SOP QG01培养基配制标准操作规程

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培养基配制的过程和注意事项

培养基配制的过程和注意事项

培养基配制的过程和注意事项一、培养基配制的基本步骤1. 材料准备:首先,需要准备培养基所需的各种原料和试剂。

常用的培养基原料包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂等。

此外,还需要准备适量的水和试剂的称量工具。

2. 称量试剂:按照配方中的比例,准确地称取所需的试剂。

在称量过程中,应注意保持实验环境的清洁,并使用洁净的称量工具,以避免试剂受到污染。

3. 溶解试剂:将称取好的试剂溶解于适量的水中。

在溶解过程中,可以通过搅拌或加热的方式促进试剂的溶解。

溶解完毕后,应检查溶液的透明度和均匀性,确保试剂充分溶解。

4. 调整pH值:根据具体的培养基配方,使用酸碱溶液调整培养基的pH值。

通过逐滴加入酸碱溶液,并经过搅拌均匀,逐步调整pH 值至所需范围。

在调整pH值的过程中,应注意避免过度调节,以免对培养细胞产生不良影响。

5. 加热消毒:将配制好的培养基加热至沸腾,保持沸腾状态持续5-10分钟,以达到消毒的目的。

在加热过程中,应注意避免溢出和烧焦,同时要保持试剂的充分混合。

6. 灭菌冷却:将消毒完毕的培养基冷却至适宜的温度,通常为45-50摄氏度。

在冷却过程中,应避免引入环境中的微生物污染,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。

7. 分装保存:将冷却好的培养基分装到无菌培养皿或试管中,并密封保存。

在分装过程中,要注意避免试剂接触到外界空气,以防止污染。

二、培养基配制的注意事项1. 实验环境要保持清洁,操作过程要注意无菌操作,以避免试剂受到污染。

2. 在配制过程中,应准确称取试剂的质量,并按照配方中的比例进行配比,以保证培养基的质量和配方的准确性。

3. 在试剂溶解和调整pH值时,应充分搅拌均匀,确保试剂充分溶解和均匀混合。

4. 加热消毒时,应注意控制加热时间和温度,以避免试剂烧焦或溢出。

5. 冷却过程中,要避免污染和细菌的侵入,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。

6. 培养基的分装要在无菌条件下进行,并尽快密封保存,避免试剂受到外界空气和微生物的污染。

培养基配制SOP

培养基配制SOP

培养基配制SOP1.目的确保各种培养基及稀释液配制过程标准、规范。

2.范围2.1.本SOP适用于pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液的配制,pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液可作为供试品稀释液。

2.2.本SOP适用于营养肉汤培养基的配制,营养肉汤培养基用于一般细菌培养。

2.3.本SOP适用于改良马丁培养基的配制,改良马丁培养基用于生物制品无菌试验,检查真菌和腐生菌。

2.4.本SOP适用于改良马丁琼脂培养基的配制,改良马丁琼脂培养基用于生物制品无菌试验,检查真菌和腐生菌。

2.5.本SOP适用于硫乙醇酸盐流体培养基的配制,硫乙醇酸盐流体培养基用于药品及生物制品等的无菌试验,检查需氧菌和厌氧菌。

2.6.本SOP适用于玫瑰红钠琼脂培养基的配制,玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌总数测定。

2.7.本SOP适用于营养琼脂培养基的配制,营养琼脂培养基用于一般细菌培养。

2.8.本SOP适用于胰酪胨大豆肉汤培养基的配制,胰酪胨大豆肉汤培养基用于真菌、需氧菌无菌检查。

2.9.本SOP适用于0.1%蛋白胨水溶液配制,0.1%蛋白胨水溶液可作为供试品稀释液。

2.10.本SOP适用于胰酪胨大豆琼脂培养基的配制,用于一般细菌分离培养。

2.11.本SOP适用于品红亚硫酸钠琼脂培养基的配制,用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和鉴别。

