检验小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)的临床价值观察
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验(食品微生物学检验)
A.6.3 试验方法
从琼脂斜面上挑取培养物接种,于26 ℃±1 ℃ 培 养 18h~24h,观 察 结 果。鸟 氨 酸 脱 羧 酶 阳 性 者 由 于 产 碱 ,培 养 基 呈 紫 色 。 阴 性 者 无 碱 性 产 物 ,但 因 葡 萄 糖 产 酸 而 使 培 养 基 变 为 黄 色 。 对 照 管 为 黄 色 。
5
GB 4789.8—2016
A.3 改良 Y 培养基
A.3.1 成分
蛋白胨 氯化钠 乳糖 草酸钠 去氧胆酸钠 三号胆盐 丙酮酸钠 孟加拉红 水解酪蛋白 琼脂 蒸馏水
15.0g 5.0g 10.0g 2.0g 6.0g 5.0g 2.0g 40.0 mg 5.0g 17.0g 1000 mL
A.3.2 制法
1
4 检验程序 小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森 氏 菌 检 验 程 序 见 图 1。
GB 4789.8—2016
图1 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序
5 操作步骤
5.1 增菌 以无菌操作取25g(或25 mL)样品放入含有225 mL 改良磷酸盐缓冲液增菌液的无菌均质杯或均
质袋内,以8000r/min均质1 min或拍击式均质器均质1 min。液体样品或粉末状样品,应振荡混匀。 均质后于26 ℃±1 ℃增菌48h~72h。增菌时间长短可根据对样品污染程度的估计来确定。 5.2 碱处理
2.0g
甘露醇
20.0g
氯化钠
1.0g
去氧胆酸钠
2.0g
硫酸镁
0.01g
琼脂
12.0g
蒸馏水
950 mL
校正 pH 至7.5±0.1,将基础培养基于121 ℃高压灭菌15 min,备用。
A.2.2 Irgasan(二 氯 苯 氧 氯 酚 ):可 用 95% 的 乙 醇 作 溶 剂,溶 解 二 苯 醚,配 成 0.4% 的 溶 液 来 替 代
腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏茵检验的价值分析
氏菌 的检 出率 ，分析此类患者的临床特 征 ，报告如下 。
１ 资料 与 方 法
１ ． ３ 统计学处理 所得数据采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ７ ． ０统计学软件进行处理 ，计数 资料采 用 检验 ，Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５为差异有统计学意义 ．
２ 结 果
以反应前后的荧 光差值作为衡量标准。 培养法 ：粪便经过 １ ８ ｈ （ １ ６℃ ） 培养后 ，取 ５ ｌ 接种刮 Ｃ Ｉ Ｎ 平板上 ，冉进 行 ２ ４ ｈ培养 ｆ ２ ５℃ ） ，挑取 可疑菌落进行培 养后 ， 再初筛 ，并 与标准菌株 作为 阳性对 照 根据初筛结果 和生化试
例（ ％）
Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ：培养 １ ８ ｈ （ １ ６℃ ） 后取 ２ ０ ０ ｔ ｘ ｌ 混 合 物进 行 Ｄ Ｎ Ａ 提取 。扩 增产 物 长度为 １ ５ ４ ｂ ｐ ，反应 体 系包括 反应 预？ 昆合液 、
引物 、探针 、Ｂ Ｓ Ａ、模板 ，在 ９ ５℃下进行 反应 ，并设立对照组 。
性状改 变。
２ ． １ Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ及培养方法对小肠结肠炎耶尔 森氏菌 的检验ｘ 寸 比 １ ３ ０ ０例患者 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ共检 ｉ ｆ ； 耶 尔森 氏菌肠 炎 １ ０ １ 例 ，比培 养法检出率更高 ，差 异有统计学意 义 ｆ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） ，详见表 １ 。
小 肠结肠 炎耶尔森 氏 菌是在 ２ ０世纪 ８ ０年 代受到重视 的一 种肠 道传染疾病 ，在全世界 范围 内均有 发现 ，患者有严 重 的胃 肠 炎和腹泻 ，同时多伴有 呼吸道 、骨 骼 、胃肠道等疾 病 ，出现 败 血症 的概率较 高 … 。病 菌可能 由家畜 、家禽 、啮齿 动物 、爬 行 动物等传播 。本文研究对 比了 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ及培养方法对 耶尔森
小肠结肠炎耶尔森菌调查
小肠结肠炎耶尔森菌调查[摘要] 目的了解高密市食品中小肠结肠炎耶尔森菌及动物带菌情况。
方法2006-2010年采集家畜家禽粪便、冷冻食品共2097份，4℃冷增菌后用选择性培养基进行病原菌分离培养并作生化鉴定，将可疑菌株做进一步的血清学鉴定和生物分型及毒力检测。
结果2097份标本中分离出131株小肠结肠炎耶尔森菌，总的检出率为6.25﹪,其中O:3（携带毒力基因ail+、ystA+、rbfc+）和O:9血清型的检出率分别为0.76﹪和1.52﹪。
108株仅携带ystB基因（82.44﹪）；26株不携带任何基因（19.85﹪）。
131株小肠结肠炎耶尔森菌分布在3个生物型，其中生物1A型占74.80﹪;生物3型占1.52﹪;生物4型占0.76﹪。
结论本地区存在致病性小肠结肠炎耶尔森菌，有感染人和动物及引起食源性型疾病的可能，因此必须加大该菌的监测力度，以预防小肠结肠炎耶尔森菌病的感染流行。
