实验九鸡白痢全血平板凝集实验
鸡白痢检验实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过全血平板凝集试验检测鸡群中是否存在鸡白痢病原体,为鸡白痢的防控提供科学依据。
二、实验材料1. 实验试剂:- 鸡白痢全血凝集反应抗原- 鸡白痢阳性血清- 生理盐水- 洁净玻璃板- 蜡笔- 7#或9#注射针头- 75%酒精棉球- 移液器2. 实验设备:- 恒温培养箱- 显微镜- 移液器- 吸管三、实验方法1. 样本采集:采集疑似鸡白痢病鸡的全血样本,分离血清。
2. 制备抗原:将鸡白痢全血凝集反应抗原溶解于生理盐水中,配制成一定浓度的抗原溶液。
3. 凝集试验:- 将洁净玻璃板分成三格,用蜡笔标记。
- 在第一格中滴加待测血清,第二格中滴加鸡白痢阳性血清作为对照,第三格中滴加生理盐水作为空白对照。
- 将抗原溶液滴加到待测血清、阳性血清和生理盐水中,轻轻摇匀。
- 观察并记录凝集现象。
4. 结果判断:- 若待测血清中出现明显的凝集现象,且与阳性血清的凝集现象一致,则判定为鸡白痢阳性。
- 若待测血清中没有出现凝集现象,则判定为鸡白痢阴性。
四、实验结果本次实验共检测鸡群中50份血清样本,其中阳性样本10份,阴性样本40份。
五、实验讨论1. 鸡白痢是一种常见的鸡传染性疾病,对养鸡业造成严重损失。
本实验通过全血平板凝集试验检测鸡群中鸡白痢病原体,为鸡白痢的防控提供了科学依据。
2. 本次实验结果显示,鸡群中鸡白痢阳性率为20%,说明鸡白痢在鸡群中存在一定的流行趋势。
因此,加强对鸡白痢的防控措施至关重要。
3. 针对鸡白痢的防控,应采取以下措施:- 加强饲养管理,保持鸡舍清洁卫生,降低鸡群密度。
- 定期进行鸡白痢检测,及时发现并淘汰阳性鸡。
- 加强疫苗接种,提高鸡群免疫力。
- 加强消毒工作,切断病原传播途径。
六、实验结论本次实验通过全血平板凝集试验成功检测出鸡群中鸡白痢病原体,为鸡白痢的防控提供了科学依据。
在今后的工作中,应继续加强鸡白痢的检测和防控,确保养鸡业的健康发展。
动物传染病学(彭大新)实验一鸡白痢的检疫
实验一鸡白痢的检疫(一)实验目的熟悉和掌握鸡白痢的血清学检疫方法。
(二)实验原理快速全血平板凝集反应(三)实验准备1.抗原:鸡白痢全血凝集反应抗原,由农业部中国兽药监察所购得,或其他来源的合格产品。
抗原为福尔马林灭活的细菌悬液,每毫升含菌100亿。
2.用具:洁净玻璃板、干净纱布、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、移液器、手电筒。
(四)实验步骤1.先将抗原瓶充分摇匀,用移液器吸取抗原20 μL,垂直滴于玻片上;2.用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,以移液器吸取血液一满环(约0.02m1)混入抗原内;3.随即搅拌均匀,并使散开至直径约2cm为度;4.用手电筒反照玻璃板,仔细观察并判定。
(五)结果分析1.抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。
2.2分钟以内不出现凝集,或出现均匀一致的极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。
3.在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者,判为可疑反应。
(六)注意事项1.抗原应在2~15℃冷暗处保存,从杀菌之日算起有效期6个月。
2.本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感度较差。
3.本试验应在20℃以上室温中进行。
4.手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。
5.每次使用金属管可以用酒精棉球擦干、消毒。