2.12.本SOP适用于酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基的配制,用于含蜜浆剂酵母菌数测定。

3.定义无4.职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行;4.2.QA、QC组长质量管理部经理负责本规程的审核;4.3.质量总监负责批准本规程;4.4.QA负责本规程执行的监督。

5.引用标准厂家说明书6.材料6.1.pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液(干粉),营养肉汤培养基(干粉),改良马丁培养基(干粉),改良马丁琼脂培养基(干粉),硫乙醇酸盐流体培养基(干粉),玫瑰红钠琼脂培养基(干粉),营养琼脂培养基(干粉),胰酪胨大豆肉汤培养基(干粉),蛋白胨(干粉),胰酪胨大豆琼脂培养基(干粉),酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(干粉),品红亚硫酸钠琼脂(干粉)。

培养基配制及适用性检查操作规程

培养基配制及适用性检查操作规程

XXXXXXXX有限公司质量控制管理制度1 目的:建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程,规范实验人员的操作流程。

2 范围:适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。

3 依据:《药品生产质量管理规范(2010年修订)》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部。

4 职责:4.1 微生物检验员:负责实验室所需求的培养基管理工作,使日常检验可以顺利进行。

4.2微生物检验主管:负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。

5 内容5.1 培养基的申购:根据检验项目、工作量和工作进度的需求,提前一个月进行所需的培养基申购。

申购时需指定培养基供应商,必要时进行供应商审计。

5.2 培养基的验收5.2.1 培养基到货后,微生物室检验员应进行验收。

验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商,应与申购单一致;检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。

5.2.2 验收合格后,登记于《培养基领用台账》(附记录文件编号:ZL-041)5.3 培养基的贮藏5.3.1 未开封的培养基贮存低温、干燥、和避光条件下。

已开封的培养基应盖紧,贮存于阴凉处。

5.3.2灭菌后培养基储存期为7天。

5.4 培养基的配制5.4.1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》(附记录文件编号:ZL-025)。

5.4.2培养基配制方法5.4.2.1 使用商品化合成培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制,如重量/体积、灭菌条件和操作步骤等。

5.4.2.2 水、容器具要求:培养基配制均采用纯化水,培养基配制所用容器和配套器具应洁净。

5.4.2.3 称量与分装:快速称量所需量的合成培养基(必要时佩戴口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有有毒物质的培养基粉末)。