[关键词] 小肠结肠炎耶尔森菌；血清分型；生物分型；毒力基因.小肠结肠炎耶尔森菌广泛分布于自然界，是能在冷藏温度下生长的少数几种肠道致病菌之一［1］，除引起胃肠道症状外，还可引起关节炎，结节性红斑及肠系膜淋巴炎等疾患，甚至引起败血症，造成死亡［2］。
本病以散发为主，但也呈暴发性流行，并有明显的地域性分布。
该菌还是重要的食源性致病菌，国内外均时有报道过油该菌引起的食物中毒，其原因都是食品污染小肠结肠炎耶尔森菌引起的［3，4］，2006-2010年间采集家畜家禽新鲜粪便及各种冷冻食品2097份进行该病原菌的分离鉴定、血清分型、生物分型毒力因子检测，目的是为了了解高密市食品中小肠结肠炎耶尔森菌和动物带菌情况，现将结果报告如下。
1 材料与方法1.1材料1.1.1标本来源参照《全国小肠结肠炎耶尔森菌监测方案》，采集宿主动物新鲜粪便、各种冷冻食品共计2097份。
1.1.2主要试剂小肠结肠炎耶尔森菌选择性培养基为美国Acumedia manufactures ,nsing,Michigan 48912 产品；改良磷酸盐缓冲液（PSB）及其他培养基均购自北京陆桥技术有限责任公司；所用抗生素及api 20 E生化条均为在有效期内。
粪便中分离出1株小肠结肠炎耶尔森菌
文 章 编 号 ： ６ ２９ ５ （ ０ ９ ０ ０ １０ｌ １ ７ ４ ５ ２ ０ ） 卜０ ６ －
血 小 板 计 数 结 果 的准 确 性 直 接 影 响 临 床 诊 断 和临 床 治 疗 ， 不 同于 其 他 血 液 细 胞 ， 小 板 本 身 是 一类 较脆 弱 易 破 坏 的 血 细 血
ｍ ｕｎ ｐ ｎ ｙ ｃ ｈａ ａｃｅ ｉａ ｉ ｏ ｐ ｄｉｔ ｉ ａｎ ａ ｏ ｈｅ ｏｔ ｐｉ ｃ ｒ ｔ ｒｚ ｔｏｎ ｆ ｅ ａ ｒｃ ｄ ｄｕｌ ｔ ｍ ｉ ｍ ａ ｌ ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｅ ａ ｕｔ ｍ ｙ ｌ ｉ ｌ ｕ ｍ ｉ （Ａ Ｍ Ｉ一 ｎｉ ｌｙ ｉｆ ｒ ｎ ｉｔ ｄ ｃ ｅ ｅ ｏｄ ｅ ｋｅ ａ
参 考 文 献
巨脾 、 中海 贫 血 收 人 普 通 外 科 ， 院 后 做 了血 红 蛋 白 电 泳 和 地 人
血 液 常 规 检 查 。 血 红 蛋 白 电 泳 结 果 为 ： 红 蛋 白 Ｈ（ Ｈ） 血 Ｈｂ
１． （ 常 为 ０ ） Ｈｂ 包 涵 体 ７ ． （ 常 为 ０ ５ ） 二 ３５ 正 ， Ｈ １５ 正 — ， 者结 果 显 示 明 显 增 高 ， Ａ ８ ．２ （ 常 为 ９ ．９ 一 Ｈｂ ３ 正 ４ ９ ． ％） 显 示 下 降 。 入 院 后 先 后 做 了 ５次 全 血 细 胞 分 析 ， 血 ７６ ， 其 小板 计 数 结 果 如 下 ， ０日 人 院 首 次 检 查 用 血 细 胞 计 数 仪 做 全 ２
显 微 镜 计 数 结 果 为 ８ × ｌ 。 Ｌ， 时将 全 血 标 本 涂 片 显微 镜 下 ７ Ｏ／ 同
仔猪粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检测
～
上 初筛下 来 的可疑 培养 物各挑 取一 接种 环 分别 接 种
１ ， ６ｇ 购于 青海地 方病 研究所 。
到 培 养 ２ ｈ ～
动 物 医 学 进 展 。 ０ ０ ３ （ ） １４ １ ６ ２ １ ，１ ７ ： １— １
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖ ｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｅ ｃｎｅ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎ ｒ ｄｉｉ
仔 猪 粪 便 中小 肠 结肠 炎 耶 尔 森 菌 的检 测
张 红 见 韩 志辉 潘 慧 霞 ， ，
氨酸 、 氨 酸 、 露 醇 、 甘 甘 山梨 醇 、 醇 、 糖 、 肌 蔗 鼠李糖 、
培 养物分 别 各接 种 到 ２管半 固体 培 养 基 中 ， 别 置 分 于 ２ ６℃和 ３ ７℃培养 ２ ４ｈ后 观察 结果 。
１ ２ ７ 涂 片 、 兰染 色与镜检 ．． 革
分 别挑 取 二次 复 筛
中图 分 类 号 ： ８ ２ ６ ２ ￥ ５ ． １ 文 献 标 识 码 ： Ｂ 文章 编 号 ： ０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ — １ ４０ １ ０ —０ ８ ２ １ ） ７ ０ １ — ３
小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森 菌
（ ｅｓｎａ Ｙ ｒｉｉ
在微 型振 荡器 （ＭＭ－ １型 ） 振 荡 ， ５ｒｉ／ ， 续 上 １ ｎ 次 连 ａ
碱 处理 液混 合 １ 。 ５Ｓ １ ２ ４ 细 菌 的分 离 将 上 述碱 处 理 后 的 增 菌 液 立 ．．
即分别划 线 于 Ｃ Ｎ一 、 良 Ｙ 培 养基 平 板 上 ， ６℃ Ｉ １改 ２
培 养 ４ ８ｈ后 观 察 菌 落 形 态 。
中国致病性小肠结肠炎耶尔森菌生物分型研究
摘 要 ： 目的 初 步 了解 我 国 致 病 性 小 肠 结 肠 炎 耶 尔森 菌 （ ３ （ ９血 清 型 菌株 的 生 物 型 分 布 ， ）： 、 ）： 掌握 我 国致 病 性小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森 菌 的生 物 学特 征 。方 法 用 文 献 报道 方 法 对 １ ８ —２ ０ ９ ６ ０ ８年 从 我 国不 同地 区 的腹 泻 病 人 、 禽 家 畜 、 类 、 品 、 家 鼠 食 环 境 等 各 类 宿 主 中分 离到 的 ４ ７株 致 病 性 小肠 结肠 炎 耶 尔 森 菌 进 行 生 物 分 型 。结 果 ２ ４ ７株 致 病 性 小 肠 结 肠 炎 耶 尔 森 中 ２ ３ ２ １
