外周血单个核细胞采集出现乳糜血处理方法
凝血因子检测工作中两种处理乳糜血方法的评价
两种 方 法 处理 前 后 结 果 比较 ( P>0 . 0 5 ) , 差 异 无 统 计 学意 义 ; 2 0例 高 度 乳 糜 标 本 经 两 种 方 法 处 理 后 凝 血 酶 原 时 间 ( P T) 结 果 与 初
始 结 果 比较 有 统 计 学意 义( P<O . 0 1 ) , 纤 维 蛋 白原 ( F I B ) 处 理 前 检 测 不 出, 两种 方法处理后 均能检 测 出结果, 且 都 与 患 者 病 情 相
・
检 验技 术与方 法 ・
凝血 因子检 测 工作 中两种处 理 乳糜 血方 法 的评价
张 健 , 厉 淑青。 ( 1 . 解 放 军第二 六四 医院检验 科 , 山西 太原 0 3 0 0 0 1 ; 2 . 浙 江 省 东 阳 市巍 山 医 院 防保 科 , 浙江 东阳 3 2 2 1 0 9 )
摘 要 : 目 的 评 价 低 温 高速 离・ L , / 法 和 无 水 乙醚 处 理 法 消 除 高脂 肪 乳 糜 对 凝 血 功 能 测 定 结 果 的影 响 。方 法 使 用 S Y S ME X C A 一 7 0 0 0血 液 凝 固 分析 仪 检 测 1 6 例 非 乳糜 标 本 及 2 O例 高 度 乳 糜 标 本 经 两 种 方 法 处 理 前 后 的 结 果 。结 果 1 6例 非 乳 糜 标 本 经
血意外抗体鉴定的历史 记录非 常重要[ 9 ] 。Mu r ( MN S 1 0 ) 血 型
[ 6 ] 刘达庄 , 朱 自严 , B y r n e P, e t a 1 . 低 频 率 抗 体 抗一 Mu r 引起 的溶 血 性 输血反应[ J ] . 中国输 血杂 志 , 2 0 0 0 , 1 2 ( 1 ) : 8 - 1 0 . [ 7 ] 刘达庄. 稀有 血型 工作在 中国的发 展状 况 [ J ] .中 国 输 血 杂 志 ,
【警惕】辛明哲医师:血液标本变色,可能是乳糜血在作怪!
在上个月的手术患者中,我们遇到了这样一位个案,抽血检查时,他的血液标本呈现浑浊,上层为乳白色油状物,这是什么情况呢?遇到这种情况该怎么办?是否能够继续手术?让我们来看一看代谢手术专家辛明哲医师是怎么说的。
简单来说,乳糜血就是“泛着浮油的血”或称为“脂血”,血液呈乳白色或浑浊状,这种情况出现表示血液中含有大量的乳糜微粒(CM)。
“乳糜微粒”的主要生理功能是转运外源性的三酰甘油。
它是小肠肠壁细胞合成的富含三酰甘油的巨大脂蛋白,一般在高脂肪饮食后产生,半衰期10分钟左右,最终运转至肝脏。
正常人空腹12个小时候,血液中几乎无乳糜颗粒。
那么什么情况下会形成乳糜血呢?我们吃的脂肪经过在小肠消化、吸收后,变成细小的乳糜微粒进入血液,乳糜微粒多到一定程度时,血清就由清澈透明的淡黄色液体变成乳白色的粘稠液体,这时,我们医学上就叫它为乳糜血。
面对乳糜血,我们应该怎么做?对于在检查中发现已经有乳糜血症状的患者来说,需要从饮食、运动等多方面来调节。
在饮食方面:控制饮食总热量、控制油脂摄取量避免高油食物、避免摄取过多的淀粉类实物、减少甜食等的摄取、多吃蔬菜水果、戒酒等都是有效控制乳糜血的方法。
在运动方面:通过运动使整个机体耗氧、耗能增加。
脂肪作为体内的主要供能物质,其分解也会随之增加。
如果真的发现有乳糜血的症状,最好的方法是咨询专业的营养医师,因为我们自己认知的健康饮食也不一定是真正的健康。
此外,我们也需要加强相关的健康知识科普,不要等到发现时才感叹为时已晚,防患未然才是最根本的解决方法。
目前,我们的个案正在医生的建议下进行调养,当血液状态恢复正常后就可以顺利手术啦!。
人外周血单个核细胞的采集、分离和保存标准
人外周血单个核细胞的采集、分离和保存标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:人外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs)的采集、分离和保存是在医学研究和临床诊断中非常重要的步骤。
PBMCs是一类具有免疫功能的细胞,包括淋巴细胞、单核细胞和浆细胞,能够在机体的免疫应答中发挥重要作用。
为了保证试验结果的准确性和可靠性,对PBMCs的采集、分离和保存必须按照相应的标准进行操作。
一、采集1. 选择合适的采集方法:一般常用的采集方法包括静脉抽血和手指取血等,静脉抽血常用于采集较多血液量的情况,手指取血则适用于采集少量血液的情况。
2. 确保采集操作标准化:在采集PBMCs的过程中,应该遵守严格的消毒和无菌操作规程,以防止细菌和病毒的污染。
3. 采集完整的血液样本:为了确保PBMCs的纯度和稳定性,应该尽量避免气泡和血细胞破损导致的RNA降解等情况。
二、分离1. 使用适当的分离方法:一般常用的PBMCs分离方法包括密度梯度离心和磁珠分选等,密度梯度离心适用于分离较大量的PBMCs,磁珠分选则适用于分离特定类型的细胞。
2. 选择合适的分离液:密度梯度离心中一般使用的分离液包括Ficoll和Percoll等,磁珠分选中则需要选择特定的磁珠标记物。
3. 保证分离效率和纯度:在PBMCs的分离过程中,应该确保细胞的分离效率和纯度,避免细胞的损失和杂质的混入。
