Nplate对大鼠长期毒性研究
氯胺酮对抑郁大鼠前额皮层CREB及BDNF表达的影响
#论著#氯胺酮对抑郁大鼠前额皮层CREB 及BDNF 表达的影响张广芬 李文媛 徐世霞 杨春 杨建军=摘要> 目的 观察氯胺酮对抑郁大鼠大脑前额皮层环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CR EB)及脑源性神经营养因子(BDN F)的影响。
方法 雄性2月龄W istar 大鼠40只,体重180~220g ,随机均分为四组。
实验第1天,大鼠行强迫游泳15min,建立抑郁模型;第2天,四组分别腹腔注射容积为1ml 的生理盐水(C 组)、氯胺酮5mg/kg (K1组)、10mg/kg (K 2组)和15mg/kg (K 3组)。
给药30min 后再次行强迫游泳实验5min,记录其不动时间。
随后取前额皮层组织测定CR EB 及BD NF 表达。
结果 与C 组相比,K1、K 2和K 3组呈剂量依赖性地减少抑郁大鼠强迫游泳不动时间,增加前额皮层CREB 和BD NF 表达(P <0.05)。
结论 氯胺酮对大鼠的抗抑郁作用可能与前额皮层CREB 及BDN F 上调有关。
=关键词> 氯胺酮;抑郁;环磷酸腺苷反应元件结合蛋白;脑源性神经营养因子=中图分类号> R614 =文献标识码> A =文章编号> 0253-3685(2011)18-2112-03Effect of ketamine on the expressions of CREB and BDNF in preforntal cortex of depressed rats Z HAN G G uangfen ,LI Wenyuan ,X U Shixia ,et al.Depar tment of Anesthesio logy ,Jinling Hospital ,Schoo l o f Medicine ,N anjing University ,Na njing 210002,CHINA=Abstract > Objective T o st udy the effects of ket am ine on cAM P -r esponse element binding pro tein(CREB)and br ain -der ived neurophic facto r (BDN F)in the prefr ontal cor tex of depressed rat s.Methods Fo rty male tw o -mo nth -o ld W istar rats weighed 180-220g wer e equally r andomized into 4g roups.O n the 1st day of ex periment,the rats w ere fo rced to sw im for 15min for establishing adepr essio n model.On the 2nd day ,no rmal saline 1ml(gr oup C),ketamine 5mg/kg (gr oup K 1),10mg /kg(g roup K2)and 15mg/kg (g r oup K 3)with the same volume of 1ml w ere int raperito neally administered,r espectiv ely.T hirty minutes after administr atio n,a f orced swimming test (F ST )w as perfo rmed for 5minutes to r eco rd the immobility time o f rats.T hen the prefor nt al cor tex w as harv ested for detecting t he ex pr essio ns of CREB and BDN F.Results Co mpar ed w ith gr oup C,g ro ups of K 1,K 2and K 3had a shor ter immobility t ime and hig her ex pressions o f CREB and BD NF in the prefr ontal cortex of the depr essed r ats in a dose -dependent manner (P <0.05).Conclusion T he antidepr essant effect of ketamine is relat ed to the up -r egulat ion of CR EB and BDNF ex pressions in the prefr ontal cor tex of rat s.