ｉ ： ３ ｅ ｏｔ ｅ ｏ ． ｎ ｅ ｏ ｏ ｉｉａ ａ ｏ ｙｐ ｎＯ ｓ ｒ ｙｐ ｆＹ ｅ ｔ ｒ ｃ ｌｔｃ ｎｄ ｂｉｔ ｅ ２ ｗａｓｔ ｏｍ ｉ ｔ ｎ Ｏ ： ９ ｓ ｒ ｔ ｅ Ｔ ｈ ｒ ｓｎ ｉ ｙｐ Ｂ ｎ Ｃｈｉ ｈｅｄ ｎａ ｅｉ ｅ ｏ ｙｐ ． ｅ ｅｉ ｏ ｂｏｔ ｅ １ ｉ ｎａ，ｗｈｉｈ ｃ ｉ ｆｅ ｅ ｒ ｍ ｈｅ ｄ ｓ ｒｂ ｉ ａｔ ｏｇ ｎｉ ． ｎ ｅ ｏ ｏｌｔｃ ｂ ｏ ｅ ｏｔ ｐｅ ｉ ｔ ｒ ｃ ｎｔ ｉｓ ｓｄｉｆ ｒ ｎｔｆ ｏ ｔ ｉ ｔｉ ｕｔｏｎ ｏｆｐ ｈ ｅ ｃＹ ｅ ｔ ｒ ｃ ｉｉａ ｉ ｓ ｒ ｙ ｎ ｏ ｈｅ ｏｕ ｒｅ ． ＫＥＹ ０ＲＤＳ ： Ｐａ ｈ ｅ ｃＹ ． ｎ ｅ ｏ ｏｌｔｃ Ｗ ｔ ｏｇ ｎｉ ｅ ｔ ｒ ｃ ｉｉａ；ｓ ｒ ｙ ｅ ｏｔ ｐｅ；ｂｉ ｙ ｏｔ ｐｅ
Ｓ ｕ ｆ Ｂｉ ｔ ｐｉ ｏ ｔ ｏ ｅ ｃ Ｙ． Ｐ． ｃ Ｚ ｆｃ ｔ ａ ｎｓ ｉ ｉ ｔ ｄｙ ｏ ｏ ｙ ｎｇ ｆ ｒ ｐａ ｈ ｇ ｎｉ Ｐ ， ｏ ｆＺ ｎ ｓ ｒ ｉ ｎ Ｃｈ ｎａ Ｄ
小肠结肠炎耶尔森菌
1B
2或3
1B 1B 1B
来源 绒鼠 野兔，山羊，大鼠，猴子 人，狗，猪 狗，猫，鼠 人 猪 人 人，猪，鸡肉 人，食物
人，狗，猪，猴子
狗，牛奶，猪，水
人 人，牛奶，注，饮水 人，猪 人，猪 人，猪 人，狗，毛，鼠 人 人，猴子，牛奶 人 人，猴子，牛奶，鼠
地理分布 欧洲、美国 欧洲、美国 欧洲，日本，北美和南美 南非，澳大利亚
咽喉 猪舌 其它
传播途径
人群传播 感染者的便、尿带菌可引起人群间的相互传染，同
时感染者的咽喉、舌、痰和气管分泌物等均带菌，因而不能排除 呼吸道传播可能。
食物传播：被认为是一种食源性病原菌，被污染的水源、奶制品
、肉类、水产品、蔬菜、水果等都可能作为经口感染的传播因子
动物传播：家畜和家禽的广泛感染和长期排菌，直接威胁着接触
我国耶尔森菌病呈现散发状态，部分地区有暴发流 行的报告
流行特征
小肠结肠炎耶尔森菌感染可分为散发与暴 发，但不同类型和规模的暴发似有增长趋
势。1972年3月日本静冈县初级中学发生一 次暴发流行，这是世界上大规模流行的最 早报告。日本是世界暴发流行最多的国家， 其次为美国，此外加拿大、芬兰、前苏联 等国也相继报告过不同类型和规模的暴发。 这些暴发流行多发生在学校和家庭等场所。
家畜类带菌情况
60% 50% 49%
40% 30.0%
30%
24.60%
20%
18.90%
10%
7.9% 7.50% 1.7%
0%
猪
牛
狗
其它
最高 最低
猪是人类的重要的传染源，理由是猪的感染率高， 猪与人类接触密切，故成为人类的传染源是很明 显的。
小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速分离、鉴定、分型及基础性研究
（． ２ ． ５ ） — ０ 的温度范围内， Ｔ． ６ ７ ７。 ３ ＂ ２ ４ 在４ Ｃ 它们的生长速率都随着温度的升 高而增加． 而在４ ＂ ５７ Ｃ到１．＂ Ｃ之间时， 耶氏菌０：４清型的生长速率大于耶 ３ 氏菌 ０：４ 清型 ， ｌ ．— Ｏ ９ 在 ５７ ３ ℃之 间时 ， 耶 氏菌０：４清型 的生 长速率 大 则 ９
１ 从南京市肉联厂屠宰场共采集猪扁桃体， ） 猪屠体 ， 地面污水 ， 砧板， 围裙等２２ ２份样 ， 检测了小肠结肠炎耶尔森 氏菌在上述样本中的污染状况， 并对分离到的菌株进行血清型、 生物型分布研究。
２采集农贸市场散装生鲜猪、 羊肉． ） 牛、 鲜鱼， 冷藏冷冻禽肉， 生禽肉
共９ 份检测该菌 ， ５ 并对检出的菌株进行进行血清和生化分型。 ３ 聚合酶链反应（ Ｒ） ＰＣ 技术对上述所有分离到的菌株进行ａｌ ｙｔ ｉ ｓ ， Ａ， ｙｔ ｙ ｄ ｓＢ， ａ Ａ，Ⅵｒ毒力基因检测， Ｆ 研究本地区该菌毒力基因主要分布特
２２ 创 新 点、 术意义及 应 用价值 学
７ 采南京市屠宰场猪扁桃体样４份 ， ） ０ 采用不同方法增菌及Ｓ ｓ，麦康 凯 ，Ｉ 等平板分别培养， ＣＮ， 对不同方法的检验结果进行比较。 ２ 主 要研 究 成 果 、 创新 点 、 术意 义 及应 用 价 值 学 ２ １ 主要 研究 成果 ． ２ １１ 首先 ， ．． 南京地区猪屠宰场来源的猪屠体、 猪扁桃体、 环境样本 中４肠结肠炎耶尔森氏菌总体血清型分布以Ｏ：、 ７８Ｏ：，０Ｏ： ，７ 、 ９Ｏ：，、 ６３ 、 ５２ 及Ｏ：为主。 ３ 其中， 血清型Ｏ：、 ５２ 仅从猪分离出， ３Ｏ：，７ 环境样中未能检出这 两种血清型。 血清型Ｏ：、 ７８Ｏ：，０ ９Ｏ：，、 ６３ 从猪和屠宰场环境样中均有检出。 其次， 猪来源的（ 猪屠体、 猪扁桃体） 本菌Ｏ：４清型的生物型以低致病ｌ ９ Ａ型 为主而非以３ 型为主，２ ２株猪来源的Ｏ：菌中有ｌ株为Ｉ ９ ９ Ａ型， 仅有３ 株为３ 型。 第三。 从猪屠体样 中检出ｌ 株生物４ 型Ｏ：菌， ３ 这在国内尚属首次报道 。 实验 结果提示可能本菌在本地 区致病性与在其它地 区有一定差异 。 本研究分离出的小肠结肠炎耶尔森氏菌的血清型共有ｌ ， ９ ２种 除０：、 Ｏ：， 、 ６ ３ 、 ５ ２及０：外 ， ７８０：，００：，７ ３ 还有 Ｏ：０ Ｏ：４ Ｏ１ ，９ Ｏｔ ，、 ２ 、 １ 、 １、 ６ ２ ， ９８ ０ ５ ０１ ，５０ ５ 种非致病血清型。 ２２ 、 ５等７ 另有７ 株菌与已有的全套因子血清均不凝 集。 提示本地区本菌的血清型分布范围广 ， 致病性比较复杂。
粪便中小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测方法的建立
小肠 结 肠炎 耶 尔森 菌 所致 疾 病在 世 界 上广 泛 分 布 ． 多 但