三、保存1. 选择合适的保存条件:PBMCs的保存条件包括温度、储存液和容器等要素,应该选择适合PBMCs存活的条件进行保存。
2. 快速冻存PBMCs:为了避免细胞的降解和失活,应该在采集和分离PBMCs后尽快将其冻存。
3. 定期监测保存效果:在存储PBMCs的过程中,应该定期监测PBMCs的存活率和纯度,以确保PBMCs的质量和稳定性。
对于人外周血单个核细胞的采集、分离和保存,在操作的过程中应该严格按照相应的标准进行,以确保PBMCs的质量和稳定性,为后续的研究和临床应用提供可靠的基础。
人外周血单核细胞分离液使用说明
人外周血单核细胞分离液使用说明产品内容:试剂A200mL试剂D200mL样本稀释液(赠品)200mL清洗液(赠品)200mL保存:18℃-25℃保存,有效期两年。
人外周血单核细胞分离液易感染细菌,需无菌条件下操作。
无菌条件下操作,启封后常温保存。
如4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。
操作步骤:全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。
首先取抗凝血按体积比1:1的比例加全血及组织稀释液混匀,根据稀释后的样本量大小,分以下两种情况:情况A:稀释后血液样本小于5mL时,实验方法如下:1.取一支15ml离心管,依次小心加入试剂A、试剂D(体积比为3:2,试剂总量与稀释后的血液样本量相等。
如稀释后的血液样本为5ml,则先后加入试剂A3ml、试剂D2ml),制成梯度界面,各液面分层一定要清晰。
2.用吸管小心吸取稀释后的血液样本加于分离液液面上,400-550g,离心20-30min(注:根据血液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到最佳分离效果)。
3.离心后,此时离心管中由上至下分为五层。
第一层为稀释液层。
第二层为透明试剂D液层。
第三层为环状乳白色单核细胞层。
第四层为透明试剂A液层。
第五层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层试剂D层和第三层乳白色细胞层到另一15ml离心管中,往所得离心管中加入10ml清洗液,混匀细胞。
5.250g,离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5ml清洗液重悬所得细胞。
8.250g,离心10min。
9.重复6、7、8,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。
10.差异贴壁法纯化细胞(1)用单核细胞无血清培养基或单核细胞完全培养基以1.5-3×106个/ml的密度重悬细胞,将细胞铺于一次性细胞板或细胞瓶中,放于37℃二氧化碳培养箱中进行贴壁培养。
(2)2-4小时内贴壁的为巨噬细胞前体(俗称为单核细胞)。
外周血单个核细胞的分离
外周血单个核细胞的分离
概述
外周血单个核细胞是一种白细胞。
通过分离单个核细胞,可以进行多种分子生物学实验和临床应用。
本文将介绍两种分离外周血单个核细胞的方法。
方法
密度梯度离心
1.将外周血收集到 EDTA 管中。
2.将 3 毫升 Ficoll-Paque™ PLUS 加入到 15 毫升离心管中。
3.轻轻加入同等体积的外周血到离心管,保持液面平整。
4.以 400g 的速度离心 40 分钟。
在离心温度达到室温前离心室门不得
打开。
5.用温和的力度将上清液吸出到新的离心管中,并在 1200g 的速度下
洗涤 2-3 次。
6.已经分离的单个核细胞可以在非抗凝血样上重悬。
此过程中加入生长
培养基以维持细胞质稳定。
磁性负选择法
1.将外周血收集到 EDTA 管中。
2.加入红细胞淋巴细胞分离液,根据厂家指南染色。
3.加入磁性微珠混合液,使单个核细胞与微珠组合。
4.放入磁场中过滤掉未与微珠组合的细胞及其他血细胞。
5.经过多次洗涤和离心,单个核细胞可以在非抗凝血样上重悬。
此过程
中加入生长培养基以维持细胞质稳定。
密度梯度离心法和磁性负选择法是分离外周血单个核细胞的两种有效方法。
这些方法对于多种分子生物学实验和临床应用都非常有用。
外周血单个核细胞的分离
实验二十四外周血单个核细胞的分离(Separation of mononuclear cell in peripheral blood)免疫细胞是一组不均一的细胞群体,它包括T、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞/巨噬细胞以及粒细胞等,这些细胞的生物学特性,如细胞的大小、密度、表面电荷、黏附能力以及细胞表面的分子标志等均存在差异,借助这些差异可区分不同的细胞类别。
外周血单个核细胞(PBMC)的分离主要有两种方法,即聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)分离法和聚乙烯吡咯烷酮硅胶(Percoll)分离法。
此处只介绍聚蔗糖-泛影葡胺分离法。
【实验原理】血液中单个核细胞的分离常采用密度梯度离心法。
市售淋巴细胞分离液是由聚蔗糖(Ficoll)和泛影葡胺(Hypaque) 按一定比例混合制成,20℃密度为1.077±0.001,单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其密度为1.050~1.077,而粒细胞和红细胞的密度为1.080~1.110。
