大豆异黄酮的测定方法综述(精)
高效液相色谱法测定大豆异黄酮片中的大豆异黄酮的含量-最新年精选文档
高效液相色谱法测定大豆异黄酮片中的大豆异黄酮的含量大豆异黄酮是一类从大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能的主要活性成分，具有防止骨质疏松、降低胆固醇、免疫调节、改善妇女更年期综合症等药理作用。
随着人们保健意识的加强，大豆异黄酮将成为医药、保健品、食品等方面多功能产品。
目前，大豆异黄酮的重要生理功能和广泛应用前景已受普遍关注。
一、材料和方法1.材料黄豆苷（Daidzin，D）、染料木苷（Genistin，G）、黄豆苷原（Daidzein，De）、金雀异黄素（Genistein，Ge）标准品：上海同田生物技术XX公司，甲醇（HPLC）：默克公司，醋酸铵、冰醋酸均为分析纯，大豆异黄酮片（样品，批号：S001、S002、S003），水为重蒸馏水。
2.仪器戴安高效液相色谱仪：P680泵、UV170u紫外检测器，超声波清洗器。
3.色谱条件3.1 色谱柱：不锈钢柱，内径4.6mm，长250mmC18柱，填料粒径10μm。
3.2 流动相：甲醇+0.05mol/L乙酸铵，pH4.6（46+54，V/V）。
3.3 流量：1.2ml/min。
3.4 进样量：20.0μL。
4.样品制备取20片大豆异黄酮片，用研钵研碎，准确称取1.0g试样，加50ml的80%甲醇溶液超声提取30min，上清液抽滤，残渣再用80%甲醇溶液洗，洗液一并抽滤，定容至100.0mL，过0.45μm滤膜，待测。
5.混合标准曲线的制备5.1混合标准储备液称取黄豆苷、染料木苷、黄豆苷原、金雀异黄素对照品用甲醇溶解并定容至10mL。
5.2混合标准曲线溶液分别取混合标准储备液0.01、0.05、0.10、0.30、0.50、1.25mL，用甲醇定容至10mL。
计算各自的浓度。
二、结果和数据1.混合工作曲线分别吸取一系列浓度范围的对照品混和溶液，进样量20μ L，按1.3项色谱条件注入液相色谱仪，测定峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
大豆异黄酮检测
结果计算
样品中大豆异黄酮各组分[大豆苷（X1）、大豆黄苷（X2）、染料木 苷（X3）、大豆素（X4）、大豆黄素（X5）和染料木素（X6）]的含 量分别按下式计算：
式中： Xi——样品中大豆异黄酮单一组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）或毫克 每升（mg/L）； Ci——根据标准曲线得出的大豆苷（或大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素 和染料木素）的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V——样品稀释液总体积的数值，单位为毫升（mL）； m——固体、半固体杨南平质量的数值，单位为克（g）； 液体样品体积的数值，单位为毫升（mL）。
测定方法
色相色谱法：进样量少，敏感性、选择性及特异性 较高，但需制备衍生物，操作复杂，耗时长，仪器 昂贵。 毛细管电泳法：快速经济，选择性高，样品前处理 简单分离效率高。 免疫检验法：以酶联免疫法为基础，测定中根据标 记物和干扰物荧光寿命的差异，选择性的测定标记 物的荧光信号。
以下介绍检测保健食品中大豆异黄 酮的测定方法 GB 23788-2009-T 高效液 相色谱法
大豆异黄酮混合标准使用溶液
将大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆 黄素和染料木素六种标准贮备溶液按1:1:1:1:1:1 的比例配成标准混合溶液，待用。 分别吸取0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL标准 混合溶液于10mL容量瓶中，加入等体积水，用 50%二甲基亚砜溶液定容，配成浓度分别为 0.0mg/L， 8.0mg/L ，16.0mg/L，24.0mg/L， 32.0mg/L，40.0mg/L的混合标准系列溶液。
样品处理
固体样品、半固体样品：固体样品粉碎、磨细（过80 目筛）、混匀，半固体样品混匀，称取样品0.05g~0.5g （精确至0.1mg），用80%甲醇溶液溶解并转移至50mL 容量瓶中，加入80%甲醇溶液至接近刻度。 液体样品：吸取混匀的液体样品0.5~5.0mL于50mL 容量瓶中，加入甲醇溶液至接近刻度。 将上述样品溶液用超声波振荡器振荡20min，用80% 甲醇定容，摇匀。取样品溶液置于离心管中，离心机离心 15min（转速大于8000r/min）。取上清液用滤膜过滤，收 集滤液备用。