集 中在寒 冷 地 区 ， 我 国东北 地 区小 肠 结肠 炎 耶 尔 森菌 各 血 在 清型 的分 布 亦较 广 泛 。本 菌可 感畜 、 兽类 、 禽类 、 鸟类 和 昆虫 ， 并通 过 排 泄 物 和污 染 的水 、 食 品传 播 。
实验 室 。
１４操 作 ．
１． ． １增 菌 ４
取 １ｇ粪 便 接 种 于 ｌ 改 良 Ｐ Ｓ培 养 基 上 ，置 于 ４ ０ｍｌ Ｂ ℃
冷 增 菌 １ ～ ０ｄ ０ ２ 。在 冷 增 菌 的 第 ７ １ 、 １天 划 线 接 种 于 耶 尔 、４２
森 选择 性 平板 、 麦康 凯 平板 ，５ ２ ℃培养 ２ 。 菌管 内液 体 量 ４ｈ 增 较 大 ， 接种 前 应轻 轻 混匀 ， 在 再用 接 种 环挑 取 液体 ， 种 于 预 接
１ ． 鉴 定 ．３ ４
Ａ． 色 体源 毒 力基 因 染 Ａ１ａｌ是 黏 附侵 袭位 点 基 因 。 ｉ： 介导 小 肠 结肠 炎 耶尔 森 菌 的侵 袭 性 。 Ａ２ｙｔ 是小 肠 结 肠炎 耶 尔 森 菌耐 热 性肠 毒 素 Ａ基 因 ， ｓ Ａ： 编 码 致病 性 小肠 结 肠 炎耶 尔森 菌 分泌 的一种 耐 热 肠毒 素 ． 是 小 肠 结肠 炎 耶 尔森 菌致 泻 的 主要 原 因 。 Ａ３ｙｔ （ ｓＢ 主要 为生物 １ Ａ型 小肠结 肠炎耶 尔森 菌携带 的 ） ： 编 码 一 种 性 质类 似 于 ｙｔ 的 耐 热 性 肠 毒 素 ，ｓ ｓ Ａ ｙｔ Ｂ仅 存 在 于 生 物 １ 型 的 菌株 ， 且 在 这 个 生 物 型 中 ， Ａ 而 目前 证 实这 类 菌 株 通 常是 非致 病 性 菌株 。 究 报 道此 类 菌株 在腹 泻 患者 中能 研
腹泻仔貉检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ ｉｒｈ ａ ａ ｈ ｇ ｎｃｔ ｓａ ｄ ｅ ｅｉｐ ｎ ｙ Ａ；Ｙｅｓｎａ ｅ ｔｒｃ ｌｔｃ ：ｄａ ｒ ｅ ；ｐ ｔ ｏ ｅ ｉｉ ｉｌｎ ｓｇ ｎ ｒ ２ ａ ｄ ｆ ｕ ｙ ｒｉｉ ｎ ｅｏ ｏｉｉａ；ｙ ｕ ｇｒ ｃｏ ｎ ｄ ｇ ｏ ｎ ａ ｃ ｏ ｏ ｓ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ ： ｎｄ ｓ ａ ｈｅ ｍ ｅ ｈａ ｉ ｍ Ｔｏ ｕ ｅｒ ｔ ｎｄ ｔ ｃ ｎ ｓ ｏｆＥ． ｃ ｌ ａ ｅ ｄｉｒ ｈｅ ｎ ｏｕ ａ ｃ ｏｎ ｄｏ ， Ｈ ＰＩｐａ ｈｏ ｎ ｃｔ ｓａｎ ｏ ｉｃ ｕｓ ｄ ａ ｒ ａ ｉ ｙ ｎｇ ｒ ｃ ｏ ｇｓ ｔ ｇｅ ｉｉｙ ｉｌ ｄｓ
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
２ ２， ２ （ ） ０１ ８ ２ Ｃｈｉ ｅ ｅＪ ｒ ｌｏ ｏ ｓ ｓ ｎ ｓ ｎａ ｆ Ｚｏ ｎｏ ｅ ｏｕ １ ９ ７
文 章 编 号 ： ０ ２ ６ ４ ２ １ ） ２ １９ ４ １ ０ —２ ９ （ ０ ２ ０ —０ ７ 一Ｏ
腹泻仔貉检 出携 带耶尔森菌 ＨＰ 毒力岛的大肠杆菌 Ｉ
Ｔ Ｃ ＧＡ ３ ， 游 引 物 ： Ｔ Ｇ Ｃ ＡＣ Ｇ － 下 ５ Ｃ ＧＣ Ａ ＧＧＡＴ—
１ １ １ 供试 菌株 ２ １ ． ． ０ １年 ６ —８月 份 ， 皇岛 市 区 秦 各县 养貉 场 的乌苏 里 仔 貉 流行 １种 腹 泻 ， 昌 黎县 仅
各 貉场发 病 率 ３ （ ５场／ ０ ５ ３ １ ０场 ） 貉 场 内仔 貉 发 ， 病 率 ３ ～４ （ ５ １ ０ １ ５只／ ０ ５ ０只 ～２ ０只／ ０ ０ ５ ０只 ） ，
通讯作者 ： 史秋 梅 ，Ｅ ｉ ｈｑｕ ｉ ｙ ｈ ｏ ｃ ｍ． ｎ ｍａｌ ｉｉｍｅ＠ ａ ｏ ． ｏ ｃ ：ｓ 作者单位 ： 河北 科 技 师 范 学 院 动 科 院 河 北 省 预 防 兽 医 学 重 点 实 验
有家禽家畜密切接触史的腹泻患者小肠结肠炎耶尔森菌检测结果
改 良磷 酸盐 缓 冲液 （ Ｂ ）干燥 培 养基 等检 测试 ＰＳ 、 剂购 自江 苏 博 达 生 物 卫 生 技 术 有 限公 司 。Ｏ： ， 、 １２ Ｏ：、 ５ Ｏ： Ｏ： 型血清 由 日本 生研株 式会 社 ３ Ｏ：、 ８和 ９分 提供 ， 他 的分 型血清 由中国药 品生物制 品检定所 提 其 供， 上述试 剂 均 在 有 效 期 内使用 。Ａ Ｂ全 自动 细 菌 Ｔ
鉴定／ 药敏 分析 系统 等设备运 转正 常 。
１ ３ 检 测 方 法 ．
分型 鉴定 ， 果显 示 该 ４株 菌 均属 于 生物 ｌ 型 （ 结 Ａ 七 叶苷 、 杨苷 、 水 吡嗪酰胺 酶 均 阳性 ） 其 中 ２株 为 血清 ，
０：２ ２ 、 株为 ０： ， 、 １ ，６ １ ７ ８ １株为 ０： ，０ ６３。
作者简介 ： 熊海平 （９ ６ ） 男 ， １６一 ， 副主任技师 。
病性菌 株为主 ， 家禽家畜 引起 小肠结 肠炎 耶尔森菌感
４卷 ２ｌ Ｏ ２年 第 ２ 第 ９期 ２ ２ ｏ ４ Ｎ。 ０１ Ｖ ｌ ２ ２ Ｎｏ ９ ４
， ． ．
上 海预 防医学
Ｓ ａ ｇ ｍ ｏ ｍａ ｆＰ ｅ ｅ ｔ ｅ Ｍａ ｉｉ ｅ ｈ ｎ ｈ Ｊ ｕ ｌｏ ｒｖ ｎ ｉ ｄｃ ｎ ｖ
２１ ０ ２年第 ２ ４卷第 ９期
１ ２ 。Ｎｏ ９ 。 ２ １ Ｖｏ ． ４ ０２ 。
． ．
文章编号： ０ ９３ （０２０ — ４２ ０ １ ４— ２１２１ ）９ ０８ — ２ ０
０： ， ９ 且均 为非致病 性菌株 （ 生物 １ Ａ型 ） 提示小肠 结 ， 肠炎耶 尔森菌 的分布有地域 差异 ， 通市可 能 以非致 南
变黄 、 不产 Ｈ ｓ 不产气者接种半固体培养基 ， ：、 分别置 ２ ｃ ３ ℃培 养 ２ ， 取动 力 ２ ＇ ６Ｃ、７ ４ｈ 挑 ６Ｃ阳性 、７Ｉ阴性 ３ｃ ＝
粪便中小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测方法的建立
