实验三 药物一般杂质检查
药物分析 药物中一般杂质的检查-重金属检查法
适用于难溶于稀酸但能溶解 于碱性溶液的药物中重金属的 检查.
如：磺胺类与巴比妥类药物
14
2. 方法
取供试品适量,加NaOH试液5ml和 水 20ml使溶解后,置纳氏比色管中,加 Na2S试液5滴, 摇匀, 与一定量标准铅溶 液经同法处理所呈颜色比较.
15
3. 讨论 Na2S 对玻璃有腐蚀性,久置
药物中一般杂质的检 查—重金属检查法
1
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1.重金属的概念
重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫 化钠作用呈色的金属。如银、铅、汞、铜、镉、 铋、锑、锡、砷、锌、钴、镍等。 重金属存在影 响药物的稳定性及安全性。
在药品生产中遇到铅的机会较多，且铅易在体 内易积蓄中毒，因此一般以Pb为代表。
2
第一法:硫代乙酰胺法
产生絮状物,应临用新配.
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水25ml硫代乙酰胺TS2ml 2比色 放置
5
结果观察
6
3．影响因素
① 标准铅溶液浓度 适宜目视比色的浓度范围 Pb2+标准溶液10g/ml 1~2ml
7
② 溶液的pH
溶液的pH对于金属离子与硫化 氢呈色影响较大.
➢pH在3.0~3.5时, 呈色较完全. ➢酸度增大, 呈色变浅甚至不呈色.
8
③ 供试品溶液有颜色时的处理
水15ml 氨试液
中性
按第一法检查
c. 含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 蒸发皿. 如：盐酸氟奋乃静中重金属检查
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第三法 硫化钠法
1. 原理 在碱性介质中,以Na2S为 显色剂, 使Pb2+与S2-作用生成PbS 的 混悬液, 与一定量标准铅溶液经同法 处理所呈颜色比较, 不得更深.
药物杂质检查-一般杂质检查
供试品
显色，立即与同法制成的对照溶液比较
加水溶解
25ml
稀HCl 4ml
过硫酸铵 50mg
加水稀释
35ml
30%硫氰酸铵溶液3ml
加水定容
铁盐检查法
注意事项
标准硫酸铁铵配制时为防止水解，需加适量硫酸 反应可逆，加过量试剂可提高反应灵敏度。同时可消除一些阴离子（Cl﹣，PO43﹣，SO42﹣，枸橼酸根）与Fe3+ 形成有色配位物而引起的干扰 供试品与对照品色调不一致或呈色浅：可加正丁醇或异戊醇提取 环状结构的有机药物：需经炽灼破坏后测定
什么是杂质？
药物纯度
有毒副作用的物质 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质
杂质的来源
贮藏过程中产生 水解 氧化 分解 异构化
两大来源
生产中引入 原料 中间体 副产物 降解产物
T
特殊杂质
氯化物 硫酸盐 铁盐 重金属 砷盐 水分 易炭化物 炽灼残渣 有机溶剂残留等 收载在中国药典的附录中
马弗炉
对乙酰氨基酚
干燥坩埚：17.3314g，继续干燥坩埚：17.3312g 装入对乙酰氨基酚总重：19.1834g 炽灼后总重：17.3329g，继续炽灼后总重：17.3328gLeabharlann 炽灼残渣检查请计算!
