甲硝唑滴眼剂的制备及含量测定

甲硝唑滴眼剂的制备及含量测定

发表时间：2013-07-16T11:03:56.387Z 来源：《世界临床医学》2013年第2期供稿作者：李祯徐今宁任峻青王爱萍[导读] 甲硝唑是硝咪唑类药物，可通过血—眼屏障，穿透角膜，用于治疗厌氧菌引起的系统或局部感染。李祯徐今宁任峻青王爱萍（河北北方学院附属第一医院张家口075000）摘要：目的：甲硝唑滴眼剂的制备；制定甲硝唑含量测定方法。方法：采用双波长紫外分光光度法，以△A=A276-A234 为定量信息测定甲硝唑含量。结果：甲硝唑含量测定在4～24μg/ml 浓度范围内，线性关系良好，r＝0.9999，平均回收率99.78%，RSD=0.52%。关键词：甲硝唑；制备；含量测定；双波长紫外分光光度法 1 实验方法 1.1 甲硝唑滴眼剂的制备称取羟苯乙酯，溶于适量的热蒸馏水中，加入甲硝唑和葡萄糖，搅拌溶解，加蒸馏水至全量，搅匀，过滤， 100℃流通蒸汽灭菌30min, 无菌分装于5ml 的滴眼瓶中。

1.2 含量测定 1.

2.1 供试品溶液配制精密称取105℃干燥至恒重的甲硝唑对照品0.5g，置100ml 量瓶中，加适量蒸馏水溶解并至刻度，摇匀；精密吸取该液，分别用0.1mol/L盐酸溶液、0.1mol/L 氢氧化钠溶液和蒸馏水稀释成含甲硝唑10μg/ml。另精密称取羟苯乙酯0.03g，置100ml 量瓶中，加蒸馏水加热溶解，冷却摇匀并稀释至刻度，分别用0.1mol/L 盐酸溶液、0.1mol/L 氢氧化钠溶液和蒸馏水定量稀释500 倍。另取5

％的葡萄糖注射液，分别用0.1mol/L 盐酸溶液、0.1mol/L氢氧化钠溶液和蒸馏水定量稀释500 倍。

1.2.2 紫外吸收光谱扫描及测定波长的选择以0.1mol/L盐酸溶液为溶剂供试液，以0.1mol/L盐酸溶液做空白，扫描结果为：甲硝唑在277nm 处有最大吸收；羟苯乙酯在255 nm 处有最大吸收，并在277 nm 处对甲硝唑的吸收测定有干扰,羟苯乙酯在 276 nm 与234 nm 处为等波长吸收点；以0.1mol/L 氢氧化钠溶液为溶剂供试液，以0.1mol/L氢氧化钠溶液做空白，扫描结果为：甲硝唑在 320 nm处有最大吸收；羟苯乙酯在294 nm处有最大吸收，并在320 nm 处对甲硝唑的吸收测定有干扰；以蒸馏水为溶剂三种供试液以蒸馏水做空白，扫描结果为：甲硝唑在319 nm 处有最大吸收；羟苯乙酯在 255 nm 处有最大吸收，但葡萄糖注射液在319nm 处对甲硝唑的吸收有干扰；故选择0.1mol/L 盐酸溶液为溶剂定量稀释样品，选定276 nm 为测定波长，234 nm 为参比波长，以△A=A276-A234 为定量信息测定甲硝唑含量，且在该测定波长条件下葡萄糖对其测定无干扰。

1.2.3 标准曲线的制备精密称取105℃干燥至恒重的甲硝唑对照品0.2g 和羟苯乙酯0.05g，置100ml 量瓶中，加蒸馏水溶解、摇匀至刻度。取该标准溶液，用0.1mol/L 盐酸溶液分别精确稀释成含甲硝唑 4、8、12、16、20μg/ml 的标准溶液，以0.1mol/L 盐酸溶液为空白，分别在276nm 和234nm 处测定其吸收值，计算吸收值差△ A=A276-A234，以浓度为横坐标，△A为纵坐标进行线性回归，得回归方程△A ＝0.02071C－0.002733，r=0.9999, n=5。结果表明：在4～ 24μg/ml 浓度范围内，浓度与吸收值差呈良好的线性关系。

1.2.4 回收试验照处方精密称取105℃干燥至恒重的甲硝唑对照品、葡萄糖和羟苯乙酯，配制甲硝唑滴眼剂4 批。分别用0.1mol/L 盐酸溶液稀释500 倍（约含甲硝唑10μg/ml），以0.1mol/L盐酸溶液为空白，分别在276nm 和234nm 处测定吸收值，计算△A=A276-A234 代入回归方程，求出甲硝唑的回收率。平均回收率为99.78％，RSD ＝0.52％，n=5。

1.2.5 稳定性试验用0.1mol/L盐酸溶液稀释500 倍，分别在0、1、 2、4、8 小时，以0.1mol/L 盐酸溶液为空白，分别在276nm 和234nm 处测定其吸收值，计算△A=A277-A234 ，其RSD为0.63％，表明该方法稳定。

1.2.6 样品测定取甲硝唑滴眼剂4 批，用0.1mol/L盐酸溶液稀释 500 倍，分别测定276nm 和234nm 的紫外吸收值，计算△ A=A276-A234，代入回归方程，计算甲硝唑含___________量。结果见表3

2 讨论 2.1 甲硝唑是硝咪唑类药物，可通过血—眼屏障，穿透角膜，用于治疗厌氧菌引起的系统或局部感染[1]。

2.2 该制剂中葡萄糖的含量测定依据《中国药典》[2]，采用比旋度测定，处方中其它主辅料均对其无干扰。

2.3 《中国药典》对甲硝唑的含量测定方法为采用直接测定紫外吸收值，用吸收系数计算[3]。甲硝唑的紫外吸收光谱，随溶剂的改变而其最大吸收波长位移较大[4]。该制剂中羟苯乙酯对甲硝唑紫外吸收有干扰。采用双波长紫外分光光度法测定甲硝唑含量，可消除羟苯乙酯干扰。

参考文献

[1] 陈新谦.新编药物学[M].第15 版.北京：人民卫生出版社，2003：110

[2] 《中国药典》二部[S]. 2010 ：927

[3] 《中国药典》二部[S]. 2010 ：153

[4] 钱亚萍. 紫外分光光度法测定甲硝唑漱口液含量[J].中国药师， 2001， 15（4）：251-252