、利福平、甲氧嘧啶的耐药率在70%以上；对四环素、大观霉素、庆大霉素的耐药率在60%以上；对恩诺沙星、头孢噻吩、链霉素、呱拉西林、环丙沙星、头孢克洛、新霉素的耐药率在50%以上；对左氟沙星和多粘菌素B的耐药率在40%以上；对诺氟沙星和头孢噻肟的耐药率在30%以上；对新生霉素和呋喃妥因的耐药率在20%以上；对头孢曲松和复方新诺明的耐药率在10%以上；仅2株菌对氯霉素耐药.哈维氏弧菌的耐药特性见表2、图1.2.2 基于耐药谱的菌株分型41株哈维氏弧菌以耐药谱聚类而得到的树状图见图2，当欧式距离的平方为1时,全部菌株聚类为13个种类；当欧式距离的平方为2时，全部菌株聚类为7个种类(Ⅰ～Ⅶ)；当欧式距离的平方为3时, 全部菌株聚类为5个种类；当欧式距离的平方为5时, 全部菌株聚类为4个种类；当欧式距离的平方为6时, 全部菌株聚类为3个种类；当欧式距离的平方为8时, 全部菌株聚类为2个种类(Group I，Group II)；当欧式距离的平方为25时, 全部菌株聚在一起.耐药谱型分为A—AO，共41种(见图2)，当欧式距离的平方为2时，Ⅰ～Ⅶ个亚群的菌株分别含有9,5,9,5,2,10,1种耐药谱型，分别占总耐药谱型的22%，12.2%,22%,12.2%,4.9%,24.4%,2.4%.Ⅰ亚群的耐药谱为丁/氨/青/咪/乙/阿/卡/麦/妥/罗/西/V/VI/氟/壮/恩/庆；Ⅱ亚群的耐药谱为丁/莫/氨/青/咪/乙/红/阿/卡/强/麦/妥/罗/西/V/VI/链；Ⅲ亚群的耐药谱为丁/莫/氨/青/咪/乙/阿/卡/强/麦/妥/罗/壮/四/吩/庆/他/欣；Ⅳ亚群的耐药谱为丁/莫/氨/青/咪/乙/阿/强/麦/利/妥/罗/西/VI/环/壮/恩/四/吩；Ⅴ亚群的耐药谱为丁/莫/氨/青/咪/卡/强/妥/四/庆/新；Ⅵ亚群的耐药谱为丁/莫/氨/青/咪/乙/红/阿/罗/西/V/VI/欣；Ⅶ亚群的耐药谱为丁/乙/红/阿/卡/强/TMP/罗/痢/V/VI/ZIS/洛/壮/多/链/庆/欣/肟.耐药量最少是亚群Ⅴ，共11种，最多是亚群Ⅶ，共19种.欧式距离的平方为8时，Group I与Group II两个组群的菌株对麦/利/罗/左/环/壮/恩/吩/新9种抗生素的敏感性存在明显差异，如Group I的菌株对左的耐药率为67.9%，中介率为28.6%，敏感率为3.6%，而 Group II的菌株对左的耐药率分别为0，3.6%，92.3%；Group I菌株对新的耐药率为39.3%，中介率为53.6%，敏感率为7.1%，而Group II的菌株对新的耐药率分别为76.9%，23.1%，0.另外，Group I菌株的耐药种类明显多于Group II菌株的耐药种类，并且耐药型更多.3.1 哈维氏弧菌的耐药情况除基因突变外，耐药基因的水平转移，即携带抗性的可移动基因元件，如基因盒、转座子、质粒、噬菌体和整合子等在不同细菌之间的转移已成为细菌耐药性产生的主要因素[11].海洋环境是庞大的耐药基因库, 它不仅为耐药因子提供了储存场所，而且它是细菌间因相互接触而发生耐药基因转移的媒介[12].Stalin等[13]在研究印度东南沿海对虾养殖环境中哈维氏弧菌的耐药性后得出，全部株菌对氨苄青霉素、头孢克洛、庆大霉素、诺氟沙星耐药；Kong等[14]在研究分离自韩国海域的哈维氏弧菌的耐药性后得出，菌株对万古霉素、氨苄青霉素、头孢吡肟、头孢替坦、链霉素耐药；梅冰[15]等在研究海南网箱养殖的斜带石斑鱼的哈维氏弧菌的耐药性后得出，菌株对阿莫西林、阿洛西林、罗红霉素、麦迪霉素等抗菌药物耐药.由此可见,哈维氏弧菌的耐药谱不仅复杂多样，而且它还在不断地变化.在本实验中，药敏实验的结果表明，菌株对抗生素存在不同程度的耐药性，耐药率可在4.9%～100%之间，所有菌株均对11种以上的抗生素耐药，存在严重的多重耐药性，多重耐药比率在27.5%～95.0%之间，耐药谱型多达41种.在所测定的40种抗生素中，只有氯霉素的抑菌效果最好，菌株耐药率仅为4.9%，这可能与我国自2003年起禁止使用氯霉素有关，这也说明某一种药物在长期不使用后菌株对其的耐药性会下降，甚至消失[16].抗生素的频繁使用会加强细菌对其的耐药性[17]，这也提示：在养殖过程中抗生素的滥用是导致哈维氏弧菌耐药性增强和多重耐药的主要原因，因此，在防治我国华南地区因哈维氏弧菌引起的细菌性疾病时，应当在科学地开展药敏试验后才选择合适的防控药物，以防止抗生素的滥用.3.2 哈维弧菌耐药性的时空分布从分离的地区来看，三亚、文昌、深圳、临高、陵水、湛江分别含有11，11，3，3，1，12种耐药谱型.三亚、文昌地区的分离菌株均对氯霉素、新生霉素、复方新诺明、呋喃妥因较敏感；文昌、深圳地区的分离菌株均对大观霉素、头孢噻吩、复方新诺明、氯霉素、环丙沙星、诺氟沙星、左氟沙星、呋喃妥因较敏感；文昌、湛江地区的分离菌株均对复方新诺明、氯霉素、呋喃妥因较敏感.以上5个地区的分离菌株对大环内脂类、阿米卡星、青霉素、氨苄西林、阿莫西林、阿洛西林、乙酰螺旋霉素、罗红霉素、阿齐霉素、头孢拉定、强力霉素具有较高的耐药性，其共同的耐药谱为：莫/氨/强/青/咪/丁.