注意事项
遗留的炽灼残渣需留作重金属检查时， 炽灼温度应控制在500-600C 炽灼至恒重的第二次称重应在规定温度继续炽灼30分钟以上 恒重——连续二次称重重量差＜0.3mg 含氟、钠药物对磁坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚
溶液颜色检查法 干燥失重测定法 水分测定法 易炭化物检查法 炽灼残渣检测法 有机溶剂残留量测定法
实验1 药物一般杂质检查(学生)
实验开始前清点实验仪器，约半小时。
实验1 药物一般杂质检查一、目的要求1、通过对葡萄糖分析，了解药物的一般杂质检查项目和意义2、掌握葡萄糖分析中氯化物、硫酸盐、铁盐和重金属限度检查的原理和方法二、原理《药物分析》书中一般杂质检查方法中的氯化物检查法、硫酸盐检查法、铁盐检查法和重金属检查法的原理。
Ag+ + Cl-→AgCl↓白色凝乳状的沉淀氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银的浑浊液比较，以判断供试品中氯化物是否超过了限量。
Ba2++ SO42-→BaSO4↓硫酸钡微粒硫酸盐的检查是利用SO42-与Ba2+在盐酸酸性溶液中生成的硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较，以判断供试品中硫酸盐是否超过了限量。
Fe3++ 6SCN-→ [Fe(SCN)6]3- ↓红色可溶性的硫氰酸铁配位离子铁盐在酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性的硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所显的颜色进行比较，以判断供试品中铁盐是否超过了限量。
CH3CSNH2+ H2O →CH3CONH2+ H2S ( pH =3.5)Pb2++ H2S →PbS↓+ 2H+硫代乙酰胺在弱酸性（pH =3.5醋酸盐缓冲液）条件下，产生硫化氢，与重金属离子（如Pb2+）生成黄色到棕黑色的硫化物浑悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金属含量是否符合限量规定。
三、操作1、氯化物样品：葡萄糖0.6g————————︳标准：标准NaCl (aq) 6.0mL————︳（标准NaCl (aq)浓度为0.01mgCl-/mL）→用水溶解为25mL→加稀HNO3 10mL→加水至40mL →加AgNO3 溶液1.0mL→加水至50mL→摇匀，暗处放置5min，置黑色背景下-实验台面上，从比色管上方自上向下观察、比较，写出实验现象。
药品的一般杂质检查
药品的一般杂质检查概述1药品的杂质：系指存在于药物之中的微量无治疗作用，或影响药物稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。
2来源：生产过程中所用原料不纯;制备过程中所用溶剂残留;生产工艺中带来的中间体及副产物;器皿,装置，设备引入；药物因外界条件而引起的变化。
3分类：一般杂质：在自然界分布较广，或在多种药物生产，储存过程中容易引入。
特殊杂质：在一些药物种独特存在。
4杂志限量=杂质量/供试品量%一氯化物检查法1原理：氯化物在酸性溶液中与硝酸银生成氯化银浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在同条件下生成的氯化银浑浊比较，来检查供试品中氯化物的限量。
适用于微量氯化物的检查。
2仪器：纳氏比色管3标准氯化钠溶液的配置：称取氯化钠0.165克，置100ML容量瓶中，溶解并稀释至刻度。
4操作方法：除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25m1(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml 纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50m1纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。
以上检查方法中使用的标难氯化钠溶液每lml相当于10μg的Cl。
在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50~80μg的Cl为宜。
在此围氯化物所显浑浊梯度明显，便于比较。
5注意事项：检查在硝酸酸性溶液中进行。
加入硝酸可避免弱酸银盐(如碳酸银、磷酸银以及氧化银)沉淀的形成而干扰检查，同时还可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。
酸度以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。
为了避免光线使单质银析出，在观察前应在暗处放置5min。
由于氯化银为白色沉淀，比较时应将比色管置黑色背景上，从上方向下观察，比较。
第三章 药物的杂质检查
四、杂质的限量及检查方法
（一）、杂质限量 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常 用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。
（二）、杂质的限量检查方法
1、对照法 2、灵敏度法 3、比较法
1、对照法 不需要知道杂质的准确含量 计算公式：知道杂
杂质限量 = 杂质的最大允许量÷供试品的量×100% = 标准液浓度×体积÷供试品的量×100%
阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸； 麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。
三、杂质的分类
按来源分为一般杂质和特殊杂质； 按性质分为信号杂质和有害杂质。
来源
一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的 生产和贮藏过程中容易引入的杂质。
特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中容易引 入的杂质。
性质
信号杂质一般无害，但其含量的多少可以反映出药物 的纯度水平，氯化物、 硫酸盐等就属于信号杂质。 有害杂质对人体有害，如重金属、砷盐、氰化物等， 在药品标准中必须严格控制。
(2) 供试品有微量Fe3+:
在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出硫，产生混 浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+氧化 成Fe2+离子再检查。
第二法：炽灼残渣法
适用于含芳环、杂环以及不溶于水、 稀酸、乙醇及碱的有机药物。
1. 原理 对照法
500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。
2. 操作方法
例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查： 本品溶液(50mg/ml)α＜- 0.4
（五）对光吸收性质的差异
1. 紫外分光光度法：
苯丙醇中苯丙酮的检查： 可利用供试液的吸收度比来控制杂质; 纯品苯丙醇A247nm/A258nm= 0.59;
99.5% 时A247nm/A258nm= 0.79; 因此规定供试品A247nm/A258nm ＜ 0.79; 即所含苯丙酮＜0.5%.
