实验八1细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使用

电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的 具有重要应用前景的一门新技术。
电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振
分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology）
（主要研究生物大分子空间结构及其相互关系）的主要实验手段。
超薄切片技术主要包括取材、固定、 包埋、切片、染色等步骤。
二、作业: 试比较电子显微镜与普通光学显 微镜的异同。
实验八 -2
细胞超微结构观察与扫描电子显微镜的使用
一、实验原理
利用二次电子信号成像来观察样品的表面形 态。电子“探针”扫描，激发样品表面放出 二次电子，探测器收集二次电子成像。
疟疾破坏的两个红细胞
二、作业
试描述扫描电子显微镜成像的基本原理
实验八1细胞超微结构观察与 透射电子显微镜的使用
电镜与光镜的比较
显微镜 分辨本领 光源
透镜
真空
成像原理
LM TEM
200nm 100nm
0.1nm
可见光 玻璃透镜 （400-700）
紫外光 玻璃透镜 （约 200nm)
电子束
电磁透镜
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（0.01-0.9）
不要求真空
不要求真空
要求真空 1.33x10-5～ 1.33x10-3Pa
利用样品对光的吸收形 成明暗反差和颜色变化
利用样品对电子的散射 和透射形成明暗反差
主要电镜制样技术
超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备 负染色技术（Negative staining）
染色背景，衬托出样品的精细结构
冰冻蚀刻技术（Freeze etching） 冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒 和膜表面结构。