=Key words > K etamine;Depression;cA M P -respo nse element binding protein;Br ain -der ived neur ophic fact or[Jiangsu M ed J ,September 2011,37(18):2112-2114.]基金项目:国家自然科学基金(30872424)作者单位:210002 南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科(张广芬、徐世霞、杨春、杨建军);南京大学医学院附属鼓楼医院麻醉科(李文媛)责任作者:杨建军 E -mail:jianju nyang1971@氯胺酮是临床广泛使用的麻醉药。
PLLA纳米纤维担载紫杉醇对大鼠胶质瘤C6细胞株毒性研究
ｒ ｏｎ ｅ ｏ ｙ ｍ ｔ Ｆ Ｍ） ａｓｙ ｂｅ ｉｇｔｅ Ｃ ｌ ｍ ｓｃｌ ｆ ｍ ｃ ａｇｎ ｆｒｔｅｎ ｎｎ ｌｍｅ ａｍｉｉｅｅ ａｏ ｕｅ ． ｅ ｅｅ ｗ ｃｔ ｅ ｙ（ Ｃ ｓ ｌ ｆ ｏ ｒ ｓａ ，ｏｓｒｎ ｈ ６ｇ ｏ ａ ｅ ｏ ｈｎ ｉ ａ ｅ ａｏｐ ｙ ｒ ｄ ｎｓ ｒｄ ｔ ｌ ｓｄ ｖ ｉ ｌ ｒ ｇ ｔ ｈ ｏ ｔ ｘ
Ｇ ｌ ａ ＵＯ Ｈａ —ｔＯ ， Ｙ ｉ—ｐ ｎ ２ ｉｇ ，
Ｌ Ｙ ｎ—ｑ ｎ ，ｔａ Ｊ Ｄ ｐ ｒ ｅｔ Ｎ ｕ ｓｒｅ ， ｉｎＰ ｏｉ ｉ ａｃ ｏ ａ Ｈ ｓｉｌ Ｃ ａｇｈ ｎ ｉ ｕ ｉ ｅ ｌ（ ． ｅａｔ ｎ ａ ｍ ｅｒ ｕｇｒ Ｊｌ ｒ ｎ ａ Ｃ ｒｉ ｍ ｏ ｔ ， ｈｎ ｅｕ ｏ ｙ ｉ ｖ ｃｌ ｎ ｐａ
Ｋｅ ｏ ｄ Ｇｌ ｍａ ； Ｌ Ａ —Ｐ Ｇ７ ； ｎ ｏ ｐ ｌｍｃ ； ｘ ｌ ｙ Ｗ ｒ ｓ： ｉ ｓ Ｐ Ｌ ｏ Ｅ ５ Ｎａ ｎ ｙ ｒ Ｔａ ｏ ｏ ｏ
胶质瘤是最常见的颅内原发肿瘤 ， 迄今为止， 采用手术、
放疗、 化疗及综合治疗 ， 预后均不 理想 。近年来 随着血管 介入 治疗及 问质 内药物 治疗 的发展 ， 疗药 物的开 发选 择 日益受 化 到重视 。紫 杉醇是 从 红豆 杉树 皮 及针 杏 叶 中提 取的抗 癌 药 物， 对卵 巢 癌 、 癌 、 腺 癌 等 均 有 显 著 疗 效 ”。Ｐ Ｌ — 肺 乳 Ｊ ＬＡ
Ａ ｓｒｃ： ｂｅｔ ｅ ｏｓ ｄ ｅｅｅｔ ｎ ｏｓ ｌ ｍｅｈｎｓ ｆ ａｏ ｐｌ ｒａ ｍｎｓ ｒｄｔ ｏ ｏ ｐｐｏｉ ｏ ｅＣ ｌ ｍａ ｂｔａｔＯ ｊｃ ｖ Ｔ ｕ ｙｔ ｆ ｃ ａｄｐｓｉ ｅ ｃａ ｉ ｏ ｎｎ ｙ ｄ ｉｉｅｅ ｘｌ ｎａｏ ｔ ｓ ｆｈ ６ ｉ ｓ ｉ ｔ ｈ ｂ ｍ ｎ ｏ ｍｅ ｔ ａ ｓ ｔ ｓｏ ｃｌ ｅ ．Ｍｅｈ ｄ ｅ ｒｌｅａｏ ｉｅ ｎ ｏｃｎｒｔ ｎ ｎ ｍｅｗ ｒ ｄ ｔ ｍ ｎｄｂ ｒ（ ｅｈ ｌ ｏｙ ｔｔ ｚｌ ｍ）ａｓｙａｄｔ ｏ １ ｔｏ Ｃ ｌｐｏｆｒｔｎｉ ｄ ｒ ｔ ｎ ｅｔ ｉ ｓ ｄｔ ｅ ｅ ｒ ｉｅ ｙＭＴ ｍ ｔｙｔ ａ ｌｌｃ ａｏｌ ｌ ｉ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ａｏ ａ ｉ ｅ ｅ ｈｚ ｒ ｕ ｓａ ｕ－ ｎ ｌ
丁基苯酞对大鼠皮层神经元损伤后谷氨酸和5_羟色胺释放的影响
・药 理・丁基苯酞对大鼠皮层神经元损伤后谷氨酸和52羟色胺释放的影响种兆忠 冯亦璞(北京100050中国医学科学院2中国协和医科大学药物研究所)摘要 目的:观察丁基苯酞(32n2butylphthalide,NBP)对低糖低氧刺激后培养的胎鼠皮层神经细胞谷氨酸和52HT释放的影响。
