药物分析-鉴别试验的条件及方法验证

药物分析-药物的鉴别试验

一些具有特定结构的官能团、金属阳离子及阴离子可能存在于多种药物中，为避免重复，中国药典将此类官能团、阴、阳离子的鉴别试验列于附录中，此类鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能确定是哪种具体药物，所以称之为一般鉴别试验。
15
如：丙二酰脲类鉴别试验只能证实是巴比妥类药物，但具体是何种巴比妥类药物不可确定。
5
初熔终熔
6
3）熔点测定的注意事项：
a. 传温液 mp在80℃以下的，用水； mp在80℃以上的，用硅油或液体石蜡。
b. 毛细管中性硬质玻璃管，长：9cm 内径：0.9~1.1mm
壁厚：0.10~0.15mm。
c. 升温速度 1~1.5 ℃/min。
d. 温度计 0.5℃刻度，且经校正。
7
（2）凝点
小供试品量，以m表示，单位为µg。最低检出浓度---在一定条件下能观察出试验结果时
供试品的最低浓度，以1V表示。
25
最低检出量与最低检出浓度之间的关系：
m v 106 V
式中： — 试液的体积（mL）：鉴别时所取试
液的体积
V — 最低检出浓度的体积：指含有1 g 供
试品的溶液体积（mL）
钠盐鉴别试验等。
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（三）专属鉴别试验
专属鉴别试验（specific identification test）是证实某一种药物的依据。根据每一种药物化学结构差异所引起的物理化学特性不同，选用某些专属定性反应来鉴别药物的真伪。如：维生素B1，中国药典（2000年版）—硫色素反应作为其专属鉴别试验。
m — 最低检出量( µg )。
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空白试验
目的: 检查试剂和蒸馏水中是否含有待测组分。方法：用蒸馏水代替试样进行测定。对照试验目的: 检查方法的可靠性。方法: 用标样代替试样进行测定。

药物鉴别技术—药物鉴别试验的条件(药物分析课件)

VB2
滤过
滤液
淡黄绿色
VB6
坦片
VE,VB1,VB6,谷氨酸…
荧光
VB1
剂
辅料
…
试样现象
VB2对照品现象
稀H2SO4
蓝色荧光
荧光消失
分三份
NaOH溶液
荧光消失
荧光消失
连二亚硫酸钠
荧光消失黄色褪去
荧光消失
分析原因，排除干扰对复方中各组分逐一比较脑蛋白的水解物水溶液呈蓝色
（二）提高反应灵敏度的方法
• 加萃取液提取浓集有色生成物，易于观测。 • 改进观测方法目视观测溶液的颜色分光光度计
观测生成沉淀比浊法
三、鉴别试验条件
（一）溶液的浓度
溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax, A, E1%1cm)
（二）溶液的温度
温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察不到结果，故试验中应注意温度的控制。
（三）溶液的酸碱度
许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，溶液的酸碱度能够使各反应物有足够的浓度处于活化状态、使反应产物处于稳定和易于观察状态。
（四）试验时间
有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。
Байду номын сангаас（五）干扰成分的存在
药物制剂的鉴别，其它成分则会干扰检查结果的现象观察，必须选择专属性更高的鉴别方法或将干扰成分分离后鉴别。
复方吡拉西坦片剂中维生素B2鉴别方法的建立
吡拉西坦
脑蛋白水解物
复
方脑蛋白水解物
吡
拉西
VB2
取10片
加50ml水

