怎样提取淀粉酶

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实验一淀粉酶的提取及作用

实验一淀粉酶的提取及作用
一．原理：
1.淀粉淀粉酶水解蓝色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖葡萄糖
2.葡萄糖+斐林试剂Cu2O↓(砖红色）
二．植物材料与实验器具：
植物材料：萌动的小麦
实验器具：试管；玻棒；量筒；研钵；漏斗；电炉；水浴锅
试剂：2%淀粉溶液；稀I-KI 溶液（原液稀释5倍）；斐林试
三．操作步骤
1. 取10粒萌动的小麦种子放入研钵中，用量筒取10ml蒸馏水作为淀粉酶提取液总量
（包括研钵清洗、种子研磨），分三次加入，将小麦研成浆状，用脱脂棉过滤于试管中,摇匀。

滤液静置5-10min ,上清液为淀粉酶的提取液。

2. 取2只刻度试管做标记A管、B管
A管：2ml 2%淀粉液+2ml蒸馏水38℃
B管：2ml 2%淀粉液+2ml淀粉酶提取液20min
加I-KI 2~3滴观察并比较两管颜色变化。

3.B管+3ml 斐林试剂沸水浴2~5min观察颜色变化
四。

实验结果
淀粉酶能将淀粉水解成葡萄糖。

淀粉酶原料

淀粉酶是一类能够水解淀粉为糖类的酶，常用于食品加工、酿造和生物技术等领域。

淀粉酶的原料主要包括以下几种：
1.淀粉：淀粉是淀粉酶反应的底物，通常从植物中提取得到。

常见的淀粉源包括玉米、小
麦、马铃薯等。

2.发酵产物：某些淀粉酶可以通过微生物发酵产生。

这些淀粉酶的原料可以是含有淀粉的
废弃物或副产品，如谷物糟粕、纤维素废弃物等。

3.培养基成分：对于通过微生物发酵生产淀粉酶的方法，培养基中需要添加适当的碳源、
氮源和微量元素等。

常见的培养基成分包括葡萄糖、蛋白质源（如酵母提取物）、氨盐等。

4.微生物菌株：淀粉酶的生产通常使用具有高产酶能力的微生物菌株。

这些菌株可以是细
菌、真菌或酵母等。

常见的微生物菌株包括枯草杆菌、曲霉、酵母菌等。

以上是常见的淀粉酶原料，不同的淀粉酶制备方法和应用领域会有所差异。

选择合适的原料和生产工艺对于获得高效、纯度较高的淀粉酶产品至关重要。

从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的流程

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简述淀粉酶解法的工艺流程

淀粉酶解法工艺流程简述
一、准备阶段
1.原料准备
确保淀粉供应充足
准备水和其他添加剂
2.设备检查
检查酶解设备和配套设备状态
确保设备清洁和正常运行
3.环境准备
清洁操作场地
调节环境温湿度适宜
二、酶解过程
1.原料混合
将淀粉与适量水混合
添加调节pH值的酸碱剂
2.加酶酶解
加入淀粉酶
控制酶解温度和时间
3.反应结束
根据需要停止酶解反应
冷却淀粉酶解液至室温
三、分离与提取
1.液固分离
过滤或离心分离液体与固体淀粉残渣2.酶提取
对液体部分进行进一步酶提取
可采用浓缩、纯化等方法
四、精制与后处理
1.澄清
通过澄清剂去除淀粉酶解液中的浑浊物2.浓缩
将酶解液浓缩至所需浓度
3.灭酶
对酶解液进行加热或添加抑制剂灭活酶
五、成品处理
1.包装
根据产品性质选择合适的包装方式
2.标签贴附
贴上产品标签和相关信息
3.成品储存
存放于干燥、阴凉、通风的库房中。