方法:胎鼠皮层神经元以低糖低氧培养基培养造成低糖低氧模型;谷氨酸和52HT以荧光分光光度法进行测定。
结果:低糖低氧10h可使神经细胞谷氨酸的释放量增加,dl2NBP(1和10μmol・L-1)和l2NBP(10μmol・L-1)可降低细胞培养基中谷氨酸的浓度,而同剂量的d2NBP对谷氨酸的释放无明显影响。
dl2NBP和l2NBP亦可抑制由花生四烯酸(100μmol・L-1)引起的神经细胞谷氨酸的释放。
本实验结果还显示,dl2NBP(1和10μmol・L-1)及l2NBP(10μmol・L-1)可降低低糖低氧后神经细胞培养基中52HT的浓度。
结论:dl2NBP和l2NBP可抑制谷氨酸和52HT的释放,这可能是其抗脑缺血作用的机理之一。
关键词 丁基苯酞;神经细胞;低糖低氧;谷氨酸;52HTE ffects of NBP on the release of glutamate and52HT from cultured neurons subjected to hypoglycemia/hypoxiaChong Zhaozhong(Chong ZZ),Feng Y ipu(Feng YP)(Institute of M ateria Medica,Chinese Academy of Medical Sci2 ences,Peking U nion Medical College,Beijing100050)ABSTRACT OB JECTIVE:To investigate the effects of dl232n2butylphthalide(dl2NBP),d2NBP and l2NBP on the release of glu2 tamate and52hydroxytryptamine(52HT)from cultured perinatal cortical neurons.METH ODS:The cortical neurons were cultured with medium containing low glucose and bubbled with N2,G lutamate and52HT were determined fluorometrically.RESU LTS:The re2 sults showed that dl2NBP(1and10μmol・L-1)and l2NBP(10μmol・L-1)reduced the glutamate release and the release of52HT from cultured cortical neurons induced by hypoglycemia/hypoxia for10h.d2NBP was shown no significant effect.dl2NBP and l2NBP also decreased the glutamater elease induced by arachidonic acid(100μmol・L-1).CONC L USION:The inhibitory effects of NBP on the release of glutamate and52HT may be one of its action mechanisms in the treatment of cerebral ischemia.KE Y WOR DS 32n2butylphthalide,neuron,hypoglycemia,hypoxia,glutamate,52HT 谷氨酸为中枢神经系统中重要的兴奋性递质,在脑缺血后,其释放显著增加,通过作用于兴奋性氨基酸受体,导致脑组织的兴奋毒性损伤。
氯胺酮对神经痛大鼠模型海马NR2B亚单位表达的影响