大豆含量测定方法
大豆提取物中大豆异黄酮含量测定方法
一、色谱条件
1．色谱柱：ODS-3 15cm × 4.6mm 5μm
2．流动相：A 甲醇：水：磷酸（ 30：70：0.2，V/V ）
B 甲醇：水：磷酸 ( 45:55:0.2,V/V )
3．流速： 1.0ml/min
4．柱温：25℃
5．检测波长：254nm
6．灵敏度：0.01AUFS
7．进样量：10μl
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备 ：
精密称取干燥至恒重的大豆甙、大豆甙元、染料木甙、染料木素、黄豆黄素和黄豆黄甙对照品各1mg 于50ml 容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备 ：
精密称取提取物约80mg 于50ml 容量瓶中，加入30ml 甲醇，超声20min 溶解后，放置至室温，甲醇定容，用0.45μm 微孔膜过滤即得样品溶液。
西安绿泉生物技术有限公司 XI ’AN GREEN SPRING NATURAL PRODUCT CO., LTD.
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后，进样测定，大豆甙的保留时间约为8min ，大豆甙元为24min ，染料木甙为15min.染料木素为32min.黄豆黄素25min,黄豆黄甙未9min,用外标法计算含量。
四、计 算：
A i W 0
含量（%）= ——— × ——— × S ×100%
A 0 W i
A i ：样品溶液中甙峰面积 A 0：对照品溶液中甙峰面积
W 0：对照品的称样量（mg ） W i ：样品的称样量（mg ）。
关于大豆异黄酮的研究综述
吸循环的不利影响,注意持续气腹压不宜太高及监测血气变化。
②气腹形式应缓慢,使老年患者对CO 2气腹有一适应过程。
③腹壁穿刺时应防止皮下气肿,术毕挤压腹部排尽腹腔内C O 2气体,可有效地预防高碳酸血症。
④术毕应保持呼吸道通畅,继续监测呼吸循环功能,防止肺部感染。
⑤LC 应由配合熟练、经验丰富的医师进行,尽可能缩短手术和麻醉时间。
214 术后护理21411 一般护理:LC 通常采用全麻,术后应严密监测血压、心率、呼吸、血氧饱和率等变化。
术毕回房后按全麻术后观察护理,3小时内注意不让病人入睡,以防止“麻醉后作用”导致病人窒息等严重并发症。
输液总量及速度宜控制,避免因输液量过多,速度过快而导致病人出现急性心肺功能不全。
21412 合并心血管疾病患者的护理;术后2～3d 应行心电监护,检查血压并通过干预保持血压稳定,高血压患者恢复服降压药,如病情不允许口服,则可静滴硝酸甘油等控制血压,如为起搏心律,则应观察起搏信号后有无QRS 波伴随及漏波现象,出现心律失常及血压变化及时通报医生处理。
21413 合并呼吸系疾病患者的护理:呼吸系疾病大多有病史长,反复发作的特点,多数病人常认为是老毛病而未加重视,术后应鼓励病人积极排痰,作有效咳嗽,协助病人翻身、拍背,保持呼吸道通畅,必要时给予祛痰药物、雾化吸入等促进排痰,严密观察呼吸频率血氧饱和度,口唇、肢端紫绀情况,视缺氧情况合理给氧,一般给予低流量吸氧,严重者应监测血气,如氧分压低于60kPa,CO 2分压高于50kpa,结合呼吸、血氧饱和度、紫绀等,则应考虑呼吸衰竭,及时报告医生,及时处理。
总之,尽管合并心肺功能疾患的病人行LC 难度较大,但只要做好术前处理,术中及术后监测,具备熟练的LC 技术,LC 不失为老年人胆石症病人的优秀手术方式,是一种损伤小,安全可靠,恢复快的微创手术,我们认为老年胆囊切除更适合于LC 。
参考文献[1] 费庆铨.老年胆道疾病的外科治疗[J ].中华外科杂志,1989127:150～152.[2] 孙石.肝胆胰外科杂志,1999,11(1):6.收稿日期:2005-09-12文献综述关于大豆异黄酮的研究综述蒋蔡滨(贵阳中医学院2003级研究生,贵州贵阳 550002) 内容提要:本文综述了大豆异黄酮的组成结构、吸收和代谢、物理和化学性质、含量测定方法、药理作用,分析了目前大豆异黄酮的市场状况,以及我国大豆异黄酮的研究前景。
大豆异黄酮的测定方法
大豆异黄酮的测定方法本方法适用于大豆制品中大豆异黄酮的测定。
本方法大豆异黄酮染料木素的最低检出限为10ng；大豆苷元的最低检出限为30ng。