药物分析---典型药物的鉴别试验

2,6-二氯靛酚的氧化型在 H+ 介质中为玫瑰红色，在 OH- 介质中为蓝色。与VC作用后生成还原型无色的酚亚胺。
氧化型
还原型
实验步骤：
• VC的鉴别：
•
取本品约 0.2g ，加水 10mL 溶解后，分成二等份，在一份中
加 AgNO3 0.5mL , 观察沉淀生成颜色；在另一份中加二氯靓酚钠试液 1－2滴，观察并记录实验现象。
结构：
VA的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯，具有许多立体异构体。天然VA主要是反式VA，取代基R不同则可以是VA醇或其酯。
理化性质：溶解性：脂溶性，溶于乙醚、石油醚等有机溶剂中，在乙醇中微溶，在水中
不溶。
不稳定性：易发生氧化、脱氢、脱水、聚合反应《中国药典》紫外吸收特性：共轭多烯醇的侧链结构与三氯化锑呈色：VA在氯仿溶液中能与三氯化锑作用，产生不稳定的蓝色。
实验步骤：
• VB1的鉴别：
•
取本品约 5mg ，加 NaOH 试液 2.5 mL溶解后，加 K3Fe(CN)6试液 0.5mL 与正
丁醇 5mL ，强力振摇 2分钟，放置使分层，观察上面的醇层荧光颜色；加稀
HCl 使成酸性，而后再加 NaOH 试液使成碱性，观察并记录实验现象。
ห้องสมุดไป่ตู้
•
K3Fe(CN)6试液配制：取 K3Fe(CN)6 1g , 加水 10mL 使溶解，即得。本液应临
典型药物的鉴别试验
-----维生素类典型药物的鉴别
张丽
实验目的
掌握维生素类典型药物的鉴别原理和鉴别方法：
维生素类典型药物：维生素A , B1 , C
熟悉维生素类典型药物的鉴别实验操作中的基本方法和试剂。
VA 鉴别实验原理

药物分析第二章药物的鉴别试验

5、芳香第一胺类
供试品 + 稀盐酸 + 亚硝酸钠 + 碱性β 萘酚试液 ----橙黄色到猩红色沉淀
6、托烷生物碱类供试品+ 发烟硝酸（在水浴上蒸干）---------黄色殘渣（冷却）
乙醇（2D）+氢氧化钾（1粒）
------------------------------------------深紫色（三）专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，证实是某一种药物（详见各论）。
E:制备氧化铝方法代号
原点至色谱斑点中心的距离 (2)比移值Rf == -----------------------------------------原点至展开剂前沿的距离供试品的Rf值与标准品的Rf值比较,由此确定供试品的成份.
例:硫酸阿米卡星的薄层色谱法鉴别试验(P35) (1)布板:硅胶H (2)配溶液(供试品)
折光率(20℃):指光线在空气中进行的速度与供试品中进行速度的比值 n t
D
t 比旋度:一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含 [ ]D 有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度
例：称取葡萄糖10.00g，加水溶解并稀释至100.0mL，于20℃用2dm测定管，测得溶液的旋光度为+10.5°，求其比旋度？解：溶液厚度：2dm: +10.5 ° 1dm: +5.25 ° 浓度：10g/100ml=0.1g/ml 比旋光度： +5.25 °×10=+52.5°
4、核磁共振（NMR） H核或C核的化学位移
(三)X射线粉末衍射法布拉格方程
（四）色谱鉴别法 1、薄层色谱将吸收剂或支持剂均匀铺在玻璃板上（或聚酯薄膜塑料或铝箔上），把要分离分析的样品点在薄层色谱板上，用溶剂展开，在日光或紫外光下观察所获得的斑点，从而达到分离、分析、鉴定目的。例: 药物中特殊杂质的检查 (醋酸可的松中其他甾体的检查) (1)布板 (2)点样 (3)显色

药物分析药物分析方法的验证

2. 验证方法
（1）含量测定
1）基质无（原料药）/可模拟（制剂）
回收率(%)=
测得量加入量
100
2）基质不可模拟（制剂、中药）
回收率(%)=
测得量 - 本底值加入量
100
（2）杂质检查——方法同2）
2. 验证方法（其他方法）
• 可与已知准确度的另一方法的测定结果比较 ——药典标准方法 / 经过验证的方法
• LOD是一种限度检验效能指标，反映方法的灵敏度
1 直观法
目视法评价的方法: 化学反应 / TLC ——鉴别的显色法；杂质检查的TLC
2 信噪比法
3 标准偏差/ 标准曲线
显示信号与噪声水平的方法: HPLC ——S/N=3（2）时的相应浓度或量
其他分析方法: UV-Vis法
LOD 3.3 / S δ空白响应偏差
含量水平
限度（%）
100 % 10 % 1% 0.1%
98~101 95~102 92~105 90~108
0.01 % 10 g/g （ppm） 1 g/g （ppm） 10 g/kg （ppb）
85~110 80~115 75~120 70~125
（二）精密度
1. 定义 • 同一均匀供试品多次取样测定所得结果之间的接近程度 • 相对标准偏差（%， RSD）；
• 也可由所测定的精密度、线性和专属性推算 ——原料药含量HPLC测定法
3. 数据要求 • 9个测定结果（n=9）
3水平×3样品 • 化药：1 ︰ 0.8、1 ︰ 1、1 ︰ 1.2 • 中药: 1 ︰ 0.5、1︰1、1︰1.5
3. 数据要求
样品中被测成分的含量水平与回收率限度要求的关系

