大豆异黄酮的测定方法综述(精)
高效液相色谱法测定大豆异黄酮片中的大豆异黄酮的含量-最新年精选文档
高效液相色谱法测定大豆异黄酮片中的大豆异黄酮的含量大豆异黄酮是一类从大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能的主要活性成分，具有防止骨质疏松、降低胆固醇、免疫调节、改善妇女更年期综合症等药理作用。
随着人们保健意识的加强，大豆异黄酮将成为医药、保健品、食品等方面多功能产品。
目前，大豆异黄酮的重要生理功能和广泛应用前景已受普遍关注。
一、材料和方法1.材料黄豆苷（Daidzin，D）、染料木苷（Genistin，G）、黄豆苷原（Daidzein，De）、金雀异黄素（Genistein，Ge）标准品：上海同田生物技术XX公司，甲醇（HPLC）：默克公司，醋酸铵、冰醋酸均为分析纯，大豆异黄酮片（样品，批号：S001、S002、S003），水为重蒸馏水。
2.仪器戴安高效液相色谱仪：P680泵、UV170u紫外检测器，超声波清洗器。
3.色谱条件3.1 色谱柱：不锈钢柱，内径4.6mm，长250mmC18柱，填料粒径10μm。
3.2 流动相：甲醇+0.05mol/L乙酸铵，pH4.6（46+54，V/V）。
3.3 流量：1.2ml/min。
3.4 进样量：20.0μL。
4.样品制备取20片大豆异黄酮片，用研钵研碎，准确称取1.0g试样，加50ml的80%甲醇溶液超声提取30min，上清液抽滤，残渣再用80%甲醇溶液洗，洗液一并抽滤，定容至100.0mL，过0.45μm滤膜，待测。
5.混合标准曲线的制备5.1混合标准储备液称取黄豆苷、染料木苷、黄豆苷原、金雀异黄素对照品用甲醇溶解并定容至10mL。
5.2混合标准曲线溶液分别取混合标准储备液0.01、0.05、0.10、0.30、0.50、1.25mL，用甲醇定容至10mL。
计算各自的浓度。
二、结果和数据1.混合工作曲线分别吸取一系列浓度范围的对照品混和溶液，进样量20μ L，按1.3项色谱条件注入液相色谱仪，测定峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
大豆异黄酮检测
结果计算
样品中大豆异黄酮各组分[大豆苷（X1）、大豆黄苷（X2）、染料木 苷（X3）、大豆素（X4）、大豆黄素（X5）和染料木素（X6）]的含 量分别按下式计算：
式中： Xi——样品中大豆异黄酮单一组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）或毫克 每升（mg/L）； Ci——根据标准曲线得出的大豆苷（或大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素 和染料木素）的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V——样品稀释液总体积的数值，单位为毫升（mL）； m——固体、半固体杨南平质量的数值，单位为克（g）； 液体样品体积的数值，单位为毫升（mL）。
测定方法
色相色谱法：进样量少，敏感性、选择性及特异性 较高，但需制备衍生物，操作复杂，耗时长，仪器 昂贵。 毛细管电泳法：快速经济，选择性高，样品前处理 简单分离效率高。 免疫检验法：以酶联免疫法为基础，测定中根据标 记物和干扰物荧光寿命的差异，选择性的测定标记 物的荧光信号。
以下介绍检测保健食品中大豆异黄 酮的测定方法 GB 23788-2009-T 高效液 相色谱法
大豆异黄酮混合标准使用溶液
将大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆 黄素和染料木素六种标准贮备溶液按1:1:1:1:1:1 的比例配成标准混合溶液，待用。 分别吸取0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL标准 混合溶液于10mL容量瓶中，加入等体积水，用 50%二甲基亚砜溶液定容，配成浓度分别为 0.0mg/L， 8.0mg/L ，16.0mg/L，24.0mg/L， 32.0mg/L，40.0mg/L的混合标准系列溶液。
样品处理
固体样品、半固体样品：固体样品粉碎、磨细（过80 目筛）、混匀，半固体样品混匀，称取样品0.05g~0.5g （精确至0.1mg），用80%甲醇溶液溶解并转移至50mL 容量瓶中，加入80%甲醇溶液至接近刻度。 液体样品：吸取混匀的液体样品0.5~5.0mL于50mL 容量瓶中，加入甲醇溶液至接近刻度。 将上述样品溶液用超声波振荡器振荡20min，用80% 甲醇定容，摇匀。取样品溶液置于离心管中，离心机离心 15min（转速大于8000r/min）。取上清液用滤膜过滤，收 集滤液备用。
大豆含量测定方法
大豆提取物中大豆异黄酮含量测定方法
一、色谱条件
1．色谱柱：ODS-3 15cm × 4.6mm 5μm
2．流动相：A 甲醇：水：磷酸（ 30：70：0.2，V/V ）
B 甲醇：水：磷酸 ( 45:55:0.2,V/V )
3．流速： 1.0ml/min
4．柱温：25℃
5．检测波长：254nm
6．灵敏度：0.01AUFS
7．进样量：10μl
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备 ：
精密称取干燥至恒重的大豆甙、大豆甙元、染料木甙、染料木素、黄豆黄素和黄豆黄甙对照品各1mg 于50ml 容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备 ：
精密称取提取物约80mg 于50ml 容量瓶中，加入30ml 甲醇，超声20min 溶解后，放置至室温，甲醇定容，用0.45μm 微孔膜过滤即得样品溶液。
西安绿泉生物技术有限公司 XI ’AN GREEN SPRING NATURAL PRODUCT CO., LTD.
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后，进样测定，大豆甙的保留时间约为8min ，大豆甙元为24min ，染料木甙为15min.染料木素为32min.黄豆黄素25min,黄豆黄甙未9min,用外标法计算含量。
四、计 算：
A i W 0
含量（%）= ——— × ——— × S ×100%
A 0 W i
A i ：样品溶液中甙峰面积 A 0：对照品溶液中甙峰面积
W 0：对照品的称样量（mg ） W i ：样品的称样量（mg ）。
关于大豆异黄酮的研究综述
吸循环的不利影响,注意持续气腹压不宜太高及监测血气变化。
②气腹形式应缓慢,使老年患者对CO 2气腹有一适应过程。
③腹壁穿刺时应防止皮下气肿,术毕挤压腹部排尽腹腔内C O 2气体,可有效地预防高碳酸血症。
④术毕应保持呼吸道通畅,继续监测呼吸循环功能,防止肺部感染。
⑤LC 应由配合熟练、经验丰富的医师进行,尽可能缩短手术和麻醉时间。
214 术后护理21411 一般护理:LC 通常采用全麻,术后应严密监测血压、心率、呼吸、血氧饱和率等变化。
术毕回房后按全麻术后观察护理,3小时内注意不让病人入睡,以防止“麻醉后作用”导致病人窒息等严重并发症。
输液总量及速度宜控制,避免因输液量过多,速度过快而导致病人出现急性心肺功能不全。
21412 合并心血管疾病患者的护理;术后2～3d 应行心电监护,检查血压并通过干预保持血压稳定,高血压患者恢复服降压药,如病情不允许口服,则可静滴硝酸甘油等控制血压,如为起搏心律,则应观察起搏信号后有无QRS 波伴随及漏波现象,出现心律失常及血压变化及时通报医生处理。
21413 合并呼吸系疾病患者的护理:呼吸系疾病大多有病史长,反复发作的特点,多数病人常认为是老毛病而未加重视,术后应鼓励病人积极排痰,作有效咳嗽,协助病人翻身、拍背,保持呼吸道通畅,必要时给予祛痰药物、雾化吸入等促进排痰,严密观察呼吸频率血氧饱和度,口唇、肢端紫绀情况,视缺氧情况合理给氧,一般给予低流量吸氧,严重者应监测血气,如氧分压低于60kPa,CO 2分压高于50kpa,结合呼吸、血氧饱和度、紫绀等,则应考虑呼吸衰竭,及时报告医生,及时处理。
总之,尽管合并心肺功能疾患的病人行LC 难度较大,但只要做好术前处理,术中及术后监测,具备熟练的LC 技术,LC 不失为老年人胆石症病人的优秀手术方式,是一种损伤小,安全可靠,恢复快的微创手术,我们认为老年胆囊切除更适合于LC 。
参考文献[1] 费庆铨.老年胆道疾病的外科治疗[J ].中华外科杂志,1989127:150～152.[2] 孙石.肝胆胰外科杂志,1999,11(1):6.收稿日期:2005-09-12文献综述关于大豆异黄酮的研究综述蒋蔡滨(贵阳中医学院2003级研究生,贵州贵阳 550002) 内容提要:本文综述了大豆异黄酮的组成结构、吸收和代谢、物理和化学性质、含量测定方法、药理作用,分析了目前大豆异黄酮的市场状况,以及我国大豆异黄酮的研究前景。
大豆异黄酮的测定方法
大豆异黄酮的测定方法本方法适用于大豆制品中大豆异黄酮的测定。
本方法大豆异黄酮染料木素的最低检出限为10ng；大豆苷元的最低检出限为30ng。
1、方法提要大豆异黄酮（soybean isoflavones，简称ISO）是一类以大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能的主要活性成分。
目前发现的大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型的糖苷两类共有12种，染料木素（Genistein，G）和大豆苷元（Daidzeiu，D）是其中两种重要化合物。