苏杭等[18]在研究海南琼海养殖场的哈维氏弧菌分离株的耐药性后得出，菌株对利福平、强力霉素等耐药，而对复方新诺明、氯霉素、诺氟沙星等敏感；蒋魁等[19]在研究海南地区的哈维氏弧菌分离株后得出，菌株对头孢克肟、呋喃唑酮、阿莫西林、复方新诺明耐药，而广东地区的哈维氏弧菌则对复方新诺明、头孢克肟、利福平、四环素耐药.结合本实验的结果可以看出，在华南地区，哈维氏弧菌主要对氯霉素、复方新诺明、诺氟沙星敏感，对阿莫西林、青霉素、强力霉素、阿洛西林耐药.从分离的时间来看，2010年的分离株具有4种耐药谱型，其中多重耐药性最严重的菌株耐31种抗生素；2011年的分离株具有5种耐药谱型，其多重耐药性最严重的菌株耐34种抗生素；2012年的分离株具有5种耐药谱型，其多重耐药性最严重的菌株耐30种抗生素；2013年的分离株具有24种耐药谱型，对于多重耐药性最严重的菌株，其对抗生素具耐药性的高达38种；2015年的分离株具有3种耐药谱型，其多重耐药性最严重的菌株耐32种抗生素.进一步的研究发现，分离菌株对复方新诺明的耐药率随着时间的推移而依次递减，分别是50%，20%，20%，12.5%，0；对阿莫西林、氨苄西林、青霉素、阿洛西林、乙酰螺旋霉素、罗红霉素、阿齐霉素、阿米卡星的耐药率(91.7%～100%)非常高，；对呋喃妥因、复方新诺明、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率处于0～50%之间；只有2013年分离的菌株对氯霉素的耐药率为8.3%，其他4个年份的耐药率均为0.从宿主来看,对于分离自点带石斑鱼的菌株，其耐药谱型有14种、红鳍笛鲷的有13种、红鲔的有6种、金鲳的有4种；因此，分离自相同宿主的菌株，其耐药谱型多样，而分离自不同宿主的菌株，其耐药谱型则差异显著.但是，对于分离自不同宿主的菌株，其耐药谱也可能相似，如点带石斑鱼、红鳍笛鲷、金鲳的分离菌株，其耐药谱同为：莫/氨/青/咪/阿/丁；又如红鲔、棕点石斑鱼、东方鲀、篮子鱼的分离菌株，其共同的耐药谱为：强/乙/罗/红/阿/丁/西/V/VI. 刘迪[20]从凡纳滨对虾分离的10株哈维氏弧菌的耐药谱各不相同，王保坤等[21]从花鲈分离的哈维氏弧菌的耐药谱与Ramasamy等[22]从罗氏沼虾分离的哈维氏弧菌的耐药谱也不同；由此可见，分离自相同或不同宿主的哈维氏弧菌菌株具有多种耐药情况.综上可知，尽管哈维氏弧菌的耐药谱型复杂多样，但是仍可根据来源地的哈维氏弧菌和药敏实验来指导用药，如针对三亚地区由哈维氏弧菌所引发的海水养殖动物的细菌性疾病，可用新生霉素、复方新诺明、诺氟沙星来防治；对于文昌、陵水、深圳地区，则可用大观霉素、头孢噻吩、新生霉素、复方新诺明、诺氟沙星、左氟沙星、呋喃妥因防治；而对于临高、湛江地区，则可用呱拉西林、复方新诺明、呋喃妥因来防治.这种针对具体情况来用药的方式对今后防治哈维氏弧菌所引发的细菌性疾病有指导作用，可防止大量抗生素的滥用.3.3 哈维氏弧菌耐药谱的聚类分析聚类分析(cluster analysis)是针对一群总体分类未知的事物，将性质相近的事物归为同一类，而将性质相差较大的事物归为不同类，然后再根据相似系数将其逐步聚在一起的方法，它在生物医学中有着广泛的应用[23].本实验以40种抗生素的抑菌圈直径作为变量，将41株哈维氏弧菌聚类为7个亚群，2个组群.其中亚群Ⅰ具有9种耐药谱型，亚群Ⅱ含5种耐药谱型，亚群Ⅲ有9种耐药谱型，亚群Ⅳ具有5种耐药谱型，亚群Ⅴ具有2种耐药谱型，亚群Ⅵ具有10种耐药谱型，亚群Ⅶ具有1种耐药谱型.亚群Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ都有共同的耐药谱：丁/氨/青/咪/乙/阿/麦/罗，在欧式距离的平方为5时聚类为 Group I，亚群Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ在欧式距离的平方为8时聚类为 Group II.此外，Group I的耐药种类和耐药谱型数比Group II的耐药种类和耐药谱型数多，可见,Group I菌株间的耐药性相似度比Group II菌株间的耐药性相似度高.两个组群的菌株对麦/利/罗/左/环/壮/恩/吩/新9种抗生素的敏感性存在明显差异.利用SPSS19.0软件，以抑菌圈直径为变量，将菌株耐药性相近的聚为一类，这能很好地揭示菌株间的同类系关系.【相关文献】[1] Ramesh A, Venugopalan V K. 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海水养殖鱼类弧菌病的研究进展