药物分析第二章鉴别

药品的熔点与分子结构有关，当构成晶格的单位（对有机化合物来说一般是分子，无机化合物的是离子或原子组成）受热，动能增加到足以克服各单位间相互作用力即格子力，晶格崩溃涣散，这时的温度就是固体的熔点。每种纯的固体有机化合物都有自己的独特的晶型结构和分子间力，因此要熔化固体，就需要一定的热能，所以每种固体物质都有独特的熔点。
5、制备衍生物测定熔点法
药物＋试剂新化合物有一定mp; 药物酸化或碱化生成游离酸或碱。操作繁琐费时间，应用较少。
二、光谱鉴别法
测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收度比值法经化学处理后, 测定其反应产物吸收光谱特性
比旋度：指在一定波长下，偏振光透过1dm且每1ml中含有
旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。可用于鉴
别药物、检查药物的纯度和含量测定。
[n]TD = 100α/dL 摩尔吸收系数εh.P收载的方法）E1%1cm=A/CL
二、一般鉴别试验（general identification test）
注意事项：
1、由于受薄层板质量、边缘效应等因素的影响，实际操作中有时会遇到同一物质在同一薄层板上的Rf值不一的情况，操作中可增加将供试品溶液与对照品溶液等量混合，点样后出现单一斑点作为鉴别依据。
2、单独使用TLC鉴别时，需要进行色谱系统适应性试验内容，对斑点的比移值和分离效能进行考察。必要时进行灵敏度考察。
（二）提高反应灵敏度方法 1. 加入与水不混溶的有机溶剂提取浓集
2. 改变观测方法
溶解度
物理常数: 相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数、折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羟值

药物的鉴别试验药物分析

的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量分析。
5. X射线粉末衍射法
第5节色谱鉴别法
利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，并进行比较，根据两者保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪。
• 加硝酸银-黄色沉淀不溶于氨水或硝酸溶液； • 通入Cl2，臵换出I2，三氯甲烷吸收显紫色，使淀粉变蓝。
第3节化学鉴别试验
2. 其他无机酸根离子
硫酸根： • 酸性下加氯化钡-白色沉淀，沉淀酸中不溶解； • 加醋酸铅→白色沉淀，沉淀在醋酸铵或氢氧化钠中溶解；硝酸盐： • 硫酸介质中，加入硫酸亚铁，接界面-棕色环（Fe(NO)SO4）； • 加硫酸、铜丝，红棕色蒸气（NO2）; 磷酸盐： • 中性条件下，加硝酸银，生成浅黄色沉淀，溶于氨溶液或稀硝酸； • 和氯化铵镁反应—白色结晶沉淀； • 和钼酸铵试液、硝酸反应—黄色沉淀（溶于氨）
HO CH COOH HO CH COOH
+
Ag(NH3)2OH
2 Ag +
HO C COONH4 HO C COONH4
+ 2NH3 + 2H2O
第3节化学鉴别试验
三、常见有机酸根的鉴别
3. 苯甲酸盐
①
FeCl3反应
COONa 7 3FeCl3 2OH中性溶液
COO Fe3(OH)2 OOC
USP采用对照品法
试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法
第4节光谱鉴别法
特征区指纹区
第4节光谱鉴别法
3. 近红外光谱法(Near-Infrared spectrometry)