本法用80%乙醇作为溶剂，提取样品中的染料木素、大豆苷元，以反相高效液相色谱分离，在紫外检测器260nm条件下检测其峰面积，以染料木素和大豆苷元两项含量之和计算大豆异黄酮含量。
2、仪器（1）LC高效液相色谱仪，C—RIB色谱处理机。
（2）检测器：SPD—2AS紫外检测器。
（3）离心机。
（4）超声波振荡器。
3、试剂（1）甲醇（色谱纯）。
（2）乙醇（优级纯）。
（3）双重蒸馏水。
（4）大豆异黄酮标准品：染料木素与大豆苷元标准品（美国Sigma公司产品），以染料木素和大豆苷元两项之和作为大豆异黄酮含量计算。
（5）大豆异黄酮标准溶液：准确称取染料木素标准品 5.0mg，大豆苷元标准品3.2mg，各自用流动相“甲醇＋水（60＋40）”定容至100mL，配制成50μg/mL的染料木素和32μg/mL的大豆苷元标准溶液。
4、测定步骤（1）样品处理：a、固体样品：准确称取一定量固体粉末样品于100mL容量瓶中，定量加入80%乙醇，经超声振荡5min，加水补足至刻度，待提取液略澄清后经离心分离（3000r/min，5min），取上清液经0.45μm滤膜过滤后待进样。
b、液体样品：准确吸取2.0mL液体样品，加入80%乙醇摇匀并定容100mL，澄清后同上述步骤。
（2）色谱分离条件：色谱柱：Shim—Pack CLC—ODS，6mm×150mm，5μm。
流动相：甲醇＋水（60＋40），临用前用超声波除气。
大豆异黄酮的测定方法综述
NANCHANG UNIVERSITY功能食品学综述论文学院：生命科学与食品工程学院专业：食品科学与工程班级：食品科学与工程113班学号：**********学生姓名：**指导教师：***起讫日期：2014年3月至2014年4月大豆异黄酮的测定方法摘要本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍关键词：大豆异黄酮；测定方法Abstract:In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introducedKeywords: soy isoflavones method目录摘要 (I)Abstract: (I)目录 .................................................................................................................................................. I I 1 根据紫外吸收特性检测方法. (1)1.1 紫外分光光度法（UV） (1)1.2 三波长法（three–wave length UV spectrophotometry） (1)2 根据色谱原理检测方法 (2)2.1 高效液相色谱法（HPLC） (2)2.2 高效液相色谱―质谱法（HPLC–MS） (2)2.3 气相色谱法（GC） (2)2.4 气相色谱―质谱法（GC–MS） (3)2.5 毛细管电泳法（CE） (3)2.6 薄层扫描色谱法（TLCS） (3)2.7 四标样快速测定法 (3)2.8 双向纸层析色谱法（Two–dimensional paper chromatography） (4)3 根据医学免疫检测方法 (4)3.1 时间分辨荧光免疫分析法（TR–FIA） (4)3.2 酶联免疫吸附法（ELISA） (4)3.3 放射免疫测定法 (5)4 各检测方法系统归纳和分析 (5)附：各国际组织采用的检测方法及标准 (6)参考文献 (7)大豆异黄酮（Soybean isoflavones，ISO）是一种从大豆中分离提取活性成分，具有异黄酮类化合物典型结构，包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定在全球范围内，豆制品是一种非常重要的食品之一。
不仅因为它们是一种丰富的蛋白质来源，还因为它们富含一种被称为异黄酮的天然化合物。
异黄酮是一类具有植物雌激素活性的化合物，许多研究表明它们具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生理活性。
提取和测定豆制品中的异黄酮成分对于研究其健康功效以及产品质量控制具有重要意义。
提取豆制品中的异黄酮成分是一个关键步骤。
首先，我们需要选择一种合适的溶剂来提取。
乙醇、乙醚和丙酮等有机溶剂都适用于异黄酮的提取。
在选择溶剂的同时，还需要考虑提取时间和温度等因素。
一般来说，较长的提取时间和较高的提取温度可以增加异黄酮的提取率，但也可能会导致一些热敏感的化合物的降解。
因此，需要在选择提取条件时进行优化。
提取后，我们需要对提取液进行浓缩和净化。
常见的浓缩方法包括旋转蒸发和真空浓缩等。
净化的方法主要包括液液萃取、固相萃取和高效液相色谱等。
液液萃取是一种简单有效的方法，它基于不同化合物在不同相中的分配差异。
固相萃取则利用固相萃取柱具有特异性吸附特性的原理，可以方便地分离目标化合物。
高效液相色谱是一种非常常用的分析方法，可以将样品中的异黄酮分离并测定其含量。
在测定豆制品中的异黄酮含量时，可以使用不同的分析技术。
常用的分析方法包括紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和质谱等。
紫外-可见吸收光谱是一种简单方便的分析方法，适用于异黄酮的定性和定量分析。
荧光光谱则具有更高的灵敏度和选择性，可以用于低浓度异黄酮的检测。
质谱是一种非常灵敏和准确的分析方法，可以通过测定分子的质量和碎片的质量谱图来确定异黄酮的结构和含量。
除了选择合适的分析方法，还需要建立准确可靠的分析方法。
分析方法的准确性和可靠性依赖于样品的预处理、标准曲线的建立和质控样品的应用等。
因此，在进行异黄酮含量测定前，需要对分析流程进行验证，并建立相应的质量控制措施。
总之，提取和测定豆制品中的异黄酮成分是一项重要的研究工作。
通过选择合适的提取方法和分析技术，可以准确地测定豆制品中异黄酮的含量，并深入研究其健康功效。
紫外分光光度法中是如何测定大豆异黄酮含量的
紫外分光光度法中是如何测定大豆异黄酮含量的介绍大豆异黄酮是一种植物雌激素，在很多植物中都有存在，特别是在大豆中含量较高。
大豆异黄酮被认为具有多种保健作用，能够预防癌症、心血管疾病等多种疾病，受到了越来越多人的关注。
测定大豆异黄酮含量的方法有多种，其中一种常用的方法是紫外分光光度法。
紫外分光光度法紫外分光光度法是一种常用的光谱分析方法，利用样品吸收光的强度与样品的组成、浓度等相关，通过测量样品在不同波长下的吸光度来分析样品中目标物质的含量。
在测定大豆异黄酮含量时，紫外分光光度法可利用大豆异黄酮的UV吸收特性进行测定。
实验步骤以下是用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量的具体步骤：1. 样品制备•取约5克大豆粉末，加入40 mL纯水中。
•安钠溶液：取0.1 g NaOH 溶于100 mL无水乙醇中，摇匀。
•取100 μL大豆提取物于2 mL离心管中，加入0.2 mL安钠溶液，混匀。
•在37度水浴箱中恒温振荡1.5h，离心3000 r/min，去除上清液备用。
2. 质量调制将1 mg/mL的大豆异黄酮标准溶液以0、1、2、4、6、8、10μg/mL的浓度分别稀释成系列标准曲线溶液。
3. 测定吸收光谱•将样品和标准曲线溶液分别在波长范围为200-400 nm之间扫描吸收光谱。
•记录吸光度值并绘制吸收光谱图。
4. 计算异黄酮含量•峰高法计算：对样品吸收光谱中的异黄酮峰高进行读值，计算大豆提取物或样品中的异黄酮质量浓度。
结论紫外分光光度法是一种简单、快速、准确的测定大豆异黄酮含量的方法。
该方法使用安钠溶液去除干扰物质，提高了测定的准确性。
通过建立标准曲线和测定样品的吸光度，可以方便快捷地计算出大豆异黄酮的含量。
该方法不仅适用于大豆异黄酮的测定，也可以用于测定其他物质的含量，具有广泛的应用前景。
大豆异黄酮检测方法研究概述
Ａ ｂｓ ｒ ｔ：Ｓｏ ｔ ａｃ ｙｂｅａ ｓ ｌ ｏｅｓ ｃｏｎｔ ｎ ａ ｖａ ｉ ｔ ｎ ｉ ｏｆ ａｖ ａｉ ｒ ｅ ｙ ｏｆ ｄｅｔ ｃｔｏｎ ｅ ｉ ｍ ｅ ｈ ｔ ｏｄｓ， ｓ ｕｃｈ ｓ ａ ｕｌｒ ｖｉ ｅｔ ｔ ａ ｏｌ
ｓ ｃ ｒ ｐｈ ｏ ｅ ｒ ｐｅ ｔ ｏ ｏｔ ｍ ｔｙ，ｔ ｅ —ｗａ ｅ ｔ ｔ ａ ｏ ｅ ｐｅ ｔ ｏ ｈｒ ｅ ｖｅ ｌ ｎｇ ｈ ｕｌｒ ｖｉ ｌ ｔｓ ｃ ｒ ｐｈｏ ｏ ｅ ｒ ｔ ｍ ｔｙ，ｈｉ ｈ ｐｅ ｆ ｒ ａ ｃ ｉ ｕｉ ｇ ｒ ｏ ｍ ｎ ｅ ｌｑ ｄ ｃ ｏ ａ ｏｇ—ｒ ｐｈｙ，ｈｉ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｅ ｌｑｕｉ ｈｒ ｍ ａ ｏ ａ ｈｙ—ｍａｓ ｐｅ ｔ ｏ ｅ ｅ ｈｒ ｍ ｔ ａ ｇ ｐｅ ｆ ｒ ｎｃ ｉ ｄ ｃ ｏ ｔ ｇｒ ｐ ｓ ｓ ｃ ｒ ｍ ｔ ｒ，ｇａ ｈｒ ｍ ａ — ｓｃ ｏ ｔ
中图分 类号 ： Ｓ ０ ． Ｔ ２ ２３
文献标 识码 ： Ａ
文章编 号 ： ０ ８ ９ ７ ２ １ ） ３ ０ ３ — ０ １ ０ — ５ ８（ ０ ０ — ０ ９ ４ １
轴 ， 种 皮 异 黄 酮 含 量 极 少 。 子 叶 约 含 ０１ 而 ．％－ ０ ％ ． ３ 大 豆 异 黄 酮 ， 绝 对 含 量 却 占 ８ ％￣ ９ ％ ； 轴 所 含 但 ０ ０ 胚 异 黄 酮 种 类 较 多 ， 度 较 高 ， 含 １ ％￣２ ％， 浓 约 ０ ０ 由于 其 本 身 比 重较 小 ， 对 含 量 不 高 。 因 大 豆 异 黄 酮 含量 绝 较 少 ， 确 检 测 大 豆 异 黄 酮 含 量 对 异 黄 酮 研 究 和 应 用 精 显得尤为重要 。