α-淀粉酶的分离提纯

α- 淀粉酶的分离方法的比较 α-淀粉酶在食品工业上有着广泛的用途。目前工淀粉酶在食品工业上有着广泛的用途。淀粉酶在食品工业上有着广泛的用途业上从发酵液中提取α淀粉酶的方法多淀粉酶的方法多。业上从发酵液中提取淀粉酶的方法多。主要有直接用硫酸铵沉淀和采用絮凝-超滤超滤-乙醇主要有直接用硫酸铵沉淀和采用絮凝超滤乙醇沉淀方法。种方法食品工业上不能使用。第一种方法食品工业上不能使用。第二种方法要求发酵液澄清度好，第二种方法要求发酵液澄清度好，否则超滤膜堵此外超滤法浓缩酶液是有限度的，塞，此外超滤法浓缩酶液是有限度的，沉淀仍消耗大量的乙醇同时酶的回收率也较低一般在55%左耗大量的乙醇同时酶的回收率也较低一般在左右。为了提高产品的活性,酶活性的回收和减少乙醇的为了提高产品的活性酶活性的回收和减少乙醇的用量已有相关报道用大孔吸附树脂吸附的方法分离纯化α- 淀粉酶。在此进一步改进了洗脱方式，离纯化在此进一步改进了洗脱方式，使其更便于工业化生产，使其更便于工业化生产，使用离子交换的方法进一步纯化α- 淀粉酶。淀粉酶。一步纯化
吸附树脂法发酵液cacl加水溶解加入絮凝剂搅拌压滤收集滤液滤液中加入吸附树脂过滤弃去滤液收集吸附树脂收集滤液40的乙醇过滤5乙醇成品收集沉淀沉淀无水乙醇洗脱ph为650005mollph为6502mollph为6505moll反复洗涤de32处理好的de32转入烧杯过夜制3cm4cm的层析柱2mlmin的流速平衡2h2mlmin洗脱酶液得洗脱峰1收集洗脱液测酶活性2mlmin洗脱酶液得洗脱峰2收集洗脱液测酶活性称取树脂吸附淀粉酶1g10ml注意
出峰图
注意！！！
–N,N’-亚甲双丙烯酰胺为神经毒性物质，可经皮肤直接吸收，使用时应避免其直接接触皮肤，必要时应戴手套。但其凝固后就变成无毒物质。沉淀α-淀粉酶过夜 α