将待分离的细胞悬液小心铺于淋巴细胞分离液上,经离心后单个核细胞悬浮于分离液上层界面,而红细胞与粒细胞沉于管底。
【主要试剂和器材】1.聚蔗糖-泛影葡胺分层液密度为1.077±0.001。
2.5g/L台盼蓝。
3.250U/ml肝素溶液用Hank,s液配制。
4.Hank,s液。
5.注射器、刻度离心管、吸管、滴管、血细胞计数板、载玻片、盖玻片。
6.水平离心机、显微镜。
【操作方法】1.抽取静脉血2ml,注入含有0.2ml肝素溶液的无菌试管中摇匀,作白细胞计数和分类计数。
再加入等量Hank,s液混匀。
2.取2ml分层液置于离心管中,将稀释血液沿管壁缓缓叠加于分层液上,形成清晰界面。
稀释血液与分层液的容积比例以2∶1~3∶1为宜。
3.置水平离心机中,2000r/min离心20min。
4.离心后从离心管的底部到液面分为四层,依次为红细胞和粒细胞层、分层液层、单个核细胞层、血浆层(含血小板和破碎细胞)。
人外周血单核细胞分离技术
人外周血单核细胞分离1. 抗凝血的预离心分别取正常人新鲜抗凝全血A: 20 mL于50 mL离心管中,以2 000 r /min离心20 min,吸弃上层血浆,获得下层沉淀细胞约10~12.5 mL。
2. 沉淀细胞的稀释与离心分离在所获取沉淀A 中的细胞中加入Hank′s液( 不含Ca2+、Mg2+, pH 7.2 ~7.6) 体积比仍未1:1,混匀,制成细胞悬液。
B: 无菌抗凝血与Hank′s液或PBS以1:1体积在试管中混匀。
另取一离心管,加入LTS1077淋巴细胞分层液,然后用毛细吸管距分层液上1cm处将细胞悬液小心而缓慢地加于其上面,使稀释血液重叠于分层液上。
此时稀释后的细胞悬液分离液淋巴细胞体积为:1:1。
与用水平离心机以2000 r /min 离心20min,离心结束后,取出离心管,可见管中液体已经分层。
管内可见分为4层:最上层是血浆,含部分血小板:第二层为薄薄的白膜层,主要台单个核细胞,还混杂有少量血小板;第三层为分离液层;第四层为粒细胞及红细胞,红细胞沉于管底,而粒细胞则紧贴在压积红细胞上呈一层很薄的白膜3. 单个核细胞的提取、洗涤与悬浮、贴壁吸去最上层的血浆,收集血浆层和淋巴细胞分离液交界面的单个核细胞,尽量全部吸出PBMC。
加3~4倍以上体积Hanks或PBS液于所得的单个核细胞中,用毛细吸管轻轻吹判均匀,避免产小气泡,液柱高度不超过离心管的2/3。
混匀后离心1500r/min离心10min,低速离心有利于去除细胞悬液中留存的血小板,去上清液。
注意:还可以先用吸管把雾状层上面的液体吸走,注意不要碰到雾状层,然后在把要的部分慢慢吸出来。
第二种方法,比较简单一些。
再用同样洗涤液洗涤细胞2次,1500r/min离心10min,洗去残留的淋巴细胞分离液。
再以RPMI-1640 培养基离心洗涤1次,吸尽上清,以充分去除血小板等杂质。
按每毫升血液标本加0.2 mL含20%小牛血清的Hank′s液( 或含10%胎牛血清及25 mmol /L hepas的RPMI-1640液3~4 mL) 重新混悬细胞37℃、5% CO2孵育箱中培养2 ~3 h后去除上清,得到贴壁的单核细胞。
外周血干细胞采集技术及护理
外周血干细胞采集技术及护理(一)采集术前准备及护理(1)向供者做必要的解释使之有心理准备;要求供者注意营养摄入,应用高蛋白、高热量、高维生素饮食,于采集前晚和当日晨改用低脂餐;沐浴清洁皮肤并更衣,上衣袖应宽松。
(2)应用重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可以有效地达到骨髓或外周血造血干细胞的扩增。
注意观察应用G-CSF的副作用,常见有低热(一般38℃以下)骨骼肌肉疼痛、乏力、食欲不振、头痛等,轻者不必做处理,严重的给予对症治疗。
(二)技术配合及护理( 1 ) 外周血干细胞采集技术可根据供者的情况在床边进行。
( 2 ) 主要设备为血液成分分离机、专用导管,另备抗凝剂、生理盐水、血压计、听诊器、急救器材和药品。
治疗盘内盛皮肤消毒物品、无菌棉球和纱布、止血带、胶布。
( 3 ) 供者清洁静脉穿刺部位皮肤,排空二便,通常采用平卧,测量血压、脉搏及呼吸。
( 4 ) 选择两处静脉穿刺部位(分别为采血和回输血通道)以肘部粗而直的大静脉最适宜。
下肢静脉、颈静脉亦可作为回输通道。
( 5 ) 经皮肤消毒,用16号穿刺针头依次进行两处静脉穿刺,首先穿刺的一侧连接回输导管,次之连接采血导管。
妥善固定针头,局部覆盖无菌纱布。
( 6 ) 医生操纵血液成分分离机,将供者身高、体重、红细胞比积等数据输入机器电脑,自动调节采集分离血液成分的速度,匀速加入抗凝剂。
(7)供者采血侧上臂间断使用止血带或血压计袖带打气加压,同时手握海绵芯子,反复一松一紧直到采集完毕。
( 8 ) 遵医嘱补钙。
( 9 ) 随时观察血压、脉搏、呼吸及其有无不适感,注意不良反应和合并并发症。
(10)采集完毕,静脉穿刺局部以无菌棉球按压5min以上,用无菌纱布保护。
供者静卧,继续观察。
(11)外周血干细胞一次采集量一般200~300ml,由检验人员进行细胞计数(12)采集后嘱患者多饮水,以促进抗凝剂代谢。
【不良反应与并发症及其处理原则】(一)空气栓塞其原因为采血管连接不严密或回输管空气未完全排除。
