SOUTHERN&NORTHERN&WESTERN杂交原理

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south southern作形容词的区别

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摘要:

1.南部地区的形容词含义

2.南部人的形容词用法

3.南部文化的影响

4.南部方言中的形容词特点

5.总结:南部形容词的意义与用法

正文:

在很多方言和口语中,南部地区的形容词有着独特的含义和用法。这些形容词不仅反映了南部地区的地理气候特点,还展示了当地的风土人情。在这篇文章中,我们将探讨南部形容词的意义、用法以及它们在南部文化中的地位。

首先,南部地区的形容词含义与北部地区有所不同。在南部,形容词常常被用来描述人的性格、生活习惯和外貌特征。例如,南部人常用“踏实”来形容一个人稳重、可靠,而用“麻利”来形容一个人动作迅速、利索。这些形容词不仅丰富了南部人的词汇,还增强了方言的独特性。

其次,南部人在使用形容词时,注重形象生动。他们善于用形容词描绘事物的外观、口感和气味。如在描述食物时,南部人会说“鲜嫩可口”,用“香喷喷”来形容菜肴的诱人香气。这种丰富的形容词用法使得南部方言更加生动有趣,令人印象深刻。

此外,南部文化的影响也体现在形容词的使用上。在南部地区,人们重视亲情、友情和乡土情结。因此,南部人在描述人际关系时,常用形容词来表达

对亲朋好友的关爱和敬意。例如,用“贴心”来形容孩子孝顺、懂事,用“热心肠”来形容一个人乐于助人。这些形容词传递了南部地区的人文关怀,彰显了南部文化的魅力。

而在南部方言中,形容词的特点更是独具一格。南部方言中的形容词往往带有浓厚的地域色彩,如四川方言中的“巴适”(舒适、惬意),湖南方言中的“韵味”(有趣、韵味)。这些方言形容词既体现了南部地区的地域特色,也彰显了当地人的性格特点。

southern和northern杂交名词解释

southern和northern杂交名词解释

"Southern" 和"Northern" 是表示方向或位置的词汇,它们通常用来指示地理位置或特定地区。在一些情况下,这些词汇可能用于形容某些事物或概念,例如"Southern Hemisphere"(南半球)和"Northern Lights"(北极光)。

杂交名词中的"Southern" 和"Northern" 可能表示两个不同地区或特定地点的组合。以下是一些可能的例子:

1.Southern Cross (南十字星):南十字星是南半球的一组星座,是夜空中最著名的星座

之一。它通常用于导航,并经常与南半球的文化和地理位置相关联。

2.Northern Lights (北极光):北极光是在北极地区可见的一种自然光现象。它是由太阳

风与地球大气层中的气体互动而产生的,因此通常在极地地区,尤其是北半球的极地地区可见。

3.Southern Ocean (南大洋):南大洋是地球上的一个主要洋,位于南极洲周围。它通常

被认为是大西洋、印度洋和太平洋之外的独立洋。

4.Northern Hemisphere (北半球) 和Southern Hemisphere (南半球):这些术语用于描

述地球的两个半球。赤道是北半球和南半球的分界线。

在这些术语中,"Northern" 和"Southern" 可能指代不同的地理、文化或气候特征,具体的含义取决于上下文。如果有具体的名词需要解释,建议提供更多的上下文信息。

Southern杂交

Southern杂交


Southern印迹杂交是进行基因组 Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定 印迹杂交是进行基因组DNA特定 序列定位的通用方法。 序列定位的通用方法。 • 一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消 一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶 琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消 化的DNA片段 将胶上的DNA变性并在原位将 片段, 化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将 单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物 片段转移至尼龙 单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物 经干烤或者紫外线照射固定, 上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结 构的标记探针进行杂交 探Байду номын сангаас进行杂交, 放射自显影或酶反应 构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应 显色,从而检测特定DNA分子的含量 分子的含量。 显色,从而检测特定DNA分子的含量。
Southern杂交 Southern杂交
1975年,Southern印迹杂交(Southern blot)由英国人埃 1975年,Southern印迹杂交(Southern blot)由英国人埃 德温·迈勒· 德温·迈勒·萨瑟恩 (Edwin Mellor Southern)创建 Southern)创建

