HIV实验室检测及规范操作
艾滋病检测点标准操作规程参考范本
HIV抗体检测原则操作规程(SOP文献)1、目旳:为了规范本卫生院艾滋病检测点旳正常运营,保证艾滋病抗体检测旳精确,保证明验室生物安全,特制定本操作规程。
2、合用范畴:合用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本旳采集、解决、检测到报告旳全过程。
3、职责:各检测工作人员按原则操作规程进行艾滋病抗体检测,本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行状况进行监督。
4、原则操作程序:4.1样品旳采集和解决4.1.1样品旳采集:4.1.1.1血清样品采集:用真空采血管抽取5mL静脉血,室温下自然放置1-2小时,待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min,吸出血清备用。
4.1.1.2抗凝血样品采集:用加有抗凝剂旳真空管或用消毒注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂旳试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
4.1.1.3采样注意事项:4.1.1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒阐明书规定进行。
4.1.1.3.2采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液旳操作应戴双层手套。
4.1.2样品旳保存:用于抗体检测旳血清或血浆样品应寄存与-20°C如下,短期(1周)内进行检测旳样品可寄存于2-8C。
4.1.3样品旳运送:4.1.3.1实验室间传递旳样品应为血清或血浆,除特殊状况外一般不运送全血。
样品应置于带盖旳试管内,试管上应有明显旳标记,标明样品旳编号或受检者姓名、种类、采样时间。
4.1.3.2将试管放入专用带盖旳容器内,容器旳材料要易于消毒。
在试管旳周边垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。
4.1.4样品旳接受:4.1.4.1具有感染性样品旳包裹必须在具有解决感染源设备旳实验室内由通过培训旳工作人员打开,用后旳包裹应进行消毒。
4.1.4.2核对标本与送检单,检查样品管有无破损及漏掉。
如发现漏掉应立即将尚存留旳样品移出、对样品管和盛器消毒,同步还要报告有关领导和专家。
HIV实验室SOP文件修订版
HIV实验室SOP文件修订版I. 引言HIV病毒是导致艾滋病的病原体。
艾滋病是一种可致命的疾病,感染者免疫系统受损,容易感染其他疾病。
实验室对于艾滋病相关样本的处理和分析具有非常重要的意义。
本文档旨在制定HIV实验室的标准操作规程(SOP),以确保实验室成员的安全和样品的准确分析。
II. 实验室基本规则1. 实验室门口实验室门口应放置标牌,明确标明实验室名称和注意事项。
在进入实验室前,请仔细阅读标牌上的内容。
2. 准备工作在实验室进行实验前,应先清洁实验台和所需用具,并在实验台的可视部位放置必要的消毒液。
3. 实验室操作操作时应按照标准操作规程进行,不得私自调试设备。
注意操作中应避免直接接触可能携带病原体的物品,如试液等。
实验操作结束后,应当清理现场并对使用的设备进行消毒处理。
4. 实验室内部环境实验室内部环境应保持干燥、整齐、安静,避免在实验室内吃饭或饮料,以免污染样本。
5. 实验中的个人防护在进入实验室前,实验人员应换上实验服、手套和面罩等防护用品,并在接触样本后,及时更换手套。
在接触可能携带病原体的样本时,应使用防护面罩。
III. HIV实验室标准操作规程1. 实验室主任职责实验室主任应根据实验室的实际情况,制定本实验室的标准操作规程,并负责制定实验室安全和职业卫生措施。
2. 样本处理(1)样本接收和处理样本应在有害生物物质等级三级或以上实验室进行处理。
所有样本应在专用的处理区进行分析,如有必要,应进行常规阴性对照,以确保操作的准确性。
(2)样本的处理过程对于血液、组织和液体等样本应从外到内依次涂片、染色或载玻片分析,如有其他处理方法,则应根据具体要求操作。
(3)处理后的样本处理后的样本直至其使用完毕之前应储存在有害生物物质等级三级或以上的实验室内,储存时应明确标记样本的名称、编号3. 试剂和设备的使用(1)试剂实验室应确保在可能的情况下使用无害或低危险性的试剂;且需要使用高危险性的试剂,应最大限度地采取预防措施。
HIV初筛实验室工作制度及操作规范
HIV初筛实验室工作制度及操作规范一、实验室工作制度1.工作时间:实验室工作时间为每周五天,每天8小时,具体工作时间根据实验室管理者的安排确定。