药物分析 第三章 药物杂质检查
6
例如： 药用规格 硫酸钡（BaSO4） 如存在可溶性钡盐则导致医疗事故。 检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐 试剂规格 硫酸钡 对可溶性钡盐不做检查；检查氯化物、铁、灼烧失 重
7
二、药物杂质的来源
杂 质
药物生产过程引入
的
来
源
药物贮存期间引入
8
（一）生产过程引入的杂质 （1）所用原料不纯、合成工艺中未反应完全的原料、 合成中间体、副产物等。
三、药物杂质的分类
1.按来源可分为:一般杂质和特殊杂质 一般杂质 指在自然界中分布广泛，在多种药物的生产或 贮存过程中容易引入的杂质
如：酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、 硫化物、氰化物、铁盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、 炽灼残渣、溶液颜色与澄清度、有机溶剂残留量等。
一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。
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例：肾上腺素中肾上腺酮的检查
盐酸溶液
样品
供试品液（2.0mg/ml）
λ＝310nm下测定，规定 A310≤0.05
肾上腺酮 肾上腺素
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一般杂质检查规则
《药品检验操作标准》规定： 1. 遵循平行操作原则 （1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对， 刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气 管长度及孔的大小要一致
28
如：蒸馏水中氯化物的检查 操作：在供试品溶液中加入试剂，在实验条 件下反应，不得出现正反应。
50ml蒸馏水
HNO3 AgNO3
不得发生混浊
0.2mgCl-/50ml Cl- 4μg/ml
规定水中氯化物含量不大于4μg/ml
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比较法 取一定量供试品，在规定条件下测定待检杂 质参数（如吸光度、旋光度等），与规定数值 （限量）比较，判断供试品中杂质限量。（不 需对照品）
药物分析 药物中一般杂质的检查-氯化物检查法
④供试品溶液不澄清处理方法
供试品溶解后溶液不澄清，应过滤， 过滤时的滤纸要先用含硝酸的水溶液 (1→100)洗涤，除去滤纸中含有的氯化物。
8
⑤ 供试品溶液有色时的处理方法
内消色法 如枸橼酸铁铵中氯化物的检查.
一定量的供试液
HNO
，分成二等份 3
第一份
AgNO3TS
过滤
滤液
标准NaCl液
作对照管
第二份
AgNO3TS
作样品管
⑥ 供试品溶液显碱性的处理方法
先中和为中性后再检查 ——避免硝酸银在碱性条件下
生成氢氧化银和氧化银
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⑦ 干扰物的排除 碘化物、溴化物中氯化物的检查
I Cl
H2O2,H3PO4 I2
[O]
Cl
挥去I 2
依法检查
Br Cl
H2O2,HNO3 Br2
药物中一般杂质的检查 —氯化物检查法
1
氯化物杂质
来源：生产过程中，用到的酸、碱、反 应试剂、催化剂等引入
属性：无机杂质 信号杂质 无毒，但影响纯度
检查的意义：反映生产工艺水平，影响 药品的稳定性
1. 原理
利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝 氯
化 酸银反应, 生成氯化银白色浑浊液, 与一
物 定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生 检
d 杂质中卤素原子连接于苯环上
——先进行有机破坏,使分解后再检查.
