生物 菊花的组织培养笔记

菊花的组织培养

基础概念：

1、细胞分化

概念：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。

原因：基因的选择性表达。

特点：持久性、稳定性、普遍性、（不可逆性)。

2、细胞的全能性

概念：已分化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能。

原因：细胞内含有形成完整个体所需的全套基因。

证明：植物组织培养证明植物细胞具有全能性；

动物克隆证明动物细胞核具有全能性。

3、植物的组织培养

概念：指植物的组织、器官、细胞等在离体条件下，通过无菌操作，在人工控制条件下（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的完整植株的技术。

区别植物组织培养和植物细胞培养：

植物组织培养：组织或细胞到植物体形成的过程；

植物细胞培养：组织或细胞到愈伤组织的过程。

一、植物组织培养的原理

1、原理：植物细胞具有全能性。

2、概念：已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。

3、原因：生物体的每一个细胞都是由同一个受精卵通过有丝分裂形成的，都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。

特例：哺乳动物成熟红细胞没有细胞全能性。（没有细胞核）

二、植物组织培养的基本过程和必要条件

1、基本过程：外植体——（脱分化）——愈伤组织——（再分化）——芽、根——植物体

脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。

愈伤组织：外植体在培养过程中，通过细胞分裂所产生的、排列疏松无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞群。

2、必要条件：离体；一定的营养物质激素和其他外界条件。

三、影响植物组织培养的因素

1、植物材料的选择

（菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。）2、培养基的营养成分

微量元素和大量元素：提供植物细胞生活所必需的无机盐。

蔗糖：提供碳源，能源，同时能够维持细胞的渗透压。

甘氨酸、维生素等：满足离体植物细胞特殊营养需求。

MS培养基：则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。

（在MS培养基配置好之后，常常需要加入植物激素）

3、植物激素

与植物组织培养相关两种主要激素：生长素和细胞分裂素。它们是启

动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。

两者关系：协同作用。

两种激素的使用顺序对结果的影响

结论：不同使用顺序导致不同结果。

两种激素的用量对结果的影响

结论：不同的用量会导致不同的结果

4、pH、温度、光照等条件

菊花的组织培养：pH：5.8左右温度：18-22℃光照：12h/D

四、实验操作

1、制备MS固体培养基

2、外植体消毒

选材：选取菊花茎段时，要取生长旺盛的嫩枝。

消毒：①流水冲洗；②70％酒精处理；③消毒液处理。

（所需材料：洗衣粉、无菌水、酒精、氯化汞，无菌吸水纸）

3、接种

注意:形态学上端朝上，形态学下端朝下，不要倒插。

接种前用70％酒精擦拭工作台，所有接种工作在燃着的酒精灯旁进行，每次使用器械后都要用火焰灼烧灭菌。每瓶接种大概6~8块外植体。

4、培养

接种后在无菌箱中培养，期间应该定期消毒。

温度：18-22℃日光灯光照：12h/D

5、移栽

一般放置在20～25℃的遮荫环境中，适应5～7d。试管苗不萎蔫，有新生长的趋势，便可移栽。

用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间。

补充：

蛭石：缓冲性，不溶于水，并含有可被花卉利用的镁和钾，为无土栽培的优良基质。蛭石偏碱性，在无土栽培中常用pH5.5～6.5的酸液处理后再使用。

珍珠岩：特点一：透气性好，含水量适中。当珍珠岩灌水后，大部分水分保持在表面，由于水分张力小，容易流动，因此珍珠岩易于排水，易于通气。虽然珍珠岩的吸水性不如蛭石，但在下层有水的情况下，珍珠岩通过颗粒间水分的传导，能把下层的水吸入整个盆中，并保持相当的通透性。

特点二：化学性质稳定，珍珠岩的酸碱度值为（PH7.5~7.0）。

6、栽培

五、结果分析与评价