氯霉素残留检测方法研究进展

氯霉素残留检测方法研究进展

氯霉素残留对人体的危害极大，因此在国际上有关氯霉素的检测方法备受关注和研究。起初是利用微生物进行定性检测，目前应用较多的是先进检测技术的联用，例如：UPLC-MS/MS，LC-MS等技术使氯霉素的检测限、精密度和回收率等方面都得到了极大提高。

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目前有关氯霉素的检测方法有十几种，在这些现有检测方法中，公认的方法是色谱法和色谱-质谱联用法，但此技术仍需不断地改进。在国内外对氯霉素残留量的检测方法仍在不断的研究中。

1 色谱法

1.1 薄层色谱法

莫金娜[1]等利用薄层色谱方法（TLC）检测化妆品中的氯霉素残留量。该方法是先用乙醇溶剂提取，以硅胶制板为载体、在展开剂为三氯甲烷-甲烷（85：15）的薄层条件下鉴别化妆品中的氯霉素残留量。从此实验得知，所检验的样品最小的检限度为1.0mg/g。

1.2 高效液相色谱-荧光检测法

潘莹宇等[2]高效液相色谱-荧光检测方法（HPLC-FL）检测牛奶中氯霉素残留量。氯霉素易与锌粉发生还原反应，将氯霉素与锌粉反应后的溶液在缓冲溶液（醋酸钠-醋酸）条件下可发生荧光衍生化反应，之后加入荧光胺丙酮溶液。将待测品逐渐稀释后在一定的色谱条件下进行检测。上述实验得出，氯霉素检测检出限为0.2μg/L。运用此方法检测牛奶中氯霉素的残留量准确度高，灵敏度好，操作较简便等优点。

1.3 超高效液相色谱-串联质谱法

彭麟等[3]利用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法检测黄鳝肌肉中氯霉素残留量。此实验首先在黄鳝肌肉样品中加入无水硫酸钠和氯化钠溶液，用碱性乙酸乙酯提取两次。合并两次提取液，在45℃水浴中氮吹至干。之后用5%甲醇溶液复溶，再加正己烷除脂，将下层水相过0.22μm滤膜，进样检测。上述实验得出氯霉素检测限为0.1μg/kg。本实验使用的UPLC-MS/MS方法具有精密度高，重现性好等优点，同时可以在保证回收率的基础上有效地提高了检测效率。

1.4 气相色谱-负化学离子源质谱检测法

潘玉香等[4]利用气相色谱-负化学离子源质谱（GC-MS/NCI）检测方法对各种动物源性食品中氯霉素残留量进行检测。此实验方法以氘代氯霉素（D5-CAP）为内标物，用乙酸乙酯对各类样品中的氯霉素进行提取，用正己烷和40g/LNaCl 溶液液液分配除脂肪，经硅烷化衍生后由GC-MS/NCI在选择离子监测模式下进行测定。此实验得出动物源性食品中氯霉素残留量的检出限为0.5μg/kg。GC-MS/NCI检测方法具有分析快速，操作简便等优点。

2 免疫分析法

免疫分析法在食品分析中正得到越来越广泛的运用，免疫分析法具有特异性、灵敏度高、快速和低成本等优点，能够用于样品的定性筛选，也能够对样品进行定量测定以确定样品中氯霉素的含量，常用的有下面三种。

2.1 免疫胶体金法

用于快速检测样品中氯霉素残留含量的胶体金免疫层析试纸条，采用免疫竞争法，将抗氯霉素单克隆抗体-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上，并将人工合成的氯霉素抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线，其与待测样品中氯霉素竞争结合胶体金标记的氯霉素单克隆抗体。李余动等[5]利用免疫胶体金法检测虾肉等组织试样时，灵敏度最低值可达到1ng/ml，试纸条具有较高的灵敏度及特异性，操作便捷，稳定可靠，可作为氯霉素残留现场监控的有效筛检手段。

2.2 酶联免疫法

酶联免疫法（ELISA）又称酶标法，是测定水产品中氯霉素含量的一种好方法。张胜帮等[6]利用酶联免疫检测方法测定水产品中残留氯霉素残留量。实验得出：样品在0.025～2.00ng/mL测定范围内呈良好的线性关系，检出限为0.009ng/mL。ELISA法具有检测快速快、灵敏度高、稳定性好、适用范围宽等优点。

2.3 化学发光酶免疫法

张启模等[7]以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白免疫Balb/c小鼠，应用杂交瘤技术获得了一株分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞5D7，并对其进行效价、亲和力和特异性测定。应用上述单抗建立的检测氯霉素的化学发光酶免疫分析法，检出限达0.0025μg/L可满足我国对水产品中氯霉素残留检测的要求。

3 其他新型的检测技术

3.1 分子印迹膜技术

李欢欢等[8]合成了对氯霉素具有快速响应能力的聚苯胺分子印迹膜，实验结合差示脉冲伏安法建立了对氯霉素残留量的检测方法，同时将聚苯胺分子印迹膜用作电化学传感器可以用以测定氯霉素眼药水中的氯霉素。这种分子印迹膜制

备方法具有操作简单，耗时短，分子印迹膜均匀稳定等优点。

3.2 比色适配体传感器

高慧菊等[9]提出了一种新颖的比色适配体传感器用于快速检测鱼肉和鹅肉中氯霉素。本方法的建立是基于核酸适配体特异性结合目标物的高选择性能和氧化钯纳米颗粒标记聚合酶螯合物的双重信号放大效应，它能特异性、灵敏性地快速检测样品中痕量氯霉素。该方法已经成功地应用于分析鱼肉和鹅肉样品中的氯霉素，其结果与传统的酶联免疫吸附测定方法相一致。

4 结语

氯霉素残留问题已引起国际组织和许多国家和地区的高度重视，氯霉素残留快速检测方法的研究备受关注。氯霉素残留量的检测还有其他方法，如毛细管电泳法、生物传感器法、超临界流体色谱等。同时各种技术的联用具有很重要的研究意义。

参考文献：

[1]潘莹宇，许茜，康学军等.高效液相色谱-荧光检测法测定牛奶中氯霉素的残留量[J].色谱，2013（23）：577-580

[2]彭麟，郭大伟，张伟等.UPLC-MS/MS法检测黄鳝中氯霉素类药物残留[J].畜牧与兽医，2016，48（04）：30-35

[3]潘玉香，董静，吕建霞等.GC-MS/NCI稳定同位素稀释技术检测动物源性食品中氯霉素的含量[J].分析试验室，2010，29（02）：720-1000.

[4]李余动，张少恩，吴志刚等.胶体金免疫层析法快速检测氯霉素残留[J].中国食品卫生杂志，2005（05）：416-419.

[5]张胜帮，董士华.中国食品学报.酶联免疫检测法测定水产品中残留氯霉素的研究[J].2006（06）：1009-7848.

[6]张启模，杨姝，马玲.氯霉素及其在畜水产品中残留检测技术研究进展动物医学进展[J].2011，32（8）：12-16.

[7]李欢欢，常志显等.聚苯胺分子印迹膜电化学传感器检测氯霉素[J].化学研究，2013（06）：11-1008.

[8]高慧菊，潘道东，孙杨赢等.鱼肉和鹅肉中氯霉素的比色适配体传感器快速检测[J].现代食品科技，2016，32，5.