药物
适当的有机破坏方法
无机
Cl 后依法检查
将有机分子破坏，使有 机氯转变为
12
40m l A1g.0NmOl3TS 用水暗稀处 释 放至 置55m0minl 比0较.01浑0%浊 程 度
3. 结果观察方法
药物分析-药物中一般杂质的检查
单质硫，加入维生素C还原Fe3+为Fe2+，消 除干扰。
（二）第二法 炽灼后的硫代乙பைடு நூலகம்胺法
适用于含芳环、杂环，及难溶于水、稀酸 及乙醇的有机药物。
1. 原理：重金属可能会芳环、杂环形成较
牢固的价键，需先将供试品炽灼破坏，残渣加 硝酸进一步破坏，蒸干。加盐酸转化为易溶于 水的氯化物，再依一法检查。
放置10min 溶液
+标准NaCl +水
对 照 溶液
供
供 试 品
+ AgNO3 +水
试 品 溶液
暗处放置 5min后比 较
1. 遵循平行操作原则
仪器的配对性;对照品与供试品的同步操作
2. 正确的取样
3. 正确的比色、比浊方法 4. 检查结果不符合规定或在限度边缘
时应对供试管和对照管各复查二份
一、氯化物的检查
适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。
原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解，产 生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色 的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同 法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金 属是否符合限量规定。
CH3CSNH2 + H2O pH3C.5H3CONH2 + H2S 合格 ≤
H2S + Pb2+
2. 操作方法
样品：S置坩埚中 500～600℃炽灼残渣 残渣 HNO3、 HCl、 氯化物 H2O NH3H2O调节至pH7.0左右 pH3.5缓冲液2.0ml 依一法检查
对照：空坩埚 H2SO4、 HNO3、 HCl 、 NH3H2O、 H2O 标准Pb（N O3）2溶液 pH3.5缓冲液2. 0ml 依一法检查
药物的杂质检查总结
第三章 药物的杂质检查杂质（forin 、impurities ）是指：1. 有毒副作用的物质2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质药物中杂质的来源1. 生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物（2）试剂、溶剂、催化剂类（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质2. 贮藏过程中产生水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等药物中的杂质按来源分为1. 一般杂质（general impurities ）如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。
一般杂质的检查方法收载在中国药典的附录中。
2. 特殊杂质（special impurities ）：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的有关物质。
特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。
杂质限量：指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几来表示药物的杂质检查法1. 对照法限量检查法 （Limit Test ）特点：不需知道杂质的准确含量2. 灵敏度法系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。
特点：不需对照物质3. 比较法含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH 值等。
特点：准确测定杂质的量，不需对照品杂质限量的计算供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量一般杂质检查规则《药品检验操作标准》规定：1. 遵循平行操作原则（1）仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过 2mm ，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品同步操作2. 正确的比色、比浊方法3. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份氯化物检查法（一）原理 对照法检查方法 药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml （溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml 纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。
药物分析 药物中一般杂质的检查-砷盐检查法
2. 操作
第一步：同古蔡氏法生成砷化氢 第二步：砷化氢还原Ag-DDC溶液,产生 红色的胶态银.
目视比色法 仪器分析 510nm处测吸收度。
17
3. Ag-DDC法的特点
a 灵敏度高 0.5 gAs/30ml b 可仪器测定,还可定量 c Sb干扰小（ 500μg ）
18
(四) 次磷酸法 BP
砷 盐
缺点：Sb干扰(100μg)
检 查
锑盐[H]SbH3 HgBr2 灰色锑斑（干扰）
法
白田道夫法
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(二) 白田道夫法
1. 原 理
SnCl2在HCl中能将砷盐还原为棕褐色的
砷
胶态砷, 与一定量的标准砷溶液按同法处理
盐
后进行比较, 判断供试品中砷盐的限量。
检
查 2As 3+ + 3SnCl2 + 6HCl
（色斑，干扰试验）
排除方法：加入浓硝酸处理
S2 ,SO32 ,S2O32 HNO3 SO24（ 不干扰） [O]
②供试品是铁盐(Fe3+)
Fe3+能消耗还原剂(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氢.