氯胺酮对神经痛大鼠模型海马NR2B亚单位表达的影响马平;于剑锋;刘淑珍;崔东红;黄科昌;曹焕军【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2013(10)12【摘要】目的研究亚麻醉剂量氯胺酮对神经痛(NP)大鼠模型的镇痛作用及对海马NR2B亚单位的影响.方法采用坐骨神经慢性压迫法(CCI)制备大鼠NP模型.大鼠随机分为4组(n=6):假手术组(SO组)、模型组(NP组)、K1、K2组.K1和K2组于CCI术后7～31 d每天分别腹腔注射氯胺酮10、20 mg/kg.各组分别于术前1d 和术后3、7、21、31 d测定大鼠术侧后爪痛阈；术后第31天,用RT-PCR和Western blot的方法检测大鼠海马组织中NR2B mRNA和蛋白的表达水平.结果与SO组比较,NP、K1组和K2组术后痛阈明显降低(P＜0.05),手术对侧海马组织中NR2B表达水平增高(P＜0.05).与NP组比较,K1组和K2组术后痛阈升高(P＜0.05),海马的NR2B蛋白表达降低(P＜0.05).结论亚麻醉剂量氯胺酮可以部分反转NP模型痛觉过敏和海马的NR2B亚单位表达增高.【总页数】3页(P11-13)【作者】马平;于剑锋;刘淑珍;崔东红;黄科昌;曹焕军【作者单位】潍坊医学院麻醉学系,山东潍坊261053;潍坊医学院麻醉学系,山东潍坊261053;潍坊医学院麻醉学系,山东潍坊261053;上海市精神卫生中心,上海200030;潍坊医学院麻醉学系,山东潍坊261053;潍坊医学院麻醉学系,山东潍坊261053【正文语种】中文【中图分类】R614【相关文献】1.慢性脑缺血老龄大鼠海马NMDA受体亚单位NR2B表达的特征 [J], 沈瑞乐;郭铁;滕军放2.丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NMDA受体亚单位NR2B及突触素表达的影响 [J], 郭铁;沈瑞乐;吴艳芝;滕军放3.NMDA受体亚单位NR1、NR2A、NR2B在生后大鼠海马的免疫组织化学表达[J], 王玉兰;徐铁军;樊红彬;张凤真;彭裕文4.生后早期大鼠海马NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B的表达变化 [J], 王玉兰;徐铁军;樊红彬;张凤真;王梅申;彭裕文5.短暂性前脑缺血后大鼠海马各区NMDA受体亚单位NR2A和NR2B mRNA的表达变化 [J], 刘志安;徐铁军;张凤真;王梅申;彭裕文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
氯胺酮对神经痛大鼠模型海马NR2B亚单位表达的影响
氯胺酮对神经痛大鼠模型海马NR2B亚单位表达的影响目的研究亚麻醉剂量氯胺酮对神经痛（NP）大鼠模型的镇痛作用及对海马NR2B亚单位的影响。
方法采用坐骨神经慢性压迫法（CCI）制备大鼠NP 模型。
大鼠随机分为4组（n = 6）：假手术组（SO组）、模型组（NP组）、K1、K2组。
K1和K2组于CCI术后7～31 d每天分别腹腔注射氯胺酮10、20 mg/kg。
各组分别于术前1 d和术后3、7、21、31 d测定大鼠术侧后爪痛阈；术后第31天，用RT-PCR和Western blot的方法检测大鼠海马组织中NR2B mRNA和蛋白的表达水平。
结果与SO组比较，NP、K1组和K2组术后痛阈明显降低（P < 0.05），手术对侧海马组织中NR2B 表达水平增高（P < 0.05）。
与NP组比较，K1组和K2组术后痛阈升高（P < 0.05），海马的NR2B蛋白表达降低（P < 0.05）。
结论亚麻醉剂量氯胺酮可以部分反转NP模型痛觉过敏和海马的NR2B亚单位表达增高。
标签：氯胺酮；神经性痛；海马；NR2B神经痛（neuropathic pain，NP）是一种慢性痛，可能引起情绪、认知功能改变[1]。
有研究表明NP大鼠脊髓背角的N-甲基-D-天门冬氨酸（N-Methyl-D-Aspartate，NMDA）受体NR2B亚单位表达显著升高，可能是导致大鼠神经性痛的原因之一，但神经性痛症状与脊髓以上脑区的NR2B亚单位表达改变的关系尚不清楚。
氯胺酮是一种非竞争性的NMDA 受体阻滞剂，其在亚麻醉剂量下具有确切的镇痛作用[2]。
本研究检测氯胺酮对NP大鼠模型海马的NR2B亚基表达水平的影响，旨在推测海马与慢性疼痛症状的相关性。
1 材料与方法1.1 动物模型的建立及分组选择体重在180～200 g的雄性Wistar大鼠，购自山东鲁抗医药集团股份有限公司实验动物中心。
大鼠随机分为4组（n = 6）：假手术组（sham operation，SO组），模型组（NP组），K1、K2组采用慢性坐骨神经压迫（chronic constrictive injury，CCI）方法制备大鼠NP模型。
棉籽总黄酮在大鼠慢性应激模型中的抗抑郁活性及其对海马神经营养通路的影响