淀粉酶生产工艺

淀粉酶生产工艺淀粉酶作为一种重要的工业酶，广泛应用于食品、医药、饲料、糖化、纺织、皮革等领域。

下面将主要介绍淀粉酶的生产工艺。

淀粉酶的生产工艺通常分为两个步骤：种子培养和发酵生产。

1. 种子培养淀粉酶的种子一般由菌丝体制备而得，种子菌株的选取非常重要。

首先，从土壤、植物、食品中分离得到淀粉酶产生菌株，并经过传代培养筛选出优良菌株。

然后，选择合适的培养基进行菌株的预培养，以获得高活性和高产量的种子菌株。

培养基的选择要考虑到菌株的特性和经济性。

在种子培养过程中，通常采用摇瓶培养或容器培养的方式，控制好温度、pH值和氧气供应等条件，优化菌株的生长。

2. 发酵生产种子培养完成后，将种子菌株接种到大型发酵罐中进行发酵生产。

发酵过程需要控制好发酵温度、pH值、氧气供应和添加剂的投放等条件。

温度：淀粉酶的产生通常在30-50°C之间，具体温度要根据菌株的特性来确定。

温度过高或过低都会影响酶活性和产量。

pH值：淀粉酶一般在中性或微酸性环境下活性最高，一般在pH 5.0-7.0 的范围内进行发酵。

氧气供应：氧气供应对淀粉酶的产生有重要影响，因为淀粉酶属于需要氧气的好氧菌株。

因此，在发酵过程中需要控制好氧气的供应，提供充足的氧气以促进酶的产生。

添加剂：为了提高淀粉酶的产量和稳定性，常常会在发酵过程中添加一些助产剂或诱导剂，如优质动物蛋白、磷酸盐和氨基酸等。

这些添加剂能够提供菌株合成淀粉酶所需的营养物质，增加产酶能力。

发酵时间一般为24-72小时，根据菌株的生长速率和淀粉酶产量进行调整。

发酵过程中，可以通过监测酶活性和生物量的变化来掌握发酵的进程和产酶情况。

在发酵结束后，可通过离心、超滤等技术手段将淀粉酶提取和分离出来，经过加工和精制，最终得到纯净的淀粉酶产品。

综上所述，淀粉酶的生产工艺主要包括菌株的培养和发酵生产两个步骤。

通过控制好培养条件和发酵参数，能够提高淀粉酶的产量和质量，达到产业化生产的要求。

淀粉酶的提取-α-淀粉酶的提取、分离及测定

α-淀粉酶的提‎取、分离及测定‎（生化试验小‎组-2005.4）试验全程安‎排：试验一、色谱分离淀‎粉酶1.1 试剂及设备‎离子交换树‎脂-20℃冰箱样品管（5-10ml试‎管）1.5ml离心‎管紫外分光光‎度计α-淀粉酶样品‎秒表胶头吸管（进样用）平衡缓冲液‎（pH8.0，0.01M磷酸‎盐缓冲液）洗脱缓冲液‎（平衡缓冲液‎+0.1M，0.3M，0.5M，1.0M的氯化‎钠）试剂瓶1.2 离子交换色‎谱原理与方‎法色谱(chrom‎a togr‎a phy)是一种分离‎的技术,随着现代化‎学技术的发‎展应运而生‎。

20世纪初‎在俄国的波‎兰植物化学‎家茨维特(Twsee‎t)首先将植物‎提取物放入‎装有碳酸钙‎的玻璃管中‎，植物提取液‎由于在碳酸‎钙中的流速‎不同分布不‎同因此在玻‎璃管中呈现‎出不同的颜‎色，这样就可以‎对各种不同‎的植物提取‎液进行有效‎的成分分离‎。

到1907‎年茨维特的‎论文用俄文‎公开发表，他把这种方‎法命名为c‎hroma‎t ogra‎p hy, 即中文的色‎谱，这就是现代‎色谱这一名‎词的来源。

但由于茨维‎特当时没有‎知名度，而且能看懂‎俄文的人也‎不多，加之很快爆‎发了第一次‎世界大战，茨维特的分‎离方法一直‎被束之高阁‎。

20世纪2‎0年代，许多植物化‎学家开始采‎用色谱方法‎对植物提取‎物进行分离‎，色谱方法才‎被广泛地应‎用。

自20世纪‎40年代以‎来以Mar‎t in 为首‎的化学家建‎立了一整套‎色谱的基础‎理论使色谱‎分析方法从‎传统的经验‎方法总结归‎纳为一种理‎论方法，马丁等人还‎建立了气相‎色谱仪器使‎色谱技术从‎分离方法转‎化为分析方‎法。

20世纪5‎0年代以后‎由于战后重‎建和经济发‎展的需要，化学工业特‎别是石油化‎工得到广泛‎的发展，亟需建立快‎速方便有效‎的石化成分‎分析。

而石化成分‎十分复杂，结构十分相‎似，且多数成分‎熔点又比较‎低，气相色谱正‎好吻合石化‎成分分析的‎要求，效果十分明‎显、有效。

淀粉酶的提取要点

α-淀粉酶的提取、分离及测定（生化试验小组-2019.4）试验全程安排：试验一、色谱分离淀粉酶1.1 试剂及设备离子交换树脂-20℃冰箱样品管（5-10ml试管）1.5ml离心管紫外分光光度计α-淀粉酶样品秒表胶头吸管（进样用）平衡缓冲液（pH8.0，0.01M磷酸盐缓冲液）洗脱缓冲液（平衡缓冲液+0.1M，0.3M，0.5M，1.0M的氯化钠）试剂瓶1.2 离子交换色谱原理与方法色谱(chromatography)是一种分离的技术,随着现代化学技术的发展应运而生。

20世纪初在俄国的波兰植物化学家茨维特(Twseet)首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中，植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同因此在玻璃管中呈现出不同的颜色，这样就可以对各种不同的植物提取液进行有效的成分分离。

到1907年茨维特的论文用俄文公开发表，他把这种方法命名为chromatography, 即中文的色谱，这就是现代色谱这一名词的来源。

但由于茨维特当时没有知名度，而且能看懂俄文的人也不多，加之很快爆发了第一次世界大战，茨维特的分离方法一直被束之高阁。

20世纪20年代，许多植物化学家开始采用色谱方法对植物提取物进行分离，色谱方法才被广泛地应用。

自20世纪40年代以来以Martin为首的化学家建立了一整套色谱的基础理论使色谱分析方法从传统的经验方法总结归纳为一种理论方法，马丁等人还建立了气相色谱仪器使色谱技术从分离方法转化为分析方法。