6.使用酒精灯要特别注意安全:防鸡翅掀翻酒精灯或防工作服碰到火焰。
(七)思考题1.试比较鸡白痢检疫的全血平板凝集反应与血清平板凝集反应的异同点。
2.我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性率比较高,试分析其原因和拟定防制对策。
实验二巴氏杆菌病的实验室诊断(一)实验目的初步掌握巴氏杆菌病的微生物学诊断步骤和方法。
了解巴氏杆菌病的病理变化。
(二)实验准备染色液:美兰染色液、瑞氏染色液、革兰氏染色液(草酸铵结晶紫、革兰氏碘液、95%酒精、沙黄水溶液)、用具:搪瓷盘、碘酊棉、75%酒精棉、组织镊、手术刀(带柄)、普通剪刀、塑料洗瓶、纱布、酒精灯、载玻片、吸水纸(载玻片大小)、铂耳、显微镜、擦镜纸、染色废液缸、甲苯、镜油、血培养基平板、巴氏杆菌病死鸡(三)实验步骤1、分离培养(划线培养)①无菌解剖病死鸡暴露胸腹腔,露出其心、肝、肺等。
鸡白痢全血平板凝集试验操作中应注意的问题
鸡白痢全血平板凝集试验操作中应注意的问
题
鸡白痢全血平板凝集试验是一种广泛应用于兽医诊断实验室的方法,用于检测
鸡源性白痢菌的存在。
然而,在进行此项试验时,有一些关键的注意事项需要遵守,以确保准确可靠的结果。
首先,操作人员应始终遵循良好的实验室操作规范,包括使用个人防护装备
(如实验手套、口罩和实验室大衣),确保实验台面的清洁,并定期消毒试验器具。
其次,确保每个步骤的操作准确无误。
在进行鸡白痢全血平板凝集试验时,需
要准备相应的试剂和培养基。
试剂的制备应按照规定的配方和浓度进行,以保证试验结果的可比性。
培养基的制备也需要遵循一定的标准,以确保培养基的质量和可靠性。
在取样过程中,要确保样品的新鲜性和卫生性,以排除外界因素的干扰。
在取
样时,尽量避免任何污染并且确保取得足够的样品量以进行后续实验。
实验的温度和时间也是需要注意的要点。
应根据试验要求,将试验物质置于恰
当的温度条件下进行,以保证反应的进行和结果的可靠性。
最后,结果的读取和判断需要细心和准确。
进行鸡白痢全血平板凝集试验时,
观察样品在试剂加入后的凝集情况,根据凝集的程度判断阳性或阴性结果。
这一步骤需要准确的观察和判断,避免主观干扰导致结果的错误。
总之,鸡白痢全血平板凝集试验是一项重要的实验室检测方法,但在操作过程
中需要注意细节,确保每一步骤的准确可靠。
只有严格遵守操作规程,并注意到这些问题,才能保证试验结果的准确性和可靠性,为兽医诊断提供有力的支持。
血清和全血平板凝集方法检测鸡白痢抗体的差异比较
家禽科曇2020.1血情和全血年祕凝集方法检测鸠白痢抗体的差异比載刘洋1,潘海萍2,陈轮锋2,严丽端2,严专强1,王占新1,鲁俊鹏1(1.温氏食晶集团股份有限公司,广东新兴527439;2.广东温氏南方家禽育种有限公司,广东新兴527439)中图分类号:S858.312.4文献标识码:B鸡白痢沙门菌可引起雏鸡大批量死亡,产蛋鸡产蛋率下降,成年鸡多呈隐性感染,可长期带毒和排毒。
鸡白痢沙门氏菌为细胞内寄生菌,利用药物治疗只能临床治愈而不能根除,且药物预防和治疗容易产生耐药性,给家禽养殖业带来严重的经济损失⑴,被中国农业部列为二类动物疫病。
《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)》中明确要求到2020年全国所有种鸡场沙门氏菌病达到净化标准。
平板凝集试验以其方便、快速、实用等特点成为国内外鸡白痢抗体检测最常用的诊断方法之一,检测对象主要包括全血、血清等。
目前我国大部分养殖场都采用平板凝集的方法开展鸡白痢沙门氏菌的净化工作。
1材料与方法1.1主要试剂和仪器鸡白痢-鸡伤寒多价染色抗原、鸡白痢-鸡伤寒阳性血清和阴性血清均购自中国兽医药品监察所。
1.2试验方法将中海的凝集抗原在室温回温30min,采集100只(大部分为即将淘汰的阳性鸡) 20周龄的竹丝鸡进行平板凝集试验测定鸡白痢抗体,每份样品均按照4种不同方法进行检测,比较各检测方法检测结果的差异,具体操作按照试剂说明书进行,见表1。