·１ ７ ９ ·
棉籽总黄酮在大鼠慢性应激模型中的抗抑郁活性 及其对海马神经营养通路的影响
赵 楠，李云峰 ，杨红菊，杨 明，赵毅民，宫泽辉 ０ ０ ８ ５ ０ ） （ 军事医学科学院毒物药物研究所，北京 １ 摘要：目的 探讨棉籽总黄酮（ 代号 Ｃ Ｔ Ｎ Ｔ ） 的抗抑 郁作用及其可能机理。方法 连续 １ ５ｄ以每日 １次 的频率给予大鼠一系列不可预知的应激刺激以建立 慢性复合应激模型， 每次应激刺激前给予 Ｃ Ｔ Ｎ Ｔ （ ５ ０
１ ７ｄ 。ｄ １ ６给药后 １ｈ 观察大鼠开场自发活动行为。 ｄ１ ７给药后 １ｈ 断头， 于冰上取脑分离双侧海马， 置 液氮中保存， 用于蛋白免疫印迹分析； 同时取全血 ６～ １ ０ｍ Ｌ ， 室温放置 ２ ０ｍ ｉ ｎ 至血液凝固后常温离心 ２ ０ ０ ０× ｇ ， ２ ０ｍ ｉ ｎ ） 分离血清， － ２ ０ ℃冻存， 用以测定 （ 血清皮质酮含量。 １ ． ３ 大鼠开场自发活动实验 开敞实验箱为 ８ ０ｃ ｍ× ８ ０ｃ ｍ× ７ ５ｃ ｍ ， 测试时将 ｉ ｄ ｅ ｏ ｍ ｅ ｘ 大鼠放于敞箱中央， 用Ｖ Ⅴ图像运动解析仪 观察 ５ｍ ｉ ｎ内大鼠活动情况， 分析指标为运动距离、 运动时间和静止时间。 １ ． ４ 血清皮质酮含量测定 采用竞争法 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ， 按照皮质酮测试盒说明书 操作。取大鼠血清 ２ ５μ Ｌ和酶联物 ２ ０ ０μ Ｌ ， 加入预 先包被抗大鼠皮质酮一抗的 ９ ６孔酶标板， 室温下反 应６ ０ｍ ｉ ｎ ， 甩尽反应液， 洗板 ３次， 每孔加入显色液 ２ ０ ０μ Ｌ ， 反应 １ ５ｍ ｉ ｎ ， 再加入终止液 １ ０ ０μ Ｌ ， １ ５ｍ ｉ ｎ 内用酶标仪测定 ４ ５ ０ｎ ｍ 波长的吸光度值（ Ａ 。 ４ ５ ０ｎ ｍ） 同时测定标准品 Ａ值， 并绘制标准曲线， 用以计算 血清皮质酮浓度。 １ ． ５ 蛋白免疫印迹分析 大鼠海马组织总蛋白提取按 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ细胞裂解 液说明书操作。考马斯亮蓝法测定蛋白浓度， 加入 ６× 上样缓冲液， 沸水浴变性 ５ｍ ｉ ｎ ，－ ７ ０ ℃ 冻存备 用。 ４ ０μ ｇ组 织 总 蛋 白 在 １ ２ ％（ 测定 ｐ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ ， Ｅ Ｒ Ｋ １ ／ ２和 ｐ Ｅ Ｒ Ｋ １ ／ ２ ） 或１ ５ ％（ 测定 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ ） 的Ｓ Ｄ Ｓ 聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离。而后， 将凝胶半干式 电转印至硝酸纤维素膜（ Ｎ Ｃ膜） 。取出 Ｎ Ｃ膜， 浸于 含５ ％脱脂奶粉的 Ｔ ｒ ｉ ｓ 缓冲生理盐水（ Ｔ ｒ ｉ ｓｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｄ ｓ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ， Ｔ Ｂ Ｓ ） 中室温轻摇封闭 １ｈ ， 用含 ０ ． ０ ５％ 的吐 温 ２ ０ 的Ｔ Ｂ Ｓ （ Ｔ Ｂ Ｓ Ｔ ） 缓冲液漂洗干净， 浸入 Ｔ Ｂ Ｓ Ｔ
异丙酚对大鼠海马神经元凋亡及细胞色素C释放的影响的开题报告
异丙酚对大鼠海马神经元凋亡及细胞色素C释放的影响的
开题报告
题目：异丙酚对大鼠海马神经元凋亡及细胞色素C释放的影响
背景和意义：
异丙酚（Propofol）是一种常用于临床麻醉的全身麻醉药，它的作用机制是通过增强GABA受体介导的神经抑制作用，使患者处于昏睡状态。
然而，异丙酚对大脑神经元的影响尚未完全阐明。
有一些研究表明，异丙酚会诱导神经元凋亡和细胞色素C 的释放，这可能会对神经系统的功能和健康产生不良影响。
因此，进一步探究异丙酚对神经元的影响具有重要的科学研究价值和临床应用前景。
研究目的：
本研究旨在探究异丙酚对大鼠海马神经元凋亡和细胞色素C释放的影响，以进一步揭示异丙酚对神经元的作用机制。