20世纪50年代以后由于战后重建和经济发展的需要，化学工业特别是石油化工得到广泛的发展，亟需建立快速方便有效的石化成分分析。

而石化成分十分复杂，结构十分相似，且多数成分熔点又比较低，气相色谱正好吻合石化成分分析的要求，效果十分明显、有效。

同样，石化工业的发展也使色谱技术特别是气相色谱得到广泛的应用。

气相色谱的仪器也不断得到改进和完善，气相色谱逐渐成为一种工业分析必不可少的手段和工具。

20世纪80年代以后我国也大规模采用气相色谱和高效液相色谱。

淀粉酶的制备

0时刻5min时刻Fra bibliotek0时刻
5min时刻
0时刻
5min时刻
B1 B1’ F1 F1’ B2 B2’ F2 F2’ B3 B3’ F3 F3’
淀粉酶液 (ml)
0.3
0.2
0.5
H2O (ml) 3.5 pH 6.8缓冲液
0.3 ％ NaCl
预热
各 1 ml 各 1 ml 摇匀， 37 ℃ 水浴 2 min
一、实验目的
掌握测定淀粉酶活力的原理和基本方法
本实验是以一定量的α -淀粉酶液，于37 ℃ 、pH6.8的条件下，在一定的初始作用时间内将淀粉转化为还原糖，然后通过与DNS试剂作用，比色测定求得还原糖的生成量，从而计算出酶反应的初速度，即酶的活力
这里规定，一个淀粉酶活力单位为在37 ℃ 、 pH6.8的条件下，每分钟水解淀粉生成1 mg还原糖所需要的酶量。
酶提取液解冻，取上清液0.05 mL，加蒸馏水稀释到25 mL，摇匀备用（2）取硫酸铵沉淀法纯化蛋白质实验中获得的盐析蛋白质解冻，取上清液0.05 mL，加蒸馏水稀释到 25 mL，摇匀备用（3）取葡聚糖凝胶层析脱盐获得的蛋白液解冻，取 0.05 mL，稀释。
收集1管的同学，将0.05 mL稀释到15 mL 收集2管的同学，将0.05 mL稀释到10 mL
NaOH (ml)
11
11
11
预热的淀粉
各 1 ml，迅速摇匀
酶促反应
37 ℃ 水浴 5 min (准确计时)
NaOH (ml) DNS试剂显色反应
比色
11
11
11
各 2 ml，摇匀
沸水浴 5 min，冷却，各用水定容至25ml，摇匀

淀粉酶的制备及活力测定

(三）α-淀粉酶活力测定： ① 取试管3支 ② 于每管中各加入酶液1mL，在70℃±0.5℃恒温水浴中准确加热15min，钝化β-淀粉酶。取出后迅速用流水冷却。 ③ 在对照管中加入4mL0.4mol/L氢氧化钠。 ④ 在4支试管中各加入1mLpH5.6柠檬酸缓冲液。 ⑤ 将4支试管置于恒温水浴中，40℃±0.5℃保温 15min，再向各管分别加入40℃下预热的1%淀粉液2mL，摇匀，立即放入40℃恒温水浴准确计时保温5min。取出后向测定管迅速加入 4mL0.4mol/L氢氧化钠，终止酶活动，准备测糖。
项目二
淀粉酶的制备及应用
班级姓名学号小组
一、淀粉酶
淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，通常通过淀粉酶催化水解织物上的淀粉浆料，由于淀粉酶的高效性及专一性，酶退浆的退浆率高，退浆快，污染少，产品比酸法、碱法更柔软，且不损伤纤维。淀粉酶的种类很多，根据织物不同，设备组合不同，工艺流程也不同，目前所用的退浆方法有浸渍法、堆置法、卷染法、连续洗等，由于淀粉酶退浆机械作用小，水的用量少，可以在低温条件下达到退浆效果，具有鲜明的环保特色。
四、实验步骤
1. 将萌发好的稻谷种子去壳，注意别把芽去掉，称取1g，置于研钵中。 2. 加入少量的石英砂和2mL的蒸馏水，研磨匀浆。 3. 将匀浆倒入离心管中，用6mL蒸馏水分次将残渣洗入离心管。提取液在室温下放置提取15至20 分钟。每隔数分钟搅动一次，使其充分提取。 4. 然后在3000转/分转速下离心10分钟。 5. 将上清液过滤，倒入100mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，即制得α-淀粉酶原液。装入试剂瓶中，贴标签，保存于低温冰箱中，为以后的实验使用。
0.1mol/L pH5.6的柠檬酸缓冲液： A液（0.1mol/L 柠檬酸）：称取C6H8O7.H2O 21.01g，用蒸馏水溶解并定容至1L； B液（0.1mol/L 柠檬酸钠）：称取 Na3C6H5O7.2H2O 29.41g，用蒸馏水溶解并定容至1L。取A液13.7mL与B液26.3mL混匀，即为 0.1mol/L pH5.6的柠檬酸缓冲液； 1％淀粉溶液：称取1g淀粉溶于 100mL0.1mol/L pH5.6的柠檬酸缓冲液中。

