(精选)动物实验技术操作训练

第四次实验 动物实验的基本操作训练
Basic Operation in Animal Experiment
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[实验目的]
1.学习捉拿家兔的正确方法和固定。 2.掌握常用手术器械的正确使用方法。 3.学习动物实验的基本操作技术，包括麻 醉、切口与止血、气管插管术、神经分离术、 颈动脉插管术、输尿管插管术、膀胱插管术。
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(5) 麻醉意外
①麻醉过量 实验动物会出现两种情况，一是呼吸、心搏 骤停或间断等情况：二是动物全身皮肤色表紫，呼吸运动浅 而慢。要密切观察动物生命体征的变化，做好实施各项抢救 工作的准备。
②麻醉过浅 动物可能出现挣扎、尖叫等表现，需要及时 地追加麻醉药物，但一次追加不宜超过总量1／3，并密切观 察动物是否已达到麻醉的基本状态。
②动作轻柔，以免引起损伤性尿闭。 ③注意膀胱插管不要插入过深。
2.药品： 25%氨基甲酸乙酯溶液(乌拉坦)
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[实验方法]
一、家兔的捉拿与称重
1.家兔的捉拿
右手抓住家兔颈背部皮肤， 轻轻将家兔提起，迅速以左 手托住其臀部，使家兔体重 主要落左掌心上，以免损伤 动物颈部。
图1 正确捉拿家兔
注意点：
家兔一般不咬人，但脚
爪锐利，在挣扎易抓伤捕捉
者，所以捕捉时要特别注意
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六、腹部手术 1.膀胱插管术(视频)
(1)膀胱插管操作要点：
①在耻骨联合上方备皮，做一3~5cm的切口，沿腹白线 打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿 管。
②结扎尿道口。
③膀胱底部剪一小口，插入导管，与切口处的膀胱壁结 扎固定。
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(2)注意事项
①因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提 起腹壁，以免伤及腹腔内脏。
图3 家兔耳缘静脉(红色箭头)
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4.家兔耳缘静脉注射方法 (1)助手按下图的方式将家兔固定
助手的一侧上肢弯 曲与同侧的躯干夹住家 兔的后半部位，同时该 侧的手托住家兔的腹部， 另一只向上抓住家兔的 颈背部。
图4 家兔耳缘静脉麻醉前固定
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(2)注射方法(视频) 静脉穿刺意外(视频)
图5 家兔耳缘静脉注射方法
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三、固定方法 1.仰卧固定
头部用一根粗棉线拉住兔 的两只门齿后栓在兔板的铁 柱或固定于钩上。两前肢平 直放在胸腰部两侧,用粗棉绳 的一端缚扎腕关节以上部位, 缚绳从背后左右交叉穿过,压 在对侧前肢的前臂上,再紧扎 于兔板两侧的木钩上,两后肢 左右分开, 缚绳扎踝关节以上 部位,另一端分别固定于兔板 后两侧的木钩上,
图6 家兔仰卧固定法
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2.注意事项
(1)活结的打法； (2)颈部必须放正拉直，且不要超过铁杆； (3)缚绳要紧扎于兔板两侧的木钩上，防止家 兔挣扎时挣脱缚绳； (4)拉出舌头，以Hale Waihona Puke Baidu阻塞呼吸道。
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四、止血
1.压迫止血法 用温热盐水纱布或棉球压迫止血。 2.钳夹止血法 对准出血点迅速、准确钳夹，一般细 小血管用此法。 3.结扎止血法 较大的血管出血，用血管钳夹住出 血点，结扎止血。
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五、颈部手术
1.气管插管术(视频)
图7 切皮运刀方法 用手术刀时，先用手或器械使两侧组织牵拉紧张情 况下，以刀刃作垂直的轻巧的切开，不要作刮削的动 作。
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甲状软骨
倒“T”形切口
“Y”形气管插管结扎线头
结扎线
图8 气管插管示意图
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(2)气管插管术操作要点：
①颈部正中切开皮肤，钝性分离暴露气管、穿线备用。 ②于气管中段第三或第四软骨环上向头端作一纵向倒“T” 形切口。 ③将气管导管由切口向胸部方向插入气管腔内。 ④在气管软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于插管分叉 处。
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2.颈部神经分离术(视频) 迷走神经 减压神经
交感神经 颈总动脉
图7 血管神经鞘示意图
（最粗、明亮）
（较细）
（最细、常与
交感神经贴在
一起）
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(2)神经分离术操作要点：
①暴露神经的手法。 ②仔细辨认神经，用玻璃分针轻轻分离神经。 ③分离神经的先后顺序。
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3.颈总动脉插管术(视频) (1)颈总动脉插管术操作要点：
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(3)耳缘静脉注射要点：
①充分暴露耳背外缘耳缘静脉。 ②左食指、中指轻夹耳根部使静脉充盈。 ③注射点的选择。 ④从远心端以30℃角度进针刺入静脉后顺血管平行方向深 入1cm。 ⑤左手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定。 ⑥注意注入速度和密切观察家兔的反应。 ⑦注射完后注意止血。
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(4)麻醉效果 动物呼吸平稳深慢 角膜反射迟钝或消失 肢体肌肉松弛 皮肤夹捏反射消失
其四肢。
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可损伤两肾 可造成皮下出血 可损伤两耳
图2 错误捉拿法
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2.家兔的称重
将家兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候 观察体重并记录。 注意点：
(1)调零 (2)切勿使劲按压称面
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二、家兔的麻醉
1. 药品:25%氨基甲酸乙酯(又名:乌拉坦) 2. 参考剂量:1g∕kg ，相当于4ml∕kg 3. 给药途径:耳缘静脉
①于气管一侧小心分离颈总动脉约3cm穿两线备用。 ②远心端结扎、近心端用动脉夹夹紧。 ③用眼科剪与血管呈45℃的角度从远心端开始在向心 一侧剪开管壁的1/3。 ④插管前导管和压力换能器的肝素化。 ⑤插管后结扎固定。
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(2)注意事项
①分离动脉时不要损伤动脉的小分支，以免造成出血。 ②颈总动脉剪口不宜过大或过小，过大易于使颈总动脉 插断，过小导管不易插入。 ③动脉导管的插入端要光滑，不能过尖，以防刺破动脉 壁，引起大出血。 ④未扎紧动脉插管前不要松动动脉夹。
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(3)注意事项
①颈部皮肤切口，皮下组织和颈前肌肉群的分离均在一 定要沿正中线进行。
②分离肌肉时，要顺着肌肉的走向钝性分离，而且动作 须轻柔，止血钳插入不宜过深，以防损伤深层的食管和血 管。
③插管之前先用蘸有生理盐水的棉球，挤尽水分后进行 清理气管内的血液和分泌物，以保证气道通畅。
④插管时动作轻柔，若见插管内有血，应取出插管擦净 血液，再进行插管。
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[实验对象]
健康家兔,雌雄不拘,体重2.0～2.5Kg
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[实验内容]
1.家兔的捉拿、麻醉与固定 2.颈总动脉、神经分离术 3.气管插管 4.动脉插管 5.膀胱插管 6.输尿管插管
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[实验器材和药品]
1.器材： 兔手术台、哺乳类手术器械一套、三通、动
脉夹、动脉插管、气管插管、输尿管插管、膀 胱插管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污物 杯。