外周血单核细胞的分离以及培养
一、牛外周血单核细胞的分离1、采血袋采集200ml血液2、首先在15ml离心管加3ml分离液(室温)3、轻轻的将3ml全血加到3ml分离液中4、400g室温离心30min5、离心后,吸取白膜层(0.5cm)转移到新的离心管6、加10ml的PBS或是培养基,进行混匀(枪轻轻吹打)7、250g室温离心10min8、加5ml的PBS或是培养基,进行混匀(枪轻轻吹打)9、250g室温离心10min10、重复8、9,加0.5ml培养液悬浮,二、磁珠分选11、将分离得到的PBMCs 进行细胞计数。
12、离心细胞悬液,300×g,10 分钟。
吸去上清。
13、将细胞沉淀用buffer(含0.5%BSA 的PBS)悬浮,按每107个细胞加80μL buffer 和20μL 抗CD14 磁珠,充分混匀,2-8℃孵育15 分钟。
14、300×g,10 分钟。
吸去上清。
用500μL buffer 重悬细胞。
15、将柱子放在磁珠分离器上,吸取细胞悬液加到柱子中,用500μL buffer 清洗三遍柱子。
16、待清洗三遍后,将柱子从磁珠分选器上取下来,加入1mL buffer,用助推器快速推动柱子中的洗脱buffer,收集单核细胞,计数。
17、单核细胞300×g 离心,10 分钟,用含10%的胎牛血清、100U/mL 青链霉素、PH7.2-7.4 的1640(IMDM)全培养液调整细胞浓度为按1×106单核细胞铺入10cm培养皿,37℃5%CO2温箱中培养。
三、磁珠分选注意事项1、柱容量:1×107磁性标记细胞可上达2×108细胞总量。
注意:当分选的细胞比淋巴细胞大时,柱容量需减少。
2、建议白细胞样本大小:在106—2×108细胞总量中有104—107标记细胞3、典型富集率:50fold至1000fold,取决于磁性标记的活力和特性,达到10000fold 富集量就可以分装两柱。
分离外周血单个核细胞的方法
分离外周血单个核细胞的方法分离外周血单个核细胞的方法其实没那么复杂,咱们来聊聊这个话题,保证让你轻松get!首先啊,单个核细胞就是我们血液中那些小家伙,像是白血球、淋巴细胞等等,它们可不是闲人,背后有不少大事儿等着它们去办。
分离这些细胞的目的是为了研究、治疗,或者是干脆为了好玩儿。
就像咱们在厨房里分离蛋清和蛋黄,听起来简单,但得有点儿讲究。
准备工作就要做好。
得有新鲜的外周血,这个非常重要哦,越新鲜效果越好。
你想啊,谁会想要那种放了几天的血液呢,肯定不行。
然后,你还得准备一些试剂,比如说淋巴细胞分离液,这个东西就像是我们的“神奇魔法水”,能帮助我们把想要的细胞和其他的杂质分开来。
想象一下,咱们就像是在捞金子,得把泥土和杂物先清理掉,才能找到闪闪发光的金子。
把外周血放进一个离心管里,像是在给它穿衣服。
这个时候,把管子放进离心机里,按下启动键,等待那些细胞的“表演”。
离心机开始转动,哇,像是舞台上的旋转木马,细胞们在里面“翩翩起舞”。
不同的细胞会根据自己的“重量”被分层,沉到底部的那些就是我们想要的单个核细胞。
别急,这个过程可得耐心等,通常要个十几分钟,时间不算长,但你得盯着,不然它们可就“出轨”了。
一旦时间到了,咱们小心翼翼地把管子拿出来,看到底部沉淀下来的细胞,心里那个激动啊,就像中奖一样!用移液管把上面的液体小心吸走,留下底下那一层细胞。
这个时候要稳,千万别让细胞跟着液体一起跑了,那就尴尬了。
吸完后,再加点洗涤液,把这些细胞洗一洗,赶走那些不速之客。
洗完之后,咱们要再次离心,重复这个过程。
就像是做面包,要不断地揉捏,让面团变得光滑。
经过几轮“洗礼”,最终剩下的就是我们的小明星了,单个核细胞。
你想啊,它们可都是为了健康、免疫力打拼的小战士,怎么能不让人心疼呢!把这些细胞进行计数和保存,当然也可以做进一步的实验。
实验结束后,记得给这些小家伙们找个好去处,不能随便丢掉,它们可是“亲密战友”呢!研究的时候,可以深入探讨它们的功能、特点,甚至在医学上用得上,帮助到更多人。
三种方法消除乳糜血干扰血细胞分析的应用
三种方法消除乳糜血干扰血细胞分析的应用作者:程雪莲王福祥谢莉程蓓蕾杨丹蓉来源:《中外医学研究》2016年第24期【摘要】目的:研究消除乳糜血干扰库尔特LH750血液分析仪主要检测指标的方法。
方法:选取每日仪器检测后已明确的乳糜血标本,并在2 h内随机选择稀释、空白、置换三种方法进行再检测分析,主要分析WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEU%、LYM%、MON%、EOS%、BASO%共13个参数指标,累计检测标本共95份。
所有实验标本剩余血液经生化仪检测甘油三酯含量,并以TG0.05)。