southern杂交

southern杂交
Southern印迹杂交
Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英 印迹杂交( 印迹杂交 ) 年由英 国人southern创建,是研究 创建, 图谱的基本技术, 国人 创建 是研究DNA图谱的基本技术,在遗 图谱的基本技术 传病诊断、 图谱分析及PCR产物分析等方面有重要 传病诊断、DNA图谱分析及 图谱分析及 产物分析等方面有重要 价值。 价值。 • Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用 印迹杂交技术是分子生物学 印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用 的具体方法之一。其基本原理是: 的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条 核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链, 碱基互补的原则形成双链 核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链, 此杂交过程是高度特异的。 此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及 检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳 凝胶电泳和核酸内切限制酶分析 检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析 的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一 分子的限制图谱。 的结果,便可绘制出 分子的限制图谱 步构建出DNA分子的遗传图,或进行目的基因序列的测 分子的遗传图, 步构建出 分子的遗传图 定以满足基因克隆的特殊要求,还必须掌握DNA分子中 定以满足基因克隆的特殊要求,还必须掌握 分子中 基因编码区的大小和位置。 基因编码区的大小和位置。有关这类数据资料可应用 Southern印迹杂交技术获得。 印迹杂交技术获得。 印迹杂交技术获得 •

Southern杂交分析原理和操作

Southern杂交分析原理和操作

Southern杂交分析原理和操作

【原理】

Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固

定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位

置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探

针同源的片段以及该片段的长度。

一.基因组DNA的限制酶切

【操作】

DNA (1μg/ml)20μg、10×酶切buffer5.0μl、限制性内切酶(lOU /μl) 5.0μl、加ddH2O至50μl,在最适温度下消化1~3h。消化结束时可取5μl电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过6h己没有必要。或者放大反应体积,

或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是DNA样品中有太多的杂质,或酶的

活力下降。消化后的DNA 加入1/10体积的0.5mol/L EDTA,以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提,2.5倍体积乙醇沉淀,少量TE溶解(参见DNA提取方法,但离心转速要提高到12000g,以防止小片段DNA的丢失)。如果需要两种酶消化DNA,而

两种酶的反应条件可以一致,则两种酶可同时进行消化;如果反应条件不一致,则先用需要低离子强度的酶消化,然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度,再加第二种酶进行消化。

二.基因组DNA消化产物的琼脂糖凝胶电泳

【操作】

1.制备0.8%凝胶一般用于Southern杂交的电泳胶取0.8%。

2. 电泳电泳样品中加人6×Loading缓冲液,混匀后上样,留一或两泳道加DNAMarker。1~2V/cm,DNA从负极泳向正极。电泳至溴酚蓝指示剂接近凝胶另一端时,停止电泳。取出凝胶,紫外灯下观察电泳效果。在胶的一边放置一把刻度尺,拍摄照片。正常电泳图谱呈现一连续的涂抹带,照片摄人刻度尺是为了以后判断信号带的位置,以确定被杂交的DNA长度。

Southern印迹技术应用与注意事项

Southern印迹技术应用与注意事项
用于DNA的精细分析和定量检测。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
去除杂质
DNA样品中可能含有蛋白质、RNA和酚等杂质,这些杂质会影响电泳和后续的 探针杂交,因此需要去除。
正确选择凝胶浓度与电泳时间
根据DNA大小选择凝胶浓度
不同大小的DNA需要不同浓度的凝胶进行分离。选择合适的凝胶浓度是确保DNA片段正确分离的关 键。
控制电泳时间
电泳时间过长可能导致DNA片段扩散,而时间过短则可能导致分离不充分。因此,需要根据DNA大 小和凝胶浓度合理控制电泳时间。
洗膜
洗去未结合的探针,提高信号的特异性。
信号检测与结果分析
信号检测
使用适当的检测方法,如放射自显影或荧光染料染色,检测 杂交信号。
结果分析
对杂交结果进行定性或定量分析,以确定目标DNA片段的存 在和大小。
04 southern印迹技术的注 意事项
保证DNA质量
确保DNA完整性
在应用southern印迹技术之前,应检查DNA样品是否完整,没有降解或断裂。
假阴性
某些情况下,由于DNA样品质量、探针选 择或实验操作等原因,可能会出现杂交信号 弱或无信号的情况,导致假阴性结果。为避 免假阴性,应优化实验条件,并对结果进行 重复验证。
05 southern印迹技术的优 缺点
优点
高灵敏度

单词southern是什么汉语意思

单词southern是什么汉语意思

单词southern是什么汉语意思

单词southern是什么汉语意思

southern是一个很常用的单词,我们应该要了解清楚它具体的汉语意思。下面我们就来看看英文单词southern实际所指的汉语意思及例句,欢迎大家阅读!

southern的汉语意思

英 [ˈsʌðən] 美 [ˈsʌðərn]

southern 基本解释

形容词南方的,南部的; 来自南方的

名词南方人,南部人

例句

1. She lives in southern Italy.

她住在意大利南部。

词典解释

1. 南方的;在南部的;来自南部的

Southern means in or from the south of a region, state, or country.

e.g. The Everglades National Park stretches across the southern tip of Florida.