同时，本研究也将提供基础研究的数据支持，为异丙酚的临床应用提供科学依据。
研究方法：
本研究将采用体外细胞实验的方法，首先使用大鼠的海马神经元培养物，并将其分为对照组和异丙酚处理组。
对照组将不接受任何处理，异丙酚处理组将采用不同的浓度异丙酚进行处理。
随后将使用细胞生存率和细胞凋亡检测方法，以及Western blotting法检测海马神经元细胞色素C的释放量，以确定异丙酚对海马神经元的影响。
研究意义：
本研究预计可以揭示异丙酚对大鼠海马神经元凋亡和细胞色素C释放的影响，为异丙酚的临床应用提供数据支持，同时也可以探究异丙酚对大脑神经元健康的影响，对神经医学的基础研究和临床治疗都具有一定的参考价值。
安神补脑液对大鼠长期毒性的观察
安神补脑液对大鼠长期毒性的观察张海晶;孙桂波;陈荣昌;王健;陈大忠;王永彬;王永宽;解钧秀;孙晓波【摘要】Objective To study the chronic toxicity and its severity of a Chinese medicine, Anshen Bunao Liquid ( ABL) , in rats, provide the target organs and extent of reversibility of their adverse effects, determine its non-toxic dose, and to evaluate the safety of medication and provide reference for clinical trial dose and observation indexes.Methods Two hundred and forty healthy 6-week old Wistar rats ( male:female=1:1) were divided into low,middle, and high dose Anshen Bunao liquid groups (2.5, 5, 10 mL/kg),and solvent control group (distilled water 2 mL/100 g), with 60 rats in each group.The drug was orally administered to rats once a day and 6 days per week for 26 weeks.The general state, body mass and food intake were measured.By the end of 13 weeks, 26 weeks of experiment and 4-week recovery period after drug withdrawal, hematological and biochemical indexes were assayed, organ coefficients were determined, and histopathological observation was performed.Results Long-term continuous oral administration of Anshen Bunao liquid, the general state, behavior and gross appearance showed no significant abnormal pared with the control group, no significant differences in all checked items were found in the treatment groups.During 3 and 6 months, the size and location of organs,organ weight and organ coefficient had no obvious changes, with only non-significant increase of weight of some organs.All the organ coefficients of the animals in different groups