结果判定以阴、阳性对照血清成立时,在2min内出现肉眼可见的75%的片状收稿日期:2019-12-20文章编号.1673-1085(2020)1-0052-02明显凝集颗粒判为强阳,50%凝集颗粒判为弱阳,25%小凝集颗粒则判为疑似。
表1样品的不同检测方法方法内容方法1全血:抗原=1:1方法2全血:抗原二2:1方法3全血:抗原=3:1方法4血清:抗原=1:12结果与分析2.1不同检测方法的阳性率全血平板凝集试验中,将全血与中海抗原分别按照1:1、2:1、3:1混合进行反应,血清平板凝集试验则按照血清与抗原1:1反应,试验的操作与结果判断均按说明书进行。
实训16鸡白痢全血平板凝集实训
鸡 白 痢 全 血 平 板 凝 集 反 应 阳 性
四、实训作业
如何对种鸡场的鸡白痢进行检测?写出操作 步骤及注意事项。
2.检测: 在玻璃板上,滴加抗原液1滴(约 0.05ml),用针头刺破鸡翅静脉,待血液 流出后,立即用灭菌取血环取2满环血(约 0.05ml)或用移液器吸取0.05ml血液放入 抗原液中,用该取血环或取血管混合均匀 ,并摊开至直径约2cm为度,轻轻摇动反应 板,仔细观察。
3.结果判定: 抗原和血液混合后,在2min 内判定结果。发生50%(++)以上凝集者 为阳性,不发生凝集者为阴性,介于上述 两者之间为可疑。
实训16 鸡白痢全血平板凝集
一、实训目的
• 1. 掌握鸡白痢全血平板凝集实验的操作方法 及结果判断 。 • 2.掌握鸡白痢全血平板凝集实验结果判断 。
二、实训内容
• 1.鸡白痢全血平板凝集实验的操作Байду номын сангаас• 2. 鸡白痢全血平板凝集实验结果判断
三、实训技术操作
1.对照试验:用滴管吸取抗原液,在玻璃板 上划分三个方格,各垂直滴抗原液1滴(相 当于0.05ml),分别滴加强阳性血清、弱 阳性血液及阴性血清各1滴(0.05ml),混 合均匀,在2min内,强阳性血清应出现 100%凝集(++++);弱阳性血清出现 50%凝集(++);阴性血清不凝集(- )。
综合实训五种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫.
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
知识拓展-种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体感染的主要危害
鸡白痢:主要侵害雏鸡,呈急性败 血症,大批死亡或耐过成为带菌鸡。
鸡白痢:成年鸡感染呈慢性或 隐性经过
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
二、仪器材料
胶头滴管、玻板、牙签、鸡白痢全血平板凝集抗 原、鸡白痢阳性血清、鸡白痢阴性血清、鸡败血 支原体平板凝集抗原,鸡败血支原体标准阳性血 清、生理盐水、鸡。
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
三、方法与步骤
• 全血平板凝集试验操作
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
3. 随即以针头刺破被检鸡冠或翼下静脉,用滴管采集新鲜 血液。
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
4.在抗原滴旁边滴加等量的一滴新鲜血液,立即用牙签将 抗原与血液混匀。不同检样不能用同一牙签混匀。
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
• 结果分析
– 阳性反应(+):代表待检鸡血液中有鸡白痢抗体,一般 认为鸡感染了鸡白痢沙门氏菌,种鸡应淘汰。
– 阴性反应(-):代表待检鸡血液中无鸡白痢抗体,即鸡 未感染鸡白痢沙门氏菌。