α-淀粉酶的发酵、提取和

4
医学课件ppt
2. 在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲 (H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键（－CO －NH－），因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。此络合物在540nm吸收值在一定范围内与蛋白质的质量成正比.
先将固体硫酸铵研成细粉末，然后按37% （重量/体积比）的比例加入到经离心的发酵液中，混合均匀，静置30min。
具体操作:5ml发酵液,加1.87克硫酸铵细粉末,混匀, 静置30min.
两组配平,4000r.m.p离心10分钟, 离心去除上清液保留沉淀。测活前加入10ml去离子水溶解。(即稀释一倍)
5
医学课件ppt
3. 淀粉在碘液中会呈现紫色。α-淀粉酶作用于淀粉时，可从分子内部切开α-1， 4键而生成糊精和还原糖。而糊精和还原糖在碘液中不显色，故可通过预先盛有淀粉和比色稀碘液的试管中的颜色变化（由紫色变棕色）来辨别反应终点。
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医学课件ppt
三、实验步骤
1. 硫酸铵沉淀法从发酵液中分离α-淀粉酶。
2. 取发酵液5ml +5ml去离子水(即稀释一倍)
3. 分别测定发酵液和提取液中的α-淀粉酶的酶活并计算它们各自的酶比活力
α-淀粉酶的酶活测定
（1）吸取1ml标准糊精溶液，置于盛有3ml标准稀碘液的试管中
（2）在试管中加入2%可溶性淀粉20ml,加缓冲液5ml,在60度水浴中平衡4-5分钟,加入0.5ml稀释酶液,立即记时,充分混匀,1分钟后取出1ml反应液于预先盛有3ml比色稀碘液的试管内(也需放在水浴中), 当颜色反应由紫色逐渐变成棕色,与标准比色管颜色相同时,记录时间为反应时间(发酵液和提取液每组各做2个重复)