第26卷第4期海洋水产研究Vol.26,N o.4 2005年8月M ARINE FISH ERIES RESEARCH Aug.,2005海水养殖鱼类弧菌病的研究进展杨少丽1,2王印庚2*董树刚1(1中国海洋大学,青岛266003)(2中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071)摘要综述了由鳗弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌等弧菌引起的海水养殖鱼类弧菌病的典型症状、病原学、病理、检测技术以及防治等方面的研究进展。
笔者对弧菌病的防治方法提出了一些有益的见解,另外对弧菌病的研究方向也进行了探讨和展望。
关键词海水养殖鱼病弧菌病检测技术防治中图分类号S941文献识别码A文章编号1000-7075(2005)04-0075-09Progress of research on vibriosis in marine cultured fishY A N G Shao-li1,2WA N G Y in-geng2*DON G Shu-gang1(1Ocean U niv ersity of China,Q ing dao266003)(2Y ellow Sea F isheries Research Inst itute,Chinese A cademy of Fisher y Scienses,Qing dao266071)ABSTRAC T T he paper summarized the research progress on the t ypical symptom,et iology, pat hology,det ective technology,the prevention and treatment of vibriosis caused by more than 10vibrio strains such as Vibrio anguil larum,V.alginoly ticus,V.harvey i and V.sp lendi-dus.T he authors provided some valuable recommendation on the prevention and t reatment f or these vibriosises,and t he f urther research direct ion w as also discussed.KEY WORDS M aricult ure Fish disease Vibriosis DiagnosisPrevention and treatment弧菌是引起海水养殖鱼类细菌性疾病的最重要的病原菌之一。
我国海水养殖贝类弧菌病研究进展
我国海水养殖贝类弧菌病研究进展时间:2009-07-02 10:31:00 来源:食品商务网山东省水产养殖病害防治中心：摘要：综述了弧菌的致病机理，对我国主要养殖贝类的危害以及对其检测方法的进展，提出了养殖贝类弧菌病的一系列防治措施，另外对贝类弧菌病的研究方向也进行了探讨和展望。
关键词：养殖贝类；弧菌；弧菌病；致病机理；防治技术弧菌是海洋环境中最常见的细菌类群之一，广泛分布于近岸、河口海区的海水和生物体中，其致病性受宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素的影响较大，是一类条件致病菌。
弧菌是海水养殖动物的主要病原菌之一，早在1970年TUBIASH等fl1就证实弧菌是长牡蛎Crassostrea gigas和欧洲扁牡蛎Ostrea lurida幼体坏死性疾病的病原，随后，BROWN和LOSEE也发现弧菌可以诱导美洲牡蛎Crassostren virgtnica的幼体发病。
迄今作为海水养殖动物弧菌病病原菌已被报道过的有2O多种，危害的对象包括鱼类，甲壳类和贝类动物，给我国的海水养殖事业带来了很大的损失。
从现有资料可知，我国养殖贝类因微生物疾病导致死亡而造成的经济损失每年达到(20～30)亿元。
而弧菌是引起贝类死亡的一类重要的病原微生物，主要危害鲍，扇贝，蛤，牡蛎等。
因此，预防与控制养殖贝类弧菌病的发生，加强弧菌病的研究，对贝类养殖业可持续发展具有重要的意义。
本文综述了弧菌的致病机理，对我国主要养殖贝类的危害及对弧菌疴陕速检测方法的研究进展，并提出养殖贝类弧菌病的一系列防治措施。
1 弧菌的致病机理与其他病原菌一样，弧菌的致病性取决于弧菌与宿主细胞间的相互作用，致病过程也包括黏附、侵袭、体内增殖、产生毒素及宿主死亡等系列过程，ELSTON和LEIBOVITZ通过研究美洲牡蛎幼体弧菌病证实了这种致病过程，在长牡蛎、欧洲扁牡蛎、硬壳蛤Mercenaria mercenaria的许多研究也都证实了类似的疾病发展过程。
海水养殖动物弧菌病防治的研究进展
弧菌 是 海 洋 环 境 中 最 常 见 的 细 菌 类 群 之 一 ， 泛 分 布 于 近 岸 、 口海 区 的海 水 和 生 物 体 广 河