药物分析药物的鉴别试验

➢ 规定λ和Aλ1/Aλ2 ➢ 经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。
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例1：布洛芬
【鉴别】 (1) 取本品，加0.4％氢氧化钠溶液制成每1ml中含0.25mg的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在265nm与273nm的波长处有最大吸收，在245nm与271nm 的波长处有最小吸收，在259nm的波长处有一肩峰。
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2.有机酸盐
水杨酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、枸橼酸盐
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（1）水杨酸盐
① FeCl3反应
COOH
6
OH+FeCl3
弱酸性
COO-
O- Fe 2
Fe
+ 12HCl
3
中性
②加稀HCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶
于醋酸铵溶液。
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例：水杨酸镁
【鉴别】 (1) …… (2)取本品约0.3g，置洁净的试管中，加水10ml溶解，加硝酸银试液过量，即生成白色沉淀，滴加氨试液恰使沉淀溶解后，将试管置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁成银镜。
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3.芳香第一胺
NH2
重氮化-偶合反应
R
取供试品约5mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓
+NaCl + H2O
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氨苯砜
【鉴别】 (1) 本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）。 (2) ……。
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药物分析02章药物的鉴别试验

药物分析02章药物的鉴别试验药物的鉴别试验是指通过对药物的外观、理化性质、药效和药物成分等方面的检测，从而确定药物的真伪、鉴别其品质和评价其质量。

药物的鉴别试验是药物质量控制和药物品质评价的重要环节，对于保障药物的有效性和安全性具有重要意义。

一、外观鉴别试验药物的外观鉴别是最基本也是最直观的鉴别方法之一、药物的外观特征包括颜色、外观形状、气味等。

在鉴别药物的过程中，需要对照药物的外观标准，比较药物的差异。

二、理化性质鉴别试验理化性质鉴别试验包括熔点、燃烧性质、溶解性、吸湿性等。

这些理化性质的测定可以通过一系列的实验方法来完成。

比如，可以通过热量仪器测定药物的熔点，通过烧毛试验判断药物的燃烧性质，通过溶解度试验测定药物的溶解性，通过称量药物的含水量比较药物的吸湿性。

三、药效鉴别试验药效鉴别试验是一种通过药物作用方式来鉴别药物真伪和品质的方法。

在进行药效鉴别试验时，需要参照药物的治疗作用机制，通过对照药物的药效标准，进行动物试验或临床试验，比较药物的疗效。

四、药物成分鉴别试验药物成分鉴别试验是一种通过检测药物中的化学成分来鉴别药物真伪和品质的方法。

常用的药物成分鉴别试验方法包括色谱分析、质谱分析、核磁共振谱分析等。

通过这些方法，可以快速准确地分析药物中的化学成分，并与标准药物进行比较。

药物鉴别试验是一项复杂的工作，需要进行详细的实验操作和仪器设备的运用。

在进行试验过程中，需要注意实验条件的控制和结果的准确性。

同时，还需要对比药物的标准要求，结合实际情况，综合判断药物的真伪和品质。

药物的鉴别试验对于保障药物的有效性和安全性具有重要意义。

通过鉴别试验，可以及时发现药物的问题，对于深入研究和改善药物制剂具有指导意义。

同时，也可以帮助医护人员正确选择药物，确保患者的治疗效果和用药安全。

总之，药物的鉴别试验是药物质量控制和品质评价的重要环节。

通过外观鉴别试验、理化性质鉴别试验、药效鉴别试验和药物成分鉴别试验等方法，可以对药物进行全面的鉴别评价，从而保障药物的有效性和安全性。

药物分析第三章章药物的鉴别试验

第三章药物的鉴别试验
4．荧光反应鉴别法
• （1）药物本身在可见光下发射荧光。（2）药物溶液加硫酸呈酸性后，在可见光下发射荧光。
• （3）药物和溴反应后，遇可见光下发射荧光。 • （4）药物和间苯二酚反应后，经加热可发射荧光。
第三章药物的鉴别试验
（二）光谱法
• 红外光谱鉴别法 • 定义：利用红外吸收光谱进行分析的方法称为红
液1滴，即显紫色。 COO-
OH
O-
6
+ 4FeCl3
Fe Fe + 12HCl
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• 方法②取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。
第三章药物的鉴别试验
• 酒石酸盐
• 方法①取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管的内壁形成银镜。
第三章药物的鉴别试验
（一）性状
• 溶解度
• 溶解度是药物的一种物理性质，一定程度上能反应其纯度。《中国药典》（2010年版）采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药物在不同溶剂中的溶解性能，并可作为药物精制或制备溶液时的参考依据。