以免吸潮。

先加入适量的水,充分混合。

注意避免培养基结块,然后加水至所需的量。

根据说明书要求选择是否加热。

分装体积不超过容器体积的2/3。

配制斜面等含琼脂的培养基也需加热煮沸至完全溶解后分装。

培养基配制使用操作规程0

培养基配制使用操作规程0

培养基配制使用操作规程0一、实验前准备1.确定所需的培养基种类和配制量。

2.准备所需的实验材料和设备,如试剂、培养基成分、量筒、称量器具等。

3.检查所使用的设备和容器,确保其干净无污染。

二、配制培养基1.根据培养基配方,按照比例准确称取所需的培养基成分。

不同的培养基成分可能有不同的配比,应根据具体要求进行配制。

2.准确称取培养基成分后,将其放入一个干净的容器中。

如果配制的培养基成分较多,可以选择使用一个混合容器,将不同的成分分批加入。

3.加入一定量的去离子水,使培养基成分溶解均匀。

注意搅拌培养基溶液,以确保成分充分溶解。

4.根据培养基配方需要,调整培养基的pH值。

可以使用酸碱溶液进行调节,pH值应根据具体要求控制在适宜范围内。

5.根据培养基配方需求,加入一定量的琼脂或琼脂糖,使培养基凝胶化。

注意在加热溶化琼脂时要确保充分溶解,并避免过热。

6.将配制好的培养基溶液均匀地倒入培养皿或试管中,封装好,并在密封处涂抹石蜡或添加适量的抗生素用于防止污染。

三、消毒和灭菌处理1.培养基配制完成后,应进行标本消毒处理,以确保培养基无菌。

可以使用自主炉、高压灭菌器或紫外线灯进行消毒处理,处理时间和方法应根据具体要求进行。

2.检查消毒后的培养基容器,确保无菌。

如果发现有污染或者其他异常情况,需要重新消毒处理。

四、记录1.培养基配制完后,需要记录相关信息,如培养基种类、配制日期、配制人员等。

这些记录有助于追溯和分析培养基的质量问题,也方便后续使用和管理。

以上是培养基配制的操作规程,这些规程主要是为了确保培养基质量的可靠性和可重复性。

执行这些规程可以减少操作失误和污染的风险,保证实验结果的准确性和可靠性,同时也有助于规范实验室管理和操作流程。

SOP-QC-001样本无菌检验标准操作规程(SOP)

SOP-QC-001样本无菌检验标准操作规程(SOP)

目的:制定无菌检验标准操作规程,确保检验操作正确。

范围:本标准适用于本公司静脉注射产品无菌检验操作。

责任者:质管部、化验室主任、QC检验员内容:1、标准依据:《中国药典》2010年版二部附录XI H。

2、简述:无菌检查方法系用于检查药品是否无菌的一种方法。

检查项目包括需气菌、厌气菌及真菌检查。

若供试品符合该项检查方法的有关规定,仅表明了在该检验条件下未发现微生物污染。

3、环境要求:该项检查应在环境洁净度万级(C级)背景下的局部百级(A级)的单向流区域内或隔离系统中进行。

其全过程必须严格遵守无菌操作。

防止微生物污染,但所采取的措施不得影响供试品中微生物的检出。

操作前环境洁净度应经验证。

日常检验需对试验环境进行监控。

4、方法验证:进行该项检查前应按照《无菌检查方法验证规程》确认该方法的适用性。

5、人员要求:无菌检查人员必须具备微生物专业知识,并经过无菌技术培训。

6、检验数量及检验量:6.1、每支供试品接入每种培养基的最少量:5ml(100ml-500ml),1ml (20-100ml),0.5ml(5-20ml)。

7、细菌培养温度为30~35℃,真菌培养温度为23~28℃。

8、仪器用具:垂直层流超净工作台、生化培养箱、电热恒温水浴箱、显微镜、手提灭菌器、离心机、双碟、试管、三角瓶、刻度离心管、注射器(针头)、微量移液器、剪刀、镊子、注射器盒、75%酒精棉球9、消毒剂配制:9.1、75%乙醇溶液(配制酒精棉球用)。

9.2、0.2%新洁尔灭溶液(配制消毒棉球用)。

9.3、2%来苏尔溶液(配制消毒棉球用)。

10、试剂及培养基的配制:10.1、0.1%蛋白胨水溶液:取蛋白胨1.0g,加水1000ml,微温使溶解,滤清,调节PH值至7.1±0.2,分装,灭菌。

10.2、pH7.0灭菌氯化钠-蛋白胨缓冲液:取磷酸二氢钾 3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g,加水1000ml微温溶解,滤清,分装,灭菌。