关于大豆异黄酮的研究综述
２００８年第９期科技论坛关于大豆异黄酮的研究综述詹吉昌（九三油脂集团哈尔滨康食品有限公司，黑龙江哈尔滨１５００６０）１大豆异黄酮的结构和含量分布大豆异黄酮［１］（ｓｏｙｂｅａｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｓ，ＳｉＦ）是多酚类混合物，大豆异黄酮的组成、存在形式主要包括染料木素（金雀异黄素，ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、大豆黄素（ｄａｉｄｚｅｉｎ）和黄豆黄素（ｇｌｙ２ｃｉｔｅｌｎ）。
天然情况下它们大多以β－葡萄糖苷形式存在，近年来发现发生乙酰化、丙二酰化、琥珀酰化转变的异黄酮苷。
其中起到生理功效的主要是染料木素、大豆黄素及其苷。
通常，在天然状态下，大豆中只有少量异黄酮以游离苷元形式存在，９０％以上是以β－葡萄糖苷的形式存在。
现已确证了３种ＳＩＦ苷元和９种ＳＩＦ葡萄糖苷，共１２种ＳＩＦ。
其中部分ＳＩＦ葡萄糖Ｃ６位上的羟基还可被乙酰基或丙二酰基取代生成酰化ＳＩＦ。
成熟大豆中［２］总异黄酮的含量常因其品种、产地、生长环境和储存条件而各不相同，一般为０．２％～０．１４％。
其中，以大豆胚轴（包括胚芽和胚根）含量最高，其百分比含量约为子叶（大豆瓣）的６倍。
不同大豆品种中，黄皮大豆的总ＳＩＦ含量最高，黑皮大豆次之，绿皮大豆最低。
大豆中不同异黄酮成分的比例以染料木黄酮为主。
约占５０％～６０％，黄豆苷元为３０％～３５％而大豆黄素只占５％～１５％。
２大豆异黄酮的提取方法２．１超临界萃取技术。
超临界萃取技术是一种新兴的分离提取技术，它是利用临界或者超临界状态的流体及被萃取的物质在不同的蒸汽压力下具有不同的化学亲和力和溶解能力所进行的分离纯化操作。
异黄酮的超临界萃取以ＣＯ２为溶剂，它的提取率往往与萃取温度、压力、ＣＯ２消耗量、夹带剂的种类和使用量、原料的装填方式以及粒度大小等很多因素紧密相关。
它与传统的溶剂提取方法相比有一系列优点：提取分离步骤简单、异黄酮得率和含量较高、提取条件温和、不会使异黄酮的生物活性成分发生变化、提取周期短、没有有机溶剂残留、环境友好等。
(整理)保健食品中大豆异黄酮的检验方法
保健食品中大豆异黄酮的检验方法--------------高效液相色谱（HPLC）法中华人民共和国食品工业标准编制说明1．任务来源国家标准《保健食品中大豆异黄酮的检验方法》制修订是根据全国食品工业标准化委员会的要求，由朝阳区产品质量监督检验所负责，与红牛维他命饮料有限公司协作，进行制订工作（项目编号：20079432-T-469），根据项目内容确定了该项工作的具体方案和工作计划，按照项目要求开展工作。
2．意义大豆异黄酮是一类具有营养学价值和治疗意义的非固醇类物质，也是目前国际上公认的安全有效的天然植物雌激素。
目前发现的大豆中天然存在的大豆异黄酮共有12种,分为游离型的甙元和结合型的糖甙两类，游离型的甙元约占总量的2%－3%，包括染料木素(Genistein),大豆黄素(Daizein)和黄豆黄素(Glycitein), 结合型的糖甙约占总量的97%－98%。
已发现大豆异黄酮是一种优良的天然抗氧化剂，具有多种生物活性，如对肿瘤、心血管疾病、骨质疏松症和更年期综合症预防与治疗作用。
因此，当前国际上特别是美国和日本对大豆异黄酮开展了大量的应用研究工作，以大豆异黄酮为主要成分的保健食品已成为一种新型畅销食品。
据统计，国内外市场上含有大豆异黄酮的保健食品达数十种之多。
主要有片剂、胶囊、口服液、饮料等。
例如，威海清华紫光科技生产的金奥力大豆异黄酮胶囊，成都中科生物技术开发有限公司生产的天雌大豆异黄酮营养片( 胶囊)、红牛维他命饮料有限公司开发的大豆异黄酮保健饮料、广东九极日用保健品有限公司生产的九极牌丽延口服液等。
美国C1ifbar公司开发出添加了大豆异黄酮的运动饮料，美国加州Imagine食品公司开发含大豆异黄酮、蛋白质、碳水化合物、23种维生素和矿物质的能量饮料。
不同的产品，大豆异黄酮的含量也不同，目前保健品市场上片剂一般每片（500mg）约含大豆异黄酮几十毫克，胶囊每粒含大豆异黄酮几十毫克，口服液饮料每一百毫升含大豆异黄酮几十到上百毫克，大豆异黄酮粉末含大豆异黄酮为每克一百到几百毫克。
高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量的研究
高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量的研究随着人们对健康意识的增强和对营养保健品需求的增加，越来越多的人开始关注食品中的天然功能组分。
大豆异黄酮作为大豆中重要的天然功能型成分之一，受到了越来越广泛的关注。
为了探究大豆中异黄酮的含量，并且保证效率和准确性，研究人员采用了高效液相色谱法进行分析研究。
一、大豆异黄酮的作用及其检测方法大豆异黄酮是大豆中最主要的天然植物雌激素类物质，具有许多良好的生物功能特性。
诸如降血压、抗氧化、降低胆固醇等，可以消化清道夫、改善皮肤、防癌、防心脑血管疾病等，被广泛应用于医疗卫生和功能性食品等领域。
而要检测大豆异黄酮的含量，通常采用的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、液-物质组合色谱法等。
其中，高效液相色谱法因其精准、快速、稳定等优点，成为检测大豆异黄酮含量的主流分析方法。
二、高效液相色谱法的原理及操作步骤高效液相色谱法是使用液相作为固定相，以分离样品中单独的化学成分为目的的一种色谱技术。
其基本原理是从样品中分离出需要测定的化合物，并用高效液相色谱仪对其进行测定。
高效液相色谱仪操作步骤具体如下：1. 样品的粉碎。
先将干燥的样品粉碎成均一颗粒大小，并筛出合适的样品。
2. 提取样品。
选择较好的提取剂，加入到粉碎的样品中，经过摇晃、超声波或加热提取等方式获得提取液。
3. 进样管的插入。
将提取液及其稀释液分别移动到进样管中，以准确测量样品的含量。
4. 色谱柱的操作。
准备好色谱柱后，运用移液器将提取物注入色谱柱的样品口中。
5. 色谱谱图的测量及结果的分析。
测量完成后，需要对仪器测量数据进行分析处理，最后得到样品中大豆异黄酮的含量。
三、高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量的优势相比于其他的化学检测方法，高效液相色谱法有以下几个明显的优势：1. 测量结果准确性高。
高效液相色谱法的检测结果精准度高，极低的误差率使分析结果更加可信。
2. 速度快效率高。
在保障精确仪器性能的前提下，高效液相色谱法的测量速度快，使得在短时间内快速地获取样品数据更加便捷。
一种豆浆中大豆异黄酮的检测方法[发明专利]
![一种豆浆中大豆异黄酮的检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3a2c683533d4b14e84246889.png)
专利名称：一种豆浆中大豆异黄酮的检测方法专利类型：发明专利
发明人：林松
申请号：CN201610649299.2
申请日：20160809
公开号：CN106053373A
公开日：
20161026
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种豆浆中大豆异黄酮的检测方法，包括如下具体步骤：豆浆样品离心取上清液，经滤膜过滤后加入正己烷溶液中，于涡旋混合仪中震荡脱脂，吹干剩余的正己烷溶液；之后加入丙酮溶液，超声处理后加入高压釜中，高压提取后大孔树脂震荡吸附，收集洗脱液，加入旋转蒸发器中除去溶剂，得到大豆异黄酮提取物。
本发明通过将高压浸提与有机溶液萃取相结合的方法提取豆浆中的大豆异黄酮，在浸提前对提取液进行超声预处理，超声波的辐射压强可以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而加速目标分子进入溶剂，促进提取的进行，本发明能够快速提取大豆异黄酮样品，为豆浆中大豆异黄酮含量测定提供了一种行之有效的检测手段。
申请人：安徽青松食品有限公司
地址：230088 安徽省合肥市高新区宁西路28号
国籍：CN
代理机构：北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：胡剑辉
更多信息请下载全文后查看。
大豆异黄酮的测定方法及其评价(优选)word资料
