药物生物测定技术

2
3 4
热原检查 内毒素检查
7 抗生素微生物检定
微生物限度检查
致病菌 无菌制剂
细菌、霉菌、酵母菌 非无菌制剂 活螨
污染药物的常见微生物
沙门氏菌
大肠杆菌
金色葡萄球菌
枯草杆菌
白色念珠菌
黑曲霉菌
污染药物的常见微生物
黑曲霉菌
破伤风杆菌
破伤风杆菌
铜绿假单胞菌
螨虫
微生物限度检查——报告书格式
以1g、1ml，膜剂以 10cm2为单位； CFU为菌落数，由一 个或多个菌细胞形成; 大于100，取2位有效 数字
降压物质检查法
实验动物：猫（可为市售家猫），1只
测定方法：组胺对照品比较法
热原及内毒素检查法
热原：通常是指能够致热的微生物的尸体及代谢产 物，主要是细菌的内毒素。 细菌内毒素：主要存在于革兰氏阴性细菌的细胞壁 内，菌体裂解时释放出来。是磷脂，脂多糖和蛋白 质组成的复合物，复合物中的脂多糖是内毒素的主 要成分，具有特别强的热原活性。
细菌数的计数规则
稀释级：1:10、1:100、1:1000
适宜菌落数：30-300
1、只有1个稀释级符合 2、各稀释级均小于30个
Leabharlann Baidu
3、均无菌生长
4、2个稀释级符合上述规定时，视情况而定
课堂活动：微生物计数
某药品的细菌总数检查中，当1:10稀释液的细菌菌落数为 2760，1:100稀释液的细菌菌落数为295，1:1000稀释液 的细菌菌落数为46，则应报告细菌总数为( ) A、29000 B、46000 C、38000 D、27000 E、34000 某片剂的霉菌总数检查中，当1:10稀释液的霉菌菌落数为 24，1:100稀释液的霉菌菌落数为19，1:1000稀释液的霉 菌菌落数为12，则应报告霉菌总数为( ) A、240 B、1800 C、12000 D、6900 E、1000
热原及内毒素检查法
热原检查：家兔法。初3复5 细菌内毒素：鲎试剂法。
测定方法——细菌、真菌的测定
计量单位：每g或每ml含细菌数 测定方法：平皿法、薄膜过滤法 培养基：细菌——营养琼脂；真菌——玫瑰红钠琼脂 实验条件：细菌——30-35℃，48h
真菌——25-28℃，72h
检查对象：活菌
阳性菌种：菌种传代次数不得超过5代
检查过程
取样
制备供试品液 接种
培养
计数 报告结果
控制菌的检查
大肠埃希菌 大肠菌群
沙门氏菌
铜绿假单孢菌
金黄色葡萄球菌
自学
降压物质检查法
组胺、缓激肽一类的物质具有血管扩张作用，超过一 定剂量会使血压快速降低，对人体产生危害。 来自动物或微生物发酵提取物及生产过程中有可 能混入此类物质的原料，应建立降压物质检查项， 如抗生素、氨基酸、多肽等。 来自动植物、微生物发酵提取物及生产过程中有 可能混入组胺类或类组胺类物质的注射剂(静脉）， 应建立降压物质检查项。如抗生素、中药注射剂、 氨基酸、多肽类等。
物的生物测定技术
引入——辛弗事件
官方报道的原因：未按批准的工艺参数灭菌!
概 述
生物测定是以生物学方法和药理作用为基础，以生物 统计为工具，运用特定的实验设计与对比检定等方法 来进行各种反应、试验、检查，最终评定药品有效性、 安全性的一项实验技术 1
微生物限度检查
无菌检查
5 6
异常毒性检查 降压物质检查