2.出勤要求:实验室人员需准时到岗,不得早退、迟到或旷工,如确有特殊情况需请假,应提前向实验室管理者申请。
3.个人卫生:实验室人员在工作期间应保持个人卫生,包括穿戴实验服、戴手套、戴口罩等。
同时,实验人员应定期接受相关健康检查,确保自身身体健康,以免对实验结果产生干扰。
4.实验室安全:实验室人员要遵守实验室安全规定,不得在实验室内吸烟、饮食,不得随意更改或移动实验设备,严禁私自使用化学试剂。
5.文档管理:实验室人员在实验过程中应及时记录实验数据,并妥善保存。
实验结果及相关数据应按照规定进行备份和存档,以备后续分析和查阅。
6.实验设备维护:实验室人员应对所使用的实验设备进行定期的清洁和维护,确保设备的正常运转和使用寿命。
7.实验报告:实验室人员应及时整理实验结果,并撰写实验报告。
实验报告应包括实验目的、方法、结果和结论等内容,以便他人能够了解实验详细情况。
二、操作规范1.个人防护:操作过程中,实验室人员应穿戴实验服、戴手套、戴口罩等个人防护装备,严格遵守实验室安全规定,避免对自身健康造成危害。
2.样本处理:实验室人员在处理样本时,应注意避免样本的污染和交叉感染。
合理安排实验时间和操作顺序,确保样本的准确性和可靠性。
3.试剂使用:在使用试剂前,实验室人员应仔细阅读试剂说明书,了解试剂的适用范围、用量和操作方法。
使用试剂时应注意避免产生化学反应,同时按照规定的方法和顺序进行操作。
4.设备操作:实验室人员在使用实验设备时,应事先进行设备的检查和调试,确保设备的正常运行。
操作时应严格按照设备操作指南进行,避免设备的误操作或损坏。
5.数据记录:实验室人员在实验过程中应及时准确地记录实验数据,并将数据进行整理和归档。
记录应包括样本信息、试剂用量、实验操作过程和结果等。
HIV实验室检测及规范操作
快速检测试剂的优缺点
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便,不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后,用筛查试剂进行检测,如 呈阴性反应,报告为HIV抗体阴性;对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测,如两种试剂复测均呈阴性 反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应, 或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确 认。
HIV抗体确认检测流程
筛查试验阳性反应样品 免疫印迹法(WB,HIV-1/2混合型)
HIV抗体初筛检测
ELISA)
(阿克苏
结果判定 ⑴阴性对照(Negative Control,,NC)的参考标准 NC必须<0.250,去除≥0.250的各孔; 计算剩余NC的平均值(NCx) 0.6NCx<NC<1.4NCX,如果有一个以上超出此范围, 去除后重新计算NCx。 ⑵判定实验有效性: 至少有2个阴性对照OD值有效。 PC1-NCx≥0.400(PC1:HIV-1抗体阳性对照值) PC2-NCx≥0.400(PC2:HIV-2抗体阳性对照值)
HIV抗体初筛检测结果解释
造成检测结果不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等,此时,身体产生的一些抗体与P24核 心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。
HIV抗体检测(明胶颗粒凝集试验)
HIV实验室操作规程档
HIV实验室操作规程
一、样品采集、收集和运送:
1、样品采集:按检测规范要求采集,做好标记填好登记表格;采样时一定要注意安全,谨慎操作,防止发生刺伤和造成外界污染,按要求分离、编号后置-20℃以下冰柜中保存待检,如近期检测放4℃冰箱保存;
2、样品收集:收到样品要按生物安全要求打开样品外包装,核对样品编号、姓名、样品状况(脂蛋白血、溶血、细菌污染);如有异常注明或拒收;填好登记表;并妥善保存样品
3、样品运送:必须将血清、血浆或全血置于有明显标记的螺旋盖的血清管或离心管内(注意:管盖的胶垫是否完好)防止样品流出,置于外标有生物安全标记的塑料袋内,垂直放在标有生物安全标记的带有软垫内放有冰块及吸水材料的容器内运送;并附送检单。
二、每批试剂应做好登记,如夏天邮寄的试剂要注意保温箱内的冰块(袋)是否融化,避免温度过高影响试剂质量。
三、检测时应严格按照每种试剂说明书规定操作;严禁擅自更改。
四、加样应防止吸头间及吸头与酶标板的交叉污染。
五、每次试验要做好质量控制,,遇到失控应采取相应措施,做好登记。
六、实验开始和实验中要注意试验温度;保证各种仪器在正常状况下运行;试验完毕,必须清洁好生物安全柜、洗板机、台面、地面;做好各种仪器登记
星子县横塘卫生院。
HIV初筛实验室标准操作规程
HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体酶联免疫原理和方法(上海科华生物)原理:用HIV-1+2型抗原包被酶联板。
待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应,再与酶标HIV-1+2型抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。
加底物(TMB显色,在酶标仪上测定后根据0D值判定有无HIV抗体的存在。
操作步骤:1、取出HIV抗原包被板。
每次试验设空白对照1孑L,阴性对照各1孑L,阳性对照各3孔(其中阳性对照1两孔,阳性对照2 一孔),质控一孔。
分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升,其余孔加入待检样本各100微升。
贴上封口胶,置37C温育60分钟。
2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。
3、弃去各孔中样品、拍干。
每孔加满洗液,静置数秒后弃去,如此重复洗5次,拍干。
4、每孔加入酶标抗原工作液100微升,贴上封口胶。
37E温育30分钟。
5、弃去各孔中酶液,用洗液反复洗涤5次(操作同步骤3)。
&每孔加入底物液A50微升,再加入底物液B50微升,轻拍混匀,置37E 避光显色30分钟。
7、显色完毕后,每孔加入终止液50微升,轻拍混匀,置酶标仪450nm波长处测定OD fi (参考波长为630nm。
结果判定:阴、阳性对照和被检样本的0D值减去空白对照0D值即为计算值。
2、若阴性对照0D均值小于按计算。
3、临界值(cut off 值)的设定:cutoff 值=PCx X 10% (若PCx>按算)4 、被检样本的OD®》临界值应判为HIV抗体阳性反应,<临界值为阴性反应。
检测样本的OD值》临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“ HIV确认实验室”进行确认实验。
注意事项:1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。
操作时必须戴手套,穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度。
hiv实验室检测及规范操作课件
hiv实验室检测及规范操作课件一、教学内容本节课我们将学习《临床免疫学》教材中第四章“病毒性疾病的免疫学诊断”,特别是关于HIV实验室检测的详细内容。
具体包括HIV检测原理、检测方法、操作流程、结果判读以及生物安全规范。
二、教学目标1. 理解HIV实验室检测的基本原理及常用检测方法。
2. 掌握HIV实验室检测的标准操作流程,能独立进行规范操作。
3. 能够正确解读HIV检测结果,并了解生物安全相关知识。
三、教学难点与重点教学难点:HIV实验室检测的操作细节、结果判读及生物安全规范。
教学重点:HIV实验室检测原理、操作流程及注意事项。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、HIV实验室检测操作视频、实验操作手册。
2. 学具:实验服、手套、口罩、消毒剂、HIV检测试剂盒。
五、教学过程1. 实践情景引入(10分钟):展示HIV实验室检测在临床诊断中的重要性。
举例说明不规范操作可能导致的后果。
2. 理论讲解(20分钟):介绍HIV实验室检测的原理、方法及操作流程。
强调生物安全意识及规范操作的重要性。
3. 例题讲解(15分钟):演示HIV实验室检测操作流程,讲解关键步骤。
分析操作过程中可能遇到的问题及解决办法。
4. 随堂练习(15分钟):学生分组,根据实验操作手册进行模拟操作。
教师巡回指导,解答学生疑问。
5. 结果判读与讨论(15分钟):模拟实验结果,让学生尝试解读。
针对结果判读进行讨论,纠正错误观念。
6. 生物安全规范讲解(10分钟):介绍实验室生物安全等级、防护措施及应急预案。
强调实验过程中遵循生物安全规范的重要性。
七、作业设计1. 作业题目:根据所学内容,简述HIV实验室检测原理及常用检测方法。
列出HIV实验室检测操作流程,并说明注意事项。
阐述生物安全规范在HIV实验室检测中的重要性。
2. 答案:(1)HIV实验室检测原理:利用抗原抗体反应,检测患者体内HIV特异性抗原或抗体。
(2)HIV实验室检测操作流程:样本准备:采集患者血液或体液,进行预处理。
HIV初筛实验室安全标准操作程序
HIV初筛实验室安全标准操作程序1 范围本章规定了HIV初筛实验室的各种安全规定,以加强生物安全,保护操作人员,防止重大事故发生,所有进入实验的人员要遵守该规定。