培养基配制标准操作规程

培养基配制标准操作规程

培养基配制标准操作规程一、目的:规范培养基配制操作流程,确保培养基的质量符合要求。

二、适用范围:本规程适用于实验室培养基配制操作。

三、岗位责任(1)实验员:根据实验需要,按照配方准确称量试剂,按照标准操作流程进行配制,保证培养基的质量。

(2)实验室主任:对实验员所配制的培养基进行审核,对质量不符合要求的培养基要求实验员进行整改,并记录在实验室日志中。

四、基础设施和基本设备实验室应配备足够的天平、电子计时器、玻璃棒、玻璃瓶、蒸馏水机、高压灭菌器等基础设备及设施。

五、培养基配制操作流程(1)准备试剂应先仔细阅读所选培养基的配方,根据试剂名称和精确剂量,准备称量瓶、试剂架、天平等计量仪器。

配制时应避免手触、相沾等操作,避免交叉污染。

(2)称量试剂初次粗择试剂后,建议先将试剂转移到称量室中,配合现代科技的天平,便可精确计算配比比例。

所有试剂称重时必须使用内配计量,不能使用外配以避免误差增大影响试剂配比。

(3)配制溶液将所需试剂依照标准配比和数量先加入容器,再用分度水小心勾兑均匀,用方法如下:先将容器中整量标容量的水加入到标记线以下。

然后倒入试剂,如对称量试剂的总质量要求是1000 ml,而已注入200 ml水时,即将剩余的实验试剂灌入到950毫升,再次将液面加到1000毫升,如此反复操作完整。

(4)用自来水采样,并抽真空去泡水样的采集,我们应该在步入实验室后在首先采用自来水进行放置,保留水样大概20分钟后,用玻璃棒试管器分别进行抽取。

培养基液体所产生的泡沫和气泡需要用抽真空的方式去除,以确保培养基的质量。

(5)实验室水龙头口淋洗容器本次所述的辛勤劳累的操作一旦完成,容器内部的物质已经被彻底摧毁,真正变成了医学科学上可行的培养基,此时我们应该用干净的管子将洗涤水彻底排完,真正保障实验室完全无菌的标准。

(6)高压灭菌用高压灭菌锅进行消毒,根据不同的材质和设备使用说明,对耐高温不锈钢的容器用121度高压灭菌20分钟,可以保证彻底去除培养基中的细菌。

培养基配制及适用性检查标准操作规程

培养基配制及适用性检查标准操作规程

培养基配制及适用性检查标准操作规程目的:建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程,规范实验人员的操作流程。

范围:适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。

依据:《药品生产质量管理规范(修订)》、《中华人民共和国药典》第四部职责:1.微生物检验员:负责实验室所需求的培养基管理工作,使日常检验能够顺利进行。

2.微生物检验主管:负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。

内容1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求,提前一个月进行所需的培养基申购。

申购时需指定培养基供应商,必要时进行供应商审计。

2 培养基的验收2.1 培养基到货后,微生物室检验员应进行验收。

验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商,应与申购单一致;检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。

2.2 验收合格后,登记于《培养基领用台账》(附记录文件编号:SMP-10-QC-009-02(00))。

3 培养基的贮藏3.1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室,使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。

已开封的脱水培养基应盖紧,贮存于阴凉库。

3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后,置4~8℃冷藏保存待用。

灭菌后培养基储存期为7天。

4 培养基的配制4.1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》(附记录文件编号:SMP-10-QC-009-02(00))。

4.2培养基配制批号原则:原材料批号-配制日期:比如 1月1日配制的培养基,培养基干粉批号000000,配制批号为:00。

配制好的培养基贴《培养基标签》(附记录文件编号:R-SMP-10-QC-009-03)。

(注:同一天同一培养基配置多次的,在原批号后加“-”加“数字”表示,如00-01)4.3培养基配制方法4.3.1 使用商品化脱水合成培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制,如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。

实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照配方准确配制,并记录相关信息如:培养基名称和类型及试剂级别,每个成分物质含量、制造商、批号,pH 值,培养基体积/分装体积,灭菌条件(灭菌方式、温度及时间),配制日期、人员等,以便溯源。