中 ， 致 病 性 受 宿 主 的生 理 状 态 及 水 质 环 境 条 件 等 综 合 因 素 的影 响 较 大 ， 一 类 条 件 致 病 菌 ． 其 是 近年来 ， 由于 养 殖 水 域 生 态 变 化 。 菌 已成 为海 水 养 殖 动 物 的 主 要 病 原 菌 之 一 ． 今 作 为 海 水 弧 迄 养殖 动物 弧 菌 病 病 原 菌 已 被 报 道 过 的 有 ２ ０多 种 ， 害 的 对 象 包 括 香 鱼 （ ｌｃｇｏｓｓａｔ ｅ 危 Ｐｅｏｌｓｕ ｌｉ — ｖ ｚ 、 颈愈 额 鲷 （ ｐ ｒ ｓ ｕ ａａ） 鳗 鲡 （ ｇ ｉａｊｐ ｎｃ 、 鱼 （ ａｃａ ｈｎ ｓ ｌｍｂｕ ） ） 隆 Ｓ ａ ｕ ｎ ｔ 、 ａ Ａｎ ｕｌ ａ ｏ ｉ ｌ ａ） 鲨 Ｃ ｒｈ ｒｉｕ ｕ ｅｓ 、 ｐ 鲑 鳟 鱼 （ ａｍ ｎｄ ｅ 、 鱼 （ ｉａａ ｓ ． 、 鲷 （ ａ ｒｓｍｕ ｊｒ 、 鱼 （ ｚ ａｍａｏｈｉ Ｓ ｌ ｏ ｉａ ） 鳕 Ｃｌ ｔ ｐ ）真 ｉ Ｐ ｇ ｏｏ ｓｍａｏ ） 梭 Ｌｉ ｈｅ ｔｃｅ一 ａ ）石 斑 鱼 （ ｐｎｐ ｅｕ ｐ ）东 方 纯 （ ｕ ｕ ｓ ． 、 鲆 （ ａａｉ ｔｙ ｌｖｃｕ ） 鲈 鱼 （ ａｅ— 、 Ｅ ｉｅｈｌｓｓ ． 、 Ｆ ｇ ｐ ）牙 Ｐ ｒｌｈｈ ｓ ｉａｅｓ 、 ｃ ｏ Ｌｔ ｏ
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第２ １卷
第 ３期
台 湾 海 峡 Ｖｏ ． 。 Ｎｏ． １ ２１ ３
Ａｕ ． ０ ２ ｇ ，２ ０
２０ ０ ２年 ８月
Ｊ ＯＵ ＲＮＡＬ ＯＦ Ｏ ＣＥＡＮｏ ＧＲＡＰ玛ｆ Ｙ Ｉ Ｎ ＴＡＩ ＡＮ Ｓ Ｗ ＴＲＡＩ Ｔ
海蜇养殖池塘中弧菌病的防治
海蜇养殖业已成为我国辽东沿海地区支柱产业之一，随着养殖业的逐年发展，病害越来越多，弧菌病即是其中常见病害之一，可以说是海蜇养殖业绕不开的一个问题，要想养好海蜇，必须会处理弧菌。
笔者在多年的生产实践中，对如何防治海蜇弧菌病总结了几点经验，介绍如下。
一、病源1.外源海水生活排污及池塘排污是海水污染及弧菌增多的主要原因，近年来，每年养殖中后期外源海水的弧菌量都明显超标，并有逐年提早的趋势。
另外，因全球气温变暖，海水温度持续上升，有研究发现，水温每上升1℃，弧菌的数量就会增加两倍。
通过这些年的海蜇养殖也看出一个问题，就是只要该年雨量充沛，海蜇混养池塘就会取得较好收成，反之，该年雨量较少甚至干旱，海蜇混养池塘就会歉收。
原因就是雨水多，一是降低了温度，二是降低了外源水的污染，净化了水质。
2.腐败底质腐败的底质是弧菌滋生的温床和天然的培养基。
在海蜇混养池塘的中后期，随着投饵量和养殖生物排泄物的增加，池底败坏较为常见，弧菌含量非常高。
对海蜇池塘不同水深分别取样进行弧菌检测，会发现越靠近底部弧菌数量越多，上下层弧菌数量相差甚至有几十倍。
3.冰鲜饵料冰鲜鱼虾中含有大量包括弧菌在内的各种细菌，对其做弧菌检测，结果发现弧菌大幅超标。
二、弧菌与环境的关系外观相似的池水，弧菌数量不一定一样，弧菌数量多少并不影响水色与透明度。
一般而言，水清的塘比水混的塘弧菌数量要少，主要是水清的塘溶氧相对较高，影响弧菌的繁殖，因为弧菌多为厌氧菌。
弧菌适应温度10～35℃，最适25℃左右；长期阴雨天气是弧菌滋生最快的时期，溶氧低以及底质腐败最适合弧菌滋生。
三、危害弧菌超标对海蜇的危害主要是在发病的初期，海蜇伞径边缘出现溃烂，不够伸展，即“烂边”。
有的海蜇须子出现打绺，有的头部先出现溃烂。
头部溃烂与外伤是有区别的，溃烂部位是褶皱的，外伤部位界限清楚，两者不可混淆。
在发病严重时期，海蜇头部会出现孔洞，即“打眼”；有的出现掉须，此时的海蜇几乎失去蜇人功能。
我国沿海致病性弧菌调查及抗生素敏感性分析
我国沿海致病性弧菌调查及抗生素敏感性分析韩善桥;马聪;虞积耀;段蕴铀;田光;郭勇;姜福亭;李锦华;王晓东【期刊名称】《解放军检验医学杂志》【年(卷),期】2003(002)001【摘要】目的了解我国福建沿海海水中致病性弧菌的分布情况及对21种抗生素的敏感性.方法海水经增培养、细菌分离、进行细菌鉴定及药物敏感性试验.结果102份海水共分离出弧菌科细菌3属17种159株,其中弧菌属142结果显示,157株致病性弧菌对亚胺增南、耐替米星、左氧沙星及头孢哌酮/舒巴四环素、氯霉素、替卡西林/克拉维酸的敏感率为90.45%～97.45%,对头孢唑啉和氨苄西林的敏感率为25.48%～27.39%.结论此项研究对海水中弧菌所致疾病的预防、诊断和治疗都具有重要指导意义.【总页数】2页(P19-20)【作者】韩善桥;马聪;虞积耀;段蕴铀;田光;郭勇;姜福亭;李锦华;王晓东【作者单位】海军总医院检验科,北京,100037;海军总医院检验科,北京,100037;海军总医院病理科,北京,100037;海军总医院呼吸科,北京,100037;海军总医院训练科,北京,100037;海军总医院科研科,北京,100037;海军总医院普外科,北京,100037;南京军医学院;海军福建基地37726部队医院【正文语种】中文【中图分类】R82【相关文献】1.