粪便中小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测方法的建立小肠结肠炎耶尔森菌是一种人畜共患的病原菌。
它在自然界中广泛分布,包括人、猪、牛等哺乳动物,禽类的排泄物,蜗牛等冷血动物,昆虫,未处理的冷水,污水,肉,乳制品,蛋制品,水产品和冰激凌。
所致疾病主要有胃肠炎型和肠道外型。
我科应用PCR方法检测小肠结肠炎耶尔森菌,及时发现患者和带菌者,为流行病学提供实验室依据,及时控制传染源,为预防疾病起重要作用。
标签：小肠结肠炎耶尔森菌;PCR检测方法;病原菌小肠结肠炎耶尔森菌所致疾病在世界上广泛分布,但多集中在寒冷地区,在我国东北地区小肠结肠炎耶尔森菌各血清型的分布亦较广泛。
本菌可感染人類以及多种动物,包括家畜、兽类、禽类、鸟类和昆虫,并通过排泄物和污染的水、食品传播。
1 实验方法1.1 试剂干燥培养基(北京陆桥生物技术有限公司);生物梅里埃API20E生化条;诊断血清。
1.2 仪器美国BIO-PCR仪;Thermo生物安全柜;离心机。
1.3 样品采集采集急性期、用药前采集患者新鲜粪便标本8例,每份2～5 g,放入Cary-Blair 半固体保存培养基中,4℃冷藏运送至实验室。
1.4 操作1.4.1 增菌取1 g粪便接种于10 ml改良PBS培养基上,置于4℃冷增菌10～20 d。
在冷增菌的第7、14、21天划线接种于耶尔森选择性平板、麦康凯平板,25℃培养24 h。
增菌管内液体量较大,在接种前应轻轻混匀,再用接种环挑取液体,接种于预先准备好的上述平板,采取分区划线的方式,一般划3～4区,目的是划出单个菌落。
由于总体菌量一般不大,每区划完后可不必烧灼接种环,直接划下一区即可。
1.4.2 培养直接取粪便标本接种选择性平板(耶尔森选择性平板、麦康凯平板),25℃培养24 h。
1.4.3 鉴定1.4.3.1 形态学鉴定在耶尔森选择性培养基上25℃培养24 h,形成较小的湿润菌落,直径为1～2 mm。
中心呈深玫瑰红色,凸起较尖锐,周围有明显的透明环,称“公牛眼”。
中国小肠结肠炎耶尔森菌流行现状及其研究进展
中国小肠结肠炎耶尔森菌流行现状及其研究进展陈邬锦【摘要】小肠结肠炎耶尔森菌在我国分布广泛,存在一定的地域、人群、时间等流行病学差异.随着我国分子流行病学的发展,许多基于分子、核酸水平的新技术及新方法不断被运用在小肠结肠炎耶尔森菌的病原生物学研究中.本文针对目前我国小肠结肠炎耶尔森菌的人群间、动物间及不同时间、地区间的流行病学差异、病原生物学研究、主要分子分型及毒力基因研究进行综述.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2015(031)004【总页数】5页(P380-384)【关键词】小肠结肠炎耶尔森菌;流行现状;分子分型;毒力基因【作者】陈邬锦【作者单位】大理学院公共卫生学院,大理 671000【正文语种】中文【中图分类】R378.2耶尔森氏菌属中致病性菌主要有鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌以及小肠结肠炎耶尔森菌[1]。
其中小肠结肠炎耶尔森菌(Yersinia enterocolitica，简称Y．e)是一种人兽共患病原细菌，广泛分布于自然界，可感染家畜、家禽、啮齿类动物、鸟类及昆虫等，也是少数能在冷藏温度下生长的肠道致病菌之一。
该菌主要通过粪口途径传播。
海产品、蛋类、鲜(生)奶及市售糕点、饮料、速(冷)冻食品中均曾检出小肠结肠炎耶尔森菌[2-3]；在家用、餐馆及医院冰箱中也曾检出小肠结肠炎耶尔森菌[4]。
该菌不仅能引起腹泻等消化道疾病，还能引起呼吸系统、心血管系统、骨骼、结缔组织和全身性疾病。
中国在20世纪80年代曾有过两次小肠结肠炎耶尔森菌的流行[5]，第1次于1986年发生在兰州市某奶牛厂，发病107人，从患者排泄物和食物中分离出的小肠结肠炎耶尔森菌为生物3型、血清O∶3型。
另一次于1987年发生在沈阳市某中学学生食堂，造成500余人被感染，从352名患者排泄物和食物中分离出的小肠结肠炎耶尔森菌为生物3型、血清O∶9。
1.1 宿主分布小肠结肠炎耶尔森菌病作为一种人兽共患病其动物宿主广泛，目前已发现30多种动物携带小肠结肠炎耶尔森菌[6]。
小肠结肠炎耶尔森氏菌 食物中毒标准
小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种常见的细菌，通常通过食物中毒的途径引起疾病。
它主要存在于未经煮沸的水、生鸡蛋、生奶酪等食物中。
一旦食用感染了这种细菌的食物，就会发生食物中毒。
对食物中毒标准的了解，对于我们防范和减少患病风险至关重要。
一、小肠结肠炎耶尔森氏菌的特征1. 菌种特点：小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种革兰氏阴性细菌，属于肠道致病细菌。
2. 病原学特性：它主要通过食物中的受污染食品或饮用水传播，引起食物中毒。
3. 临床表现：患者会出现腹泻、发热、腹痛等症状，严重时甚至会导致肠道炎症和肠穿孔。
二、食物中毒标准1. 食品摄入标准：提醒人们要选择放心食材，避免食用生的或未煮熟的食品，特别是生肉和生蛋。
对于农村地区的自来水源不保险的人们，可以通过开水煮沸、消毒等方式确保食品安全。
2. 食品储存标准：要求人们正确储存食物，避免食物受到细菌的污染。
尤其是冰箱的温度要控制在适宜的范围内，避免细菌滋生。
3. 饮食习惯标准：从饮食结构上规避食物中毒，比如不要经常食用生冷食品，不要过量饮酒，不要摄入未经检验的野生水产品等，以减少感染的风险。
三、对主题的个人观点和理解小肠结肠炎耶尔森氏菌食物中毒虽然常见，但只要我们合理科学地饮食，保持良好的卫生习惯，就能有效地预防疾病的发生。
我们应该养成良好的饮食卫生习惯，选择新鲜、熟透的食品，合理搭配膳食，减少饮食中毒的风险。