培养基 配制方法

培养基 配制方法

培养基配制方法
培养基的配制方法是根据不同微生物的生长要求来确定的。

下面是一般的培养基配制方法:
1. 准备所需成分:根据所需的培养基成分,准备好相应的化学品和试剂,如氨基酸、糖类、盐类、维生素等。

2. 称量和溶解:按照配方中各成分的比例和浓度,称取相应的化学品,并加入适量的蒸馏水或去离子水中溶解。

3. 调节pH 值:使用pH 仪或pH 纸检测溶液的pH 值,并根据需要,用盐酸或氢氧化钠等酸碱溶液调节pH 值,使其符合要求。

4. 加热和消毒:将配制好的培养基溶液倒入试管、烧杯等容器中,并加热至沸腾,持续煮沸几分钟以杀灭其中的微生物。

5. 经冷却和灭菌:将煮沸后的培养基放置自然冷却至室温,并使用高压灭菌器或培养器进行灭菌处理,以确保培养基的无菌性。

6. 添加营养补充物:在无菌培养基冷却后,根据需要可以添加营养补充物,如血清、酵母提取物等,以满足特定微生物的生长需求。

7. 盛装分装:将配制好的培养基倒入无菌试管、琼脂瓶或平板上,根据需要冷却凝固成固体或保持为液体状态。

8. 贮存和标签:将分装好的培养基密封保存在低温冰箱或冷库中,并在容器上贴上标签,注明培养基的名称、配方、pH 值和贮存日期等信息。

以上是一般培养基的配制方法,不同类型的培养基可能还有其他特殊的步骤和要求。

在配制过程中要注意无菌操作,以确保培养基的纯净度。

培养基配制标准规程

培养基配制标准规程

目的:建立培养基的配制方法,保证培养基质量稳定可靠,使检验结果准确可信。

适用范围:公司所有培养基责任人:质量管理部主任、检验员内容:1、培养基管理员应具有一定的微生物专业知识并经过培训合格。

2、培养基制备前的准备工作。

2.1、制备培养基所用的玻璃器皿,如吸管、试管、三角瓶和平皿等。

新的玻璃器皿(首次使用)和再次使用的分别按各自批准的规程洗涤、干燥。

2.2、干燥后器皿按规定程序进行灭菌。

2.3、已灭菌的器皿按规定要求保存,并在规定期限内用完。

2.4、用前检查质量(颜色、结块等),变质不符合要求的不得使用。

3、培养基的制备3.1、按处方生产的符合规定的脱水培养基3.2、配制:所用溶剂为纯化水。

脱水培养基应完全溶解于水中,再行分装与灭菌。

配制时若需加热助溶。

应注意不要过度加热,避免培养基颜色变深。

所用器具应用纯化水充分冲洗,以消除清洁剂和外来物质的残留。

3.3、灭菌:培养基配制后应在2小时内灭菌,避免细菌繁殖。

应按生产商提供的或验证的参数进行湿热灭菌,pH值范围3.4、认真填写配制记录,内容有:名称、配制批号、操作方法中重要参数(时间、压力、温度)、配制日期、配制者、使用期限。

3.5、在每个已灭菌的培养基容器外标明名称、配制批号、配制日期、使用期限。

4、培养基的质量检查:对初次使用或新购进的培养基均要进行适用性检查,并做好适用性记录,记录内容:名称、配制日期、接种菌名称、接种菌培养(阳性检查)结果、未接种菌培养(阴性检查)结果、结论、检查日期、检查者。