1、方法提要大豆异黄酮（soybean isoflavones，简称ISO）是一类以大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能的主要活性成分。
目前发现的大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型的糖苷两类共有12种，染料木素（Genistein，G）和大豆苷元（Daidzeiu，D）是其中两种重要化合物。
本法用80%乙醇作为溶剂，提取样品中的染料木素、大豆苷元，以反相高效液相色谱分离，在紫外检测器260nm条件下检测其峰面积，以染料木素和大豆苷元两项含量之和计算大豆异黄酮含量。
2、仪器（1）LC高效液相色谱仪，C—RIB色谱处理机。
（2）检测器：SPD—2AS紫外检测器。
（3）离心机。
（4）超声波振荡器。
3、试剂（1）甲醇（色谱纯）。
（2）乙醇（优级纯）。
（3）双重蒸馏水。
（4）大豆异黄酮标准品：染料木素与大豆苷元标准品（美国Sigma公司产品），以染料木素和大豆苷元两项之和作为大豆异黄酮含量计算。
（5）大豆异黄酮标准溶液：准确称取染料木素标准品 5.0mg，大豆苷元标准品3.2mg，各自用流动相“甲醇＋水（60＋40）”定容至100mL，配制成50μg/mL的染料木素和32μg/mL的大豆苷元标准溶液。
4、测定步骤（1）样品处理：a、固体样品：准确称取一定量固体粉末样品于100mL容量瓶中，定量加入80%乙醇，经超声振荡5min，加水补足至刻度，待提取液略澄清后经离心分离（3000r/min，5min），取上清液经0.45μm滤膜过滤后待进样。
b、液体样品：准确吸取2.0mL液体样品，加入80%乙醇摇匀并定容100mL，澄清后同上述步骤。
（2）色谱分离条件：色谱柱：Shim—Pack CLC—ODS，6mm×150mm，5μm。
流动相：甲醇＋水（60＋40），临用前用超声波除气。
大豆异黄酮的测定方法综述
NANCHANG UNIVERSITY功能食品学综述论文学院：生命科学与食品工程学院专业：食品科学与工程班级：食品科学与工程113班学号：**********学生姓名：**指导教师：***起讫日期：2014年3月至2014年4月大豆异黄酮的测定方法摘要本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍关键词：大豆异黄酮；测定方法Abstract:In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introducedKeywords: soy isoflavones method目录摘要 (I)Abstract: (I)目录 .................................................................................................................................................. I I 1 根据紫外吸收特性检测方法. (1)1.1 紫外分光光度法（UV） (1)1.2 三波长法（three–wave length UV spectrophotometry） (1)2 根据色谱原理检测方法 (2)2.1 高效液相色谱法（HPLC） (2)2.2 高效液相色谱―质谱法（HPLC–MS） (2)2.3 气相色谱法（GC） (2)2.4 气相色谱―质谱法（GC–MS） (3)2.5 毛细管电泳法（CE） (3)2.6 薄层扫描色谱法（TLCS） (3)2.7 四标样快速测定法 (3)2.8 双向纸层析色谱法（Two–dimensional paper chromatography） (4)3 根据医学免疫检测方法 (4)3.1 时间分辨荧光免疫分析法（TR–FIA） (4)3.2 酶联免疫吸附法（ELISA） (4)3.3 放射免疫测定法 (5)4 各检测方法系统归纳和分析 (5)附：各国际组织采用的检测方法及标准 (6)参考文献 (7)大豆异黄酮（Soybean isoflavones，ISO）是一种从大豆中分离提取活性成分，具有异黄酮类化合物典型结构，包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定在全球范围内，豆制品是一种非常重要的食品之一。
不仅因为它们是一种丰富的蛋白质来源，还因为它们富含一种被称为异黄酮的天然化合物。