大豆异黄酮的测定方法及其评价(优选)word资料第13卷第6期2007年12月上海大学学报(自然科学版JOURNA L OF SH ANG H AI UNI VERSITY (NAT URA L SCIE NCE收稿日期:2006209219通信作者:顾建明(1961~,男,副教授,博士,研究方向为食品资源开发与利用.E 2mail :jminggu @文章编号:100722861(20070620741205大豆异黄酮的测定方法及其评价顾建明,潘春云(上海大学生命科学学院,上海200444摘要:大豆异黄酮的测定可采用单波长法、三波长法和液相色谱法.单波长法(y =7.4317x -0.0556,R 2=0.9998和三波长法(y =32.432x +0.0488,R 2=0.9981用于总异黄酮测定,操作简便.高效液相色谱法(染料木甙,y =1828.6x -96.467,R 2=0.9964;大豆甙,y =1795.4x -420.67,R 2=0.9953用于单个异黄酮成分的测定,操作较复杂.精密度和准确度依次为:液相色谱法>三波长法>单波长法.关键词:大豆异黄酮;测定;紫外光谱法;高效液相色谱法中图分类号:T Q 041.7文献标识码:AAnalytical Approach of Soybean Isoflavones and Its EvaluationG U Jian 2ming ,PAN Chun 2yun(School of Life Sciences ,Shanghai University ,Shanghai 200444,ChinaAbstract :S oybean is oflav ones were determined with a single 2wave 2length method ,a three 2wave 2length methodand HP LC.Single 2wave 2length method (y =7.4317x -0.0556,R 2=0.9998and three 2wave 2lengthmethod (y =32.432x +0.0488,R 2=0.9981were used conveniently for total is oflav ones.HP LC(genistin ,y =1828.6x -96.467,R 2=0.9964;daidzin ,y =1795.4x -420.67,R2=0.9953was used for single is oflav one ,which was com plicated.Accuracy and precision of the three methods in a descending order is HP LC ,three 2wave 2length method ,and single 2wave 2length method.K ey w ords :s oybean is oflavone ;determine ;ultraviolet spectrometry ;HP LC在自然界中,大豆异黄酮资源十分有限,仅分布于豆科的蝶形花亚科的极少数植物中,如大豆、墨西哥小白豆、苜蓿和绿豆,大豆是唯一含有异黄酮且其含量具有人体保健功能意义的食物资源[1].大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的次级代谢产物,属黄酮类中的异黄酮多酚化合物,以糖甙的形式存在,易溶于水,生理活性最高的是其配基,现已发现3种配基(染料木素(genistein 、大豆甙元(daidzein 、黄豆黄素(glycitein 和9种配糖物[224].糖甙型大豆异黄酮的化学结构为(R 1=H ,OH R 2=H ,OCH 3R 3=H ,OCH 3,C OCH 2C OOH大豆异黄酮与大豆制品的苦涩味有关,因而长期以来被视为不良成分而被试图除去.近几年来国内外的研究已证实大豆异黄酮对人体的保健功能,其主要功能包括:(1类雌性激素活性,由于其结构与雌激素相似,能结合到细胞表面激素受体上,可起到类雌激素的效果,能缓解妇女更年期综合症[526];(2抗氧化活性[728];(3预防骨质疏松[728],其功能与补充类雌激素有关;(4抗癌活性[729];(5缓解糖尿病症状[8];(6预防心血管疾病的发生[9210].国内外市场对大豆异黄酮的需求量正不断增长,年需求量1500t,而目前年产量仅为500t[9,11212].据测定,大豆中大豆异黄酮的含量为0.05%~0.4%[13],约有44%的大豆异黄酮流失于豆浆凝固后经压滤流出的黄浆水中[14215],此外,豆粕和豆芽菜中也含丰富的大豆异黄酮[16].目前,虽然有三种大豆异黄酮测定方法[17218],但缺少同一条件下的相互比较,这给应用带来一定的盲目性.因此,评价大豆异黄酮测定方法,对大豆、大豆加工副产品、大豆异黄酮保健品的生产、黄浆水等中的大豆异黄酮的研究和开发利用(如快速在线测定、产品质量控制都具有十分重要的意义.本研究报告就用同一大豆异黄酮的样品,采取三种不同测定方法,在方便性、准确度和精确度进行比较,并对其应用性进行评价.1材料和方法1.1实验材料和仪器无水乙醇、95%乙醇均为分析纯;高效液相色谱用甲醇和冰醋酸;染料木素(genistein,purity≥99%, Sigma、大豆甙元(da idzein,purity≥99%、染料木甙(denistin,purity≥99%和大豆甙(daidzin,purity≥99%均购自同田生化技术;大豆异黄酮片(30片Π瓶市售.UV2754紫外可见光分光光度计,恒温干燥箱,真空干燥箱,旋转蒸发器,Y X J21型低速离心机, SC L26A型液相色谱分析仪,AB104电子分析天平(METT LER2T O LE DO G roup,Max101g,d=0.1mg. 1.2实验方法(1标准曲线的测定(2样品的测定取大豆异黄酮片6片,研碎后置于500m L锥形瓶中,加300m L80%乙醇浸提2h,过滤,滤渣再加300m L80%乙醇浸提2h,合并滤液得浸提液,用80%乙醇定容得1000m L母液,吸取1m L并用80%乙醇定容至100m L,同上测定A,根据回归方程计算样品中大豆异黄酮的含量.(3精密度和准确度测定准确吸取标准样品溶液0.15m L,置于10m L具塞试管中,80%乙醇定容,同上测定并计算样品中大豆异黄酮的含量,重复5次,计算相对标准偏差(RS D.从上述大豆异黄酮片1000m L母液中准确吸取1m L,用80%乙醇定容至10m L,再吸取1m L6份于10m L具塞试管中,分别准确加入标准样品溶液0.10、0.10、0.10、0.20、0.20、0.20m L,80%乙醇定容,同上测定并计算样品中大豆异黄酮的含量,按(测得大豆异黄酮量-原样品量Π加样量×100%计算回收率.(1标准曲线的测定准确称取大豆异黄酮标准样品染料木素0.02 g,乙醇溶解后,定容于100m L容量瓶中,然后分别准确吸取0.10、0.20、0.30、0.40、0.50m L标准溶液于10m L容量瓶中,80%乙醇定容后在199~400nm 紫外区扫描,读取240、260和280nm处吸光度值A1、A2、A3,按A=A260-(A240+A280Π2计算A,并对A和浓度的关系进行回归分析,绘制标准曲线.(2样品的测定(3精密度和准确度测定准确吸取标样溶液0.3m L,置于10m L具塞试管中,80%乙醇定容,测定同(1,根据回归方程计算样品中大豆异黄酮的含量,重复5次,计算RS D.(1染料木甙的测定(a染料木甙标准曲线的测定准确称取染料木甙0.01g,80%乙醇溶液溶解并定容得100m L标准溶液,分别准确移取1、2、3、4、5、6m L溶液于10m L容量瓶中,以80%乙醇溶液定容,在色谱柱Vp2ODS(Ф4.6mm×150mm,流动相V MeOH∶V H AC∶V H2O(40∶0.5∶60,流速1.5m LΠmin,柱温40℃,检测波长254nm条件下,分别进样10μL247上海大学学报(自然科学版第13卷进行测定,绘制染料木甙浓度与峰面积的标准曲线.(b 样品的测定取大豆异黄酮片6片,研碎后置于500m L 锥形瓶中,加120m L 80%乙醇浸提2h ,过滤,滤渣再加120m L 80%乙醇浸提2h ,合并滤液得浸提液,真空浓缩至干,该干物质用80%乙醇溶解,定容得1000m L 母液,吸取3m L 并用80%乙醇定容至10mL ,HP LC 测定含量,色谱操作条件同(1,进样10μL ,根据峰面积计算大豆异黄酮含量.(c 精密度和准确度测定准确吸取标准溶液2m L 于10m L 容量瓶中,以80%乙醇溶液定容,测定和计算同(a ,重复5次,计算RS D.从上述大豆异黄酮片1000m L母液中准确吸取1m L 6份于10m L 具塞试管中,用80%乙醇定容,再分别准确加入标准溶液1、1、1、2、2、2m L ,80%乙醇定容,同上测定并计算样品中大豆异黄酮的含量,按(测得大豆异黄酮量-原样品量Π加样量×100%计算回收率.(2大豆甙的测定(b 样品的测定2结果与讨论2.1单波长法测定大豆异黄酮经对实验数据进行相关分析,大豆异黄酮浓度和吸光度的回归方程为y =7.4317x -0.0556,R 2=0.9998,大豆异黄酮在260nm 下浓度与吸光度呈较好的线性关系(见图1.图1单波长法测定大豆异黄酮的标准曲线(260nmFig.1R elation betw een absorb ance and concentration(single 2w ave 2length method大豆异黄酮片提取液样品的测定结果A =0.3307,代入上述回归方程,得出该样液中大豆异黄酮含量为2.40mg ΠL ,则可得出每片含大豆异黄酮40.03mg.精密度和准确度的测定结果见表1和2.表1单波长法测定大豆异黄酮的精密度T ab.1Precision determining soybean isoflavones withsingle 2w ave 2length methodA浓度Π(mg ・L -13.283.233.323.413.45 2.724%表2单波长法测定大豆异黄酮的准确度(×10-2mgT ab.2Accuracy determining soybean isoflavones withsingle 2w ave 2length method(×10-2mg试验号123456原样品2.392.39 2.39 2.39 2.39 2.39标准样品 2.00 2.002.004.004.004.00A4.664.706.756.836.85回收率Π%平均回收率Π%111.332.2三波长法测定大豆异黄酮三波长法的大豆异黄酮浓度和吸光度的回归方程为y =32.432x +0.0488,R 2=0.9981,浓度与吸光度呈较好的线性关系(见图2.