5、经检查验证合格的培养基方可准许使用,否则不准使用。

6、培养基的保存6.1、琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放,以防破坏凝胶特性。

6.2、配制好的培养基应保存在2-25℃,避光的环境,若保存于非密闭容器,一般不超过3周。

6.3、融化的培养基应置于45-50℃的水浴中。

6.4、倾注培养基时应擦干容器外表面的水分,以免容器外壁的水滴进入培养皿造成污染。

培养基的配制标准操作规程

培养基的配制标准操作规程

培养基的配制标准操作规程1.目的选取天然或纯化的营养物质及其相应的渗透压、酸碱度等理化条件,经过加工,制成不同的营养基质,藉以在人工条件下培养供检验用的微生物。

2.适用范围适用于培养基的配制操作。

3.责任者操作员。

4.仪器硅胶塞、试管、平皿、吸管、漏斗、高压锅、三角瓶、天平。

5. 内容5.1 准备5.1.1 玻璃器皿洗涤5.1.1.1 制备培养基所用吸管、试管,三角瓶和平皿等新玻璃器皿,因有灰尘和游离碱性物质,先用水冲洗干净。

然后置3%的盐酸中浸泡约12H。

取出后,用清水冲洗干净,再用纯化水冲洗1~2次,晾干后备用。

5.1.1.2 凡各种装量大而又不宜高压的含糖培养基,所用的玻璃器皿应事先灭菌,以免因一次性低压灭菌不彻底而染菌。

5.1.2 用具包装与灭菌5.1.2.1 硅胶塞:应用水冲洗干净,再以纯化水冲洗1~2次,烘干备用。

5.1.2.2 试管:各种试管最好先配上合适的硅胶塞,待高压灭菌后再分装培养基,可防止污染。

5.1.2.3 平皿:取洗净晾干的平皿,每7 套作一个包装,121℃ 30分钟灭菌后烘干备用;也可用160℃ 2小时干热灭菌后备用。

5.1.2.4 吸管:供染菌限度检验用的吸管,应防止堵塞,故选用红刻度粗下口的。

用前洗净烘干,上口塞进少许普通棉花,松紧适度,以防污染。

然后按其容量大小,分别放在用双层牛皮纸做成的纸袋或者金属盒内,包严经121℃ 30分钟灭菌后烘干备用。

5.2 操作5.2.1 根据用途选择培养基,按其用法进行准确称量和加纯化水,并填写配制记录如名称、配制量、配比、配制日期、配制者。

5.2.2 培养基完全溶解后,进行过滤和分装,液体培养基一般应澄清无沉淀,否则影响观察细菌生长结果。

过滤时可用滤纸或脱脂棉。

5.3 分装5.3.1 各种液体培养基分装试管时,每支应按试管大小及用途不同定量分装,可用吸管或注射器分装,也可用漏斗分装。

一般漏斗下口连接一段橡胶管,管口插一小段玻璃管,再加上一个弹簧夹控制流量,分装时将漏斗放在支架上,内装培养基,然后将下口插入试管中即可按量将培养基逐管分装,注意,不同品种的培养基用过漏斗,应充分洗净后再用,以防两种培养基互相混淆,影响使用效果。

配置培养基流程

配置培养基流程

配置培养基流程
配置培养基流程主要包括以下步骤:
1. 配方准备:根据所需微生物或细胞种类,查阅资料确定培养基配方,列出所需成分(如蛋白胨、酵母浸膏、无机盐、生长因子等)及浓度。

2. 称量溶解:在无菌条件下,精确称取各成分,加入蒸馏水或去离子水中,充分搅拌直至完全溶解。

3. 调节pH值:使用精密试纸或pH计测量溶液pH,如有必要,加入适量酸碱进行调节,使pH达到适宜范围。

4. 过滤灭菌:将配置好的液体培养基通过0.22μm滤膜过滤除菌,或者采用高压蒸汽灭菌法灭菌,确保无菌环境。

5. 冷却凝固:对于固体培养基,灭菌后待冷却至约50℃左右时,倒入无菌平皿中,待其自然冷却凝固形成培养平板。

6. 储存备用:已配置好的培养基应在适宜条件下储存(如4℃冰箱保存),并在有效期内使用。

以上流程确保了培养基能够提供微生物或细胞生长繁殖所需的营养条件,并确保实验不受污染。

培养基配制操作规程

培养基配制操作规程

1.目的:本规程规范了微生物实验室培养基的配制操作。

2.范围:适用于微生物检测使用的各类培养基配制。

3.职责:微生物检验员对本规程的实施负责。

质量部负责人负责监督。

4.内容4.1 培养基定义指人工配制的生物营养物质,即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。