轻中度乳糜组仅稀释法处理前后的Hb、MCH比较差异有统计学意义(P【关键词】乳糜血;血液分析仪;标本中图分类号 R446.1 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2016)24-0043-04【Abstract】 Objective:To investigate the method for eliminating interference of chylemiaon on the main indexes of COULTER LH750 hematology analyzer.Method:Chyle blood samples which had been cleared by daily testing instruments was selected,they were detected and analyzed by one of the three methods of dilution,blank,replacement randomly within 2 hours mainly to analyze the 13 parameters of RBC,WBC,PLT,Hb,HCT,MCV,MCH,MCHC,NEU%,LYM%,MON%,EOS%,BASO%,a total of 95 samples were detected.The content of triglyceride of all experimental remaining specimens were tested by blood biochemical analyzer,specimens withTG0.05).The differences in Hb,MCH of chylous mild to moderate group before and after processing by dilution method were statistically significant(P【Key words】 Chylemia; Hematology analyzer; SpecimenFirst-author’s address:Maternal and Child Health Hospital of Haiyan County,Haiyan 314300,Chinadoi:10.14033/ki.cfmr.2016.24.024库尔特LH750是贝克曼库尔特公司一款比较经典的五分类血液分析仪,仪器工作原理为细胞计数采用阻抗法、血红蛋白为比色法、白细胞分类为VCS(容量、电导、光散射)原理[1]。
乳糜血样本对生化检测的影响及处理办法——检验科日常培训
乳糜血样本对生化检测的影响及处理办法——检验科日常培训乳糜血样本是指其中含有乳糜的血液样本,乳糜是一种油脂颗粒与免疫球蛋白复合物。
乳糜血样本对生化检测有一定的影响,可能导致结果的不准确,并且影响结果的解读。
本文将介绍乳糜血样本对生化检测的影响及处理办法。
首先,乳糜血样本会影响血清或血浆中脂质和蛋白质的测定。
乳糜血样本中含有大量的脂质颗粒,它们会干扰脂质测定,如血脂、胆固醇等。
同时,乳糜血样本中的免疫球蛋白复合物会与一些蛋白质底物结合,影响血清蛋白的测定,如白蛋白、球蛋白等。
其次,乳糜血样本会影响一些酶类的测定。
乳糜血中的脂肪酶、脂蛋白酶等酶类会催化底物的反应,导致酶活性的改变。
在生化检测中,常用的酶测定项目包括肝功能检测中的丙氨酸氨基转移酶(AST)、天门冬氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)等,以及肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)等心肌酶标志物测定。
乳糜血样本会导致这些酶活性的改变,从而影响结果的准确性。
处理乳糜血样本的方法有以下几种。
首先,应当采取正确的采血技术和采血顺序,保持患者处于早晨空腹状态。
乳糜血样本往往与患者饮食有关,尤其是含有高脂食物的饮食。
因此,患者应在采血前8-12小时内禁食,并且只饮用无添加脂肪的水。
此外,在采血过程中,应注意正确的针头选择、穿刺角度和深度等,以避免组织或血管损伤,减少乳糜血样本的产生。
其次,可以采用离心法处理乳糜血样本。
将乳糜血样本离心800-1500g,10-15分钟。
离心后,上层液相即为血清或血浆,可用于后续的生化检测。
在离心过程中,应当注意离心的速度和时间,以确保血清或血浆的质量。
此外,还可以使用聚磺乙烯-聚苯乙烯(PES)膜过滤器来过滤乳糜血样本,将乳糜颗粒去除,从而获得较为纯净的血清或血浆样本。
这种方法的优点是简单、快捷,可以在较短的时间内处理样本,并且过滤效果较好。
最后,对于那些检测结果受到乳糜血样本影响较大的项目,可以选择其他检测方法来获取更准确的结果。
外周血单个核细胞分离方法
外周血单个核细胞分离方法外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)是一类重要的免疫细胞,包括淋巴细胞、单核细胞和自然杀伤细胞等。
它们在免疫反应、炎症、感染和肿瘤等过程中起着重要作用。
因此,从外周血中分离出单个核细胞对于许多研究项目非常重要。
本文将介绍几种常用的外周血PBMCs分离方法,并详细描述它们的步骤和应用。
方法一:梯度离心梯度离心是最常用的PBMCs分离方法之一、它利用了外周血中不同细胞的密度差异,通过离心使PBMCs在浓度梯度上进行分离。
以下是具体步骤:1.收集外周血样本,将其加入离心管中。
2. 向离心管中缓慢加入等体积的稀释液,常用的等体积稀释液有Ficoll-Paque、Lymphoprep等。
3. 将稀释液中的血液离心,离心速度和时间根据样品的要求而定。
一般来说,1200rpm离心10分钟即可。
4.离心过程中,PBMCs会沉积在离心管的界面上,分离出上清液。