图2三波长法测定大豆异黄酮的标准曲线(240、260、280nmFig.2R elation betw een absorb ance and concentration(three 2w ave 2length method大豆异黄酮片提取液样品的测定结果A =0.0691,代入上述回归方程,得出该样液中大豆异黄酮含量为2.29mg ΠL ,则可得出每片含大豆异黄酮347第6期顾建明,等:大豆异黄酮的测定方法及其评价38.17mg.精密度和准确度的测定结果见表3和4.表3三波长法测定大豆异黄酮的精密度T ab.3Precision determining soybean isoflavones withthree 2w ave 2length methodA浓度Π(mg ・L -16.076.136.196.216.02 1.307%表4三波长法测定大豆异黄酮的准确度(×10-2mgT ab.4Accuracy determining soybean isoflavones with three 2w ave 2length method(×10-2mg试验号123456原样品2.312.31 2.31 2.31 2.31 2.31标准样品 2.002.002.004.004.004.00A4.424.406.446.506.45回收率Π%平均回收率Π%104.252.3高效液相色谱法测定大豆异黄酮2.3.1染料木甙的测定结果HP LC 法的大豆异黄酮浓度和峰面积的回归方程为y =1828.6x -96.467,R 2=0.9964,浓度与峰面积呈较好的线性关系(见图4.大豆异黄酮片提取液中染料木甙测得浓度为50.18mg ΠL ,则每片含染料木甙27.88mg.图3(a大豆异黄酮标准样品液相色谱图(染料木甙,2号峰,7.668min ;大豆甙,3号峰,18.762minFig.3(a Profile of HP LC of isoflavones stand ard solution(genistin ,peak 2,7.668min ;d aidzin ,peak 3,18.762min图3(b大豆异黄酮片样品的液相色谱图(染料木甙, 2号峰;大豆甙,3号峰Fig.3(b Profile of HP LC of isoflavones tablet extract (genistin ,peak 2;d aidzin ,peak3图4染料木甙的标准曲线Fig.4R elation betw een concentration andpeak area(genistin表5高效液相色谱法测定染料木甙的精密度T ab.5Precision determining genistin with HP LC 峰面积3649436476360733634835909RS D浓度Π(mg ・L -120.0120.0919.7819.93表6高效液相色谱法测定染料木甙的准确度(×10-2μg T ab.6Accuracy determining genistin withHP LC(×10-2μg试验号123456原样品16.7310.0020.0020.0020.00峰面积485694890348623669756668467032测得值26.6126.8026.64%99.7598.9599.90平均回收率Π%99.53447上海大学学报(自然科学版第13卷HP LC 法的大豆甙浓度和峰面积的回归方程为y =1795.4x -420.67,R 2=0.9953,浓度与峰面积呈较好的线性关系(见图5.图5大豆甙的标准曲线Fig.5R elation betw een concentration and peak area(d aidzin大豆异黄酮片提取液中大豆甙测得浓度为19.83mg ΠL ,则每片含大豆甙5.51mg.子为1.6[4].3结论在中试、大规模工业化生产和一般性大豆异黄酮测定等对前处理要求不高,较关注总异黄酮的含量,且样品多和要求快速测定场合应采用三波长法,并可根据回收率,对测定值进行校正.如有标准样品,较关注单个组分,且精确度和准确度要高的场合,如产品质量检验和科学研究可采用HP LC 法.参考文献:[1]孙君明,丁安林.地理环境对大豆种子中异黄酮含量积累的影响趋势[J ].大豆科学,1998,17(4:3052310.[2]顾晓华,杨爱华,宗志敏,等.大豆异黄酮[J ].精细与专用化学品,2001(6:11212.[3]NAI M M ,GESTET NER B ,KIRS ON I ,et al.A newis oflav one from s oyabeans [J ].Phytochemistry ,1973,22:1692170.[4]宋永生.影响大豆异黄酮含量与种类的因素[J ].粮油食品科技,2003,11(3:425.[5]彭明.国外大豆食品研究发展动态[J ].中国食物与营养,1998(2:31232.[6]H UT ABARATL S ,G REE NFIE LD H ,M U LH O LLAND M.Is oflav ones and coumestrol in s oybeans and s oybean products from australia and indonesia [J ].Journal of F ood C omposition and Analysis ,2001,14:43258.[7]AR JM ANDI B H.S oybean is oflav ones ’osteoprotective rolein postmenopausal w omen :mechanism of action [J ].Journal of Nutritional Biochemistry ,2002,13(3:1302137.[8] C LARK S ON T B.Estrogenic s oybean is oflav ones andchronic disease :risks and benefits [J ].TE M ,1995(6:11217.[9]HE NDRICH S.Bioavailability of is oflav ones [J ].Journal ofChromatography B ,2002,777:2032210.[10]ME NG Q H.Incorporation of esterfied s oybean is oflav oneswith antioxidant activity into low density lipoprotein [J ].Biochimica et Biophysica Acta ,1999,1438:3692376.[11]郭京晓,武虹,林春花,等.大豆异黄酮的研究开发与利用[J ].大豆通报,2000(3:22223.[12]CH OI Y S ,LEE B H ,J I M J H ,et al.C oncentration ofphytoestrogens in s oybeans and s oybean products in K orea [J ].J Agric F ood Chem ,2000,80:170921712.[13]史宣明,岳琳,吴丽荣.大豆异黄酮的提取与精制[J ].中国油脂,2001,26(2:325.[14]UMPHRESS S T ,M URPHY S P ,FRANKE A A ,et al.Is oflav one content of foods with s oy additives [J ].Journal of F ood C omposition and Analysis ,2005,18:5332550.[15]W ANG H.J ,M URPHY P A.Is oflav one content incommercial s oybean foods [J ].Agric F ood Chem ,1994, 42:166621673.[16]刘大川,汪海波.大豆胚芽中大豆皂甙、异黄酮甙的提取工艺研究[J ].食品科学,2000,21(10:28231.[17]董怀海,谷文英.三波长比色法测定大豆异黄酮的研究[J ].中国油脂,2002,27(4:75277.[18]李文亮,韩继福,崔洪斌.RP 2HP LC 法测定大豆提取物中金雀异黄素[J ].大豆科学,2002,21(2:1062108.(编辑:刘志强547第6期顾建明,等:大豆异黄酮的测定方法及其评价大气中甲醛的测定方法【D-JQ】甲醛(HCHO又名蚁醛)为无色液体，分子量30.03，有刺激性气味。
高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量的研究
讨论
大豆异黄酮是一种具有多种生物活性的物质，对人体健 康有潜在益处。本研究为进一步探究大豆异黄酮的生物 活性提供了实验基础，同时也为评估大豆的营养价值提 供了科学依据。然而，本研究仅关注了大豆基因型对异 黄酮含量的影响，未来研究还可以探究环境因素、种植 条件等对大豆异黄酮含量的影响。
05
结论与展望
03
研究大豆异黄酮含量的测定方 法对于了解其生物活性、评价 大豆产品质量具有重要意义。
研究目的与任务
研究目的
建立高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量 的方法，并对其进行分析和验证。
VS
研究任务
筛选合适的色谱条件，优化样品处理方法 ，建立标准曲线，验证方法的准确性和可 靠性。
研究方法与技术路线
研究方法
张三, 李四, 王五. 大豆异黄酮的高效液相色谱法测定研究 [J]. 中国食品学报, 2022, 22(3): 12-20.
李四, 张三, 王五. 应用高效液相色谱法测定大豆异黄酮含 量的研究[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 108-116.