2 规范性引用文件全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS(2004年版)3 安全规定细则1、进入实验室应穿防护服,戴手套,防护服置于实验室清洁区内专用存放处。
不用戴手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。
2、离开时应脱去防护服,每次穿过的污染的防护服应及时放到污衣袋中,待消毒后方可洗涤或废弃。
3、当含有HIV的液体(样品或病毒培养液)有可能溅到工作人员时,应使用防渗透性的(如塑料)围裙。
4、当发现防护服已被污染时,应立即更换。
5、进入实验室应换专用的工作鞋或穿上鞋套。
6、皮肤的任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。
7、进实验室前要摘除首饰,修剪长的带刺的指甲,以免刺破手套。
8、如果接触物传染危险性大,则应戴双层手套和防护眼罩。
操作时手套破损,应立即丢弃、洗手消毒并戴上新手套。
9、严禁在HIV实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。
10、HIV实验室所用的个人防护装备均应符合国家有关标准的要求。
11、禁止采用口腔吸液管,必须使用移液器来操作实验室的所有液体标本或试剂。
12、操作中有标本、检测试剂外溅时应立即用大量清水冲洗,及时消毒。
对大量溅出的高浓度传染物在清洁之前应先用5000mg/L有效氯清洗消毒剂溶液浸泡,然后戴上手套擦净。
13、工作完毕,要用500mg/L有效氯清洗消毒剂溶液对工作台面消毒,清洗后要干燥20分钟以上,并用紫外线消毒30分钟以上。
严格执行消毒隔离制度。
14、工作完毕,脱去手套后洗手,再脱去工作衣,用肥皂和流动水洗手。
15、加强人员培训。
向管理人员和所有检测人员提供并完成相关的充足有效的技术培训,强化全员安全培训和“普遍性防护原则”安全意识,实验室的安全责任人要对工作和环境的安全负责,所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。
HIV实验室检测方法和步骤
HIV实验室检测方法和步骤HIV,也称为人类免疫缺陷病毒,是一种能导致艾滋病的病毒。
HIV实验室检测方法和步骤被广泛应用于检测感染HIV的个体。
以下是一般情况下使用的实验室检测方法和步骤的详细说明。
1.预处理和登记在进行HIV实验室检测之前,需要对样本进行预处理和登记。
预处理包括标识样本的相关信息,如样本编号和患者信息。
这些信息对于结果记录和跟踪是至关重要的。
此外,还需检查样本的适应性和完整性。
2.血液样本采集3.血清分离采集到的血液样本需要进行血清分离。
这可以通过离心来分离血液的不同成分,例如血红蛋白和血清。
离心速度和时间需要根据实验室设备和协议进行调整。
4.酶联免疫吸附测定法(ELISA)最常用的HIV实验室检测方法是酶联免疫吸附测定法(ELISA)。
这种方法使用特定的抗体来检测血液中特定的抗原。
根据ELISA方法的不同,可检测HIV抗原或抗体。
实验室技术人员将患者血清样本加入到已包含HIV相关抗原或抗体的试剂盘中,然后根据试剂盘的建议操作,包括孵育时间、温度和洗涤步骤。
任何与接触抗原或抗体反应的特异性颜色改变,都可作为阳性结果。
否则,结果被视为阴性。
5.确认试验在进行HIV检测的初步结果后,通常会进行一个或多个确认试验。
确认试验的目的是统一确定检测结果的可靠性。
常用的确认试验包括HIV免疫荧光试验(IFA)和西方印迹法(Western blot)。
这些试验通过检测血清中的HIV特异性抗体,以确保先前的结果的准确性。
6.分子检测有时,为了获得更加可靠和敏感的结果,实验室会使用分子检测方法,例如聚合酶链式反应(PCR)。
PCR可以检测和放大病毒的基因或核酸,以确定HIV感染的存在和病毒的数量。
7.结果解读和记录HIV实验室检测结束后,实验室技术人员需要解读并记录结果。
阳性结果意味着存在HIV感染,而阴性结果则表示未检测到HIV感染。
针对不同的检测方法和样本类型,结果的解释可能有所不同。
因此,在结果解读和记录时,实验室人员需要严密遵循实验室的标准操作规程(SOP)。
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 标本采集1.1 采集过程- 标本采集应由经过相应培训的医务人员进行。
- 采集前应充分向受检者解释采集过程,并获得其知情同意。
- 采集时应采取严格的无菌操作,以避免污染。
- 一般采集静脉全血样本,采集量不少于5ml。
1.2 标本处理- 采集后的标本应尽快送至实验室,避免暴露时间过长。
- 采用专用的血液收集管,确保标本完整无漏。
- 标本送至实验室前,应妥善保存并严禁摇晃。
2. 送检流程2.1 标签标识- 标本送检前,应在采集管上粘贴完整、清晰的条码标签,以确保标本追踪可靠性。