排除方法：先加酸性SnCl2试液使 Fe3+ → Fe2+
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5 古蔡氏法特点
优点：灵敏度高(1 g As)
C2H5 N
C2H5
S C Ag
S
本法不仅用于砷盐的限量检查, 而且可用作 微量砷盐的含量测定.
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1. 原 理
Zn+HCl→H2+AsO33-→AsH3↑ AsH3+6Ag(DDC)→As(DDC)3+6Ag(红色)+3HDDC
8.第八章 药物的杂质检查
（三） 按杂质是否有害分类：普通杂质和有害杂质 1.普通杂质：氯化物、硫酸盐等 一般无害，含量多少可以反映出纯度的水平。 2.有害杂质：重金属、砷盐、氰化物等 对人体有毒害，在质量标准中要严格控制，以保 证用药安全。
杂质的限量检查： 1）药物的纯度：指药物的纯净程度。反应药物质量 的优劣。 杂质是影响药物纯度的主要因素。 因此，杂质检查是控制药物纯度的一个重要方 面，杂质检查也称纯度检查。
7、炽灼残渣
� �
是检查有机药物中混入的各种无机杂质（如金属的氧化物或盐）。 有机药物或挥发性的无机药物经 H2SO4处理，于高温 700～800℃ 炽灼至恒重，根据遗留残渣的量和供试品的量，计算炽灼残渣的 百分率。
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当炽灼残渣用于重金属检查时，温度应控制在 500～600℃。
8.易炭化物检查法
2）Ag-DDC法： 首先看一下 Ag-DDC 代表什么：（ Silver dithyl dithioCarbamate Ag-DDC）
原理：第一步同古蔡氏法生成AsH3↑ 第二步将生成的AsH3经导管导入盛有Ag-DDC吡啶溶 液中，与之作用使Ag-DDC中银还原为红色胶态银溶液， 同法处理标准砷溶液后比较（目视或于510nm处测定吸 收度)
3）方法 (1)在弱酸性下（pH3.5醋酸盐缓冲液），以硫代乙酰胺为显色剂 (2)在碱性下（若药物在酸性下不溶解），以Na2S为显色剂。 4）讨论 （1）硫代乙酰胺试剂：Ch.P90版以前用H2S显色剂，缺点是有恶臭和 毒性，污染环境，且不稳定（空气中易析出），浓度不易控制 （H2S↑）。用硫代乙酰胺替代H2S,该试剂在弱酸性下转换为H2S。 所以与H2S显色剂具有相同作用和效果，无恶臭、浓度易控制
第八章 药物的杂质检查
沈阳药科大学药学院 赵春杰
药品的杂质检查
任何影响药品纯度的物质均称为杂质。
杂质无治疗作用，或者影
响药物的稳定性和疗效，杂质检查在药品质量控制中是非常必要的。
1、一般杂质检查
一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏
过程中容易引入的杂质。
我们可提供《中国药典》规定的一般杂质检
查服务，如甲醇、氯化物、硫酸盐、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐、酸碱度(pH值)、澄清度、溶液的颜色、干燥失重、水分、炽灼残渣、易炭化物及有机溶剂残留等。
2、特殊杂质检查
特殊杂质是指在该药物生产和储藏过程中，根据其生产方法、工
艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质。
我们可提供如降解
产物、基因毒性杂质、酮体、聚合物、高分子杂质、分子量与分子量
分布、异构体、其他甾体及挥发性杂质等项目的特殊杂质检查服务。
3、有关物质
（1）有关物质限度检查
可按《中国药典》中的规定，采用高效液相色谱法、气相色谱法
等手段实现药品有关物质的限度检查。
（2）有关物质定量检查
可按《中国药典》中的规定，采用高效液相色谱法、气相色谱法
等手段对有杂质对照品的有关物质进行定量检查。
（3）有关物质化学成分的鉴定
按照国家药监局的要求用液相色谱-质谱法或气相色谱-质谱法对药物中有关杂质进行鉴定，明确有关物质的化学成分。
提供的检测报告包括：有关物质的分子式、分子量、化学结构式、化学名称、检测方法及条件、色谱和质谱的原始谱图等信息，符合国家药监局的相关规定。
药物分析 药物的杂质限量及检查方法
9
（一）
化 学 方 法
1 杂质与一定试剂反应产生沉淀
盐酸肼屈嗪中游离肼的检查.