相关研究报告
中国科学院. 大豆异黄酮高效液相色谱法测定技术研究报告 [R]. 北京: 中国科学院, 2020.
实验结果与分析
要点一
实验结果
分别得到了非转基因大豆和转基因大豆中异黄酮含量的 测定结果。
要点二
结果分析
通过对比分析，发现非转基因大豆中异黄酮含量高于转 基因大豆，且不同品种的大豆中异黄酮含量也存在差异 。
实验结论与讨论
实验结论
本研究成功运用高效液相色谱法测定了非转基因大豆和 转基因大豆中异黄酮的含量，验证了该方法的可行性和 有效性。
研究不足与展望
尽管本研究建立了高效液相色谱法测定大豆异黄酮含量的方法 ，但在实际应用中仍存在一些限制，如样品处理过程较为繁琐 ，检测成本较高，不利于大规模应用。
食品中大豆异黄酮的测定与分析
食品中大豆异黄酮的测定与分析随着人们对健康意识的提高，越来越多的人开始注重饮食中的营养成分。
其中，大豆作为常见的植物蛋白源之一，其含有丰富的大豆异黄酮成分，备受关注。
大豆异黄酮是一类与雌激素相似的化合物，据研究表明，它具有多种生理功能，包括预防心血管疾病、乳腺癌、骨质疏松等。
因此，测定和分析食品中的大豆异黄酮含量对于了解其健康保健效果和合理补充具有重要的意义。
一、大豆异黄酮的测定方法一种常用的测定大豆异黄酮含量的方法是高效液相色谱法（HPLC）。
该方法的原理是根据大豆异黄酮在一定条件下的保留时间和色谱图峰面积进行定量分析。
首先，将食品样品进行处理和提取，然后使用高效液相色谱仪进行分离和检测，最后根据外标法计算出大豆异黄酮的含量。
二、食品中大豆异黄酮的分布情况大豆异黄酮主要集中在大豆及大豆制品中，如豆浆、豆腐、豆腐干等。
据研究表明，不同的大豆制品中大豆异黄酮的含量差异较大。
例如，豆浆中的大豆异黄酮含量相对较高，而豆腐中的含量较低。
另外，不同的加工工艺也会影响大豆异黄酮的含量。
研究发现，炒制大豆可以显著降低大豆异黄酮的含量，而蒸煮对其影响较小。
三、大豆异黄酮的稳定性及影响因素大豆异黄酮在食品中的稳定性受到多种因素的影响。
首先，光照、氧气和高温都会导致大豆异黄酮的降解和丢失。
因此，在储存和使用过程中要尽量避免暴露在直接阳光下，并保持食品的低温、低湿环境。
其次，酸碱环境和金属离子也会影响大豆异黄酮的稳定性。
酸性环境会加速大豆异黄酮的分解，而适度的碱性条件则有助于其稳定存在。
此外，金属离子，尤其是铁离子、铜离子等，也会催化大豆异黄酮的降解反应。
四、大豆异黄酮的健康效果大豆异黄酮具有多种生理效果，如抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等。
其中，抗氧化是大豆异黄酮最为重要的功效之一。
大豆异黄酮作为一种自由基清除剂，可以帮助减少人体内的自由基含量，从而保护细胞免受氧化损伤。
此外，研究还发现大豆异黄酮对心血管疾病和骨质疏松有一定的保护作用，可以降低患病的风险。
大豆异黄酮的提取纯化研究综述
大豆异黄酮的提取纯化研究综述34第2期(总第54期)重庆中草药研究二oo六年十二月大豆异黄酮的提取纯化研究综述高太平罗维早(重庆市中药研究院重庆400065)摘要:简要介绍了大豆异黄酮的物理化学性质和大豆异黄酮的提取和纯化研究进展.天然大豆异黄酮多以苷的形式存在,提取方法一般采用乙醇提取法和酸水解法.由于提取液中含有各种杂质,通常采用柱色谱法,溶剂萃取法,沉淀法,超滤法等技术进行纯化.关键词:大豆异黄酮提取纯化大豆异黄酮是存在于大豆等豆科植物中的黄酮类化合物.它是一类重要的生物活性物质.早在1940年,研究者就注意到澳大利亚某些牧场中的绵羊生殖能力很强,通过研究发现这是因为牧场中含有一种特殊的三叶草植物,其富含的芒柄花索可在绵羊的胃中酵解为一种大豆异黄酮一黄豆苷元.从那个时候起,研究者就开始逐渐去关注异黄酮对于健康的作用,最后掀起了研究异黄酮的热潮.近来研究发现,大豆异黄酮具有抗癌,防治动脉硬化,防治骨质疏松,抗氧化和抗真菌活性等多种药理作用].从大豆异黄酮中分离得到的染料木黄酮,其结构与l7—9雌二醇的结构相似,能与内源性雌激素受体结合,发挥雌激素效应,同时又没有药物雌二醇的副作用,被人们称为植物雌激素.1大豆异黄酮的化学组成【2J大豆异黄酮是一种混合物,其结构主要有三种:葡萄糖苷配基(aglucone),葡萄糖苷(glucone )和结合葡萄糖苷(conjugatedglucone),葡萄糖苷配基以游离的形式存在于大豆中,主要有染料木黄酮(genistein),黄豆苷元(daidzein)和大豆黄索(glycintein),这三种异黄酮在大豆籽粒中含量甚少,约占异黄酮含量的2—3%.大豆籽粒中有9r7 -98%的异黄酮是以葡萄糖苷和结合葡萄糖苷(conjugatedglucone)的形式存在.2大豆异黄酮的性质天然植物中存在的异黄酮以游离型苷元和结合型糖苷两种形式存在,大部分以结合成苷的形式存在.大豆异黄酮在通常情况下为固体,熔点大都在100oc以上,常温下性质稳定,呈黄白色,粉末状,无毒,有轻微苦涩味,在醇类,酯类和酮类溶剂中有一定溶解度,不溶于冷水,易溶于热水,难溶于石油醚,正己烷等.大豆异黄酮在水中的溶解度在40—50℃没有明显变化,在70—90℃时其溶解度随着温度的升高而显着增加.大豆异黄酮中的结合葡萄糖苷(conjugatedglucone)在加热和碱性条件下可以水解去掉丙二酰基和乙酰基而转化成葡萄糖苷.碱水解条件pH值为8一l3,水解程度随pH值及温度的升高而加大.而大豆异黄酮葡萄糖苷在强酸高温或酶存在的条件下可水解去掉葡萄糖基而转变成葡萄糖苷配基形式.3大豆异黄酮的提取在自然界中大豆异黄酮的资源十分有限,作为一种具有广阔开发前景的药用植物活性成分,如何高效率地提取大豆异黄酮,确定最佳的提取纯化方法显得尤为重要.近年来国内外学者对大豆异黄酮的提取及分离纯化工艺进行了大量的研究,现将其主要研究进展做一简述,为进一步研究开发提供资料J.3.1乙醇提取法:-'Oo六年十二月重庆中草药研究第2期(总第54期)35 豆粕中蛋白质含量很高,用醇提取异黄酮时,一方面要求异黄酮的提取率要高;另一方面要求蛋白质的提取量低.因为蛋白质的存在不利于提取液的浓缩和异黄酮的分离操作,因此需要对醇提工艺条件进行优选.江英等H对乙醇提取工艺进行了单因素考察.大豆粕粉碎后过40目筛,先用乙醚回流脱脂至乙醚液无色,分别采用不同乙醇浓度,物料比,提取温度和提取时间进行提取.以紫外分光光度法测定异黄酮含量.以60%乙醇提取,物料比18:1,温度60℃,提取时间2h为最佳.朱仕房等用正交实验筛选了大豆异黄酮的提取方法,以染料木黄酮,黄豆苷元和大豆黄素混合对照为指标,用HPLC法进行测定.结果发现最佳条件为:80%的乙醇,不小于18:1的物料比(溶剂:原料),时间1h,温度不超过50℃;如以染料木黄酮作为目的产物,则温度宜升高至70℃.鞠兴荣等通过单因素实验和正交试验对大豆异黄酮提取工艺中提取溶剂,料液比,温度,时间等因素进行了探讨,以大豆异黄酮提取回收率及干扰物质量为指标,确立最佳提取条件.试验结果表明:采用70%的乙醇溶液为提取剂,固液比1:5,在50℃温度下浸提二次,每次lh总转移率可达95%以上,且干扰物质量较低.袁龙等用正交实验进行了提取条件筛选,结果70%的乙醇,50℃下对豆粕重复提取3次,每次1.0h,异黄酮的提取率达到最高,而蛋白质的提取量最低.并认为,要得到纯度较高,与天然大豆成分一致的异黄酮产品,在提取液中必须用HE1等强酸进行异黄酮与糖和蛋白质的分解和分离.胡卫新等同样采用正交实验进行了提取条件的研究,以70% 的乙醇,固液比(豆粕:溶剂)l:10,70℃提取豆粕3次,每次1.5h,可使总大豆异黄酮的提取率最高,而蛋白质的提取率较低.且提出采用盐析和等电点沉淀工艺分离除去提取液中的大豆蛋白质,pH值在4.1±0.1下,加入3.0(m/v)的ZnC1,大豆蛋白质的分离除去率最高. 3.2酸水解提取法:大豆异黄酮绝大部分是以苷的形式存在的,药理研究表明苷元形式的异黄酮比糖苷形式的异黄酮具有更高的生物活性.大豆异黄酮苷能被稀酸催化水解成为苷元.用醋酸,硫酸等均可发生水解.但从实际生产和经济实用角度考虑,一般选用盐酸.汪海波等以脱脂大豆粕为原料,采用酸水解后用无水乙醚萃取的方法提取游离型异黄酮成分.实验结果表明,酸水解异黄酮的提取率和产品纯度均高于醇浸提法;张炳文等u通过正交实验确立了糖苷型大豆异黄酮转化为游离型大豆异黄酮的最佳酸水解工艺条件:盐酸甲醇溶液的浓度为2mol/L,水解温度为80℃, 水解时间为60rain,水解前后大豆素的含量由0.22%增加至14.01%,染料木素的含量由0. 02%增加至23.45%.3.3其他:酶法提取大豆异黄酮反应条件温和,提取率高,提取物不易变性.一般最适酶解反应温度为40~C,最适pH值为5.0,目前酶法在一定范围内得到了应用;超声波提取法利用超声波空化,粉碎,搅拌等特殊作用,对植物药材的细胞进行破坏,使其有效成分快速溶于溶媒之中, 以利于提取.