2.2 填写送检单- 标本送检时,应填写完整的送检单,包括受检者个人信息、采集时间、送检目的等相关信息。
2.3 送检方式- 送检可选择邮寄或快递方式,确保标本能够安全送达实验室。
- 快递包装需符合相关规定,避免标本在运输过程中受损。
3. 处理流程3.1 标本分离- 实验室接收标本后,应立即进行核酸分离,以保证分析的准确性。
3.2 核酸提取- 将分离的标本进行核酸提取,提取后的核酸可用于后续的检测操作。
3.3 核酸检测- 采用合适的核酸检测方法,如聚合酶链式反应(PCR)等,对提取的核酸进行检测。
3.4 结果解读- 核酸检测结果应由经验丰富的专业人员进行解读,并做出相应的结果报告。
4. 结论本文档简要介绍了HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程。
标本采集要求医务人员进行,并在采集前向受检者解释采集过程。
送检时需填写完整的送检单,并确保标本的追踪可靠性。
实验室应迅速进行标本分离、核酸提取和核酸检测,并由专业人员进行结果解读。
以上流程的规范实施可提高HIV病毒核酸检测的准确性和可靠性。
HIV筛查实验室检测操作规程
HIV筛查实验室检测操作规程
1、样品应按《全国艾滋病检测规范》要求采集,并做好标记,填好送检表格。
采样时一定要注意安全,谨慎操作。
防止发生刺伤和外界污染。
采样完毕后应尽快送往实验室。
2、实验室收到样品后及时登记、编号、校对、分离血清。
如短期内检测可冷藏保存,否则放-20。
C冰柜低温保存。
3、检测操作应严格按厂家的试剂说明书及仪器操作程序进行准确操作,并做好质量控制,不能擅自更改,操作时要注意移液咀与本酶标板之间交叉污染。
所用的试剂必须是经过国家药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。
4、筛查阳性标本须再用同一种试剂和不同厂家或不同检测原理的试剂进行复检,如复检均呈阳性或一阴一阳,须填好筛查阳性复检单和送检单送往复查中心实验室复检。
筛查阴性的填好HIV抗体筛查报告。
5、可疑阳性或阳性样品的转送,必须按照规定的运送程序,将血清盛于有标签的螺旋管内,防止样品流出,标签上注明姓名、唯一编号。
然后置于标有HIV检测专用字样的塑料容器内运送,保持2—4。
C冷藏运送。
送检单和复检单与样品分开放置。
6、实验结后应对实验室环境和实验废弃物进行消毒。
7、实验原始记录即时填写,实验后应认真填写实验记录和各种报表,做好质控。
艾滋病检测点标准操作规程(胶体金法)
艾滋病检测点标准操作规程(胶体金法)HIV抗体检测标准操作规程(SOP文件)目的:为规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行,保证艾滋病抗体检测的准确性,确保实验室生物安全,特制定本操作规程。
适用范围:本操作规程适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。
职责:各检测工作人员应按照标准操作规程进行艾滋病抗体检测。
本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。
标准操作程序:样品的采集和处理血清样品采集:用真空采血管抽取5mL静脉血,室温下自然放置1-2小时,待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min,吸出血清备用。
抗凝血样品采集:用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
采样注意事项:采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。
采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。
样品的保存:用于抗体检测的血清或血浆样品应存放在-20℃以下。
短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。
样品的运送:实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。
将试管放入专用带盖的内,的材料易于消毒,在试管的周围垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。
样品的接收:含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。
核对标本与送检单,检查样品管有无破损及遗漏。
如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒,同时还要报告有关领导和专家。
检验方法和步骤快速检测法(胶体金法)原理:采用胶体金免疫技术和层析原理,定性测定血清样本中的HIV-1+2抗体。
