类风湿性关节炎动物实验

类风湿性关节炎

反应蛋白（CRP）红细胞沉降率（ESR）

1造模方法

健康Wistar大鼠60只，雄性，体重180±20g，大鼠佐剂性关节炎(AA)模型

2检测方法

CRP采用免疫散射比浊法检测

ESR采用微量毛细血管法检测

1. 取100mmoI/L 构橼酸钠溶液0.4ml于干净小试管中。

2. 取静脉血1.6ml立即注入抗凝管中并混匀。

3. 用清洁、干燥的魏氏血沉管准确地吸取抗凝血至"0"刻度，擦去管外附着的血液，将管垂直竖立于血沉架上，避免振动、阳光直照和血液外溢。

4. 准一小时后，读取血浆凹面至红细胞顶部之间的距离(mm) 数，( 即血浆高度) 为血沉结果。

报告方式：XXmm/hr

参考文献

黑龙江中医药大学博士毕业论文《宣痹颗粒剂治疗风湿热痹（类风湿性关节炎）的药效学及作用机理的研究》2007

白介素6（IL6），血清基质金属蛋白酶（MMP-1,MMP-3）

1检测方法

血清IL6，MMP-1，MMP-3采用放射免疫分析法，参照试剂盒说明进行

大动物模型（猴）

在绒猴和猕猴动物的易感品系，给予皮内注射混有完全弗氏佐剂的II型胶原可以诱导关节炎的出现（CIA）。这是Trentham等人于1977年在尝试培养胶原的抗血清参照物时偶然发现的。CIA在关节炎的动物模型中比较独特，因为它可以通过对正常的软骨蛋白而不是外源性异体抗原产生自身免疫反应而诱导疾病的发生。而且，给正常动物注射纯化的抗II 型胶原抗体可产生轻度的关节炎。在10-14天接受II型胶原免疫的小鼠超过90%发展为多关节炎。在关节炎发生后的2周内，小鼠出现血管形成，并导致关节软骨及骨组织的侵蚀和破坏。II型胶原主要存在于透明软骨中，但也可出现在耳廓和耳前庭等关节外部位，这也可以解释II型胶原的关节外效应。CIA的特点是可以产生抗II型胶原抗体，并可发展为迟发型超敏反应。此关节炎是依赖T细胞的证据包括:①胸腺缺失的动物不能诱导出关节炎;②给予抗T细胞或抗CD4辅助T细胞抗体可以抑制关节炎;③对II型胶原特异的T细胞克隆可以传递疾病。

评估关节炎的首要指标：诱导后发病率，近端指间关节炎发病率，关节肿胀，关节炎评分，动物体重；

检测免疫反应和疾病进展的指标：血液学分析，血清生物标志物（C-反应蛋白，碱性磷酸酶，白蛋白），猴抗II型胶原抗体酶联免疫吸附试验，抗原特异性T细胞和B细胞反应，细胞因子水平（一般可有IL-1，IL-18，IL-6，抗胶原IgG抗体，另外还有趋化因子CCR5及受体CXCR3）；

骨的病理组织学和形态计量学：关节炎和放射性的放射形象得分（关节破坏，骨吸收和生长异常，失去关节腔），定性组织病理学，定量组织形态计量学。

另外，自发性狗类风湿性关节炎与人类幼年型类风湿性关节炎十分相似。也有用此建模的。