异黄酮是一类具有植物雌激素活性的化合物，许多研究表明它们具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生理活性。
提取和测定豆制品中的异黄酮成分对于研究其健康功效以及产品质量控制具有重要意义。
提取豆制品中的异黄酮成分是一个关键步骤。
首先，我们需要选择一种合适的溶剂来提取。
乙醇、乙醚和丙酮等有机溶剂都适用于异黄酮的提取。
在选择溶剂的同时，还需要考虑提取时间和温度等因素。
一般来说，较长的提取时间和较高的提取温度可以增加异黄酮的提取率，但也可能会导致一些热敏感的化合物的降解。
因此，需要在选择提取条件时进行优化。
提取后，我们需要对提取液进行浓缩和净化。
常见的浓缩方法包括旋转蒸发和真空浓缩等。
净化的方法主要包括液液萃取、固相萃取和高效液相色谱等。
液液萃取是一种简单有效的方法，它基于不同化合物在不同相中的分配差异。
固相萃取则利用固相萃取柱具有特异性吸附特性的原理，可以方便地分离目标化合物。
高效液相色谱是一种非常常用的分析方法，可以将样品中的异黄酮分离并测定其含量。
在测定豆制品中的异黄酮含量时，可以使用不同的分析技术。
常用的分析方法包括紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和质谱等。
紫外-可见吸收光谱是一种简单方便的分析方法，适用于异黄酮的定性和定量分析。
荧光光谱则具有更高的灵敏度和选择性，可以用于低浓度异黄酮的检测。
质谱是一种非常灵敏和准确的分析方法，可以通过测定分子的质量和碎片的质量谱图来确定异黄酮的结构和含量。
除了选择合适的分析方法，还需要建立准确可靠的分析方法。
分析方法的准确性和可靠性依赖于样品的预处理、标准曲线的建立和质控样品的应用等。
因此，在进行异黄酮含量测定前，需要对分析流程进行验证，并建立相应的质量控制措施。
总之，提取和测定豆制品中的异黄酮成分是一项重要的研究工作。
通过选择合适的提取方法和分析技术，可以准确地测定豆制品中异黄酮的含量，并深入研究其健康功效。
紫外分光光度法中是如何测定大豆异黄酮含量的
紫外分光光度法中是如何测定大豆异黄酮含量的介绍大豆异黄酮是一种植物雌激素，在很多植物中都有存在，特别是在大豆中含量较高。
大豆异黄酮被认为具有多种保健作用，能够预防癌症、心血管疾病等多种疾病，受到了越来越多人的关注。
测定大豆异黄酮含量的方法有多种，其中一种常用的方法是紫外分光光度法。
紫外分光光度法紫外分光光度法是一种常用的光谱分析方法，利用样品吸收光的强度与样品的组成、浓度等相关，通过测量样品在不同波长下的吸光度来分析样品中目标物质的含量。
在测定大豆异黄酮含量时，紫外分光光度法可利用大豆异黄酮的UV吸收特性进行测定。
实验步骤以下是用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量的具体步骤：1. 样品制备•取约5克大豆粉末，加入40 mL纯水中。
•安钠溶液：取0.1 g NaOH 溶于100 mL无水乙醇中，摇匀。
•取100 μL大豆提取物于2 mL离心管中，加入0.2 mL安钠溶液，混匀。
•在37度水浴箱中恒温振荡1.5h，离心3000 r/min，去除上清液备用。
2. 质量调制将1 mg/mL的大豆异黄酮标准溶液以0、1、2、4、6、8、10μg/mL的浓度分别稀释成系列标准曲线溶液。
3. 测定吸收光谱•将样品和标准曲线溶液分别在波长范围为200-400 nm之间扫描吸收光谱。
•记录吸光度值并绘制吸收光谱图。
4. 计算异黄酮含量•峰高法计算：对样品吸收光谱中的异黄酮峰高进行读值，计算大豆提取物或样品中的异黄酮质量浓度。
结论紫外分光光度法是一种简单、快速、准确的测定大豆异黄酮含量的方法。
该方法使用安钠溶液去除干扰物质，提高了测定的准确性。
通过建立标准曲线和测定样品的吸光度，可以方便快捷地计算出大豆异黄酮的含量。
该方法不仅适用于大豆异黄酮的测定，也可以用于测定其他物质的含量，具有广泛的应用前景。