2 杂质与一定试剂反应产生颜色
氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺和5-氯水杨酸的 检查
3 杂质与一定试剂反应产生气体
盐酸乙基吗啡中胺盐检查.
4 滴定法
10
（二）
比较法：取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质 参数，与规定的限量相比，不得更大。
三、杂质的限量(Limit Test)
杂质限量计算法如下：
杂质限量(%) 杂质最大允许量 100％ 供试品量
标准溶液的浓度 标准溶液的体积 100％ 供试品量
CV
L(%)
100%
S
注意单位统一！
四、杂质的常用检查法
按毒性分类 毒性杂质和信号杂质
按理化性质 有机杂质、无机杂质、残留
分类
溶剂
三、杂质的限量(Limit Test)
药物中所含杂质的最大允许量。
通常用百分之几或百万分之几 (parts per million, ppm )
杂质 限量 控制
限量检查
对照法 灵敏度法 比较法
定量测定杂质含量
注意平行原则
三、杂质的限量(Limit Test)
（二）
色 谱 方 法
3.气相色谱法(GC) ——用于药物中挥发性杂质的检查,
如药物中残留溶剂、农药残留量等.
检查方法:同高效液相色谱法. 标准溶液加入法
19
（二）
色 谱 方 法
4.毛细管电泳法 —
20
（三）
光 谱 方 法
1. 可见-紫外分光光度法 2. 红外分光光度法 3. 原子吸收分光光度法
3章药物的杂质检查
b ＜(a-b)，符合规定；b ＞(a-b)，不合格。
维生素C中铁、铜离子的检查 碳酸锂中钾盐的检查
（四）其他方法
1、热分析法
在程序控制温度下，测量物质的物理 化学性质与温度关系的一类技术。
中国药典规定检查砷盐时，应取标准 砷溶液2.0ml（每1ml相当于1μg的 As）制备的标准砷斑，今依法检查溴 化钠中的砷盐，规定含砷量不得超过 0.0004%，问应取供试品多少克？
取溴化钠0.5g，检查砷盐，与标准砷 溶液2.0ml制备的标准砷斑比较，不得 超过规定限量（0.0004%）。标准砷 溶液的浓度是多少（μg/ml）？
Ba2+ + SO42-
BaSO4
2、方法：
50ml纳氏比色管 —规定量的供试品+水→40ml+稀盐酸2ml —规定量的标准硫酸钾溶液+水→40ml+稀盐酸
2ml 分别加入25%氯化钡溶液5ml+水→50ml 放置10分钟 黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较。
3、注意事项：
（1）供试品带颜色：内消色法。
葡萄糖中重金属检查：取葡萄糖 4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐 缓冲液（PH3.5）2ml，依法检查 重金属（中国药典），含重金属不 得超过百万分之五，问应取标准铅 溶液多少毫升（每1ml相当于10μg 的Pb）？
磷酸可待因中吗啡检查：取本品0.10g， 加盐酸溶液（9→100）使溶解成5ml， 加亚硝酸钠试液2ml，放置15min， 加氨试液3ml，所显颜色与吗啡溶液 [取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液 （9→100）使溶解成100ml]5.0ml用 同一方法制成对照液比较，不得更深， 问限量为多少？