大沼泽地国家公园位于佛罗里达州的最南端。

e.g. ...a place where you can sample southern cuisine.

可以品尝到南方美食的`地方

southern的单语例句

1. Lam said the bank hopes to focus on developing its loan business in southern China, while its main operations in the north will be taking in deposits.

2. The number of singles has been on the rise in the southern metropolis, as young people are too busy working to find their ideal partner.

southern印迹杂交

southern印迹杂交

southern印迹杂交

Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。

由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一步构建出DNA分子的遗传图,或进行目的基因序列的测定以满足基因克隆的特殊要求,还必须掌握DNA分子中基因编码区的大小和位置。有关这类数据资料可应用Southern印迹杂交技术获得。

southern记忆法

southern记忆法

southern记忆法

南方记忆法

南部记忆法是一种视觉记忆策略,利用图像联系来增强回忆力。该方法以其在内战期间帮助士兵学习复杂军事演习的能力而闻名。

原理

南部记忆法基于联想记忆原理,即大脑通过将新信息与已知信

息联系起来来储存记忆。该方法使用图像、故事和感官提示创建生动、令人难忘的心灵图像,从而 memudahkan 检索信息。

步骤

南部记忆法的步骤如下:

1. 选择一个熟悉的物理位置:选择一个你非常熟悉的地方,例

如你的家或办公室。

2. 创建图像:将要记住的信息转换为一组图像。这些图像必须

生动、独特且与信息相关。

3. 建立位置:在熟悉的物理位置中确定一个特定的路线或路径。

4. 放置图像:沿着路径将图像以逻辑顺序放置。每个图像都与

路线上的特定位置相关联。

5. 创建故事:编制一个贯穿路线并连接所有图像的故事。

6. 复习:定期复习图像放置和故事,以加强记忆。

示例

例如,要记住一个杂货清单:

1. 选择位置:你的家

2. 创建图像:牛奶 = 白色小猫、鸡蛋 = 棕色母鸡、面包 =

金色烤面包

3. 建立位置:从前门到厨房

4. 放置图像:前门放小猫,厨房门放母鸡,柜台上放烤面包

5. 创建故事:小猫跳进厨房,母鸡在她后面生下一枚鸡蛋,鸡蛋落在烤面包上。

6. 复习:重复这个故事,将图像与位置联系起来。

优点

南方记忆法的优点包括:

增强回忆力:生动的图像和联系有助于创建强烈的记忆。

组织信息:按顺序放置图像有助于组织和分块信息。

提高注意力:创建图像和故事需要集中注意力,从而提高记忆力。

减轻焦虑:熟悉的物理位置和生动的图像可以舒缓考试或演讲前的焦虑。

southern印迹法的原理

southern印迹法的原理

southern印迹法的原理

南方印迹法是一种常用于犯罪现场调查的法医学技术,通过分析和比对犯罪现场的足迹和鞋底纹理,以确定犯罪嫌疑人的身份或提供重要线索。这种技术的原理基于每个人的足迹和鞋底纹理都是独一无二的,类似于指纹识别的原理。

首先,南方印迹法的原理是基于人类足部特征的研究。每个人的足部形状、大小、弯曲程度以及脚趾的排列都是独特的,就像人的面部特征一样。这些特征会在行走时留下印记,因此可以通过对足迹的形状和尺寸进行测量和分析,来确定是否与嫌疑人的足迹相匹配。

其次,南方印迹法还依赖于鞋底纹理的研究。每双鞋的鞋底都有独特的纹理和花纹,就像指纹一样。这些纹理和花纹可以通过显微镜和其他高科技设备进行放大和比对。通过对犯罪现场的鞋印进行分析和比对,可以确定是否与嫌疑人的鞋底纹理相符。