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
项目九 一周综合实训
综合实训五 种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
项目九 一周综合实训--种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
鸡白痢的检疫
实验四 鸡白痢的检疫
刘金彪验目的 实验准备 实验步骤 结果分析 注意事项 思考题
(一)实验目的
公鸡,幼龄鸡敏感度较差。
●本试验应在20℃以上室温中进行。
●用手电筒反照可以不分阴晴天或
白昼;也不需要使用酒精灯而确保 了自身和鸡舍的安全。
●使用结束后要用酒精棉球将玻璃
板消毒擦净 。
(六)思考题
●试比较鸡白痢检疫的全血平板凝
集反应与血清平板凝集反应的异同 点。
●我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性
明显颗粒状或块状凝集者为阳性反 应;
●
2min内不出现凝集,或出现均匀 一致的极微小颗粒,或在边缘处由 于临干前出现絮状者判为阴性反应。
●在上述情况之外而不易判断为阳
性或阴性者,判为可疑反应。
(五)注意事项
●抗原应在2~15℃冷暗处保存,从
杀菌之日算起有效期6个月。
●本抗原适用于产卵母鸡及1年以上
率比较高,试分析其原因和拟定防 制对策。
●熟悉和掌握鸡白痢的血清学检
疫方法。
(二)实验准备
●
抗原
●鸡白痢全血凝集反应抗原,由农 业部中国兽药监察所购得,或其他 来源的合格产品。 ●抗原为福尔马林灭活的细菌悬 液,每毫升含菌100亿。
●用具
●洁净玻璃板、干净纱布、7#或9# 注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、 移液器、手电筒。
(三)实验步骤
●先将抗原瓶充分摇匀,用移液器 吸取抗原20 μL,垂直滴于玻片 上; ●用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠 尖,以移液器吸取鲜新血液20 μL 混入抗原内;
鸡白痢全血平板凝集试验课件(共13张PPT)《猪鸡生产》
⑷试验用的胶头滴管不能交叉 使用
⑸试验完后应迅速给鸡止血, 减少失血,再给鸡饮电解多维 以减少迎接。
蛋种鸡饲养管理
鸡白痢检测
种鸡技术员岗位要求:严谨认真 的从业态度、具有责任心、耐心、 细心的职业素养
5 在室温20℃的静置2分钟后观察
6、结果判断
和阳性和阴性组对照,出现明显颗粒凝集 或块状凝集的均为阳性,未出现则为阴性
7、注意事项
(1)鸡白痢标准抗原应在215℃冷暗处保存,注意检查保 质期
⑵鸡白痢抗原适用于产蛋母鸡 及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感 度较差 ⑶本实验应在20℃以上室温中 进行。冬季检疫室内温度达不 到20℃时,先将载玻片在酒精 灯加热达30℃左右。
鸡白痢全血平板凝集试验目录ca Nhomakorabeaalog
1 方法 2 原理 3 应用 4 器械准备 5 试验操作 6 结果判断 7 注意事项
1、方法
鸡全血平板凝集试验。
2、原理
颗粒性抗原与相应抗 体结合后,在有电解 质存在时,相互凝集 成肉眼可见的凝集小 块。
3、应用
种鸡场鸡白痢的检测。
4、器材准备
鸡白痢标准抗原 鸡白痢阳性血清 载玻片、微量移液器 注射器、生理盐水 无菌手套、酒精灯 接种环镊子、碘伏棉球 干棉球、火柴 擦拭纸、成年产蛋鸡
5、操作流程
1 检查阳性血清的保质期和密封状态,并将阳性血清用 生理盐水进行稀释
5、操作流程
2
检查抗原的保质期和密封状态,在载
玻片上分别滴上3滴抗原
5、操作流程
3
助手将成年鸡侧卧保定,刺破翅静脉后
用火焰消毒后的接种环采取已满环
5、操作流程
4 分别用阳性血清、鸡全血、 生理盐水分别和抗原1:1混 合,摊成直径1cm的圆
实验一 鸡白痢的检疫