我国沿海地区海水致病性弧菌的调查现状 [J], 韩善桥;马聪;陆晓白;郝秀红2.我国沿海地区海水中致病性弧菌的调查 [J], 韩善桥;马骢;陆晓白;郝秀红3.黄岩椒江二市沿海地区致病性弧菌的调查实验报告 [J], 徐达明;黄普元;谢艳斐4.海军东海某部沿海营区环境致病性弧菌的流行病学调查 [J], 周云昌;吴玲解;张景隆;倪语星;杜源;仇海峰5.厦门海域优势致病性弧菌对抗生素敏感性调查研究 [J], 陈双红;巴剑波;徐雄利;武文斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鲍养殖水体中致病性弧菌的调查
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海水养殖中水产动物主要致病弧菌研究进展
海水养殖中水产动物主要致病弧菌研究进展王凤青;孙玉增;任利华;姜向阳;姜芳;崔艳梅;刘丽娟【摘要】随着海水养殖产业的发展和集约化养殖规模的不断扩大,海水养殖业中细菌性疾病的发病率越来越高.在导致养殖水产动物感染的病原菌中,致病性弧菌占有较高比例,这不仅给水产动物健康带来高风险,也给海水养殖产业造成严重的经济损失.文章针对中国常见的4种致病性弧菌:鳗弧菌(V.anguillarum)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)和溶藻胶弧菌(V.alginolyticus),分别从菌体形态结构、生物学特性、流行病学特征、致病机理及相关分子生物学研究现状5个方面展开陈述,并对其相关研究进行了展望,以期为水产养殖中弧菌性疾病的防治和监管工作提供参考.【期刊名称】《中国渔业质量与标准》【年(卷),期】2018(008)002【总页数】8页(P49-56)【关键词】海水养殖;致病性弧菌;致病机理;分子生物学【作者】王凤青;孙玉增;任利华;姜向阳;姜芳;崔艳梅;刘丽娟【作者单位】山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006;山东省海洋资源与环境研究院,山东省海洋生态修复重点实验室,山东烟台264006【正文语种】中文【中图分类】S91中国水产养殖产量占世界水产养殖总产量的65%[1]，为世界水产业的发展做出了重大的贡献。
2005—2015年，中国的海水养殖面积年均增长率为3.61%，海水养殖总产量年均增长率为3.25%[2]。
2012年～2014年南海海水养殖鱼类病原菌哈维弧菌分离株的耐药性分析
2012年～2014年南海海水养殖鱼类病原菌哈维弧菌分离株的耐药性分析蒋魁;徐力文;苏友禄;王雨;郭志勋;许海东;高芳;冯娟【摘要】哈维弧菌(Vibrio harveyi)是海水养殖鱼类主要的病原菌,给养殖业带来了巨大的损失.该研究采用K-B法对南海地区沿岸养殖鱼类90株哈维弧菌分离株进行抗生素耐药性分析,通过系统聚类法以平方Euclidean距离来分析菌株间的耐药性同类关系,探讨哈维弧菌耐药性的时空分布和耐药谱的多样性.结果显示,90株哈维弧菌共有耐药谱26种,谱型丰富度为28.9％.其中,多重耐药谱(耐3类及以上抗生素)21种,包含菌株共35株,占总菌株数的38.9％,谱型丰富度为80.8％.从时间分布上看,2012年、2013年和2014年分别具有10、18和8种耐药谱型;从地区分布上看,海南、广东和广西3个地区分别包含17、13和2种耐药谱型,时间与地区的耐药谱型差异明显.90株哈维弧菌样本聚类分析得到Group Ⅰ、GroupⅡ和其他组群,分别含有11、12和4种耐药谱,耐药谱型率分别为16.9％、57.1％和100％,而Group Ⅰ和GroupⅡ组群进而分为5个亚群i～v.结果表明,在广东、海南和广西地区养殖鱼类中所分离到的哈维弧菌耐药谱具有复杂多样性特征,随着时间年份的递增,哈维弧菌耐药谱种类也发生着更新变化,耐药谱不断扩大延伸.【期刊名称】《南方水产科学》【年(卷),期】2016(012)006【总页数】9页(P99-107)【关键词】哈维弧菌;耐药谱;聚类分析;海水鱼类【作者】蒋魁;徐力文;苏友禄;王雨;郭志勋;许海东;高芳;冯娟【作者单位】中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所热带水产研究开发中心,海南三亚572018;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院南海水产研究所,农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300【正文语种】中文【中图分类】S948哈维弧菌(Vibrio harveyi)为革兰氏阴性弧形短杆菌，极生单鞭毛，基因组DNA的G+C含量在46%～48%之间，菌体大小为0.44～1.38 μm，在3%NaCl的营养琼脂平板上形成的菌落呈圆形灰色，TCBS培养基上为黄色，对O/129敏感[1-2]。