通常指干粉培养基和配制好的琼脂、肉汤、稀释液等。

4.2 培养基制备前准备工作4.2.1 准备配制培养基用的天平、三角瓶、量筒、称量纸、小勺、电阻炉和所需的纯化水等,新的玻璃器皿(首次使用)和再次使用的玻璃器皿分别按各自批准的规程洗涤、干燥。

4.2.2 按照所检项目微生物限度的种类,准备相应的培养基。

4.3 培养基的制备4.3.1溶解:根据培养基瓶上标签说明和所需配制量称取干燥培养基,置烧杯中,加入适量纯化水,放到电炉上加热,使溶解。

如有沉淀,应于溶化后趁热过滤。

4.3.2 校正酸碱度:根据培养基瓶上标签说明,用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节pH值达到规定的要求。

如与所需pH不符,可用酸或碱液加以校正,试剂规格应为化学纯以上。

4.3.3 培养基分装:培养基一般在高压灭菌前分装,将配制好的培养基分装到若干个三角形瓶或试管中,分装量不宜超过该容器的2/3,以免灭菌时外溢。

瓶口塞好塞子,盖上牛皮纸并用绳子捆扎好。

硫乙醇酸盐流体培养基,分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基的氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。

4.3.4 培养基的灭菌:配制好的培养基依据说明书规定时间、方法进行灭菌,配制后宜在2小时内灭菌,避免微生物滋生避免细菌繁殖。

培养基应只能进行一次蒸汽灭菌处理。

4.3.5 培养基的使用尽量做到现配现用。

4.4 培养基的保存和使用。

4.4.1 灭菌后的培养基应保存在2~25℃(一般放入冰箱中保存),防止被污染,可在三周内用毕。

临用时,取出,用水浴加热使溶化。

已溶化的培养基应一次用完。

培养基配制作业指导书(SOP)

培养基配制作业指导书(SOP)
5.2将蛋白胨、氯化钠混合于肉浸液中加热溶解,再加入葡萄糖、枸橼酸钠、对氨苯甲酸及硫酸镁,继续煮沸5min,并补足失水,调整pH至7.8。过滤分装,每瓶50ml,高压灭菌115℃20min后,每瓶加入青霉素酶50 U,经无菌试验合格后,冷却备用。
6、用法
将采取的血液标本,以无菌手续注入培养瓶中(血液1ml,培养液10ml),置35℃培养箱内,每天1次取出观察结果。如有细菌生长,可出现数种不同的表现,应随时作分离培养,可选用血琼脂、伊红美蓝琼脂及巧克力琼脂平板等。无细菌生长表现的培养瓶,需连续观察7d,仍无细菌生长方可弃去。在观察的过程中,至少应作两次分离培养。
4、该作业指导书变动程序
本作业指导书程序的改动,可由任一使用本作业指导书的工作人员提出,并报经下述人员审核、批准和签字:专业主管、科主任。
5、工作程序
5.1蛋白胨(或月示胨)10g,氯化钠5g,肉浸液(或心浸液)1L,葡萄糖3g,枸橼酸钠3g,5g/L对氨基苯甲酸水溶液10ml,1mol/ L硫酸镁溶液20ml,青霉素酶1000 U。
5工作程序51蛋白胨或月示胨10g氯化钠5g肉浸液或心浸液1l葡萄糖3g枸橼酸钠3g5gl对氨基苯甲酸水溶液10ml1mol硫酸镁溶液20ml青霉素酶100052将蛋白胨氯化钠混合于肉浸液中加热溶解再加入葡萄糖枸橼酸钠对氨苯甲酸及硫酸镁继续煮沸5min并补足失水调整ph至78
培养基配制作业指导书(SOP)
编制/日期
*****/2005.01.20
审核/日期
*****/2005.01.20
批准/日期
*****/2005.02.20
注:
⑴枸橼酸钠为抗凝剂,可使血液加入培养基中不凝固。
⑵对氨基苯甲酸主要中和血液中磺胺类药物的抑菌作用。