werewithin normal range.Histopathology showed no obvious patho-logical and toxicological changes even in the high-dose drug treatment group, and no delayed toxicity occurred after with-drawal of drugadministration.Conclusions The Chinese drug, Anshen Bunao liquid has no obvious toxicity and no de-layed toxicity after withdrawal of the drug in rats.It is expected that the planned dose in clinical use is a safe dose.%目的：观察安神补脑液长期灌胃给药对大鼠所产生的毒性反应及严重程度，提供毒副反应的靶器官及其损害的可逆程度，确定无毒反应剂量，以评价安神补脑液长期用药的安全性，为拟定临床试验剂量及观察指标提供参考。
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Nplate对大鼠长期毒性研究
摘要】目的研究Nplate的长期毒性作用。
方法 120只大鼠，随机分为4组，低、中、高剂量组和溶媒对照组。
每周给药三次，连续给药四周，恢复期四周，观察
给药期间大鼠状况。
分别于停药期、恢复期各剖杀一半大鼠，进行血液学、血液
生化学、免疫学等指标检测，称脏器重量，计算脏器系数，并作病理组织学检测。
结果中、高剂量动物与溶媒对照组比较，部分指标有显著异常，停药后各指标
恢复或有恢复趋势。
结论 Nplate有一定的毒性，主要毒性靶器官为血液系统，免疫系统和消化系统，但毒性变化具有可逆性，临床使用时需注意毒性靶器官的毒
副作用并控制剂量。
【关键词】 Nplate 长期毒性大鼠
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）26-0051-02
促血小板生成素（TPO）的主要作用是调节巨核细胞和血小板生成，人体内
主要由肾脏、肝脏、骨髓基质细胞生成[1]。
基因在1994年被克隆后，出现了繁
多的TPO衍生物，其治疗目的更是多种多样，比如对放射病[2]、肝病的救治，但
基本都有一定毒性。
Nplate是国外研制的一种TPO衍生物，现本中心使用注射用Nplate冻干粉，sc对大鼠四周长期毒性试验，对其毒性进行一定研究，给后续试
验提供一定参考资料。
1.材料
1.1 供试品 Nplate，厂家：AMGEN，性状：白色冻干粉，规格：250μg/支。
1.2 动物 SPF级SD大鼠，6～8周龄，体重120～140g，主体试验每组20只，卫星组每组10只，雌雄各半，由上海西普尔-必凯试验动物有限公司提供，实验
动物生产许可证号：2008001607994，动物饲养于SPF级动物房。
1.3 仪器日立7080全自动生化分析仪；ADVIA 2120型全自动血球分析仪；美
灵MC10plus血凝仪；CytomicsTM FC 500流式细胞仪。
2.方法[3-7]
2.1 大鼠长期毒性试验取120只SD大鼠，雌雄各半，按体重均匀随机分为4组，Nplate低、中、高剂量组和溶媒对照组，主体试验组各20只，卫星组各10组。
雌雄分开饲养，每笼5只。
给药剂量分别为5、15、50μg/kg，按1ml/kg体
重sc给药，每周3次，连续四周，d10对卫星组动物麻醉采血，进行血液学、血
液生化学、免疫学等指标检测，称脏器重量，计算脏器系数，并作病理组织学检测。
给药期间每日观察大鼠症状一次。
每日称1次摄食量，每周称1次体重。
d28各主体试验组1/2动物进行麻醉取血检测血液学指标、血液生化指标和凝血
指标，然后放血处死动物，进行尸检，取其脏器称重，并计算脏器系数。
将脏器
组织固定保存，并进行病理学检查。
d56其余动物，重复上述检查。
3.结果
3.1 对动物一般情况的影响给药期间动物一般行为、活动、毛发、大小便、
食量、体重均未见明显异常。
3.2 对大鼠血液学指标的影响 d10时低、中、高剂量组TT降低、PLAT升高，
