实验三 药物一般杂质检查

实验三 药物一般杂质检查

一、实验目的

熟悉药物中杂质检查的项目、原理和方法，并能进行检查操作。

二、实验原理

1.氯化物检查法

药物中微量氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色混浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊液比较，以判断药物中氯化物的限量。

↓→++-AgCl Ag Cl

2．硫酸盐检查法

药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡白色混浊液，与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成的混浊比较，以判断药物中硫酸盐的限量。

↓→++-4224BaSO Ba SO

3．重金属检查法

采用《中华人民共和国药典》（以下简称“中国药典”）（2005年版二部）收载的重金属检查的第一法。硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液）溶液中水解，产生硫化氢，与微量重金属离子作用，生成黄色到棕黑色的硫化物均匀昏悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，可判定药物中中重金属的限量。

S H CONH CH O H CSNH CH 223223+→+

↓→++PbS S H Pb 22

4．砷盐检查法

采用古蔡氏法检查砷盐。利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中的微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，可判定药物中砷盐的限量，其反应如下：

O H Zn AsH H Zn AsO 223333393++↑→++++-

223)(22HgBr

AsH HBr HgBr AsH +→+黄色 323)(33HgBr As HBr HgBr AsH +→+棕色

三、实验方法

1．酸碱度 取本品10ml ，加甲基红指示剂2滴，不得显蓝色；另取10ml ，加溴麝香草酚蓝指示剂5滴，不得显蓝色。

2．氯化物、硫酸盐与钙盐 取本品，分置三支试管中，每管各50ml 。第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml ，第二管中加氯化钡试液2ml ，第三管中加草酸铵试液2ml ，均不

得发生混浊。

3．重金属取本品40ml，加醋酸盐缓冲液（Ph3.5）2ml与硫代乙酰胺试液2ml,摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液2.0ml加水38ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.00005%）。

4．砷盐的检查

（1）仪器装置：检查前，先在两支检砷器的导气管中装入醋酸铅棉花约60mg（装管高度为60~80mm），再在有机玻璃旋塞的平面上放一片溴化汞试纸（试纸的大小以能覆盖孔径又不露出玻璃平面外为宜），盖上旋塞盖并旋紧。

（2）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml置锥形瓶中，依次加入盐酸5ml与水21ml、碘化钾试液5 ml及酸性氯化亚锡试液5滴，混合后在室温放置10分钟，再加入锌粒2g，迅速将预先装妥醋酸铅棉花与溴化汞试纸并带瓶塞的部分塞紧在锥形瓶口上，保持反应温度在25~40℃，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得标准砷斑。

（3）供试品砷斑的制备：称取碳酸氢钠1.00 g置锥形瓶中，加水23 ml溶解，小心加入盐酸5 ml后，依次加入碘化钾试液5ml及酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加入锌粒2 g，迅速将预先装妥醋酸铅棉花与溴化汞试纸并带瓶塞的部分塞紧在锥形瓶口上，在与制备标准砷斑相同的温度下反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得供试品砷斑。

（4）比色：比较标准砷斑与供试品砷斑的颜色，供试品砷斑的颜色不得比标准砷斑的颜色深（0.0002%）。

四、注意事项

1．比浊或比色试验所用的纳氏比色管的规格必须一致。比色、比浊前应使比色管内试剂充分混匀。比色方法是将两管同位置于白色背景上，从侧面或自上而下观察；比浊方法是将两管同置于黑色背景上，从上向下垂直观察。所用比色管刻度高低差异不应超过2mm，使用过的比色管应及时清洗，注意不能用毛刷刷洗，可用铬酸洗液浸泡。

2．检查氯化物、硫酸盐、钙盐时，观察是否有轻度混浊，可以水作空白对照进行观察。

3．硫代乙酰胺试液不稳定，应新鲜配制。药典规定应将配制的4%硫代乙酰胺水溶液置冰箱中保存，并于临用前每1.0ml硫代乙酰胺溶液加混合液（1mol/L）氢氧化钠溶液15ml，水5ml和甘油20ml制成），5.0ml，再置水浴加热20秒钟，冷后，立即使用。

4．（1）醋酸铅棉花不能塞得太紧，否则砷化氢气体上不来，影响检查；也不能塞得太松，否则不能除去全部硫化氢气体。（2）标准砷斑和供试品砷斑在制作时，从“加碘化钾试液5m l……”起，就应该一起平行操作。应在同一温度下45分钟后，取出溴化汞试纸。（3）检砷装置应严密不漏气。（4）应该严格按照操作顺序进行，不得随意改变加入试剂的顺序。

五、思考题

1．检查酸碱度时，为什么要用甲基红指示液及溴麝香草酚蓝指示液？

2．检查氯化物、硫酸盐、及重金属杂质各依据什么原理？其检查方法与常用的限度检查法有何不同？哪种更严格？

3．检查氯化物、硫酸盐、钙盐及重金属时，应在什么衬底上进行？

4．砷盐检查中加入碘化钾试液与酸性氯化亚锡试液后，须放置10分钟，为什么？