关格片中盐酸小檗碱的含量测定

关格片中盐酸小檗碱的含量测定

孙佳石,董金香*,邱智东

(长春中医药大学药学院,吉林长春130117)

摘 要:目的提高关格片的质量标准。方法应用高效液相色谱法对黄连中有效成分盐酸小檗碱进行了含量测定。结果盐酸小檗碱在0 1998~1 998mg 范围内呈良好线性关系,回归方程为Y =1843459 405 X =45289 6762,r =0 9996。结论含量测定方法简便、灵敏、准确、专属性强。可作为关格片中盐酸小檗碱含量测定的方法。

关键词:关格片;盐酸小檗碱;高效液相色谱法

中图分类号:R285 5 文献标志码:A 文章编号:1007-4813(2009)02-0180-02 作者简介:孙佳石(1982-),女,硕士研究生。研究方向:中药学。*通讯作者:董金香,女,副教授 Tel:0431 ********

关格片是由苍术、砂仁、冬虫夏草、黄连、石韦等9味中药组成的复方制剂。具有降浊祛湿,温补脾肾的功效。用于治疗慢性肾功能衰竭,属于湿浊型者。症见肢体困重,食少纳呆,恶心呕吐,倦怠无力,腰酸膝软,脘腹胀满,口中黏腻,腰部冷痛,大便不实,舌苔厚腻,脉象沉细[1]

。本品处方中主药黄连,其有效成分盐酸小檗碱含量的高效液相测定方法明确,且选定条件下精密度高、重现性好,所以选择以黄连中的有效成分盐酸小檗碱为含量测定指标是合理的。1 仪器与试药

日本岛津 高效液相色谱仪,SPD 10Avp,浙大N 2000色谱数据工作站。盐酸小檗碱化学对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号:110805-200306,规格:供含量测定)。所用试剂均为色谱纯和分析纯。

2 蛇床子素含量测定

2 1 对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品5mg,置于50mL 容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

2 2 供试品溶液的制备[2]

取本品10片,除去包衣,研细,取约0 6g,精密称定,置125mL 磨口具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 盐酸(100 1)溶液50mL,称定重量,超声(功率150W,频率40kHz)处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇 盐酸(100 1)溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。取续滤液,用0 45 m 微孔滤膜滤过,即得。

2 3 阴性对照品溶液的制备 取不含黄连的处方,按制备工艺制成缺黄连的阴性对照品,再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

2 4 色谱条件[3] 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150mm 4 6mm)的色谱柱;流动相:乙腈

-0 05mol/mL 磷酸二氢钠溶液(磷酸试液调节pH 值至3 0)(27:73)为流动相检测波长:346nm;流速:0 8mL/min;柱温:25!;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。

2 5 线性关系考察 精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液2,5,10,15,20 L,分别注入液相色谱仪,以进样量( L)为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,并绘制标准曲线,Y=1843459 405X=45289 6762,r=0 9996,盐酸小檗碱线性范围为0 1998~1 998mg 。2 6 精密度试验 精密吸取对照品溶液盐酸小檗碱10 L,注入液相色谱仪,连续进样5次,依法测定,结果RSD 分别为0 70%,表明仪器的精密度良好。2 7 稳定性试验 取同一供试品溶液,进样10 L,分别在0,1,4,8,12h 测定,结果所得5个数据的RSD 为2 37%,表明盐酸小檗碱在供试品溶液中12h 内稳定。2 8 重现性试验 取同一批样品共5份,按供试品溶液项下制备,依法独立测定,结果RSD 分别为1 17%,表明该方法重现性良好。

2 9 回收率试验 取同一批样品(盐酸小檗碱6 66428mg/g),共5份,分别精密加入对照品盐酸小檗碱适量,按供试品溶液的制备方法制成检测溶液,并依法测定,结果平均回收率为97 62%,RSD 为0 84%,表明方法准确性较好,方法可行。

2 10 样品测定 取3批样品,每批2份,测定样品中盐酸小檗碱含量,结果3批样品中盐酸小檗碱的含量(mg/g)分别为6 3889,6 7202,7 41875。

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例,显效12例,好转6例,无效5例,总有效率91 93%。

1 5 中西医结合治疗 游小苇等[16]用半夏泻心汤合法莫替丁预防消化性溃疡复发。结果2年内治疗组总复发率为7 9%,低于单纯西药组25 0%。吕梦华等[17]运用中成药温胃舒结合三联疗法治疗脾胃虚寒型消化性溃疡合并HP阳性患者30例,并与单纯西药治疗的28例作对照。结果治疗组主要症状缓解率、溃疡愈合率均显著高于对照组(P<0 05)。薛红记[18]采用中西医结合治疗56例,中药基本方:党参10g,白术10g,茯苓15g,砂仁10g,甘草3g,白及10g,乌贼骨30g,煅瓦楞子30g,黄连6g,蒲公英15g。虚寒者加良姜、香附;气滞者加柴胡、枳壳、醋延胡索;夹热者黄连加量,并加郁金;阴虚者加麦冬、沙参、百合。每日1剂,饭前30min温服。西药:雷尼替丁150mg口服,2次/d,甲硝唑0 2g(只服2周)口服,每日3次。4周为1疗程,结果痊愈48例,显效4例,有效3例,无效1例,总有效率98 20%。姚云卿[19]采用中西药结合治疗110例,西药:西米替丁0 2,丙谷胺0 4,每日3次,口服;中药:脘腹蠲痛散,每次10g,每日3次吞服;30d为1个疗程,3个疗程后统计疗效。结果治愈100例,显效4例,有效4例,无效2例,总有效率98 2%。

2 结语

近年来临床治疗消化性溃疡报道较多,治法各异,都具有较好的疗效,前景广阔。但还存在不足之处,西药治疗有很多不良反应,中医药治疗缺少标准统一的规范治疗方案,并且疗程长,因而需要从中西医结合疗法上深入研究,以进一步提高临床疗效。

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(收稿日期:2008-11-11)

(上接第180页)

3 讨论

根据盐酸小檗碱的紫外吸收图及空白实验,选择测定波长为346nm。含量测定在选择流动相的过程中,曾选择乙腈-0 05mol/mL(磷酸二氢钠溶液(磷酸试液调节pH值至3 0)(30 70)、乙腈-0 05mol/ mL磷酸二氢钠溶液(磷酸试液调节pH值至3 0) (28 72)为流动相,但分离度均不佳;在上述流动相基础上,以乙腈-0 05mol/m L磷酸二氢钠溶液(磷酸试液调节pH值至3 0)(27:73)为流动相,结果供试品分离效果较好,盐酸小檗碱峰与其它峰达到了良好的分离度(R>1 5)。

参考文献:

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