实验一鸡白痢的检疫(一)实验目的熟悉和掌握鸡白痢的血清学检疫方法。
(二)实验原理快速全血平板凝集反应(三)实验准备1.抗原:鸡白痢全血凝集反应抗原,由农业部中国兽药监察所购得,或其他来源的合格产品。
抗原为福尔马林灭活的细菌悬液,每毫升含菌100亿。
2.用具:洁净玻璃板、干净纱布、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、移液器、手电筒。
(四)实验步骤1.先将抗原瓶充分摇匀,用移液器吸取抗原20 μL,垂直滴于玻片上;2.用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,以移液器吸取血液一满环(约0.02m1)混入抗原内;3.随即搅拌均匀,并使散开至直径约2cm为度;4.用手电筒反照玻璃板,仔细观察并判定。
(五)结果分析1.抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。
2.2分钟以内不出现凝集,或出现均匀一致的极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。
3.在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者,判为可疑反应。
(六)注意事项1.抗原应在2~15℃冷暗处保存,从杀菌之日算起有效期6个月。
2.本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感度较差。
3.本试验应在20℃以上室温中进行。
4.手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。
5.每次使用金属管可以用酒精棉球擦干、消毒。
6.使用酒精灯要特别注意安全:防鸡翅掀翻酒精灯或防工作服碰到火焰。
(七)思考题1.试比较鸡白痢检疫的全血平板凝集反应与血清平板凝集反应的异同点。
2.我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性率比较高,试分析其原因和拟定防制对策。
鸡白痢全血平板凝集实验
实验所需材料
采血器具
如注射器、针头、试管等,用 于采集鸡血液。
移液管
用于准确量取抗原和血液。
鸡白痢沙门氏菌抗原
用于与鸡血液中的抗体进行特 异性结合。
玻璃平板
用于涂抹抗原和滴加血液。
显微镜
用于观察凝集现象。
02
实验步骤
准备试剂和器材
鸡白痢抗原:用于检测鸡血 清中鸡白痢抗体的存在。
稀释液:用于稀释鸡血清。
01
观察血清和抗原混合后的反应 情况,如果出现明显的颗粒状 凝集物,说明血清中含有鸡白 痢抗体,实验结果为阳性。
02
如果血清和抗原混合后没有出 现凝集现象,说明血清中没有 鸡白痢抗体,实验结果为阴性 。
03
记录实验结果,并进行分析和 处理。
03
实验结果分析
阴性结果的判定标准
红细胞完全沉于管底,形成小圆点,周围无颗 粒物或薄膜,也无凝集块。
对实验的反思和改进建议
实验操作
在实验过程中,要严格控制操作步骤, 确保抗原与抗体的比例合适,避免出 现假阳性或假阴性结果。
抗原纯度
提高抗原纯度可以降低假阳性率,提 高实验的准确性。
试剂质量
选用质量可靠的试剂,避免使用过期 或质量不稳定的试剂。
样本处理
在采集和处理样本时要保证无菌操作, 避免污染。同时要保证采血量适中, 避免影响实验结果。
04
实验注意事项
安全注意事项
1
实验操作应在生物安全柜中进行,确保空气流通, 防止交叉污染。,如实验服、 口罩、手套等。
3
实验过程中产生的废弃物应按照生物废弃物处理 规定进行处理。
实验操作注意事项
01 实验前应确保所有试剂和器材都已准备好,并按 照标准操作程序进行操作。
用血清平板凝集试验监测鸡白痢沙门氏菌感染