在实际应用中,南方印迹法的原理主要包括三个步骤:采集、比对和分析。

首先,采集足迹和鞋印是南方印迹法的关键步骤。这通常需要专业的法医学人员使用特定的工具和技术,例如粉末、胶印和照相等。他们会在现场找到可疑的足迹和鞋印,并进行记录和采集。这些足迹和鞋印可以是直接的,例如在泥土、沙地或雪地上,也可以是间接的,例如在纸张、木板或地板上。

其次,比对是南方印迹法的关键步骤之一。采集到的足迹和鞋印会与嫌疑人的足迹和鞋底纹理进行比对。这需要专业的法医学人员使用显微镜等设备来放大和比对纹理和形状。如果发现足迹和鞋印之间存在相似性,就可以提供重要的线索,帮助警方追踪和确定

犯罪嫌疑人。

最后,分析是南方印迹法的最后一步。在比对的基础上,法医学人员会对足迹和鞋印的特征进行进一步的分析。这包括测量足迹的长度、宽度、弯曲程度等,以及比对鞋底纹理的特征和形状。通过这些分析,可以得出更准确的结论,确定犯罪嫌疑人的身份或提供更多的线索。

Southern印迹杂交

Southern印迹杂交

Southern印迹杂交

实验原理

核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一步构建出DNA分子的遗传图,或进行目的基因序列的测定以满足基因克隆的特殊要求,还必须掌握DNA分子中基因编码区的大小和位置。有关这类数据资料可应用Southern印迹杂交技术获得。

Southern印迹杂交技术包括两个主要过程:一是将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹(blotting);二是固定于膜上的核酸同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过程。该技术是1975年英国爱丁堡大学的E.M.Southern首创的,Southern印迹杂交故因此而得名。早期的Southern印迹是将凝胶中的DNA变性后,经毛细管的虹吸作用,转移到硝酸纤维膜上。近年来印迹方法和固定支持滤膜都有了很大的改进,印迹方法如电转法、真空转移法;滤膜则发展了尼龙膜、化学活化膜(如APT、ABM纤维素膜)等。利用Southern印迹法可进行克隆基因的酶切、图谱分析、基因组中某一基因的定性及定量分析、基因突变分析及限制性片断长度多态性分析(RFLP)等。

实验方法

本节以哺乳动物基因组DNA为例,介绍Southern印迹杂交的基本步骤。

southern印迹杂交

southern印迹杂交

southern印迹杂交

Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA

变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。

Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一步构建出DNA分子的遗传图,或进行目的基因序列的测定以满足基因克隆的特殊要求,还必须掌握DNA

分子中基因编码区的大小和位置。有关这类数据资料可应用Southern印迹杂交技术获得。

Southern印迹杂交技术包括两个主要过程:一是将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹(blotting);二是固定于膜上的核酸同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过程。

早期的Southern印迹是将凝胶中的DNA变性后,经毛细管的虹吸作用,转移到硝酸纤维膜上。印迹方法如电转法、真空转移法;滤膜发展了尼龙膜、化学活化膜(如APT、ABM纤维素膜)等。利用Southern印迹法可进行克隆基因的酶切、图谱分析、基因组中某一基因的定性及定量分析、基

easthern印迹杂交名解

easthern印迹杂交名解

easthern印迹杂交名解

Southern印迹杂交是一种基于DNA的分子杂交技术,用于检测特定DNA序列的存在和位置。Southern印迹杂交的名称来自于其发明者Edwin Southern。

Southern印迹杂交的基本原理是将DNA样品通过电泳分离到适当的片段大小,然后将其转移到硝酸纤维素或PVDF等膜上。接着,使用带有特异性探针的标记物与膜上的DNA进行杂交反应,从而检测特定DNA序列的存在和位置。

Southern印迹杂交的优点包括灵敏度高、特异性强、适用于大量DNA 样本的检测等。它被广泛应用于基因组学、遗传学、生物化学等领域,是研究DNA序列的重要工具之一。

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south的形容词和名词

south的形容词和名词

south的形容词和名词

south的形容词:

southern 南的;

southeastern 东南方的;

southward 向南的;

south的名词:

southern 南方人;

southerner 南方人;

southward 朝南的方向;

south

n. 南;(罗盘的)南方;

adj. 位于南方;

adv. 向南;

v. 朝南移动;(天体)穿过子午线

扩展资料

Swallows migrate south in winter.

燕子在冬天迁徙到南方。

In the south, the reverse applies.

在南方,情况相反。

They were both raised in the South.

他们俩都是在南方长大的.。

The terrace faces south.