海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析
海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析【摘要】目的了解我国东南沿海海水中致病性弧菌的分布情况及其对抗菌药物的敏感性。
方法用海水采样器采集海水，经增菌培养和细菌分离，进行细菌鉴定和抗菌药物敏感性试验。
结果从160份海水中分离出弧菌科细菌339株，其中弧菌属295株（87.0%）,气单胞菌属42株(12.4%),邻单胞菌属2株（0.6%）。
药敏试验结果显示，150株致病性弧菌对亚胺培南及头孢哌酮/舒巴坦的药物敏感率为100%，对头孢哌酮、复方磺胺甲噁唑、庆大霉素、奈替米星、头孢噻肟、头孢他啶和左氧氟沙星的药物敏感率在90.0%～98.7%，对头孢唑啉和氨苄西林的敏感率较差，仅为28.0%和30.0%。
结论海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析，对海洋弧菌所致疾病的预防、诊断和治疗都具有重要指导意义。
【关键词】海水；弧菌；抗菌药物；药敏试验An analysis of antimicrobial susceptibility and isolation of pathogenic vibrio in brine.Han Shan-qiao， Yu Ji-yao ， Jiang Tao and Wang Da-peng(Research Centre of Sea War Wound, Naval GeneralHospital,Beijing 100037)ABSTRACT Objective To investigate the distribution of pathogenic vibrio and antimicrobial susceptibility in brine of Southeast China Sea area. Methods Pathogenic vibrio from different regions of straits were cultured, separated and identified.Microbial sensitivity tests were performed with the Kirby-Bauer method. Results Among 339 bacteria strains isolated from brine, 295 strains (87.1%) were Vibrio, 42 strains (12.3%) were Aeromonas, 2 strains (0.6%) were Plesiomonas. The susceptibilities of the bacteria to 18 kinds of antibiotics were tested,the susceptibility rates to imipenem and cefoperazone/sulbactam were 100%,to cefoperazone，trimethoprim/sulfamethoxazole, gentamicin, netilmicin, cefotaxime, ceftazidime and levofloxacin were 90.0%～98.7%,tocefazolin and ampicillin were 28.0% and 30.0%. Conclusion This investigation will be of great significance for prevention and therapy of bacteria infection in brine.KEY WORDS Brine; Vibrio; Antimicrobialagent; Antimicrobial susceptibility test弧菌广泛分布于海水和海产品中，人们常常因接触海水或食入被弧菌污染的食物而引起感染。
海水鱼类主要弧菌鉴定和毒力基因检测的膜芯片技术的开题报告
海水鱼类主要弧菌鉴定和毒力基因检测的膜芯片技术的开题报告一、研究背景和意义海洋资源是人类非常重要的财富之一，海水养殖业尤其受到广泛关注。
然而，海水养殖业中常常会出现疾病暴发的问题，其中，细菌病是引起海水养殖业重大损失的一个重要原因。
主要弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是造成海水养殖业中贝类、虾类疾病的主要病原体之一，其引起的感染症状轻重不一，最严重的可导致病死率达到70%。