5.使用移液器或玻璃毛细管,将上清液移至新的离心管中。
6.向新的离心管中加入如PBS等缓冲液,使细胞沉淀。
7.用离心将细胞沉淀下来,并去除上清液。
8.向细胞沉淀中加入培养基,使其重悬。
这种方法的优点是简单、快速,可以同时分离出不同类型的免疫细胞。
缺点是离心的条件需要根据具体实验要求进行调整,有些细胞如自然杀伤细胞可能会受到损伤。
方法二:抗凝血液管离心另一种常用的PBMCs分离方法是使用抗凝血液管。
以下是具体步骤:1.收集外周血样本,将其加入含有抗凝剂的抗凝血液管中,常用的抗凝剂有EDTA、肝素等。
2.轻轻颠倒血液管使血液与抗凝剂充分混合。
3.将血液离心,离心速度和时间根据样品的要求而定。
4.离心过程中,PBMCs会沉积在离心管的底部,分离出上清液。
5.使用移液器或玻璃毛细管,将上清液移至新的离心管中。
6.向新的离心管中加入如PBS等缓冲液,使细胞沉淀。
7.用离心将细胞沉淀下来,并去除上清液。
血液样本采集错误紧急计划
血液样本采集错误紧急计划背景血液样本采集是医疗过程中非常重要的一环,但由于各种原因,可能会发生样本采集错误的情况。
为了快速有效地应对这些错误,需要制定紧急计划。
目标本紧急计划的目标是在发现血液样本采集错误时,快速采取适当的措施,确保错误得到修复并减少对患者和医疗过程的不良影响。
计划以下是应对血液样本采集错误的紧急计划步骤:1. 立即暂停采集:一旦发现血液样本采集错误,立即停止继续采集。
避免采集更多错误样本,并减少患者的不适。
2. 标记错误样本:使用鲜红色标签或其他明显的标志标记错误样本。
这样可以方便后续处理时的识别和区分。
3. 通知相关人员:立即通知负责采集的医务人员,以及相关的实验室人员和管理人员。
他们需要了解错误的发生,并参与后续处理。
4. 收集必要信息:记录样本采集时的具体情况,包括采集时间、采集人员、采集位置等信息。
收集任何可能有助于解决错误的相关数据。
5. 快速纠正错误:根据错误的具体性质,采取必要的纠正措施。
例如,如果是识别错误导致的样本交换,立即进行更正,并确保正确的样本与患者匹配。
6. 反馈与记录:将错误情况记录在医疗文件中,并向需要了解的相关人员提供反馈。
这有助于以后避免类似错误的再次发生。
7. 预防措施:在纠正错误的同时,分析错误的根本原因,并采取相应的预防措施。
例如,提供更好的培训,改善采集流程,使用更可靠的标识系统等。
总结血液样本采集错误紧急计划旨在确保及时处理和纠正血液样本采集错误。
通过快速采取适当的措施,并建立预防措施,可以降低错误发生的风险,并提高医疗质量和患者安全性。
请注意,本文档仅为紧急计划的概述,具体的应对步骤和措施应根据具体情况和机构要求进行制定和执行。
单采血细胞治疗标准操作程序
单采血细胞治疗标准操作程序
单采血细胞治疗是一种治疗血液系统疾病的方法,它涉及从患者或供者体内采集造血干细胞,并将其输给患者以恢复其造血功能。
以下是一般的单采血细胞治疗标准操作程序的概述:1. 患者评估:对患者进行全面的评估,包括疾病诊断、身体状况、血液指标等。
2. 供者评估:如果使用供者的造血干细胞,对供者进行全面的评估,包括健康状况、传染病筛查等。
3. 干细胞采集:根据患者和供者的情况,选择适当的干细胞采集方法,如骨髓采集、外周血干细胞采集等。
4. 干细胞处理:采集到的干细胞需要进行处理,如离心、洗涤、浓缩等,以确保干细胞的质量和数量。
5. 干细胞输注:将处理后的干细胞输给患者,可以通过静脉输注或骨髓输注等方式进行。
6. 术后护理:对患者进行术后护理,包括观察生命体征、预防感染等。
7. 随访:对患者进行长期的随访,观察治疗效果、并发症等。
需要注意的是,单采血细胞治疗是一项复杂的医疗技术,需要在专业的医疗机构进行,并由经验丰富的医生和护士操作。
在治疗过程中,患者需要密切配合医生的治疗方案,遵循医生的指导和建议,以确保治疗的安全和有效。
乳糜血的介绍及治疗
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乳糜血的介绍及治疗
导语:乳糜血是一种在日常生活中常见的症状。
对于这种病,不同的程度有不同的治疗方法,在治疗时一定要准确认识自己的情况,否则会引起不良的后果
乳糜血是一种在日常生活中常见的症状。
对于这种病,不同的程度有不同的治疗方法,在治疗时一定要准确认识自己的情况,否则会引起不良的后果。
对于不知道自己情况的患者,大家可以先去医院咨询医师的意见。
下面呢,我就为大家介绍一些治疗方法。
简介
1.血浆颜色呈乳白色或混浊状,那就是乳糜血,表示血液中含有高量脂肪。
2.脂质对人体而言,就如同汽油之於汽车是重要的能量来源,脂质在体内经由脂蛋白携带至身体各个部位,提供能量需求或储存备用。
3.脂质的种类很多,其中以胆固醇及三酸甘油脂较为一般人所熟知。
胆固醇是体内最丰富的固醇类化合物,它不但是细胞生物膜及脂蛋白的成分,并可合成胆酸及维生素D,同时也是类固醇类激素的前趋物质,因此对於大多数的组织来说,胆固醇的供给及维持代谢平衡是十分重要的。
4.而人体的固醇类来源包括体内合成及由食物中摄取,但植物性食品不含胆固醇,而是植物固醇,它们不易被人体吸收,摄取过量时反而会抑制胆固醇的吸收。
5.三酸甘油酯是人体内含量最多的脂质类,大部分的组织都可以利用三酸甘油酯所分解的产物提供热量。
治疗方法:
1、控制体重,达到理想体重范围。
