丙二醛含量的测定

丙二醛（MDA）含量的测定

(一)、设备及试剂

设备分光光度计、离心机、铝锅、电炉、研钵、剪刀、试管

试剂 10%三氯醋酸(TCA)、0.5%硫代巴比妥酸(TBA以10%三氯醋配制)

(二)、操作方法

1．MDA的提取

取叶片数片剪成0.5cm2左右的小块，称取1g置研钵中。加2ml 10%TCA和少许石英砂，研磨成匀浆，加入8ml 10%TCA继续研磨均匀。匀浆在3000×g下离心10min，上清液即为提取液。

2．显色测定

10ml刻度试管2支，一支加入上清液3ml，另一支加水3ml(空白)，各加0.5%的TBA溶液3ml，摇匀，在沸水浴中煮沸10min(溶液出现小气泡开始计时)，立即在冷水中冷却。如有沉淀，应离心。以空白作参比，在分光光度计450cm、532nm、600nm下测定样品反应液的消费值(用1cm光径的比色杯)

(三)、实验结果

C(μmol · L-1)=6.45(OD532– OD600)–0.56 OD450

MDA的含量(μmol · g-1 FW)= C×V×10-3 / W

OD532 OD600 OD450 ：450nm、532nm、600nm波长下的光密度

C：提取液中MDA的浓度(μmol · L-1)

V：提取液的总体积(ml)

W：样品鲜重(g)