第三章药物的鉴别试验
第三章药物的鉴别试验
（三）色谱鉴别法
• 薄层色谱鉴别法
• 薄层色谱法用于鉴别，以比移值和斑点颜色作为鉴别依据，来把握供试品与对照品的同一性。
• （1）供试品与同浓度对照品溶液颜色（或荧光）与位置（Rf）应一致，而且主斑点大小与颜色深浅应大致相同。
• （2）供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点。
H HO C COOH HO C COOH + 2Ag(NH3)2OH

药物的鉴别试验方法及原理

第一章药物的鉴别试验第一节概述依据药典进行的药物分析主要有三大项：鉴别、检查和含量测定。

药物的鉴别试验（identification test）是用于鉴别药物的真伪，在药物分析中属首项工作，只有证实被分析的药物是真的，才有必要接着进行检查、含量测定。

药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。

它与分析化学中的定性鉴别有所区别。

这些试验方法不能赖以鉴别未知物。

原料药：鉴别试验结合性状项下的外观和物理常数进行确证。

一、鉴别的项目（一）性状药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。

（二）一般鉴别试验（general identification test）*以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物真伪的。

*无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录III项下的一般鉴别试验为依据，*有机药物：采用典型的官能团反应。

*一般鉴别试验的项目：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）。

*一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。

*通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。

例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。

要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。

（三）专属鉴别试验（specific identification test）*根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。

药物分析的方法学验证所要做到的事项

药物分析的方法学验证所要做到的事项（一）新药申报时，药品质量标准中分析方法必须验证；药物生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法必须进行验证；2005版药典中分析方法验证指导原则只规定了项目和基本方法而没有合格标准:附录XIX A；中国GMP(98)非常关注验证的过程,分析方法验证不完善是常见的问题药物分析检验时药品生产的GMP的药物分析的方法学验证，是保证药物分析结果准确性的前提和基础，也是实现药物分析检测GMP的必然要素。

构成药物分析中的检测方法验证，这要涉及到以下些方面的内容：1、分析方法验证成功的前提条件：（！）仪器已经确认、校正并在有效期内（2）经过培训的人员（3）可靠稳定的对照品（4）可靠稳定的实验试剂（5）确认受试溶液的稳定性，在规定时间内无降解。

2、分析方法学验证所要求验证的内容：（1）含量的测定（2）杂质的含量测定（3）药物的定性鉴定（4）药物的含量均匀度测定（5）药物的微生物检测（6）药物的细菌内毒素的检测验证内容：准确度：准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。

测定回收率R（recovery）的具体方法可采用加样回收试验法来进行测定。

加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。

数据要求:规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次精密度：（重复性、中间精密度和重现性精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。

用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。

（1）重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价（2）中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度（3）重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度（4）数据要求：需报告SD，RSD和可信限。

药物分析-鉴别实验(本科生实验)

实验一药物的鉴别实验——大山楂丸的鉴别一、目的要求1. 掌握药物的化学鉴别和薄层色谱鉴别试验。

2. 掌握药物分析的前处理方法。

3. 熟悉其它药品检测方法及要求。

二、主要仪器与药品超声仪、水浴锅、烤板器；移液管、蒸发皿、分液漏斗、漏斗、锥形瓶、展缸、薄层色谱板；乙醇、甲醇、正丁醇、氯仿、丙酮、水、盐酸、镁粉。

三、实验方法大山楂丸组方为山楂、六神曲（麸炒）、炒麦芽，为棕红色或褐色的大蜜丸。

1. 化学鉴别取本品9 g，剪碎，加乙醇40 mL，超声10分钟，滤过，取续滤液10 mL蒸干，残渣加水2 mL，加热使溶解（分三次加入，溶液合并），用正丁醇3 mL振摇，萃取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解。