药物杂质检查—一般杂质检查(药物分析课件)
若供试品有色，也可用内消色法 即倍量法处理。
例：药物中硫酸盐检查时，所用的标 准对照液是
A. 标准氯化钡 B. 标准醋酸铅溶液 C. 标准硝酸银溶液 D. 标准硫酸钾溶液 E. 以上都不对
二、氯化物检查法
（一）原理 对照法
药物：Cl AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
对照：NaCl（c,V） AgNO3 HNO3 AgCl白色浑浊
九、炽灼残渣检查法 检查不含金属的有机药物或挥发性无
机药物中混入的无机杂质(金属氧化物或无 机盐类)。
1. 原理 样品炭化后+ H2SO4湿润→700～800℃ 炽灼至恒重→炽灼残渣（硫酸灰分） 限量一般为0.1%～0.2%
2. 操作方法
样品 炽灼至恒重的坩埚 直火缓缓加热 至全部黑色、无烟雾，放冷 H2SO4 0.5～1ml湿润，直火加热 至H2SO4蒸气除尽 700～800℃高温灼烧 残渣（恒重）
5. 药物中挥发性物质的检测法 A
例2. 干燥失重测定的方法有 A．炽灼（500～600℃）法 B．常压恒温干澡法 C．减压干燥法 D．干燥剂干燥法 E．减压干燥剂干燥法
例3. 干燥失重测定中应注意哪几个方 面
A. 供试品平铺在称量瓶中的厚度一 般不超过5mm
B. 干燥温度一般为105℃ C. 可用干燥剂干燥 D. 主要指水分和挥发性物质 E. 测定时间不超过3小时
A．内消色法 B．外消色法 C．比色法 D．差示比浊法 E．差示可见分光法
例4. 若要进行高锰酸钾中氯化物的检 查，最佳方法是
A. 加入一定量氯仿提取后测定 B. 氧瓶燃烧 C. 倍量法 D. 加入一定量乙醇 E. 以上都不对
例5. 下列哪些条件为药物中氯化物检 查的必要条件
一般杂质检查
按来源可分为2类
一般杂质
二 、 杂
——指在自然界中分布广泛,在多种 药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质.
质 的
特殊杂质
种
——指在该药物的生产或贮存过程
类 中,根据药物的性质、生产方法和工艺条
件,有可能引入的杂质.
第一节 概 述—杂质的来源与种类 第三章
按结构可分为2类
二 无机杂质
、 杂
——Cl-、S2-、CN-、As、重金属.
对氨基苯甲酸
苯胺
引起毒性反应
第一节 概 述—杂质的来源与种类 第三章
二 、
2 贮藏过程中引入
杂
质
来 (1)保管不善或贮存时间过长
源
与 种
(2)包装不当
类
第一节 概 述—杂质的来源与种类 第三章
二
、
杂
在外界条件 水解、氧化、分
质 来 源
药品温 度 、湿 度 、 日气光 、、 微 空生 物聚合、异构化 、 型转化潮、解发、霉
化学试剂——一般分为4个等级〔基准试 剂GR、优级纯或特种试剂(光谱纯、色谱 纯、农药残留检测级)、分析纯AR、化学 纯CP和实验室试剂LR〕
第一节 概 述—药物的纯度要求 第三章
例如：硫酸钡（BaSO4） 试剂规格 对可溶性钡盐不做检查.
检查：氯化物、铁、灼烧失重等 药用规格 如存在可溶性钡盐则导致
c 药物的晶型不同,其理化常数,
二 、
溶解性稳定性、体内的吸收和疗 效也有差异.
杂 质 的
如：驱虫药甲苯咪唑,有A、B、 C三种晶型.
种 类
其中C晶型的驱虫率90%,B晶 型的驱虫率40~60%,A晶型的驱虫
率小于20%.