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NANCHANG UNIVERSITY功能食品学综述论文学院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班级:学号:学生姓名:廖杰指导教师:王远兴起讫日期:2014年 3月至 2014年 4月大豆异黄酮的测定方法摘要本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍关键词:大豆异黄酮;测定方法Abstract:In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introducedKeywords:soy isoflavones method目录摘要 ........................................................................................................................................... .. (I)Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)1.2三波长法(three–wave length UVspectrophotometry (1)2根据色谱原理检测方法 ................................................................................................................. 2 2.1高效液相色谱法(HPLC ................................................................................................. 2 2.2高效液相色谱―质谱法(HPLC–MS .............................................................................. 2 2.3气相色谱法(GC ............................................................................................................. 2 2.4气相色谱―质谱法(GC–MS .. (3)2.5毛细管电泳法(CE .........................................................................................................3 2.6薄层扫描色谱法(TLCS .................................................................................................. 3 2.7四标样快速测定法 . (3)2.8双向纸层析色谱法(Two–dimensional paperchromatography (4)3根据医学免疫检测方法 ................................................................................................................. 4 3.1时间分辨荧光免疫分析法(TR–FIA .............................................................................. 4 3.2酶联免疫吸附法(ELISA . (4)3.3放射免疫测定法 (5)4各检测方法系统归纳和分析 ......................................................................................................... 5附:各国际组织采用的检测方法及标准 ........................................................................................ 6参考文献 ........................................................................................................................................... .. 7大豆异黄酮 (Soybean isoflavones , ISO 是一种从大豆中分离提取活性成分, 具有异黄酮类化合物典型结构, 包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。
根据大豆异黄酮分子结构, 可用特征显色及荧光反应对其定性定量检测。