露台朝南。

The storm wrought havoc in the south.

这场暴风雨在南方造成了巨大的灾害。

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Southern杂交分析原理和操作

Southern杂交分析原理和操作

Southern杂交分析原理和操作

【原理】

Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固

定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位

置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探

针同源的片段以及该片段的长度。

一.基因组DNA的限制酶切

【操作】

DNA (1μg/ml)20μg、10×酶切buffer5.0μl、限制性内切酶(lOU /μl) 5.0μl、加ddH2O至50μl,在最适温度下消化1~3h。消化结束时可取5μl电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过6h己没有必要。或者放大反应体积,

或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是DNA样品中有太多的杂质,或酶的

活力下降。消化后的DNA 加入1/10体积的0.5mol/L EDTA,以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提,2.5倍体积乙醇沉淀,少量TE溶解(参见DNA提取方法,但离心转速要提高到12000g,以防止小片段DNA的丢失)。如果需要两种酶消化DNA,而

两种酶的反应条件可以一致,则两种酶可同时进行消化;如果反应条件不一致,则先用需要低离子强度的酶消化,然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度,再加第二种酶进行消化。

二.基因组DNA消化产物的琼脂糖凝胶电泳

【操作】

1.制备0.8%凝胶一般用于Southern杂交的电泳胶取0.8%。

2. 电泳电泳样品中加人6×Loading缓冲液,混匀后上样,留一或两泳道加DNAMarker。1~2V/cm,DNA从负极泳向正极。电泳至溴酚蓝指示剂接近凝胶另一端时,停止电泳。取出凝胶,紫外灯下观察电泳效果。在胶的一边放置一把刻度尺,拍摄照片。正常电泳图谱呈现一连续的涂抹带,照片摄人刻度尺是为了以后判断信号带的位置,以确定被杂交的DNA长度。

Southern 杂交

Southern 杂交

Southern 杂交

Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。(Q往圣科技3452125268提供12万种免费质粒)通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。但由于该技术的操作比较烦琐、费时,所以现在有一些其他的方法可以代替Southern杂交。但该技术也有它的独特之处,是目前其他方法所不能替代的,如限制性酶切片段的多态性(RFLP)的检测等。

一、基因组DNA的制备(前述)(Q往圣科技3452125268提供Science的CRISPR/cas9免费送)二、基因组DNA的限制酶切(Q往圣科技3452125268提供12万种

CRISPR/cas9免费送)根据实验目的决定酶切DNA的量。(Q往圣科技3452125268提供张峰Science的CRISPR/cas9免费送)一般Southern杂交每一个电泳通道需要10-30μg的DNA。购买的限制性内切酶都附有相对应的10倍浓度缓冲液,并可从该的产品目录上查到最佳消化温度。为保证消化完全,一般用2-4U的酶消化1μg 的DNA。消化的DNA 浓度不宜太高,以0.5μg /μl 为好。由于内切酶是保存在50%甘油内的,而酶只有在甘油浓度<5%的条件下才能发挥正常作用,所以加入反应体系的酶体积不能超过1/10。

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Southern杂交

Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量 基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。

Southern印迹杂交技术包括两个主要过程:一是将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹(blotting);二是固定于膜上的核酸同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过程。该技术是1975年英国爱丁堡大学的E.M.Southern首创的,Southern印迹杂交故因此而得名。

Northern 印记杂交 Northern blot 是一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法,通过northern blot的方法可以检测到细胞在生长发育特定阶段或者胁迫或病理环境下特定基因表达情况。 原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。

Western杂交

原理:是将蛋白质电泳、印迹、免疫测定融为一体的特异性蛋白质的检测方法。其原理是:生物中含有一定量的目的蛋白。先从生物细胞中提取总蛋白或目的蛋白,将蛋白质样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中,经SDS-PAGE电泳将蛋白质按分子量大小分离,再把分离的各蛋白质条带原位转移到固相膜(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,接着将膜浸泡在高浓度的蛋白质溶液中温育,以封闭其非特异性位点。然后加入特异抗性体(一抗),膜上的目的蛋白(抗原)与一抗结合后,再加入能与一抗专一性结合的带标记的二抗(通常一抗用兔来源的抗体时,二抗常用羊抗兔免疫球蛋白抗体),最后通过二抗上带标记化合物(一般为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)的特异性反应进行检测。根据检测结果,从而可得知被检生物(植物)细胞内目的蛋白的表达与否、表达量及分子量等情况。


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