操作步骤:将标本平衡至室温。
将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温,打开铝箔包装袋,平置于台面上并编号(与样本编号相对应)。
HIV筛查实验室作业指导书
HIV筛查实验室作业指导书一、引言HIV(人类免疫缺陷病毒)的筛查和确认是预防和控制艾滋病传播的关键环节。
本作业指导书旨在提供HIV筛查实验室的操作流程、安全措施和质量控制等方面的指导。
通过遵循本作业指导书,实验室工作人员可以确保HIV筛查工作的准确性和安全性。
二、实验室设置和设备1. 实验室应具备适当的面积和布局,确保样品处理、试剂准备、实验操作和结果判定等区域相互独立,避免交叉污染。
2. 实验室应配备必要的实验设备,包括:生物安全柜、离心机、冰箱、恒温箱、洗板机、酶标仪等。
3. 实验室应具备良好的通风和照明设施,确保实验操作的安全和舒适。
三、样品处理和实验操作1. 样品接收:实验室应设立专门的样品接收区域,对样品进行登记、核对和标识。
样品应在低温条件下保存,并尽快进行实验操作。
2. 样品处理:在生物安全柜中进行样品处理,包括血样的分离、稀释和加样等步骤。
实验室工作人员应穿戴适当的个人防护装备,包括防护服、口罩、手套和护目镜等。
3. 实验操作:按照试剂盒说明书进行实验操作,包括ELISA和WB等方法。
实验过程中应确保试剂的准确性和实验条件的稳定性。
4. 结果判定:按照试剂盒说明书进行结果判定,包括灰区判断和阳性确认等步骤。
对于可疑结果,应进行复检或进一步的确认实验。
四、安全措施1. 生物安全:实验室应遵循生物安全相关规定,确保实验操作的安全性。
对于含有HIV病毒的样品和废物,应进行适当的消毒和灭活处理。
2. 个人防护:实验室工作人员应穿戴适当的个人防护装备,包括防护服、口罩、手套和护目镜等。
在实验操作过程中,应避免直接接触样品和试剂。
3. 废物处理:实验室应设立专门的废物处理区域,对含有HIV病毒的样品和废物进行适当的消毒和灭活处理。
废物的处理应遵循相关法规和标准。
五、质量控制1. 内部质量控制:实验室应定期进行内部质量控制,包括室内质控和室外质控等方法。
通过内部质量控制,确保实验结果的准确性和可靠性。
hiv抗体检测标准操作流程
hiv抗体检测标准操作流程
HIV抗体检测是一种常见的临床实验室检测方法,用于检测人
体内是否存在艾滋病病毒(HIV)的抗体。
以下是HIV抗体检测的标
准操作流程:
1. 采集标本,通常使用静脉血作为检测标本。
在采集血液样本
之前,医务人员应该进行充分的消毒,并确保采集器具的无菌。
2. 标本处理,采集的血液标本需要进行离心分离,将血浆与细
胞分离开来。
血浆通常是用于HIV抗体检测的样本。
3. 试剂准备,准备好用于HIV抗体检测的试剂盒,包括酶联免
疫吸附试验(ELISA)试剂盒、免疫层析试纸或其他相应的检测试剂。
4. 检测操作,根据试剂盒的说明书,将标本和试剂按照指定的
比例混合,进行反应。
通常包括加入标本、洗涤、加入检测试剂、
洗涤等步骤。
5. 检测结果读取,根据试剂盒的说明书,进行反应时间的控制,然后通过目测或者仪器读取结果。
6. 结果判读,根据试剂盒的说明书,对检测结果进行判读。
通常根据试剂盒的设定标准,阳性、阴性和可疑结果会有相应的判读标准。
7. 结果确认,对于初步阳性的样本,需要进行复测或者进行其他方法的确认,以确保结果的准确性。
8. 结果报告,将检测结果进行记录和报告,确保结果能够被医生和患者及时获取。
总的来说,HIV抗体检测的标准操作流程包括标本采集、标本处理、试剂准备、检测操作、结果读取、结果判读、结果确认和结果报告等步骤。
在整个流程中,严格遵循操作规程和质量控制标准非常重要,以确保检测结果的准确性和可靠性。
HIV实验室SOP手册-最新版
HIV实验室SOP手册-最新版目录- 概述- 实验室安全操作规范- 样本处理- 实验室设备维护- 数据记录和存储- 废物处理- 参考文献概述本实验室SOP手册旨在确保实验室内对HIV病毒的实验操作安全可靠,并遵守相关法规和规范。
本手册提供了一系列操作规范,供实验人员参考和遵循,以最大程度地减少实验风险和错误。
实验室安全操作规范穿戴个人防护装备- 进入实验室前,必须穿戴实验室指定的个人防护装备,包括实验服、手套、面罩和护目镜等。
- 所有个人防护装备必须定期检查和更换,以确保其完好无损。
- 在实验结束后,应将个人防护装备妥善清洁和存放。
实验室内卫生措施- 实验室内保持整洁,定期清理和消毒工作台和器材。
- 严禁在实验室内食用、喝水或化妆。
- 实验结束后,应将工作台上的所有物品清理干净并归位。
实验操作注意事项- 所有实验操作必须在指定的实验台上进行,避免在无关区域操作。
- 使用HIV病毒样本时,必须佩戴手套并注意避免任何直接接触。