谢明杰等u利用超声提取大豆异黄酮,并与加热回流的提取方法进行了比较. 结果表明超声提取超声频率为25kHz,超声功率为160W,60℃超声处理60min时,大豆异黄酮的得率和含量与醇提法相比分别提高了3.93%和7.87%,说明超声波提取法也不失为一种提取异黄酮的新的有效方法;另外,国外一些学者还将超临界流体萃取,微波技术等方法应用到大豆异黄酮的提取.4大豆异黄酮的纯化大豆异黄酮粗提液中含有蛋白质,糖类,油脂等多种杂质.为了得到高纯度的异黄酮和异黄酮相关单体化合物,有必要对其粗提物进一步分离纯化.目前大豆异黄酮的纯化方法主要36第2期(总第54期)重庆中草药研究二oo六年十二月有柱色谱法,溶剂萃取法,沉淀法,超滤法等.4.1柱色谱法:目前广泛应用的主要有聚酰胺吸附法和大孔树脂吸附法引.袁建等对两种方法进行了对比,结果采用聚酰胺作为吸附剂时可以将大豆异黄酮与低聚糖等干扰物质分开,2O一50%乙醇洗脱液中大豆异黄酮回收率可达87.O%,存在的问题是吸附柱很易过载,洗脱速度较慢,聚酰胺易霉变等.采用大孔树脂吸附技术也可以有效地将大豆异黄酮与干扰物质进行分离.20—50%的乙醇洗脱液中回收率可达94.5%.比较二种吸附剂的性能,认为采用大孔树脂作为吸附剂效果较好.潘廖明等l1比较了9种不同型号的弱极性大孔吸附树脂对大豆异黄酮的吸附性能.研究表明LSA一8型树脂具有较好的选择性和解吸能力,该树脂在35cI=时,对大豆异黄酮有较好的吸附效果,其动态最大吸附量为204.6mg/g千树脂,采用70%乙醇解吸5h,大豆异黄酮的含量达到57.O%.4.2溶剂萃取法:运用溶剂法既可以为粗提取液脱酯,也可以萃取异黄酮.低极性溶剂石油醚可以用来脱酯,而乙酸乙酯等中等极性溶剂可以提取异黄酮.袁建等u试验了乙酸乙酯,乙醚,正丁醇,氯仿,苯等有机试剂对大豆异黄酮的提取效果,吸取一定量的大豆异黄酮提取浓缩液,加水适当稀释,加入等体积的有机溶剂后振摇2min,静置分层,分别取有机相和水相进行分析,测定其中大豆异黄酮的含量,计算萃取效率.结果发现以氯仿,苯,乙醚作为萃取剂时萃取效率较低;正丁醇三次萃取效率可达92.5%,但正丁醇沸点较高,萃取液不易浓缩,且萃取液中杂质较多;而乙酸乙酯三次萃取效率可达85.4%,萃取液易处理,所以认为用溶剂法时宜采用乙酸乙酯作为萃取剂.4.3沉淀法:大豆异黄酮的粗提液中含有大量蛋白质,其对浓缩,分离操作影响极大.浓缩时大量的蛋白质易起泡溢出;进行柱分离精制时,蛋白质的絮凝引起上柱速度慢,并容易引起柱吸附性能降低和柱阻塞现象,因此必须对提取液进行脱蛋白质处理.采用沉淀的方法可以除去蛋白质而达到精制目的.乙醇沉淀法去除蛋白的效率较低,进一步分离精制时,往往还需进行脱醇处理过程,增加了操作步骤和生产成本;等电点沉淀法去蛋白质能力中等,因此在生产过程中,采用等电点沉淀法较为可行.其他沉淀方法还有盐析沉淀法,有机溶液沉淀法,重金属沉淀法等.4.4超滤法:超滤法往往作为辅助手段与其他方法一起运用,以达到精制目的.如等电点沉淀法结合超滤法脱蛋白,可提高超滤速度及大豆异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7.2%,蛋白质截留率达91. 1%.超滤膜与大孔树脂吸附法相结合ll'】,采用: 浸提液一超滤膜一吸附——解吸——干燥的工艺,用超滤膜去除部分杂质,减轻了吸附树脂的负担,较适合工业大生产.4.5其他方法:随着分离技术的不断发展,一些新技术新方法也在大豆异黄酮的分离纯化中得到了运用.如高速逆流色谱法,膜分离技术,固相萃取,超临界流体萃取等.5讨论目前大豆异黄酮的提取方法主要是乙醇提取法和酸水解提取法.乙醇提取法相对简便,成本较低,对设备要求不高,因此被广泛采用,但其提取率不高,后处理和精制较为烦琐.酸水解提取法较传统的醇提法提取率有了很大的提高,酸水解一般时间较长,产物是否稳定,或是否已发生变化,需要进一步的研究.超声提取,超临界流体萃取等新技术的出现,为大豆异黄酮的提取提供了新的方法,目前这些方法多停留在实验室阶段,很难得到大生产的推广.因此,如何更为有效的从大豆中提取异黄酮,找到一种高效,简便,适用的方法尤为重要.(下转第45页)二oo六年十二月重庆中草药研究第2期(总第54期)45 学,1979:(9):431[28]梁侨丽等.垂盆草的化学成分研究.中草药,2001:32(4):503[29]何爱民等.垂盆草中的甾醇化合物.中国药科大学,1997:28(5):271[30]何爱民等.垂盆草中的黄酮类成分.中草药,1997:28(9):517[31]杨金龙等.阿昔洛韦与垂盆草治疗乙型肝炎的比较.新药与临床,1994:13(3):175[32]凌一揆等.中药学.第1版.上海:上海科技出版社,1984:55～6[33]戴岳等.垂盆草对免疫系统的影响.中药药理与临床,1995:(5):30[34]林以宁等.垂盆草制剂中水溶性成分的药理活性研究.中药药理与临床,2000:16(6):19[35]张邦祝.垂盆草水溶性成分的免疫活性研究.中药新药与临床药理,2001:12(6):430[36]王鹏等.中药水芹降血脂的实验研究.河北中医, 1994:17(1):38[37]张红英等.水芹甲醇提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.中国中药杂志,1995:120 (1):44[38]陈红艳等.水芹酸碱提取物对小鼠Call肝损伤的保护作用.解放军药学.2001:22[39]黄正明等.水芹水提物在鸭原代肝细胞培养中对DHBV抑制作用的初步研究.中国药学杂志, 1997:32(11):720[4|D]杨旭等.香菇多糖对慢性乙肝患者T细胞亚群和IL一2受体表达的影响.临床内科杂志,1994:11 (4):47[41]郝淑兰.香菇多糖注射液治疗慢性乙型肝炎近期疗效观寨.临床内科杂志,1994:11(4):48[42]李荷花等.猪苓多糖联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎疗效观察.河北中西医结合杂志,1997,6 (1):89[43]梁侨丽等.云芝多糖对慢性乙肝的疗效观察.辽宁药物与临床,1999:2(3):19(上接第36页)参考文献:[1]刘苹苹等.大豆异黄酮的研究进展[J].辽宁化工, 2004,33(1):27[2]井乐刚等.大豆异黄酮的物理化学性质[J].中国农学通报,2006,22(1):85[3]曲丽萍等.大豆异黄酮提取与纯化方法研究进展[J].药学实践杂志,2006,24(2):69-72[4]江英等.大豆异黄酮提取条件的研究[J].食品研究与开发,2004,25(3):67[5]朱仕房等.大豆异黄酮提取条件的研究[J].食品科学,2001,22(3):54[6]鞠兴荣等.大豆异黄酮提取工艺的优化注[J].中国粮油,2001,16(6):17[7]袁龙等.大豆中异黄酮提取条件及其在提取液中的存在形式[J].徐州师范大学(自然科学版),2004,22(3):55[8]胡卫新等.大豆异黄酮提取条件和大豆蛋白质分离工艺研究[J],大豆科学,2005,24(1):26[9]汪海波等.酸水解法提取人豆异黄酮甙元工艺研究[J].食品科学,2003,24(4):98[10]张炳文等.大豆异黄酮水解工艺的研究探讨[J]. 中同粮油,2003,18(3):44[11]谢明杰等.超声波提取大豆异黄酮[J].大豆科学, 2004,23(1):75[12]郭文勇等.大孔树脂吸附层析法提取淡豆豉中总异黄酮的研究[J].第二军医大学,2004,25(9):1033[13]罗少洪等.大豆总异黄酮的提取及含量测定[J]. 广东药学,2005,15(4):7[14]冯建光等.大孔吸附树脂对大豆异黄酮的吸附与洗脱性能[J].无锡轻工大学,2003,22(1):82[15]袁建等.大豆异黄酮分离与精制工艺研究[J].食品科学,2002,23(8):118[16]潘廖明等.大孔树脂吸附大豆异黄酮特性的研究[J].食品与发酵工业,2003,29(5):15[17]史宣明等.大豆异黄酮的提取及精制[J].中国油脂,2001,26(2):3。
大豆异黄酮的检测方法
大豆异黄酮的检测方法（高效液相色谱外标法）{OMn=
2.1异黄酮的流动相的配制?^OP
2.1.1量取36ml冰乙酸+64ml水，配制成38%的乙酸水溶液。
3t>
2.1.2吸取36%冰乙酸5ml+95ml水，将其稀释成1.8%的乙酸水溶液，抽滤。
EzEB*
2.1.3量取70ml1.8%乙酸水溶液+30ml色谱纯甲醇，脱气10-15min备用。
o-<03S
2.2样品的制备fIFE(
2.2.1用分析天平准确称取0.1g异黄酮产品，用50%的乙醇溶液定容100ml。
xyM
2.2.2用1ml移液管吸取1ml，在定容10ml，过滤，即为被测样品。
/*D`ay
2.3进色谱测样@l8q5!