基本培养基配置的流程及注意事项

基本培养基配置的流程及注意事项

基本培养基配置的流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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培养基配制的基本过程

培养基配制的基本过程

培养基配制的基本过程1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,根据培育基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最终补足所需水分.对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足.配制固体培育基时,先将上述已配好的液体培育基煮沸,再将称好的琼脂加入,连续加热至完全溶化.并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦.2、调整pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培育基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调整,直到调整到配方要求的pH值为止.3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培育基过滤.用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤.4、分装已过滤的培育基应进行分装.假如要制作斜面培育基,须将培育基分装于试管中.假如要制作平板培育基或液体、半固体培育基,则须将培育基分装于锥形瓶内.分装时,一手捏松弹簧夹,使培育基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培育基.分装时,留意不要使培育基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染.装入试管的培育基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定.一般制作斜面培育基时,每只15150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培育基,每只20230毫米的试管约装12~15毫升.每只锥形瓶装入的培育基,一般以其容积的一半为宜.5、加棉塞分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口.堵棉塞的主要目的是过滤空气,避开污染.棉塞应采纳一般新奇、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用.制作棉塞时,要依据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞.棉塞作成后,应快速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入.棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适.棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取.塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,预备灭菌.6、制作斜面培育基和平板培育基培育基灭菌后,如制作斜面培育基和平板培育基,须趁培育基未凝固时进行.(1)制作斜面培育基.在试验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右.将试管头部枕在木条上,使管内培育基自然倾斜,凝固后即成斜面培育基.(2)制作平板培育基.将刚刚灭过菌的盛有培育基的锥形瓶和培育皿放在试验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培育皿盖,右手快速将培育基倒入培育皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度.铺放培育基后放置15分钟左右,待培育基凝固后,再5个培育皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培育基末长杂菌,即可用来培育微生物.。

培养基的配置方法

培养基的配置方法

培养基的配置方法
1. 准备所需的化学试剂和溶剂:如氨基酸、葡萄糖、盐类、维生素、磷酸盐缓冲液等。

2. 将所需化学试剂按照配方比例称量或称取。

3. 将溶剂(通常为蒸馏水)加热至适当温度,然后将化学试剂逐一加入,并充分搅拌使其充分溶解。

4. 调节溶液的pH 值至合适的范围,通常为7.0。

5. 滤过溶液以去除悬浮物和异物。

6. 将溶液分装至培养皿或试管中。

7. 最后,对培养基进行高温灭菌,以杀灭可能存在的微生物污染。

需要注意的是,不同生物、不同细胞株所需的培养基成分、比例和条件可能会有所不同,因此在配置培养基时需要根据具体需求进行调整。

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药包材生产质量管理文件
目的:建立培养基配制的基本操作规程,为培养基配制人员提供正确的操作规程。

范围:本标准适用于培养基的配制。

责任人:化验员。

内容:
1.本规程中配制所用培养基均为脱水干燥商品培养基。

2.微生物检查用培养基的配制
2.1配制用具
蒸汽灭菌器、电炉、玻璃棒、三角瓶、烧杯、棉塞、托盘天平、砝码、药匙、量筒。

2.2根据配制量称取干燥培养基基质,置烧杯中。

2.3根据培养基瓶上标签说明,加入适量纯化水,使溶解。

2.4将烧杯放到电炉上煮沸。

2.5根据培养基瓶上标签说明,调节pH值,使灭菌后pH值达到规定的要求。

2.6分装到若干个三角瓶中,瓶口塞好棉塞,盖上牛皮纸捆扎好,放入灭菌器中,按规定条件灭菌。

2.7灭菌后的培养基,待冷却后,放入冰箱中保存,临用时,取出加热使溶解,再倾注入培养皿中。

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