淀粉酶的提取原理

淀粉酶的提取原理
淀粉酶的提取原理是利用微生物（如真菌或细菌）产生的淀粉酶对淀粉进行降解和分解。

提取淀粉酶的步骤通常如下：
1. 选择合适的产酶微生物：选择能产生大量淀粉酶的微生物，如放线菌、曲霉等。

2. 制备培养基：制备含有适宜碳源、氮源、矿物质和其他辅助物质的培养基，以提供微生物生长和淀粉酶产生所需的营养物质。

3. 预处理培养基：对培养基进行适当的预处理，如调整pH值、消毒等。

4. 接种培养基：将选定的微生物接种到预处理的培养基中，并进行培养。

5. 酶液分离：经过一定时间的培养后，将微生物分离出来，通常通过离心或其他分离方法。

6. 纯化酶液：对酶液进行纯化和浓缩，以去除杂质。

7. 测定酶活力：通过测定酶液的酶活力来评估酶提取的效果。

提取淀粉酶的原理主要是通过培养合适的微生物产生酶，然后对酶液进行分离、纯化和测定酶活力，以获取纯化的淀粉酶。

一种从土壤中分离产淀粉酶的微生物的方法

一种从土壤中分离产淀粉酶的微生物的方法
淀粉酶是一种重要的酶类，在食品、制浆造纸等工业中广泛应用。

为了提取淀粉酶，我们需要寻找土壤中的微生物作为产酶菌株，并开发一种高效的分离方法。

下面介绍一种用于分离产淀粉酶微生物的方法。

首先，我们需要采集土壤样品，最佳采集时间一般在较潮湿的季节，例如春季或秋季。

将土壤样品放入无菌容器中，避免外界污染。

接下来，将土壤样品进行稀释处理。

取适量的土壤样品，加入适量的浸润液（如无菌盐水溶液），进行充分的搅拌混合。

然后，进行一系列的稀释，以获得适合于微生物生长的平衡菌落计数。

然后，将样品进行涂布。

取一定稀释倍数的土壤样品，均匀涂布在含有淀粉基质的琼脂平板上。

淀粉基质可以提供微生物产酶的营养来源。

在涂布后，将琼脂平板进行孵育，一般在适宜温度下培养24-48小时。

在孵育结束后，观察琼脂平板上是否出现透明环或透明区域。

这些透明环或区域代表微生物分泌产生的淀粉酶对淀粉基质进行降解的结果。

选择直径适当、透明区域清晰的菌落进行分离。

分离后，我们可以进行产淀粉酶微生物的纯化和鉴定。

对分离的菌株进行单菌落传代培养，将单一菌落的微生物培养至纯化。

然后，通过形态学观察、生理生化特性测试和16S rRNA基因测序等手段，对微生物进行鉴定确认。

通过这种方法，我们可以从土壤中分离并鉴定出产淀粉酶的微生物菌株。

这对于淀粉酶的生产和应用具有重要的意义，为相关工业提供了有益的资源。

淀粉酶及其在实验室中的制取讲解

式分为四种 :
酶的种类
α 酶
-
淀粉
β 酶
-
淀粉
葡萄糖淀粉酶
α-
1, 6糖苷酶Biblioteka 酶的性质随机内切酶
直链端切酶
外切酶
特异性水解 α - 1, 6糖苷键
产物糊精二糖葡萄糖直链淀粉
多数淀粉由 20% ～25%的直链淀粉和 75% ～ 80%的支链淀粉组成 ,直链淀粉借助分子内的氢键卷曲成螺旋状 ,如果加入碘液 , I2 分子就会嵌入到螺旋结构的空隙处 ,形成一种较稳定的淀粉 - 碘络合物 ,从而使淀粉呈蓝色。各种淀粉酶的作用部位不尽相同 [1 ] , 图 1。
(3)新编试题新编试题也称为原创题 ,重点体
结论 (表 2) :在以多糖为原料的情况下 ,微生物产生的淀粉酶较多 ,尤其以淀粉为主要原料时 ,微生物产生的淀粉酶最多 ;单糖、二糖为原料时 ,产生的淀粉酶较少 ;在不含糖的培养基中 ,不产生淀粉酶。
实验 2:不同疏松剂对淀粉酶产量的影响。由以
A
BC
3
6
7
++
+
+
结论 :多数微生物在淀粉培养基中 ,均能产生 α 淀粉酶。而当淀粉中加入纯种面包酵母时 ,蓝色消退最快 ,产生淀粉酶较多 (表 3) 。
实验 3:不同植物中的淀粉对淀粉酶产量的影响实验步骤 :称取各类淀粉 40g,分别加 2g面包干酵母 ,加水搅拌成面团 ,常温下发酵 5 ～10 小时 ; 各加水 350mL ,摇匀 ,继续发酵数天 ,澄清液就是新鲜的淀粉酶溶液。用淀粉酶溶液 1. 5 mL 分别水解 3mL 3%的可溶性淀粉溶液 (已加入碘液 ) , 50℃～60℃水浴 ,观察蓝色消退时间并记录。