各加I 。 m l 42 第1 . 管加被检血清。2 , . m 与石炭酸生理盐水混匀( L 使成1 1 稀释)取1 移至第2 混匀 :0 。 m L 管, 后连续倍比 稀释至第 4 最后从第 4 管, 管内吸出 1 m L弃去。 如此各管血清最后稀释依次为 I , : 2 0
1:4 , ,8 , 0 1 1:1 0 1:3 0 0 6, 2
46 结果观察 . 国家质量技术监督局 19 一 1 1 批准 99 1 - 0 20 一 4 O 实施 00 0 一 1
GB T 7 9 . -1 9 / 1 99 8 99
461 从 4 -8 .. 0 ℃冰箱取出试管架, C 暂不振动试管。 462 轻轻取出每支试管, .. 先观察试管内上清液和管底凝集物, 再轻振管底, 使凝块从管底升起, 最后 按液体清浊、 凝块大小记录。 463 观察结果时应首先观察抗原对照与阴性血清对照, . . 均应呈“ ’即不凝集)阳性血清对照呈不 一, ( , 同程度凝集, 表明试验可靠。 464 凝集结果判定见表 t .. o 表 1 试管凝集结果判定
2 原理
同血清平板凝集试验, 亦是细菌性抗原与相应的抗体结合后 在适量电解质参与下, 经过一段时间 出现肉眼可见的凝集现象, 只是结果判定以凝集价表示 3 试剂和材料
31 抗原: . 试管凝集试验用鸡白痢一 鸡伤寒抗原( 1 亿/ L 含菌 0 m ) 32 阳性、 阴性血清。 13 被检血清口 34 . 石炭酸生理盐水: . o5, Y 了炭酸 5 ; 9 , a化钠 85 ; . 9
类
1 2 3 4
别
试
管
所
见
结
果
细菌全部形成凝块, 上层液完全透明
++++ +++
鸡白痢实验报告
一、实验目的1. 了解鸡白痢的基本知识,包括病原、流行病学、症状和病理变化等。
2. 掌握鸡白痢平板凝集试验的操作方法,提高实验技能。
3. 通过实验,了解鸡白痢的诊断方法和注意事项。
二、实验原理鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的一种急性传染病,主要感染雏鸡。
本实验采用平板凝集试验检测鸡白痢抗原,通过观察血清与抗原反应后的凝集现象,判断鸡是否感染了鸡白痢。
三、实验材料1. 鸡白痢全血凝集反应抗原2. 鸡白痢阳性血清3. 生理盐水4. 洁净玻璃板5. 蜡笔6. 7#或9#注射针头7. 75%酒精棉球8. 移液器四、实验方法1. 准备工作(1)将玻璃板用蜡笔分成三格,标明“抗原”、“血清”和“对照”。
(2)用移液器分别吸取鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性血清和生理盐水,分别滴入三格中。
(3)用移液器将抗原和血清按照一定比例混合。
2. 操作步骤(1)在抗原格中加入生理盐水,对照格中加入等量的生理盐水。
(2)在血清格中加入等量的鸡白痢阳性血清。
(3)用移液器将抗原和血清按照一定比例混合,充分振荡。
(4)将混合液滴入抗原格和血清格中,用移液器轻轻混合。
(5)用移液器将对照格中的混合液滴入抗原格和血清格中,充分振荡。
(6)观察各格中混合液的变化,记录凝集现象。
五、实验结果1. 抗原格:混合液呈均匀的红色,无凝集现象。
2. 血清格:混合液出现明显的凝集现象,出现絮状物。
3. 对照格:混合液呈均匀的红色,无凝集现象。
六、实验分析根据实验结果,鸡白痢阳性血清与抗原发生凝集现象,而生理盐水和抗原混合液无凝集现象,说明鸡白痢抗原与鸡白痢阳性血清具有特异性,可以用于鸡白痢的诊断。
七、实验讨论1. 鸡白痢是一种急性传染病,对雏鸡的危害极大。
本实验通过平板凝集试验,成功检测出鸡白痢抗原,为鸡白痢的诊断提供了实验依据。
2. 在实验过程中,要注意操作规范,避免污染。
同时,要注意观察混合液的变化,准确记录凝集现象。
3. 鸡白痢的防控措施包括:加强饲养管理,提高鸡群免疫力;严格执行消毒制度,切断传播途径;及时淘汰病鸡,防止疫情扩散。
技能点28种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫.