样本处理样本采集和标识- 样本采集必须遵守相关采样流程和规范,确保样本的准确性和完整性。
- 采集到的样本必须立即进行标识,并记录相关信息,包括样本编号、采集时间和采集者姓名等。
样本处理过程- 样本处理必须在指定的处理区域进行,避免交叉污染。
- 样本处理过程中使用的试剂和材料必须符合质量要求并进行适当的保存和管理。
实验室设备维护设备操作规范- 在操作实验室设备之前,必须仔细阅读设备操作手册,了解操作步骤和安全注意事项。
- 操作完成后,应将设备清洁干净并妥善存放。
设备维护和保养- 实验室设备必须按照规定的维护计划进行定期维护和保养,确保其正常运行和准确性。
数据记录和存储数据记录要求- 所有实验数据必须按照规定的格式记录,包括实验日期、样本编号、实验操作步骤和结果等。
数据存储和保密- 实验数据必须进行适当的存储和备份,以防止数据丢失或损坏。
- 所有数据必须保密,并只能向授权人员提供。
2024年hiv实验室检测及规范操作课件
2024年hiv实验室检测及规范操作课件一、教学内容二、教学目标1. 理解HIV实验室检测的基本原理和方法。
2. 学会规范操作HIV实验室检测流程。
3. 掌握HIV检测质量控制措施。
三、教学难点与重点教学难点:HIV实验室检测方法的原理、操作步骤及质量控制。
教学重点:规范操作HIV实验室检测流程,确保实验结果的准确性。
四、教具与学具准备1. 教具:PPT课件、实验操作视频、HIV实验室检测操作手册。
2. 学具:实验室检测器材(如离心机、移液器等)、实验试剂、个人防护用品。
五、教学过程1. 实践情景引入(5分钟)通过展示HIV实验室检测在实际工作中的应用案例,引导学生了解HIV检测的重要性。
2. 理论知识讲解(15分钟)介绍HIV实验室检测的基本原理、方法及操作步骤。
3. 例题讲解(10分钟)通过具体例题,讲解HIV实验室检测中可能遇到的问题及解决方法。
4. 随堂练习(10分钟)学生分组进行HIV实验室检测操作练习,教师巡回指导。
5. 规范操作演示(15分钟)播放实验操作视频,讲解操作要领及注意事项。
6. 质量控制讲解(10分钟)介绍HIV检测质量控制措施,包括实验室内部质量控制、实验室间质量控制等。
六、板书设计1. 2024年HIV实验室检测及规范操作2. 内容:HIV实验室检测基本原理实验室检测方法操作步骤质量控制七、作业设计1. 作业题目:(1)简述HIV实验室检测的基本原理。
(2)列举三种常用的HIV实验室检测方法。
(3)结合实验操作流程,说明如何进行HIV实验室质量控制。
2. 答案:(1)HIV实验室检测基本原理:通过检测病毒核酸、病毒抗原或抗体等指标,来判断待检样本中是否存在HIV感染。
(2)常用的HIV实验室检测方法:免疫印迹法、ELISA法、PCR法。
(3)HIV实验室质量控制:实验室内部质量控制包括实验器材校准、试剂质量检查、操作人员培训等;实验室间质量控制包括参加外部质控活动、进行室间比对等。
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HIV抗体初筛检测结果解释
什么是不确定结果?
HIV抗体确认试验时,试验条带上出现的蛋白带型 不足以判断为HIV抗体阳性,应建议其3个月后复查. ►如果复查结果阳转,表明受检者已感染HIV; ►如复查时条带全部消失,则为阴性结果; ►如复查时条带没有变化或有变化但仍不足以判 断为阳性,则应建议其3个月后再复查一次,如还不 能判断为阳性结果,则应作为阴性对待.
艾滋病检测的方法
HIV抗体检测
HIV核酸检测
HIV抗体初筛检测 HIV抗体确认检测(免疫印迹试验)
▪核酸序列依赖性扩增(NASBA) ▪HIV定量逆转录PCR系统(RT-PCR) ▪HIVRNA定量检测的分支测定法(bDNA)
艾滋病检测方法的意义
HIV抗体检测
酶联免疫吸附试验 ▪间接法 ▪直接法(双抗原夹心法) ▪抗体竞争法 明胶颗粒凝集试验(PA) 快速法 HIV/AIDS的筛查,但初筛阳性结果不能做为艾滋 病诊断依据,需将该标本送地区筛查中心实验室用两 种方法进行复核,仍为阳性或一阴一阳则须送省确认 中心。
HIV抗体初筛检测结果解释
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
造成检测结果不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等,此时,身体产生的一些抗体与P24核 心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。
艾滋病检测方法的意义
HIV抗体确认检测(免疫印迹试验) HIV/AIDS诊断的唯一依据,省CDC确认实验室负责全省 监测哨点以及常规检测中阳性及可疑标本的确认和省内 HIV初筛实验室的质量管理.另外,省检疫系统有一个确认 实验室,设在省检疫局保健中心.
