奶制品中阿斯巴甜和阿力甜的检测方法

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阿斯巴甜
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DAD1 A, Sig=200,4 Ref=off (ASIBATIAN0620\S+ 10.D) mAU
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阿斯巴甜
阿力甜
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图6. 有阿斯巴甜标识的阳性样品
图7. 阴性样品2中添加阿斯巴甜和阿力甜
订购信息 安捷伦Zorbax 120 SB-C18色谱柱(4.6x150mm,5µm,P.N.7995218-595 ) 安捷伦Proshell 120 SB-C18色谱柱（4.6x100mm,2.7µm,P.N. 685975-902） 安捷伦 Captiva Prem Syringe Nylon 过滤膜 0.2µmP.N. 5190-5088
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图4.无两种甜味剂标识的奶制品样品—阴性样品
DAD1 A, Sig=200,4 Ref=off (C:\CHEM32\...巴甜\¦Ó-ª¦=¦Ó-¦¦-¦=\¦Ó-¦¦-¦= 2017-06-22 13-22-41\201706220000016.D) mAU
本方法参照GB5009.263—2016 分析乳制品中的阿斯巴甜和阿力甜，根 据阿斯巴甜和阿力甜易溶于水、甲醇和乙醇，乙腈等极性溶剂而不溶于脂 溶性溶剂特点; 乳制品、含乳饮料类和冷冻饮品试样用乙腈沉淀蛋白后用 乙腈水溶液提取。考虑到前处理的方便性，减少了取样量。
乳品中阿斯巴甜和阿力甜分析
称取约5g液态乳制品 (精确到0.001g)于50mL离心管,加入10mL乙腈,盖 上盖子; 涡旋混匀30S, 静置5min，5000r/min0~4℃低温离心5min,上清液倒 入25mL容量瓶,沉淀用8mL乙腈-水(2+1)洗涤,离心后上清液转移入同一25mL 容量瓶,用乙腈-水(2+1)定容,经0.22μm 尼龙膜过滤后用于液相色谱分析。
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图5. 阴性样品1中添加阿斯巴甜
5.117 4.102 6.136
DAD1 A, Sig=200,4 Ref=off (C:\CHEM32\...巴甜\¦Ó-ª¦=¦Ó-¦¦-¦=\¦Ó-¦¦-¦= 2017-06-22 13-22-41\201706220000008.D) mAU
奶制品中阿斯巴甜和阿力甜分析
检测方法（参照GB5009.263—
2016 ）
应用简讯 食品检测与农业
作者 安娟 ，吴翠玲，张聪聪 安捷伦科技（中国）有限公司
前言
阿斯巴甜是一种人造甜味剂，由两种氨基酸（苯基丙氨酸和天门冬氨 酸）和酒精（甲醇）组成。阿斯巴甜比食糖甜200倍左右，常用甜味剂。 阿斯巴甜可能对人体产生致病因素。阿斯巴甜的使用在早期引起社会广泛 争议。有些研究发现不嫩排出阿斯巴甜引发脑瘤、脑损伤以及淋巴癌等严 重后果的可能性。阿力甜是第二代人工设计制备的肽类甜味剂，主要针对 阿斯巴甜热稳定性较差的缺点而研制开发的。根据肽类结构与甜昧关系的 规律，保持生甜基团的必需部分：L一天冬氨酸．而以D一丙氨酸代替L一 苯丙氨酸，以异丙酯替换甲酯，制得新型甜昧剂天一丙二肽即L一天冬氨 酰一D一丙氨酸异丙酯。作为强甜味剂，一般被认为是无毒和无刺激性的 物质，WHO规定阿力糖日允许摄入量可达0.1mg/kg。目前，阿力甜尚未被 FDA认可，全世界只有中国、澳大利亚和墨西哥等6个国家批准使用，我国 卫 生 部 于 1994 年 就 已 批 准 使 用 。 1996 年 JECFA 确 定 的 ADI 值 为 1mg/kg.GB 2760中规定调制乳中阿力甜和阿斯巴甜的最大使用量均为为0.6g/kg;调制 乳粉和调制奶油粉中最大使用量为2.0g/kg;其他相关乳制品中最大使用量 为1.0g/kg。
A re a
阿 力 甜 ,DAD1 A A re a = 4 8 .7 7 7 7 3 7 1 * A m t + 7 .1 6 8 1 1 5 4
R e l. R e s % ( 1 ) : 1 .1 3 1
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A m o u n t [ n g / u l]
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C o r r e la tio n : 0 .9 9 9 9 9
图1阿斯巴甜线性相关曲线
50
A m o u n t [ n g / u l]
5.162 7.572
DAD1 A, Sig=200,4 Ref=off (C:\CHEM32\...巴甜\¦Ó-ª¦=¦Ó-¦¦-¦=\¦Ó-¦¦-¦= 2017-06-22 13-22-41\201706220000003.D) mAU
图2阿力甜线性相关曲线
A re a 6000
阿 斯 巴 甜 ,DAD1 A A re a = 5 5 .2 5 1 1 9 8 6 * A m t + 1 0 .8 9 7 0 4 7
R e l. R e s % ( 1 ) : 4 .5 7 5 2 e - 1
5000
结果和讨论
该方法阿斯巴甜和阿力甜在5µg/mL~500µg/mL浓度范围内线性 相关，R2分别为0.99999和1.00000，其线性相关曲线见图1和图 2. 图3为25µg/mL两种混标的色谱图，可以看出在20%乙腈水流 动相体系下具有很好的保留和分离。将不含甜味剂标识的乳制 品作为阴性样品做添加回收，将含有其中一种甜味剂的标识的 作为阳性样品进行检测验证方法。
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图3. 25µg/mL 阿斯巴甜和阿力甜混标谱图
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DAD1 A, Sig=200,4 Ref=off (C:\CHEM32\...巴甜\¦Ó-ª¦=¦Ó-¦¦-¦=\¦Ó-¦¦-¦= 2017-06-22 13-22-41\201706220000015.D) mAU
仪器条件 安捷伦1260 LC-DAD 色谱条件 色谱柱：安捷伦Zorbax 120 SB-C18色谱柱
(4.6x150mm,5µm,P.N. 7995218-595 ) 柱温：30℃ 流动相： 乙腈-水(20+80） 流速:0.8mL/min； 进样量:20μL； 检测器:DAD； 检测波长:200nm； 运行时间：10min，每次运行建议加入冲洗 色谱柱梯度