目前主要检测方法有:利用紫外吸收特征,可采用紫外分光光度法(UV 、三波长法等进行大豆异黄酮定量检测; 利用色谱原理检测大豆异黄酮方法为:高效液相色谱法(HPLC 、高效液相色谱―质谱法(HPLC – MS 、气相色谱法(GC 、气相色谱―质谱法(GC – MS 、毛细管电泳法(CE 、四标样快速测定法、薄层扫描色谱法(TLCS 、双向纸层析色谱法等。
此外,医学上荧光免疫法:分辨荧光免疫分析法(TR – FIA 和酶联免疫吸附法(ELISA 等也是检测大豆异黄酮重要方法。
至今我国尚未制定统–标准规范 ISO 检测方法, 现对大豆异黄酮测定多采用 HPLC 法或气相色谱―质谱(GC – MS 联用法,且毛细管电泳法 (CE 将逐渐成为替代 HPLC 方法, 广泛应用于大豆异黄酮主要组分(大豆苷元和染料木素等测定。
本文根据检测大豆异黄酮原理不同, 暂归纳为三大类进行阐释,并对各种检测大豆异黄酮方法进行系统比较分析 1根据紫外吸收特性检测方法1.1紫外分光光度法(UV大豆异黄酮结构中羟基和芳香环形成共轭体系具有较强紫外光吸收特性, 大豆异黄酮各组分最大吸收波长相差不大, 峰数目较少。
如染料木素在紫外区有很强吸收带, 最大吸收波长为 260nm ; 大豆苷元最大吸收波长为 256nm , 在 310 nm 处有–个很小肩峰,这使紫外吸收作为评价指标成为可能。
王哲等〔 1〕用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量, 以大豆苷元作标准品绘制标准曲线, 建立回归方程,相关系数 R2=0.9941、方法回收率 100.4%、变异系数 0.25%,证明此法可靠性好、回收率高、重现性高。
1.2三波长法(three – wave length UV spectrophotometry三波长法于 1980年–经提出, 便很快在岛津 UV – 250分光光度计上被采用, 形成–种新方法。
该法原理为:根据大豆异黄酮在 240nm 、 260nm 、 280nm 三个波长处吸光值,分别计算△ A ,计算方法为:△ A=A260-(A240+A280 /2。
根据三角形相似原理推得△ A 与待测物浓度成正比, 进而求得待测物质浓度。
鞠兴荣等〔 2〕采用三波长紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量,有效消除随浓度不同发生本底漂移、油脂等干扰物质、及吸收峰不对称给定量分析造成不良影响。
此法简便、灵敏,最低检出浓度为1μg/mL,加样回收率>99%;证明该法具有良好准确性和精密度,适于大批量样品测定和产品生产质量控制及监测。
2根据色谱原理检测方法2.1高效液相色谱法(HPLC高效液相色谱法是在经典色谱法基础上, 于上世纪 60年代后期引用气相色谱理论所建立检测方法, 可广泛应用于大豆异黄酮检测。
在技术上, 色谱柱是以特殊方法用小粒径且均匀填料填充而成, 小颗粒具有高柱效, 从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万 ,但会对仪器产生高阻力,为此,流动相改为高压输送(最高输送压力可达 4.9×107Pa ;同时,柱后联有高灵敏度检测器, 可对流出物进行连续检测。
与 HPLC 配备的检测大豆异黄酮仪器主要是紫外分光光度仪(UV 和质谱分析仪(MS 。
建立高效液相色谱法 (HPLC 测定保健食品中大豆异黄酮含量方法。
运用二极管阵列检测器(PDA 建立 4种大豆异黄酮组分:染料木素、大豆苷元、黄豆黄素和黄豆苷光谱库, 采用 PDA 检测, C18反相柱, 以甲醇∶水∶醋酸 (HAC =55∶ 45∶1(V/V/V为流动相,测定 4种大豆异黄酮组分响应值之比。
该法变异系数小于 5%,回收率在 92.5%~99.3%之间,检测速度快,精密度及准确度在允许范围内,可作为测定保健食品中大豆异黄酮方法。
超声波辅助提取(UAE 可提高有机化合物提取有效率,徐颖〔 3〕采用高效液相色谱法结合具有提取时间短和工艺简化等优点超声提取法测定异黄酮含量。
吴周和等〔 4〕建立反相高效液相色谱法测定豆制品中大豆苷元和染料木素方法,采用Hypersil BDS C18(250mm ×4.6mm ID , 5μm 色谱柱,以甲醇、 0.5%乙酸水溶液为流动相, 流速为 1ml/min, 柱温为 35℃, 检测波长为 260nm ; 样品制备经真空干燥、正己烷脱脂、 80%甲醇加热提取、离心、过滤等过程, 大豆苷元和染料木素加样回收率分别为 99.1%和 98.8%, RSD 分别为 1.3%和 0.5%。