因此，对主要弧菌的快速准确检测和鉴定尤为重要。
传统的实验室检测方法主要依赖于细菌培养和鉴定技术，该方法需要较长时间来获得准确的结果，同时还存在一定的误差和局限性。
因此，基于膜芯片技术的细菌检测方法在近年来得到了广泛的研究和应用。
目前，一些基于膜芯片技术的检测方法已经应用于主要弧菌的检测和鉴定中，因其具有检测快速、多重检测、对样品需求少等优点而备受关注。
本研究旨在建立基于膜芯片技术的主要弧菌鉴定和毒力基因检测的方法，提高主要弧菌的检测效率和准确性，为海水养殖业的健康发展提供有力的支持。
二、研究内容和方法1.制备膜芯片：根据主要弧菌的基因序列信息设计合适的探针，并将其固定在单层玻璃或硅芯片上，形成探针阵列。
2.样品处理：收集海水鱼类样品，并按照标准方法进行样品处理，包括DNA提取、纯化等步骤。
3.膜芯片检测：将提取的DNA样品与膜芯片中的探针阵列进行杂交反应，通过检测信号强度和位置，鉴定样品中主要弧菌的种类和毒力基因。
4.结果分析：将膜芯片检测结果与传统的细菌培养和鉴定结果进行比较和验证，评估膜芯片检测方法的准确性和可靠性。
三、预期结果和意义本研究将建立基于膜芯片技术的海水鱼类主要弧菌鉴定和毒力基因检测的方法，预计可快速准确地检测出主要弧菌的种类和毒力基因，为海水养殖业中的疾病监测和控制提供有力的支持。
该方法具有检测快速、高通量、对样品需求少、自动化程度高等优点，可用于监测不同规模的海水养殖场的主要弧菌感染情况，以及对疾病进行有效的预防和控制。
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[作者简介] 何剑锋(1976-)男,大专,主管技师,主要从事微生物检验工作。
=调查报告>沿海养殖场海水中致病性弧菌的调查研究何剑锋(浙江省平阳县疾病预防控制中心,浙江平阳 325400)[摘要] 目的:了解养殖海水中致病性弧菌的分布情况。
方法:采集养殖海水,进行致病性弧菌的鉴定和药物敏感试验。
结果:从18份水样中检出致病性弧菌34株。
结论:对养殖场海水进行致病性弧菌调查,对人和养殖生物的疾病防治具有重要意义。
[关键词] 养殖海水;致病性弧菌;调查[中图分类号] R 378.3 [文献标识码] B [文章编号] 1004-8685(2010)11-2998-02Investigation of Pathogenic Vibrio in coastal farm seawaterH E J i an -feng(P i ngyang center f o r D isease Contro l and P reventi on ,P i ngyang 325400,Chi na)[Abstract] O b jec ti ve :To i nvesti gate the d i str i bu tion of Pa t hogenic V ibrio i n coasta l far m seawa ter .M ethods :Coasta l far m sea w ate r w ere co ll ected for identifi cation and drug sensiti v ity tests o f P at hog enic Vibr i o .R esu lts :34stra i ns Pathog enic Vibr i o w ere detec ted from 18w ater spec i m ens .Conc l u sion :T h i s investi gation w ill be o f i m po rtan t s i gnificance for d i sease contro l of hu -m an and bio l og i ca.l [K ey words] Sea w ate r ;Pathogenic V ibrios ;Investi g ati on 致病性弧菌广泛分布于江水、海水以及江海水产品中,不仅会引起人类的肠道感染性腹泻和食物中毒,还会引起养殖鱼类、贝类、虾类的细菌性疾病,如溃疡病、肠炎、出血病等。
平阳县毗邻东海,海水养殖业属于传统行业,近年来发展颇快,为了解养殖海水中致病性弧菌的分布情况,我们于2008年8月份和9月份对平阳县三大养殖场的养殖海水进行了调查研究,现报告如下:1 材料与方法1.1 样品来源样品来源于平阳县三个沿海养殖场,分别用A 、B 、C 表示,每个养殖场各采集三个有代表性的水样,于8月和9月各采集一次,共18份样品,其中8月份的气候较为稳定,未受台风和暴雨侵袭,可视为常态下的水样;9月份的采样日期为台风暴雨后的第一天,可以了解特殊天气情况和环境突变下的水样中微生态的变化。
1.2 方法1.2.1 耐热大肠菌群 根据G B /T 5750.12-2006生活饮用水标准检验方法,采用多管发酵法进行检测。