2.3.1打开柱温箱，设置温度为50度，再调节流速为1ml/min，待柱温升至50度，在开启泵，平衡色谱仪1小时左右，待压力稳定后即可注样。
另外紫外检测器波长调为254nm。
8^+
2.3.2样品的注样：用10μl注射器吸5μl（不许有气泡）注入色谱进样口，等待出峰，建立标准方法（如何建立，参考中北工作站数据处理）。
=
2.3.3样品的测定：建立完标准方法后，注被测样品5μl，等待出峰。
W+8DZ
2.4数据处理,
根据标样的峰面积与浓度的关系，换算出样品各成分的浓度。
\w/;
异黄酮纯度=∑V*1000/1000000*M fPq
∑V—表示异黄酮各成分的浓度总和（μg/ml）47jkn
M—表示样品质量（g）y)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
NANCHANG UNIVERSITY功能食品学综述论文学院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班级:学号:学生姓名:廖杰指导教师:王远兴起讫日期:2014年 3月至 2014年 4月大豆异黄酮的测定方法摘要本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍关键词:大豆异黄酮;测定方法Abstract:In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introducedKeywords:soy isoflavones method目录摘要 ........................................................................................................................................... .. (I)Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)1.2三波长法(three–wave length UVspectrophotometry (1)2根据色谱原理检测方法 ................................................................................................................. 2 2.1高效液相色谱法(HPLC ................................................................................................. 2 2.2高效液相色谱―质谱法(HPLC–MS .............................................................................. 2 2.3气相色谱法(GC ............................................................................................................. 2 2.4气相色谱―质谱法(GC–MS .. (3)2.5毛细管电泳法(CE .........................................................................................................3 2.6薄层扫描色谱法(TLCS .................................................................................................. 3 2.7四标样快速测定法 . (3)2.8双向纸层析色谱法(Two–dimensional paperchromatography (4)3根据医学免疫检测方法 ................................................................................................................. 4 3.1时间分辨荧光免疫分析法(TR–FIA .............................................................................. 4 3.2酶联免疫吸附法(ELISA . (4)3.3放射免疫测定法 (5)4各检测方法系统归纳和分析 ......................................................................................................... 5附:各国际组织采用的检测方法及标准 ........................................................................................ 6参考文献 ........................................................................................................................................... .. 7大豆异黄酮 (Soybean isoflavones , ISO 是一种从大豆中分离提取活性成分, 具有异黄酮类化合物典型结构, 包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。
根据大豆异黄酮分子结构, 可用特征显色及荧光反应对其定性定量检测。
目前主要检测方法有:利用紫外吸收特征,可采用紫外分光光度法(UV 、三波长法等进行大豆异黄酮定量检测; 利用色谱原理检测大豆异黄酮方法为:高效液相色谱法(HPLC 、高效液相色谱―质谱法(HPLC – MS 、气相色谱法(GC 、气相色谱―质谱法(GC – MS 、毛细管电泳法(CE 、四标样快速测定法、薄层扫描色谱法(TLCS 、双向纸层析色谱法等。
此外,医学上荧光免疫法:分辨荧光免疫分析法(TR – FIA 和酶联免疫吸附法(ELISA 等也是检测大豆异黄酮重要方法。
至今我国尚未制定统–标准规范 ISO 检测方法, 现对大豆异黄酮测定多采用 HPLC 法或气相色谱―质谱(GC – MS 联用法,且毛细管电泳法 (CE 将逐渐成为替代 HPLC 方法, 广泛应用于大豆异黄酮主要组分(大豆苷元和染料木素等测定。
本文根据检测大豆异黄酮原理不同, 暂归纳为三大类进行阐释,并对各种检测大豆异黄酮方法进行系统比较分析 1根据紫外吸收特性检测方法1.1紫外分光光度法(UV大豆异黄酮结构中羟基和芳香环形成共轭体系具有较强紫外光吸收特性, 大豆异黄酮各组分最大吸收波长相差不大, 峰数目较少。
如染料木素在紫外区有很强吸收带, 最大吸收波长为 260nm ; 大豆苷元最大吸收波长为 256nm , 在 310 nm 处有–个很小肩峰,这使紫外吸收作为评价指标成为可能。
王哲等〔 1〕用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量, 以大豆苷元作标准品绘制标准曲线, 建立回归方程,相关系数 R2=0.9941、方法回收率 100.4%、变异系数 0.25%,证明此法可靠性好、回收率高、重现性高。
1.2三波长法(three – wave length UV spectrophotometry三波长法于 1980年–经提出, 便很快在岛津 UV – 250分光光度计上被采用, 形成–种新方法。
该法原理为:根据大豆异黄酮在 240nm 、 260nm 、 280nm 三个波长处吸光值,分别计算△ A ,计算方法为:△ A=A260-(A240+A280 /2。
根据三角形相似原理推得△ A 与待测物浓度成正比, 进而求得待测物质浓度。
鞠兴荣等〔 2〕采用三波长紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量,有效消除随浓度不同发生本底漂移、油脂等干扰物质、及吸收峰不对称给定量分析造成不良影响。
此法简便、灵敏,最低检出浓度为1μg/mL,加样回收率>99%;证明该法具有良好准确性和精密度,适于大批量样品测定和产品生产质量控制及监测。
2根据色谱原理检测方法2.1高效液相色谱法(HPLC高效液相色谱法是在经典色谱法基础上, 于上世纪 60年代后期引用气相色谱理论所建立检测方法, 可广泛应用于大豆异黄酮检测。
在技术上, 色谱柱是以特殊方法用小粒径且均匀填料填充而成, 小颗粒具有高柱效, 从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万 ,但会对仪器产生高阻力,为此,流动相改为高压输送(最高输送压力可达 4.9×107Pa ;同时,柱后联有高灵敏度检测器, 可对流出物进行连续检测。
与 HPLC 配备的检测大豆异黄酮仪器主要是紫外分光光度仪(UV 和质谱分析仪(MS 。
建立高效液相色谱法 (HPLC 测定保健食品中大豆异黄酮含量方法。
运用二极管阵列检测器(PDA 建立 4种大豆异黄酮组分:染料木素、大豆苷元、黄豆黄素和黄豆苷光谱库, 采用 PDA 检测, C18反相柱, 以甲醇∶水∶醋酸 (HAC =55∶ 45∶1(V/V/V为流动相,测定 4种大豆异黄酮组分响应值之比。
该法变异系数小于 5%,回收率在 92.5%~99.3%之间,检测速度快,精密度及准确度在允许范围内,可作为测定保健食品中大豆异黄酮方法。
超声波辅助提取(UAE 可提高有机化合物提取有效率,徐颖〔 3〕采用高效液相色谱法结合具有提取时间短和工艺简化等优点超声提取法测定异黄酮含量。
吴周和等〔 4〕建立反相高效液相色谱法测定豆制品中大豆苷元和染料木素方法,采用Hypersil BDS C18(250mm ×4.6mm ID , 5μm 色谱柱,以甲醇、 0.5%乙酸水溶液为流动相, 流速为 1ml/min, 柱温为 35℃, 检测波长为 260nm ; 样品制备经真空干燥、正己烷脱脂、 80%甲醇加热提取、离心、过滤等过程, 大豆苷元和染料木素加样回收率分别为 99.1%和 98.8%, RSD 分别为 1.3%和 0.5%。