总结回顾：小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种引起食物中毒的致病菌，正确了解食物中毒标准，培养健康的饮食习惯，能够有效预防疾病的发生。
通过对主题的深入了解，我们能够更好地预防和应对食物中毒，保障身体健康。
小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种肠道致病细菌，常常引起食物中毒疾病。
这种细菌的传播途径主要是食物中，特别是未经煮沸的水、生鸡蛋、生奶酪等食物中。
一旦食用了被这种细菌污染的食物，就可能出现严重的食物中毒反应。
对于小肠结肠炎耶尔森氏菌及食物中毒的防范和应对至关重要。
小肠结肠炎耶尔森氏菌的特征包括它是一种革兰氏阴性细菌，且主要通过食物传播，引起食物中毒。
小肠结肠炎耶尔森菌风险评估国标指南
小肠结肠炎耶尔森菌风险评估国标指南下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体的研究进展
紫绍贵，张海鹏，钟佑宏.小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体的研究进展［J ］.中南农业科技，2023，44（10）：236-240．噬菌体是感染细菌的病毒，最早于1915年被发现，最初10年起步阶段噬菌体被尝试用于治疗细菌感染，但由于当时噬菌体具体疗效尚未被探明以及抗生素的出现，导致噬菌体疗法被抛弃［1］。
细菌对抗生素的耐药性日益严峻，噬菌体疗法又重新引起了人们的关注。
噬菌体被用于食品初加工、生物灭菌和生物保鲜三大食品工业领域，并被用来控制食品质量，比如对抗食源性致病微生物如大肠埃希氏菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌、单增李斯特菌，也用来对付引起人畜共患的病原菌［2，3］。
噬菌体不仅是杀灭细菌的武器，而且可以作为食源性病原菌存在的指示器应用于食品、水和环境污染预警系统中［4，5］。
小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体正是对抗食源性病原菌——小肠结肠炎耶尔森氏菌的利器。
1小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体小肠结肠炎耶尔森氏菌属于耶尔森菌属，革兰氏阴性杆菌，由此菌引起的疾病称为耶尔森氏菌病，人类感染多呈自限性，临床症状包括发热、胃肠消化功能紊乱伴随急性腹泻肠道炎症等，然而在动物身上通常表现为无症状带菌［6］。
小肠结肠炎耶尔森氏菌广泛分离于人、圈养的猪和野猪的排泄物，但在食品、自然环境和临床标本上分离率较低［7］。
猪是该致病菌株的主要储存宿主，除猪肉制品为主要感染来源外，输血和饮用被污染的水源也可能导致感染［8］。
根据小肠结肠炎耶尔森氏菌菌体O 抗原的结构已鉴定出60多种不同的血清型，其分别归属于6种生物分型——1A 、1B 、2、3、4、5［9-11］。
属于生物型1A 的菌株被确定为无致病性，通常分离于环境、健康的动物和人的样本。
而生物型1B 即美洲型，是该菌种中最危险的生物型。
生物型2、3、4、5被称为欧洲型，致病性弱，在中国主要的致病生物血清型是2/O ∶9、3/O ∶3［12，13］。
小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体是一类专性感染小肠结肠炎耶尔森氏菌的病毒。
腹泻患儿粪便中病原微生物的检验及意义分析
儿童腹泻为临床常见病、多发病。
细菌性腹泻为造成此类疾病发生的重要原因。
该疾病由细菌所引发，为一类以腹泻为临床主要表现的肠道传染性病变。
患者发病之后，会表现出腹泻、腹胀、呕吐、恶心等不良症状。
倘若未能在第一时间对患者开展行之有效的治疗，将会引起相当严重的后果，甚至导致小儿患者死亡［1］。
本研究探究腹泻患儿粪便中病原微生物检验以及相关意义，报告如下。
1资料与方法1.1一般资料：选择2018年12月至2019年12月我院收治的122例小儿腹泻患者为研究对象。
受试者家属自愿参加试验调查，同时签署了《知情同意书》。
收集所有受试者的粪便样本，实施病原微生物检查。
年龄6个月以下者12例、6个月至2岁者14例、2~6岁者96例，平均年龄（2.8±0.4）岁，男性65例，女性57例。
其均存在大便性状改变以及大便频次增多的现象。
同时有部分患者表现出脱水、发热、呕吐等不良表现。
排除标准：肝肾脾等脏器功能异常者、精神疾患、非细菌性腹泻患者、机体免疫功能缺陷者。
1.2方法：对受试者的相关样本进行收集之后，采用日本日立公司所生产的全自动细菌鉴定分析设备与ATB 半自动细菌鉴定设备，对所搜集的分泌样本进行病原菌检验。
检验病原菌种类具体为铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌以及沙门菌属等。
针对于上述细菌实施分离和鉴定工作。
1.3观察指标：①分析所有受试者病原微生物检出详情。
②分析各个年龄段内受术者微生物感染对比详情。
1.4统计学处理：利用SPSS20.0统计学软件。
计数资料行χ2检验，P <0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1受试者病原微生物检出详情：122例受试者分泌样本内存在病原微生物患儿共计96例，占腹泻患儿粪便中病原微生物的检验及意义分析贾亦斐陈晨王立平孙晴胡永奇DOI ：10.3969/j.issn.0253⁃9926.2021.04.047作者单位：200362上海市同仁医院检验科（贾亦斐、王立平、孙晴、胡永奇）；上海市中医药大学附属曙光医院检验科（陈晨）通信作者：胡永奇疗，对于改善母婴结局具有积极意义。
小肠结肠炎耶尔森菌病团体标准
小肠结肠炎耶尔森菌病团体标准小肠结肠炎耶尔森菌病（Enterocolitis due to Yersinia）是由耶尔森菌（Yersinia）引起的一种肠道感染，主要累及小肠和结肠。