国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库
种鸡场鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫
一、目的要求
掌握鸡白痢、鸡败血支原体检疫的操作方法及结果判定。
明确凝集试验在生产中的应用。
二、仪器及材料
胶头滴管、玻板、牙签、鸡白痢全血平板凝集抗原、鸡白痢阳性血清、鸡白痢阴性血清、鸡败血支原体平板凝集抗原,鸡败血支原体标准阳性血清、鸡。
三、方法与步骤
1.取一块洁净的玻板或白瓷板,划出3×3cm的方块。
2.在每个方块的中心滴一滴(约0.02ml)鸡白痢全血平板凝集抗原或鸡败血支原体平板凝集抗原。
3.用采血针刺破鸡冠或翅静脉采集新鲜血液。
4.在抗原滴旁边滴加等量的一滴新鲜血液。
5.用一洁净的细玻璃棒或牙签将抗原与血液混匀,不同检样不能用同一牙签混匀。
6.轻轻摇动,使混合物反应2分钟。
结果室温放置,2分钟内出现凝集现象者为阳性;2分钟内未出现凝集现象者为阴性。
注意:每次试验都要设阳性和阴性对照,做法同全血平板凝集试验。
对可疑的鸡应根据鸡群以往感染情况做出解释,如鸡群以前为阳性群,则可疑反应应判为阳性。
新近感染的鸡,还需在3~4周后作重新试验。
1。
禽细菌性疾病实验
实验鸡白痢的诊断实验一、实验目的会用病理剖检和血清学方法诊断鸡白痢。
二、实验内容与方法1、鸡白痢由于感染对象不同,病、死鸡剖检可见不同的病理剖检变化。
胆囊扩张,充满胆汁。
卵黄吸收不良,内容物有轻微的变化。
雏鸡白痢病死鸡呈败血症经过。
鸡只瘦小,羽毛污秽,肛门周围污染粪便、脱水、眼睛下陷及脚趾干枯,卵黄吸收不全,卵黄囊的内容物变成淡黄色并呈奶油样或干酪样黏稠物,心包增厚,心脏上常可见灰白色坏死小点或小结节,肝肿大,并可见点状出血或灰白色针尖状的灶性坏死点,胆囊扩张充满胆汁,脾肿大,质地脆弱,肺可见坏死或灰白色结节,肾充血或贫血,输尿管显著膨大。
有时在肾小管中有尿酸盐沉积,肠道呈卡他性炎症,特别是盲肠常可出现干干酷样栓子。
青年鸡白痢突出的病理变化是肝肿至正常的数倍,整个腹腔常被肝覆盖,肝的质度极脆,一触即破,腹腔充盈血水或血块,脾肿大、心包扩张,心包膜呈黄色不透明,心肌可见数量不一的苋色坏死灶,严重的心脏变形、变圆,整个心脏几乎被坏死组织代替。
肠道呈卡它性炎症,肌胃常见坏死。
成年鸡白痢主要病理变化在生殖系统,表现卵巢与卵泡变形、变色及变性,卵巢未发育或发育不全,输卵管细小,卵变形如呈梨形、三角形、不规则等等形状,卵变色如呈灰色、黄灰色、黄绿色及灰黑色等不正常色泽,卵泡或卵黄囊内的内容物变性,有的稀薄如水,有的呈米汤样,有的较黏稠成油脂样或干酪状。
有病理变化的卵泡或卵黄囊常可从卵巢上脱落下来,成为干硬的结块阻塞输卵管,有的卵破裂造呈卵黄性腹膜炎,肠道呈卡他性炎症。
2、鸡白痢全血平板凝集实验将鸡白痢全血平板凝集抗原充分振荡均匀,用滴管吸取抗原1滴(约0.05ml),垂直滴在玻板上,随即用针头刺破被检鸡的翅静脉,用铂耳环蘸取血液一满环(约0.05ml)放于抗原滴中,用铂耳环搅拌均匀,静置(20℃以上室温)判定结果。
(1)抗原与血液混合后,在2分钟内出现明显的颗粒凝集或块状凝集为阳性反应。
(2)在2分钟内不出现凝集或仅呈现均匀一致的微细颗粒或在边缘处由于临干前形成细絮状物等,均断为阴性。
鸡白痢病生物监测
实验过程
讲述新知识 并示范操作
(1 )介绍鸡白痢检疫方法中两种最常用的检 疫方法:全血平板凝集试验,血清平板凝集试 验
实验过程
讲述新知识 并示范操作
( 2 )比较以上两种方法各自的优缺点 及应用特点,重点介绍目前养殖企业最 常用的血清平板凝集试验
实验过程
讲述新知识 并示范操作
(3)血清平板凝集试验的操 作步骤和范操作
A.采血并取得血清
实验过程
讲述新知识 并示范操作
B.准备检测的仪器材料
实验过程
讲述新知识 并示范操作
C .滴加诊断抗原。每批鸡 检查的开始时需做阴性、 阳性血清对照
玻片 鸡白痢标准抗原
实验过程
讲述新知识 并示范操作
D.滴加等量的血清 阳性血清 (对照)
阴性血清 待检血清 (对照)
实验过程
播放某养殖企业正在进
情境导入
行鸡白痢检疫的片段
视 频
实验过程
复习旧知识
1、待检血清的准备:采集鸡血的方 法:
保定─翅膀下静脉采血─析出血清─装 瓶
实验过程
复习旧知识
2、血清学试验─凝集反应原理:
红细胞、细菌性等颗粒性抗原,与相应抗体结合结 合后,在适量电解质参与下,经过一般时间,复合物 相互凝集成肉眼可见的凝集团块。 血清平板凝集反应属于直接凝集试验,常用于传染 病诊断
F.判断(血清平板凝集)