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外周血单个核细胞采集出现乳糜血处理方法103
外周血单个核细胞采集出现乳糜血处理方法摘要】目的:探讨进行外周单个核细胞采集的患者采集过程中出现乳糜血后所采用的方法及体会。
方法:收集我科从2012年4月至2015年4月之间的800例进行外周单个核细胞采集的患者中20例患者在采集过程中出现乳糜血后对其进行的处理,经过相应处理20例患者所采集的成品细胞质量未受影响。
结论:在采集外周单个核细胞出现乳糜血后,给予相应处理,效果良好,值得在临床中推广应用。
【关键词】外周血;单个核细胞;乳糜血;处理方法【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)34-0069-01DC-CIK细胞治疗是目前应用于恶性血液系统疾病及肿瘤疾病治疗中,广泛、安全的治疗方法。
需采集外周血中单个核细胞在GMP实验室进行体外诱导、培养、扩散后再为患者回输治疗。
我科从2012年4月至2015年4月之间的800例患者中20例患者在采集过程中出现乳糜血对其进行的处理,经过相应处理20例患者所采集的成品细胞质量未受影响,现将采集处理方法报告如下。
1.临床资料本组20例患者,在第一次溢出(80状态)结束,89状态(或87状态)出现IDB(界面探测值基线)值为40-50共7例,50-60共5例,60-70共8例。
2.处理方法界面探测器是一个光学传感器,用于监测通过CRP(富成分血浆)管路光的通透量。
当CRP管路内的细胞浓度增加时,光的通透量减少。
因此,微电脑可以监测CRP管路内的细胞成分。
界面探测值基线(IDB)以富成分血浆管路中清洁血浆的浊度设定。
如患者在进行外周单个核细胞采集之前输入过脂肪乳、使用过高脂肪饮食,或者是患者自身原因(血脂过高)。
在采集过程中第一次溢出后立即进行IDB值设定,会出现IDB值过高(≥40)。
2.1随着患者的血液循环,在采集过程中每次溢出后均需进行IDB值设定。
在每次进行IDB值设定时会发现IDB值会逐渐下降。
直至降至正常或接近正常(20-30)。
三种方法消除乳糜血干扰血细胞分析的应用
三种方法消除乳糜血干扰血细胞分析的应用目的:研究消除乳糜血干扰库尔特LH750血液分析仪主要检测指标的方法。
方法:选取每日仪器检测后已明确的乳糜血标本,并在2 h内随机选择稀释、空白、置换三种方法进行再检测分析,主要分析WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEU%、LYM%、MON%、EOS%、BASO%共13个参数指标,累计检测标本共95份。
所有实验标本剩余血液经生化仪检测甘油三酯含量,并以TG0.05)。
轻中度乳糜组仅稀释法处理前后的Hb、MCH比较差异有统计学意义(P<0.05);但重度乳糜组Hb、MCH、MCHC、PLT、EOS%三种方法处理前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:乳糜血干扰血细胞分析的主要参数指标为Hb、MCH、MCHC、PLT,影响大小与乳糜血严重程度有关,稀释、空白、置换三种方法均能消除这种干扰,但以稀释法操作方便、可检出较小的干扰,具有推广价值。
[Abstract] Objective:To investigate the method for eliminating interference of chylemiaon on the main indexes of COULTER LH750 hematology analyzer.Method:Chyle blood samples which had been cleared by daily testing instruments was selected,they were detected and analyzed by one of the three methods of dilution,blank,replacement randomly within 2 hours mainly to analyze the 13 parameters of RBC,WBC,PLT,Hb,HCT,MCV,MCH,MCHC,NEU%,LYM%,MON%,EOS%,BASO%,a total of 95 samples were detected.The content of triglyceride of all experimental remaining specimens were tested by blood biochemical analyzer,specimens with TG0.05).The differences in Hb,MCH of chylous mild to moderate group before and after processing by dilution method were statistically significant(P <0.05).But in the chylous severe group,the Hb,MCH,MCHC,PLT,EOS% before and after processing by the three kinds of methods