溶液（a）加少量镁粉与盐酸2~3滴，加热4~5分钟后，即显橙红色。

2. 薄层鉴别取上述溶液（a），作为供试品溶液。

另取熊果酸对照品，加甲醇制成对照品溶液。

吸取上述两种溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。

四、注意事项1. 移液管的使用移取溶液前，先用吸水纸将尖端外的水吸除掉，然后用待吸溶液转洗3次。

吸取溶液时，将移液管直接插入液面下1~2 cm深处。

用右手拿移液管，左手拿洗耳球，排出球内空气，紧接管口上，使溶液缓慢上升，管内溶液上升至标线以上时，移去洗耳球，右手食指迅速按紧管口，把移液管提出液面，左手拿容器，倾斜45°，将管的尖端垂直紧贴容器的内部，食指稍松，使液面缓慢下降，待管中溶液的凹液面与刻度线相切时，用食指紧按管口，使溶液不再外漏。

此时溶液恰好为管上所示容量。

用左手拿另一洁净的容器，右手将移液管放入容器，方法同上，待溶液自然流完，停15 s后取出移液管。

凡移液管上未写“吹”字的，其残留液不用吹出，若管上标有“吹”字，其残留液必须吹出。

药物分析-第2章第一节-鉴别

pH4.3
蓝紫色络合物
2. 有机酸盐 (1) 水杨酸红色配位化合物水杨酸 + FeCl3 紫色配位化合物
(2) 酒石酸盐
供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银
水浴中
银镜
3.芳香第一胺类供试品
稀盐酸
+ 亚硝酸钠碱性-萘酚试液黄色到猩红色
4.托烷生物碱类（发烟硝酸、氢氧化钾醇溶液）
此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。
第二章
药物的鉴别技术
第一节药品鉴别基础知识
概述
鉴别试验：是根据药物的分子结构、理化性质, 采用现有的分析方法来判断药物的真伪。是药检工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，才能进行药物的杂质检查、含量测定。
★注意：这些鉴别试验用来证实贮藏在标签容器中的药物是否为所标示的药
物，其方法虽有一定的专属性，但不
第二章
④ 规定一定浓度供试品在最大吸收波长处的吸收度. ⑤ 经化学处理后,测定其反应产物的吸收光谱特性.
第二章
2 .红外光谱法
主要用于组分单一、结构明确的
原料药。
ChP
BP
采用标准图谱对照法
采用标准图谱对照法、对照品法
USP
JP
采用对照品法
规定条件下测定一定波数处特征吸
收峰。
标准图谱法：Ch.P要求按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱，与《药品红外光谱集》中的相应标准图谱对比，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物。对照品法：将供试品与对照品在同样的条件下绘制红外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不同仪器和操作条件造成的误差。
第二章
② 规定吸收波长和吸收度比值法

药物鉴别实验

射荧光；
药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物
经其它反应后，发射荧光。
常有气体生成的药物
大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺
类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气
化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发
生硫化氢气体
含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可
产生乙酸乙酯的香味。
（三）光谱鉴别法
1．紫外光谱鉴别法
核对λmax和λmin；规定一定浓度的供试液在λmax处的吸收度；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收度比值法；经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。
标准图谱对照法： 2.红外光谱鉴别法
中国药典（2005年版)
BP (2005年版)
对照品法： USP (29)。
（一种专属性很强、应用较广）
（四）色谱鉴别法
1.薄层色谱鉴别法采用对照品（或标准品）比较法，要求二者的Rf值一致； 2.高效液相色谱鉴别法要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致含量测定方法为内标法； 3.气相色谱鉴别法 4.纸色谱鉴别法逐渐被薄层色谱法所取代
氨基
氧化还原显色反应及其它颜色反应
常见的呈色反应有：
与重金属离子的沉淀反应---如巴比妥类药物
与铜盐、钴盐、银盐生成沉淀的反应；
与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应-多为生
物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；
其它沉淀反应。
常见的荧光发射形式有以下类型
药物本身可在可见光下发射荧光；药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发
2.硫酸盐
1) 取供试品溶液，加氯化钡试液，即生成