三、α-淀粉酶的分离提纯2010

c.迅速在两玻璃板间隙中灌注分离胶，直至红色指示片的下缘。然后用移液器吸取500μl异丙醇覆盖在胶上。
d.在分离胶聚合的过程（约40分钟）中，配制5%的积层胶（2ml）：依次混合ml 蒸馏水，0.65ml 30%丙烯酰胺贮存液， 0.5ml 1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液，0.04ml 10% SDS溶液， 0.04ml 10%过硫酸铵，0.004ml TEMED。注意：TEMED应在灌胶前才加入。
10、脱色液：甲醇:水:冰乙酸=9:9:2 注：1、2、5、6、7由教师提供，其余由学生自己配
制，其中8可在凝胶凝固的过程中配制，9、10在电泳时配制。
21
4.2.3 实验方法
A、准备步骤
a、将凝胶板依次用水、SDS、水、无水乙醇、水洗涤干净，然后使其自然风干或烘干。
b、试样格（梳子）使用后无水乙醇擦拭，让其挥发至干。 c、灭菌：枪头、eppendorf管。
D、上样用20μl-200μl移液器上样，每加入一种样品，更换一个枪头。
E、电泳打开电源，使得电压恒定为180V，电泳直至染料刚出凝胶底部时停止。
PS：现在请打开水浴锅调至60℃
24
F、后处理
a.染色：除去固定液，用蒸馏水冲洗后加入染色液（用量同上），室温染色30min。
b.脱色：回收染色液，将凝胶浸泡于脱色液中，直至背景脱至无色。
2、1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液； 3、10% SDS溶液； 4、10%过硫酸铵：新鲜配制。0.1g/管，用时加1ml
双蒸水溶解； 5、TEMED溶液：4℃保存； 6、1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液； 7、2×样品溶解液：2%SDS，5%巯基乙醇，10%甘
预先称重并标记，离心前需平衡后方能使用），于4℃ 10000rpm离心 20min； ➢ e.小心取出离心管，将上清液转移至预先标记的三角瓶内待用。沉淀称重后用1ml ddH2O重悬后待用； ➢ f.准备20支大试管，标记，以实验二中方法分别测定上清和沉淀的酶活。（选做）

淀粉酶的生产及应用

淀粉酶的生产及应用淀粉酶是一种重要的工业酶制剂，具有广泛的应用前景。

以下将就淀粉酶的生产和应用进行详细阐述。

一、淀粉酶的生产淀粉酶是通过发酵工艺生产的，主要来源于微生物、动物和植物。

1. 微生物源生产微生物源生产淀粉酶是目前主要的生产方式，常用的微生物有真菌和细菌。

常见的真菌有Aspergillus、Penicillium、Trichoderma等，常见的细菌有Bacillus、Streptomyces等。

微生物源生产淀粉酶的步骤一般为：选材→筛选高效菌株→发酵→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。

2. 动物源生产动物源淀粉酶主要来自猪胰腺。

提取过程一般为：猪胰腺养殖→收集猪胰腺→粉碎破碎→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。

3. 植物源生产植物源淀粉酶主要来自马铃薯、玉米等植物中。

提取过程一般为：马铃薯破碎→破菌、杀菌、酶解→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。

二、淀粉酶的应用1. 食品工业中的应用淀粉酶在食品工业中有着广泛的应用，主要用于食品加工中的葡萄糖浆、糖化醇、果胶等的制备和糖化工艺的调控。

例如，淀粉酶可将淀粉酶解为较小的糖分子，提高食品中糖的含量，改善口感和稳定性。

此外，淀粉酶还可用于面包、饼干等面粉制品的改良，并提高其贮存性和食用品质。

2. 纺织工业中的应用淀粉酶在纺织工业中主要用于织物的整理处理，如退浆、硫酸盐还原等。

其作用是分解纺织原料中的淀粉，提高降解淀粉成分的活性和效果，从而达到改善织物的柔软度、光泽度和手感等目的。

3. 制浆造纸工业中的应用淀粉酶在造纸工业中广泛应用于原料中的淀粉和非淀粉物质的降解处理。

通过添加适量的淀粉酶，可以有效降低造纸原料中淀粉的含量，提高浆料的筛选效率和纸张的强度、光泽度等性能。

4. 医药工业中的应用淀粉酶在医药工业中主要用于药物的合成和改良。

例如，淀粉酶可以用于制备药物辅料，改变其物化性质，提高药物的稳定性和可溶性。

此外，淀粉酶还可用于药物的表面活性剂、缓释剂等的改良，提高药效和降低毒副作用。

介绍一种淀粉酶的简易取材方法

介绍一种淀粉酶的简易取材方法
裴进华
高中《生物》(必修)课本第45页的演示实验，证明酶是生物催化剂。

所用的酶，是选取萌发的小麦种子芽，与石英砂和蒸馏水碾磨后的过滤液。

我们做此实验时改用人的唾液方法较简便。

首先，准备好过滤装置，如漏斗、脱脂棉、试管等。

然后让几个同学漱口后，将脱脂棉含入口中吸足唾液，再将唾液挤入基部放有脱脂棉的漏斗中过滤，收集滤液，滤液内就含有丰富的唾液淀粉酶，按1∶50稀释即可直接用于实验。

此法既解决了酶的取材问题，又提高了学生的学习兴趣，效果很好。