were statistically significant(P<0.05).Conclusion:Chylous disturbs the blood cell analysis of Hb,MCH,MCHC,PLT,the influence degree is associated with the severity of chylemia.The three methods of dilution,blank,replacement can eliminate the interference,but the method of dilution is easy to operate and can detect small interference,it has the value of popularization.[Key words] Chylemia;Hematology analyzer;Specimendoi:10.14033/ki.cfmr.2016.24.024库尔特LH750是贝克曼库尔特公司一款比较经典的五分类血液分析仪,仪器工作原理为细胞计数采用阻抗法、血红蛋白为比色法、白细胞分类为VCS(容量、电导、光散射)原理[1]。
外周血单细胞测序悬液制备
外周血单细胞测序悬液制备
外周血单细胞测序悬液的制备步骤如下:
1. 采集外周血样本,加入含有抗凝剂的试管中,防止血液凝固。
2. 将抗凝的外周血样本与等体积的PBS溶液混合,并充分混匀。
3. 将混合液加入离心管中,离心管底部有预先处理过的红细胞裂解液。
4. 轻轻摇动离心管,使混合液充分接触红细胞裂解液,从而裂解红细胞。
5. 将离心管中的液体重新悬浮在PBS溶液中,并洗涤细胞两次,去除杂质和死细胞。
6. 加入适量的人淋巴细胞分离液,将单个核细胞(包括外周血中的淋巴细胞和其他单核细胞)与红细胞和血小板分离。
7. 离心后,将离心管中的液体弃去,留下单个核细胞层。
8. 用PBS溶液洗涤单个核细胞两次,去除残留的分离液和杂质。
9. 将单个核细胞转移到另一离心管中,加入适量的完全RPMI 1640培养液,使细胞浓度达到所需的浓度。
10. 再次离心后,弃去上清液,得到外周血单细胞悬液。
注意事项:
1. 在采集外周血样本时,要使用含有抗凝剂的试管,以防止血液凝固。
2. 在洗涤细胞时,要使用PBS溶液,这样可以去除杂质和死细胞。
3. 在制备过程中,要保持无菌操作,避免污染。
4. 在离心时,要控制好离心速度和时间,以免影响细胞分离效果。
5. 在制备过程中,要注意温度的控制,避免温度过高或过低影响细胞的活性。
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外周血单个核细胞采集出现乳糜血处理方法
摘要】目的:探讨进行外周单个核细胞采集的患者采集过程中出现乳糜血后所采用的方法及体会。
方法:收集我科从2012年4月至2015年4月之间的800例进行外周单个核细胞采集的患者中20例患者在采集过程中出现乳糜血后对其进行的处理,经过相应处理20例患者所采集的成品细胞质量未受影响。
结论:在采集外周单个核细胞出现乳糜血后,给予相应处理,效果良好,值得在临床中推广应用。
【关键词】外周血;单个核细胞;乳糜血;处理方法
【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)34-0069-01
DC-CIK细胞治疗是目前应用于恶性血液系统疾病及肿瘤疾病治疗中,广泛、安全的治疗方法。
需采集外周血中单个核细胞在GMP实验室进行体外诱导、培养、扩散后再为患者回输治疗。
我科从2012年4月至2015年4月之间的800例患者中20例患者在采集过程中出现乳糜血对其进行的处理,经过相应处理20例患者所采集的成品细胞质量未受影响,现将采集处理方法报告如下。
1.临床资料
本组20例患者,在第一次溢出(80状态)结束,89状态(或87状态)出现IDB(界面探测值基线)值为40-50共7例,50-60共5例,60-70共8例。
2.处理方法
界面探测器是一个光学传感器,用于监测通过CRP(富成分血浆)管路光的通透量。
当CRP管路内的细胞浓度增加时,光的通透量减少。
因此,微电脑可以监测CRP管路内的细胞成分。
界面探测值基线(IDB)以富成分血浆管路中清洁血浆的浊度设定。
如患者在进行外周单个核细胞采集之前输入过脂肪乳、使用过高脂肪饮食,或者是患者自身原因(血脂过高)。
在采集过程中第一次溢出后立即进行IDB值设定,会出现IDB值过高(≥40)。
2.1随着患者的血液循环,在采集过程中每次溢出后均需进行IDB值设定。
在每次进行IDB值设定时会发现IDB值会逐渐下降。
直至降至正常或接近正常(20-30)。
2.2提高设定的全血终点量值,全血量每增加500ml时设定一次IDB值。
3.总结
以上处理方法有效地提高了乳糜血患者外周单个核细胞采集成品细胞质量。
进行外周单个核细胞采集过程中,操作人员应注意观察富成分血浆管路颜色,准确记录IDB值,IDB值如有异常及时给予处理,以保证患者成品细胞质量。
【参考文献】
[1]李婧,外周单个核细胞采集中的护理配合体会[J].天津护理,2010,6 18(3):137.
[2]王艳,孙玉红外周单个核细胞采集的护理配合体会[J].中国实用医药,2013,2 8(4):208。