分别搅拌均匀后在2分钟内出现抗原大片凝集块,而且 上清液透明判定为阳性;没有出现抗原凝集块、上清 液均匀混浊判定为阴性
实验过程
讲述新知识 并示范操作
(4)试验的注意事项
(5)教师操作示范,培训小组长
布置任务,提升能力
布置任务 分组讨论
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3、查阅资料,写出种鸡场如何做好鸡白痢的 检疫、净化?
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鸡白痢全血平板凝集试验
张桂枝
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一、实验目的要求
掌握鸡白痢全血平板凝集试验的操作 方法及结果判断。
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二、实验原理
颗粒性抗原与相应抗体结合后,在有电 解质存在时,互相凝聚成肉眼可见的凝 集小块。参与反应的抗原称为凝集原, 抗体称为凝集素。
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三、在生产中的应用
鸡白痢全血凝集反应抗原。 3、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,用移
液器吸取全血一滴加入第1格内。
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五、实验方法步骤
4、用移液器吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第2 格内作阳性对照,吸取生理盐水一滴加入第3 格内作阴性对照。
5、以上3格用牙签随即搅拌均匀,并使散开至 直径约2cm为度;
6、用手电筒反照玻璃板,仔细观察并判定。
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六、结果分析
1、抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒 状或块状凝集者为阳性。
2、2分钟以内不出现凝集,或出现均匀一致的 极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状 者判为阴性反应。
3、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性 者,判为可疑反应。
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七、注意事项
4、手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。 5、吸血的滴管每次先用水反复吹吸4~5 次,
再用生理盐水冲洗1 ~ 2 次, 最后以吸水纸将 水吸干。 6、实验完后应迅速止血,以减少失血。再给鸡 饮电解多维,以减少应激。
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八、实验作业
1、写出鸡白痢全血平板凝集试验的操作方法 及结果判断
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?思考题
全血平板凝集反应和血清平板凝集反应有何区 别?哪一个更准确?
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七、注意事项
1、抗原应在2~15℃冷暗处保存,从杀菌之 日算起有效期6个月。
2、本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼 龄鸡敏感度较差。
3、本实验应在20℃以上室温中进行。冬季检 疫室内温度达不到20℃时, 应先将载玻片在酒 精灯加热达30℃左右。
1、用于鉴定细菌。 2、用于种鸡场鸡白痢的检疫。
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四、实验器材
鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性 血清、生理盐水、洁净玻璃板、蜡笔、 7#或9#注射针头、75%酒精棉球、移液 器、手电筒。
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五、实验方法步骤
1、用蜡笔将玻璃板分成3格。 2、将抗原瓶充分摇匀,在3格内分别滴加一滴