本文将从病因、临床表现、诊断和治疗等方面介绍小肠结肠炎耶尔森菌病的团体标准。
一、病因小肠结肠炎耶尔森菌病主要由耶尔森菌引起，耶尔森菌是一类革兰氏阴性杆菌，可分为耶尔森菌属（Yersinia）的3个物种：鼠疫耶尔森菌（Yersinia pestis）、耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）和假瘤耶尔森菌（Yersinia pseudotuberculosis）。
其中，耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）是最常见的致病菌。
二、临床表现小肠结肠炎耶尔森菌病主要表现为腹痛、腹泻和发热。
腹痛多为持续性或阵发性，疼痛部位多在右下腹或全腹。
腹泻常伴有腹痛，大便呈水样或黏液样，有时可带血。
发热多呈弛张热型，体温可达39-40℃。
此外，部分患者还可出现恶心、呕吐、食欲不振、乏力等非特异性症状。
三、诊断小肠结肠炎耶尔森菌病的诊断主要依靠临床表现和实验室检查。
临床上需注意与其他病原体引起的肠道感染相鉴别，如细菌性肠炎、病毒性肠炎等。
实验室检查包括粪便培养、血培养、血清学检测和分子生物学方法等。
粪便培养可检测到耶尔森菌，但阳性率较低，需多次复查。
血培养和血清学检测有助于明确感染的范围和严重程度。
分子生物学方法如聚合酶链反应（PCR）可提高诊断的敏感性和特异性。
四、治疗小肠结肠炎耶尔森菌病的治疗主要包括对症治疗和抗菌治疗。
对症治疗包括补液、纠正电解质紊乱、控制腹泻和缓解腹痛等。
抗菌治疗的选择应根据耶尔森菌的药敏结果，常用药物包括氨苄西林、头孢菌素和氟喹诺酮类药物等。
治疗一般持续7-14天，必要时可延长治疗时间。
小肠结肠炎耶尔森菌病是一种常见的肠道感染，临床表现多样，诊断主要依靠临床表现和实验室检查。
早期诊断和积极治疗对预防并发症和减轻患者痛苦具有重要意义。
腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析
腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析发表时间：2020-08-14T07:32:54.887Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2020年第6期作者：张杰[导读] 针对腹泻粪便样本开展小肠结肠炎耶尔森菌检验分析，可发现该种细菌的检出率处在较高水平，为临床医生开展相关疾病的诊断工作提供支持。
平阳县第二人民医院 325405【摘要】目的：探讨分析针对腹泻粪便样本中包含的小肠结肠炎耶尔森菌展开检验，在诊断感染性腹泻患者过程中的临床价值。
方法：2019年4月-2020年2月，将我院104例感染性腹泻患者随机等分为两组，每组各52例，为参照组选择运用培养法开展粪便样本耶尔森菌检测，针对研究组选择运用RT-PCR法开展粪便样本耶尔森菌检测，对比两组的阳性检出率。
结果：研究组的阳性检出率19.23%（10/52）高于参照组5.77%（3/52），组间有差异（卡方=4.308，P＜0.05）。
结论：为感染性腹泻患者的粪便样本选择运用RT-PCR法开展耶尔森菌检测，能获取较好效果，值得临床推广。
针对腹泻粪便样本开展小肠结肠炎耶尔森菌检验分析，可发现该种细菌的检出率处在较高水平，为临床医生开展相关疾病的诊断工作提供支持。
【关键词】腹泻粪便检验样本；小肠耶尔森菌检测；临床价值；探讨分析从现代西医病理学基本理论角度展开阐释分析，感染性腹泻是因肠道寄生虫，或者是肠道微生物及其代谢产物作用而引致发生的人体肠道组织内传染性疾病，而小肠结肠炎耶尔森菌属于典型的感染性腹泻疾病致病微生物[1]。
从生物分类学视角展开分析，小肠结肠炎耶尔森菌是可经由革兰染色处理的小杆菌微生物或者是球杆菌微生物，其主要经由粪-口途径完成人体感染过程，其感染后潜伏期持续时间介于3.00-7.00d，其病程持续时间介于1.00-3.00d之间，患者在临床中主要形成和展示出典型的急性胃肠炎疾病症状，或者是肠道外感染性疾病症状，继而导致生命健康水平显著下降[2]。
浅析食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌检测技术研究
浅析食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌检测技术研究摘要：小肠结肠炎耶尔森氏菌是重要的食源性致病菌，如何有效地检测该菌是预防和减少食品安全问题的关键环节。
本文较为系统地介绍了利用常规分离鉴定、免疫学、分子生物学和生物质谱等技术手段检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，最后对小肠结肠炎耶尔森氏菌检测技术的现状进行分析，并对发展趋势进行了预测。
关键词：耶尔森氏菌；分离鉴定；免疫学技术；分子生物学技术；生物质谱技术Abstract：enterocolitis Jerson Prand is an important foodborne pathogen. How to effectively detect the bacteria is the key link in preventing and reducing food safety. This paper systematically introduces the methods of detecting enterocolitis Jerson Prand by conventional separation and identification，immunology，molecular biology and biological mass spectrometry. Finally，the present situation of the Jerson Prand detection technique of enterocolitis is analyzed，and the trend of the development is predicted.Key words：Jerson S fungus；isolation and identification；immunology technology；molecular biology technology；bio mass spectrometry technology小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）是一种广泛分布的细菌，可存在于生鲜蔬菜、乳和乳制品、肉类、豆制品等食品中。