艾滋病检测方法的意义
HIV核酸检测
►辅助诊断:在特殊情况下,如出现某些非典型的抗 体反应,特别是不确定反应时,RNA的测定可提供有用 的证据。
HIV抗体初筛检测结果解释
如何判断婴儿是否感染了HIV?
通过胎盘,感染了HIV的母亲所生的婴儿可 能带有来自母体的HIV抗体,此时HIV抗体检 测阳性并不意味着已被感染。 ►建议在婴儿9个月时进行HIV初筛检测 如阴性,则判定为未感染HIV。 如阳性,则应在婴儿18个月时进行复检 阴性:判定为未感染。 阳性:则将血样送至省CDC确认中心进 行 HIV抗体的确认试验。
3、筛查试验的流程图
样品
筛查试剂 筛查检测 阳性反应 原有试剂加 另一种筛查试剂 重复检测 一阴一阳 均阴性反应 阴性反应
均阳性反应 送确认实验室 进行确认
阴性报告
HIV抗体筛查结果的报告和处理
►筛查试验呈阴性反应,出具HIV抗体阴性报告 (提示应考虑窗口期的可能)。 ►筛查试验呈阳性反应,可出具“HIV待复查”报 告,不能出阳性报告。同时尽快进行以下处理: ▪ 填写HIV阳性标本送检单,并随标本送至当 地筛查中心实验室,或直接送确认实验室。 ▪ 筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复测, 如结果均阳性或一阴一阳,则应将该标本和送 检单一并送至省艾滋病确认实验室确认。 ▪阳性标本必须送省确认中心,筛查实验室不 能随意处理。 ▪ 做好检测后的咨询
HIV抗体初筛检测
酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) ELISA法中有间接法、夹心法和竞争 法。目前使用最多的是夹心法。
HIV抗体初筛检测(ELISA实验原理)
酶球(酶标记抗原)
抗体
HIV抗体初筛检测 ELISA夹心法
原理 将HIV抗原包被到固相载体上,标本中的HIV抗体 与包被的HIV抗原结合形成复合物,利用抗体的多 价性,又与酶(HRP)标记的同类HIV抗原也即酶 标板内的球状复合物,形成一个HIV抗原抗体酶标 记的HIV抗原复合物,最后加入底物,避光30分钟, 在酶作用下,产生显色反应,加2N硫酸终止后呈 黄色,在450/620nm双波长下测定光密度值,与 标准进行比较,以判定标本 的结果。
结果的解释
问题:
HIV抗体检测结果阴性是否表明未感染?
对不确定结果如何解释? 怎么样知道婴儿是否感染了HIV?
HIV抗体初筛检测结果解释
阴性 (1)未感染HIV (2)可能感染了HIV,但处于窗口期,或HIV-1/2抗 体和HIV-1O亚型抗体低于检测下限。 (3)疾病晚期,免疫功能缺损,抗体可能呈阴性. 确认阳性 感染了HIV,样品含有HIV-1/2抗体和 HIV-1O亚型抗体(未满18个月的婴儿除外). 不确定:建议追踪检测.
◆确认试剂
必须经国家食品药品监督管理局注册批准。
我国常用的HIV抗体检测试剂
►HIV抗体筛查试剂 ▪酶联免疫:初筛实验室的常用基本试剂。 ▪明胶颗粒凝集 ▪其它快速诊断试剂:在尚未建立艾滋病筛 查实验室的偏远地区由经过培训的技术人员 在规定的场所使用。 ►HIV抗体确认试剂 ▪免疫印迹试剂
快速检测试剂的优缺点
►感染早期:在HIV感染的窗口期,无法使用抗体检 测进行诊断,此时RNA的测定具有特殊的意义,提示是 否有感染的可能,但仍需追踪检测HIV抗体,最终根据 抗体的检测情况做出诊断。 ►病程监控:帮助确定疾病发展的阶段。 ►指导治疗方案及疗效测定
►预测疾病进程
国家对HIV抗体检测试剂的要求
◆初筛试剂
筛查试剂必须是HIV1+2混合型的、经国 家食品药品监督管理局注册批准、批批检合 格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便,不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后,用筛查试剂进行检测,如 呈阴性反应,报告为HIV抗体阴性;对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测,如两种试剂复测均呈阴性 反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应, 或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确 认。