1.2.2 霍乱弧菌 450m l 水样加入50m l 10倍浓缩碱性胨水,调p H 值至8.4~9.2,加入青霉素和亚碲酸钾,37e 培养过夜,二次增菌,37e 培养6h ~8h ,接种4号琼脂,37e 培养18h~24h ,挑取可疑菌落鉴定。
1.2.3 致病性弧菌 25m l 水样加入225m l 碱性胨水37e 培养12h~18h ,接种TCBS 琼脂和MA C 琼脂,37e 培养18h~24h ,挑取可疑菌落鉴定。
1.2.4 药物敏感试验 根据W S /T 125-1999纸片法药物敏感试验标准,采用K -B 法。
2 结果2.1 所有水样均未检出霍乱弧菌,致病性弧菌的检出情况见表1。
表1 致病性弧菌检出情况水样8月份9月份A ¹副溶血性弧菌、溶藻弧菌、非O 1/O139霍乱弧菌豚鼠气单胞菌A º副溶血性弧菌、溶藻弧菌、麦氏弧菌副溶血性弧菌、溶藻弧菌A »溶藻弧菌、霍利斯弧菌副溶血性弧菌、非O1/O139霍乱弧菌B ¹副溶血性弧菌、拟态弧菌、霍利斯弧菌麦氏弧菌、非O1/O 139霍乱弧菌B º副溶血性弧菌、拟态弧菌嗜水气单胞菌B »副溶血性弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌豚鼠气单胞菌C ¹副溶血性弧菌、溶藻弧菌舒伯特气单胞菌C º副溶血性弧菌、溶藻弧菌温和气单胞菌C »非O1/O 139霍乱弧菌、河弧菌非O1/O139霍乱弧菌2.2 耐热大肠菌群检验结果见表2。
表2耐热大肠菌群结果(MPN/100m l)水样8月9月水样8月9月A¹<2<2B»<24Aº<24C¹<26A»<26Cº<2<2B¹<28C»<2<2Bº9142.3药物敏感试验对本次调查的优势菌,包括9株副溶血性弧菌,7株溶藻弧菌、5株非O1/O139霍乱弧菌进行药物敏感试验,发现对链霉素和氨苄青霉素有不同程度的耐药,对头孢类均敏感,见表3。
表321株致病性弧菌药物敏感试验结果抗菌药物副溶血性弧菌敏感中敏耐药溶藻弧菌敏感中敏耐药非O1/O139霍乱弧菌敏感中敏耐药环丙沙星900700500左氧氟沙星810700500庆大霉素900700500阿米卡星810700500链霉素621502410氨苄青霉素018025014复方新诺明810700500氯霉素801700410头孢噻肟900700500头孢他啶900700500头孢吡肟9007005002.4致病性检测对检出的2株嗜水气单胞菌依据GB/T18652-2002/致病性嗜水气单胞菌检验方法0进行脱脂奶平板试验,结果均为阳性。
对9株副溶血性弧菌进行神奈川试验,结果6株阴性,3株阳性。
3讨论本次调查共检出致病性弧菌34株,其中8月份22株,9月份12株;8月份以弧菌科细菌为主,仅检出一株气单胞菌,占4.5%,9月份检出5株气单胞菌,占42%;8月份水样中仅一份检出耐热大肠菌群,而9月份则有6分水样检出。
这显示两个月水样中的微生态发生了较大变化,应该是暴雨稀释海水以及陆地水流携带固有微生物进入养殖场,从而导致养殖海水中的菌群发生明显变化。
环境突变会使养殖场原有微生态平衡被打破,养殖生物受新菌群影响,很容易产生应激反应、疾病流行,给沿海养殖经济带来重大损失。
因此,做好台风暴雨后的养殖生物疾病防治工作显得尤为重要。
从8月份的检出情况看,副溶血性弧菌和溶藻弧菌是养殖海水中的主要菌群,这与韩善桥[1,2]、郑小宏[3]等的调查结果基本一致。
副溶血性弧菌是引起人类感染性腹泻和食物中毒的主要致病性弧菌,特别是在沿海地区,其检出率呈不断上升趋势。
溶藻弧菌是人和海洋动物共同感染的一种主要致病性弧菌,不仅可引起人类腹泻,也是海产鱼类危害最严重的一种主要病原菌。
可引起鱼体伤口感染、炎症反应和败血症等症状,发病率高,流行面广,造成经济损失巨大。
此次调查虽然未检出霍乱弧菌,但却检出5株非O1/O139霍乱弧菌,检出率达14.7%,显示我县养殖海水具备霍乱弧菌的生长繁殖条件,今后必须加强对养殖海水中霍乱弧菌的监测。
而非O1/ O139霍乱弧菌也是感染性腹泻的病原菌之一,我县也曾爆发过非O1/O139霍乱弧菌污染饮用水引发的疫情[4]。
近年来,由于环境污染日益严重,导致江海水富营养化程度上升,病原菌大量繁殖;同时由于海水养殖业的快速发展,盲目扩大规模和养殖品种,加快了海水微生态的破坏,导致养殖环境不断恶化。
这些原因不仅使养殖生物不断发生病害,而且随着养殖生物携带病原菌增多,引起人类致病性弧菌肠炎和食物中毒的危险性也在不断上升。
目前,对于水产品中致病性弧菌的调查研究较多[5~7],但对养殖水的弧菌研究则很少。
从此次调查结果来看,加强对养殖场海水的定期监测和自然灾害后的重点监测,不仅对养殖生物的疾病防治具有指导意义,减少由于致病性弧菌带来的经济损失;还可以从源头上发现和遏制由于水产品污染引发的感染性腹泻和食物中毒,为疾病控制工作做出贡献。
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