第一节 概 述—杂质的来源与种类 第三章
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实验三 药物一般杂质检查
一、实验目的
熟悉药物中杂质检查的项目、原理和方法，并能进行检查操作。
二、实验原理
1.氯化物检查法
药物中微量氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色混浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊液比较，以判断药物中氯化物的限量。
↓→++-AgCl Ag Cl
2．硫酸盐检查法
药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡白色混浊液，与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成的混浊比较，以判断药物中硫酸盐的限量。
↓→++-4224BaSO Ba SO
3．重金属检查法
采用《中华人民共和国药典》（以下简称“中国药典”）（2005年版二部）收载的重金属检查的第一法。
硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液）溶液中水解，产生硫化氢，与微量重金属离子作用，生成黄色到棕黑色的硫化物均匀昏悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，可判定药物中中重金属的限量。
S H CONH CH O H CSNH CH 223223+→+
↓→++PbS S H Pb 22
4．砷盐检查法
采用古蔡氏法检查砷盐。
利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中的微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，可判定药物中砷盐的限量，其反应如下：
O H Zn AsH H Zn AsO 223333393++↑→++++-
223)(22HgBr
AsH HBr HgBr AsH +→+黄色 323)(33HgBr As HBr HgBr AsH +→+棕色
三、实验方法
1．酸碱度 取本品10ml ，加甲基红指示剂2滴，不得显蓝色；另取10ml ，加溴麝香草酚蓝指示剂5滴，不得显蓝色。
2．氯化物、硫酸盐与钙盐 取本品，分置三支试管中，每管各50ml 。
第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml ，第二管中加氯化钡试液2ml ，第三管中加草酸铵试液2ml ，均不
得发生混浊。
3．重金属取本品40ml，加醋酸盐缓冲液（Ph3.5）2ml与硫代乙酰胺试液2ml,摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液2.0ml加水38ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.00005%）。
4．砷盐的检查
（1）仪器装置：检查前，先在两支检砷器的导气管中装入醋酸铅棉花约60mg（装管高度为60~80mm），再在有机玻璃旋塞的平面上放一片溴化汞试纸（试纸的大小以能覆盖孔径又不露出玻璃平面外为宜），盖上旋塞盖并旋紧。
（2）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml置锥形瓶中，依次加入盐酸5ml与水21ml、碘化钾试液5 ml及酸性氯化亚锡试液5滴，混合后在室温放置10分钟，再加入锌粒2g，迅速将预先装妥醋酸铅棉花与溴化汞试纸并带瓶塞的部分塞紧在锥形瓶口上，保持反应温度在25~40℃，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得标准砷斑。
（3）供试品砷斑的制备：称取碳酸氢钠1.00 g置锥形瓶中，加水23 ml溶解，小心加入盐酸5 ml后，依次加入碘化钾试液5ml及酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加入锌粒2 g，迅速将预先装妥醋酸铅棉花与溴化汞试纸并带瓶塞的部分塞紧在锥形瓶口上，在与制备标准砷斑相同的温度下反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得供试品砷斑。
（4）比色：比较标准砷斑与供试品砷斑的颜色，供试品砷斑的颜色不得比标准砷斑的颜色深（0.0002%）。
四、注意事项
1．比浊或比色试验所用的纳氏比色管的规格必须一致。
比色、比浊前应使比色管内试剂充分混匀。
比色方法是将两管同位置于白色背景上，从侧面或自上而下观察；比浊方法是将两管同置于黑色背景上，从上向下垂直观察。
所用比色管刻度高低差异不应超过2mm，使用过的比色管应及时清洗，注意不能用毛刷刷洗，可用铬酸洗液浸泡。
2．检查氯化物、硫酸盐、钙盐时，观察是否有轻度混浊，可以水作空白对照进行观察。
3．硫代乙酰胺试液不稳定，应新鲜配制。
药典规定应将配制的4%硫代乙酰胺水溶液置冰箱中保存，并于临用前每1.0ml硫代乙酰胺溶液加混合液（1mol/L）氢氧化钠溶液15ml，水5ml和甘油20ml制成），5.0ml，再置水浴加热20秒钟，冷后，立即使用。
4．（1）醋酸铅棉花不能塞得太紧，否则砷化氢气体上不来，影响检查；也不能塞得太松，否则不能除去全部硫化氢气体。
（2）标准砷斑和供试品砷斑在制作时，从“加碘化钾试液5m l……”起，就应该一起平行操作。
应在同一温度下45分钟后，取出溴化汞试纸。
（3）检砷装置应严密不漏气。
（4）应该严格按照操作顺序进行，不得随意改变加入试剂的顺序。
五、思考题
1．检查酸碱度时，为什么要用甲基红指示液及溴麝香草酚蓝指示液？
2．检查氯化物、硫酸盐、及重金属杂质各依据什么原理？其检查方法与常用的限度检查法有何不同？哪种更严格？
3．检查氯化物、硫酸盐、钙盐及重金属时，应在什么衬底上进行？
4．砷盐检查中加入碘化钾试液与酸性氯化亚锡试液后，须放置10分钟，为什么？。