雄性动物EOS%降低，雌性动物HGB降低、MPV升高；中、高剂量组雄性动物MPV升高，雌性动物HCT降低、WBC升高；高剂量组LYMPH%降低，雄性动物HCT、RETIC%降低，雌性动物NEUT%、MONO%升高；其余指标无明显差异。
d28
时低、中、高剂量组PLAT升高，雌性动物MPV升高；中、高剂量组雄性动物
NEUT%、RETIC%、MPV升高，LYMPH%、PAG降低；高剂量组WBC升高，EOS%
降低，雌性动物RBC、HGB、HCT、TT降低，NEUT%升高；其余指标无明显差异。
d56各指标无明显差异。
（见表1）
表1 Nplate sc对大鼠血液学指标
注：★p<0.05vs同时间点的溶媒对照组
3.1.3 对大鼠血液生化学指标的影响 d28时中、高剂量组雌性动物P升高；高剂量组动物AST升高，雌性动物CPK、LDH、P升高；其余指标无明显差异。
d56时中、高剂量组雌性动
物Tbil升高，ALP降低；其余指标无明显差异。
3.1.4 对大鼠免疫学指标的影响各组与溶媒对照组比较d28和d56时均无明显差异。
3.1.5 抗体检测结果各组与溶媒对照组比较d28和d56时均无明显差异。
3.1.6 骨髓细胞检查结果停药期各个剂量组巨核细胞均有不同程度增生活跃且粒红比例降
低或倒置，粒系细胞增生较低下，可见坏死细胞碎片，有核红细胞增生低下，均可见到程度
不等的成纤维细胞和纤维细胞及胶原纤维，高剂量组动物可见到裸核及坏死细胞。
3.1.7 脏器系数 d28时高剂量组雌性动物脾脏、肝脏、肺的绝对重量和相对重量升高，其
余脏器重量未见明显异常。
d56时未见明显异常。
3.1.8 病理组织学检查 d28时低、中、高剂量组肝脏间质内髓外造血灶数目明显增多，巨
核细胞数目明显增多，汇管区炎细胞浸润亦显著增多，且量-效关系明显。
脾脏红髓明显扩增，淋巴细胞数量显著减少，淋巴小结体积亦明显缩小。
脾脏红髓和白髓中均散在分布有髓外造
血灶，尤以分叶核样巨核细胞的增多最为显著。
红髓内散在分布有大量核深染、胞浆嗜酸性
的网状内皮细胞增生病灶，部分网状内皮细胞已蜕变为近梭形的类成纤维细胞，且量-效关系
明显，d56时以上病变在给药组和溶媒对照组的差别基本消失。
其余器官或组织结构均未见明显器质性病理变化。
3.1.9 骨髓检查 d28时低、中、高剂量组骨髓内巨核细胞数量轻度增多。
d56时给药组和
溶媒对照组大鼠骨髓中巨核细胞数量和比例未见明显差异。
4.讨论
长毒动物给药期和停药后的一般情况、体重、摄食量等结果未见明显异常，本试验条件下，Nplate连续四周sc对大鼠毒性作用较轻，动物可以耐受。
血常规检查结果表明给药后中、高剂量组外周血RBC、HGB、HCT略有下降，而RETIC%
略有上升。
骨髓涂片和骨髓病理组织学检查均观察到半数以上高剂量组动物的髓红系幼稚造
血细胞减少。
同时在肝脏、脾脏和肾上腺可见明显的代偿性的髓外造血灶，伴随脾脏和肝脏
重量的明显增加，停药一个月后可恢复。
红系数值的下降的具体机制尚不清楚，可能是由于
干细胞竞争，药物刺激血小板生成的同时抑制了红细胞的生成。
血液生化学指标表明给药后高剂量组ALT、AST、ALP升高，同时大鼠停药时肝脏绝对重
量和相对重量与溶媒对照组相比显著升高。
肝脏重量的变化可能和大量的髓外造血灶的生成
有关，但未发现其他严重的器质性病变。
药物可能对大鼠肝功能有影响，但程度较轻，停药
一个月后可恢复。
停药时血清K、P升高，停药一个月后可恢复，推测因血小板释放K和P，
此现象可能药物刺激血小板大量生成有关。
高剂量血清CPK、LDH升高，停药一个月后可恢复。
病理组织学未见心脏、胰腺等有明显的药物相关的病变。
是否与供试品作用相关尚不能
确定，有待进一步长期的毒性试验确证。
抗体的产生与剂量无明显相关性。
5.结论
大鼠以5.0、15、50μg/kg皮下注射给予注射用Nplate，连续给药4周，安全剂量为
5.0μg/kg，毒性剂量为15μg/kg。
毒性作用靶部位主要为免疫系统（脾脏、骨髓）和血液系统（巨核系、粒系、红系）以及消化系统（肝脏）等，以骨髓纤维化最为显著，停药可恢复或
有恢复趋势。
临床使用时应注意药物对以上毒性靶部位可能存在的毒副作用，长期使用时注
意监测患者网硬蛋白形成情况。
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