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检验小肠结肠炎耶尔森菌（腹泻粪便中）的临床价值观察
摘要：目的观察腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检验方法与效果。
方法
收集2015年3月——2017年12月我院感染性疾病科收治的腹泻50例患者临床
资料，回顾性分析培养法与RT-PCR法在本组小肠结肠炎耶尔森菌的检验结果。
结果RT-PCR法阳性检出率明显（24.00%）明显高于培养法（8.00%），差异具
有统计学意义（P＜0.05）。
结论相较于培养法而言，采用RT-PCR法检验腹泻
粪便中小肠结肠炎耶尔森菌效果更加突出，值得临床推广应用。
关键词：小肠结肠炎；耶尔森菌；腹泻；检验价值
小肠结肠炎是一组临床严重肠道感染疾病，耶尔森菌属（Yersinia）是本病主要传染病菌，患者多伴有胃肠道炎症与腹泻症状，疾病的进展可出现呼吸道、骨骼等病理表现，增加了败
血症发生几率[1]。
培养法与RT-PCR法检测小肠结肠炎耶尔森菌的主要方法，但就二者机体
体检验效果，仍需临床研究证实[2]。
本文收集2015年3月——2017年12月我院感染性疾病
科收治的腹泻50例患者临床资料，观察腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检验方法与效果，现报道如下，供临床参考。
1资料与方法
1.1一般资料
收集2015年3月——2017年12月我院感染性疾病科收治的腹泻50例患者临床资料；
本组患者年龄5个月~75岁，平均年龄（31.05±8.48）岁，其中男性32例，女性18例；患者入院均表现排便次数增加，每日排便次数超过3次以上，且粪便可见其形状明显发生改变；
本次研究内容获得院方伦理会批准，患者及其家属均知情并自愿签署同意书。
1.2方法
所有患者均接受耶尔森菌的培养法与RT-PCR法检测，采集患者粪便样本，加入Cary-Blair 保存液，取得0.5g粪便，置入生理盐水4.5ml，将其混合后置于增菌液中培养；随后采取RT-PCR检测，将粪便样本置放于16℃环境内予以保存，在培养18h后，取出200μg混合物，提
取其DNA液，反应体系包括BSA、探针、模板、引物、反应混合液等；扩增产物长度为
154bp，于95℃环境下反应；培养法检验中，将采集的分辨标本置入16℃环境下保存，在培
养18h后取出5.0μg混合物，在CIN平板上接种，随后调整培养条件，即温度为25℃，培养24h，将其中可疑菌落筛出，随后予以标准菌株完成比对，判定阴性。
1.3统计学方法
数据由SPSS21.0统计学软件包完成处理，P＜0.05表示差异存在统计学意义；计数资料“率”采用卡方值检验。
2结果
RT-PCR法阳性检出率明显（24.00%）明显高于培养法（8.00%），差异具有统计学意义
（P＜0.05）（表1）。
3讨论
小肠结肠炎耶尔森氏菌分布较广，可存在于水果、蔬菜、乳制品、肉类等物质中，亦可
在环境中寄存，包括土壤、植被、河流等[3]。
此菌属在30年代便引起临床注意，是引起急
性胃肠炎的主要病原菌，且具有人畜共患的特点，人体在摄食后潜伏期在3~7d发病，患者
临床症状以发热、腹泻、腹痛、呕吐、败血症等为主，可引起阑尾炎、反应性关节炎、血液
系统感染等。
小肠结肠炎耶尔森氏菌属于革兰氏阴性杆菌，多见于单个散在，少数表现排列
成短链或成堆样[4]。
在既往研究中指出，本菌不会形成芽孢，无荚膜，存在周鞭毛（可于30℃环境下培养形成，在温度增高时可丧失，因此其动力表现在30℃条件下，而35℃以上则基
本无动力表现）。
在对患者腹泻粪便检验中，培养法主要基于人为控制条件下，为特定微生物创造适宜生
存繁殖条件，以此促使其产生菌体或产物，完成相关研究。
关于培养法在小肠结肠炎耶尔森
菌的检验中的优势主要体现在简便，仅需人眼主观性既可予以判断，降低了检验难度与复杂性。
RT-PCR法（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）也就是反转录PCR，通过将RNA反转录（RT）和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合，已完成细胞组织中基因表达水平、细胞RNA病毒含量等检验[5]。
在小肠结肠炎耶尔森菌的检验中，同样存在操作流程简单，阳性检出率高等，整个检验流程仅需2d，在其产生反应后无需电泳，避免了环境污染。
在本文中可见，RT-PCR法阳性检出率明显（24.00%）明显高于培养法（8.00%）。
此表明RT-PCR法较培养法检出率更高，这与现阶段研究表现一致性。
综上所述，相较于培养法而言，采用RT-PCR法检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌效果更加突出，值得临床推广应用。
参考文献
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