蔡锡渠—宫颈癌筛查技术--HPV12+2检测
世卫组织最新宫颈癌筛查指南建议要点(全文)
世卫组织最新宫颈癌筛查指南建议要点（全文）2020年，全球超过50万女性患上宫颈癌，大约34.2万名女性因宫颈癌死亡。
宫颈癌是一种可预防、可治疗的疾病。
快速准确的筛查计划对于宫颈癌预防和早期发现、早期治疗至关重要。
世界卫生组织（WHO）全球消除宫颈癌战略呼吁，至少90%的女孩在15岁前完成人乳头状瘤病毒（HPV）疫苗接种，70%的女性定期接受高效检测方法筛查，90%确诊宫颈疾病的女性得到治疗。
当地时间7月6日，WHO发布了最新的宫颈癌前病变筛查和治疗指南，以促进诊断工具和筛查选择的优化，促进宫颈癌预防并挽救更多生命。
此次指南更新共包括23项推荐和7项筛查管理规范（good practice）声明，其中12条建议和4项管理规范适用于所有一般女性。
此次更新要点中，尤为值得关注的是，WHO推荐筛查方法有重要转变。
重要更新：推荐HPV DNA检测作为首选筛查方法新指南推荐HPV DNA检测作为首选方法，而不是目前广泛使用的醋酸染色目视观察（VIA）或细胞学检查（也常称为“巴氏涂片”）。
指南强调，HPV DNA检测可检测出高危型HPV，这些亚型导致了几乎所有的宫颈癌。
与依赖目视检查的方法不同，HPV DNA检测是一种客观诊断。
证据回顾显示HPV DNA检测的敏感性和特异性也都更好。
尽管对医生来说，HPV DNA检测或细胞学检查中获取宫颈样本的过程相似，但HPV DNA检测更简单，可以预防更多的癌前病变和癌症，并挽救更多生命。
此外，HPV DNA检测更具成本效益。
对于采用VIA检查的地区，WHO建议采取快速转变，以HPV DNA检测取代VIA检查作为宫颈癌主要筛查方式。
值得一提的是，HPV检测在中国人群中也已经积累了重要支持性证据。
去年末，中国医学科学院北京协和医院郎景和教授与中国医学科学院肿瘤医院乔友林教授共同主持的中国大规模宫颈癌筛查随机对照临床研究结果揭晓，在第一轮初筛中，相较于细胞学检查或VIA/VILI检查，高危（hr）HPV检测能够检出更多癌前病变，也更能确保阴性结果的女性在两年内无病变，试验结果支持将hrHPV检测纳入中国的国家筛查计划。
宫颈癌筛查指南解读
2012第2版NCCN宫颈癌筛查指南解读(转载)中山大学孙逸仙纪念医院妇产科吴妙芳、谢玲玲、李晶、林仲秋2012年5月，NCCN对宫颈癌筛查指南进行了更新。
现对新指南进行简要介绍和解读。
一、主要更新内容1、强调宫颈癌筛查的起始年龄为21岁。
应避免对年龄＜21岁的女性进行筛查，因为这些女性罹患宫颈癌的风险很低，即使发生癌变，21岁后筛查发现早期病变的可能性也很高；过早筛查可能导致不必要的检查和治疗，有些治疗甚至是有害的，会使早产的风险增加。
如果已经对年龄＜21岁女性进行了筛查并发现了异常，患者应转诊至有经验的阴道镜医生处理。
2、新增了原位腺癌（adnocarcinoma in situ, AIS）的处理方法。
3、对于细胞学检查无异常，单独HPV阳性的女性，新版指南更新了后续处理方法，指出这些患者可做HPV16或HPV16/18基因型分型检测（1级证据）。
4、对于HPV阴性、细胞学阴性或为ASC-US的女性，推荐每3-5年进行一次筛查。
5、不推荐在任何年龄段的人群中单独使用HPV检测进行筛查。
在21-29岁女性，推荐只用细胞学筛查，不加用HPV检测。
6、突出了HPV16和HPV18型的重要性，只要出现HPV16（+）或HPV16/18（+）就是进行阴道镜检查的指征。
7、对于原位腺癌或浸润性腺癌，进行诊断性切除术时首选冷刀切除术（cold knife cornization, CKC）。
但如果医生能够保证电环切除术（loop electrosurgical excision procedure，LEEP）达到足够的切除范围，也可选择LEEP。
8、增加的其他内容详见下述。
注意：对于任何年龄的女性，不论使用何种方法，筛查都没有必要每年进行一次；单使用细胞学进行筛查时，鳞状上皮内病变的检出率更高，但腺体病变及腺癌的检出率有限，同时进行HPV检测可弥补这一不足。
二、不同细胞学筛查结果的处理进行宫颈癌细胞学筛查时，使用巴氏涂片法或液基细胞学都是可以接受的，这两种方法的效能相同，但报告筛查结果时均需要使用Bethesda系统中的术语。
2-HPV联合液基细胞筛查预防宫颈癌
2-HPV联合液基细胞筛查预防宫颈癌发布时间：2022-10-14T07:19:27.604Z 来源：《中国结合医学杂志》2022年8期作者：李其美[导读] 目的：探讨观察2-HPV联合液基细胞筛查预防宫颈癌的效果。
李其美古蔺县妇幼保健计划生育服务中心四川泸州 646500【摘要】目的：探讨观察2-HPV联合液基细胞筛查预防宫颈癌的效果。
方法：2020.8-2021.11，选取79例疑似宫颈癌患者进行研究，患者依次进行2-HPV检查及液基细胞筛查，以阴道镜下活检为金标准，比较最终检查结果。
结果：2-HPV检查+液基细胞筛查的四项检查参数大于2-HPV检查、液基细胞筛查（P＜0.05）。
结论：2-HPV检查+液基细胞筛查可有效检出宫颈癌，在宫颈癌防治中发挥显著作用。
关键词：宫颈癌；2-HPV检查；液基细胞筛查宫颈癌属于女性子宫颈癌症，又名子宫颈浸润性癌，属于恶性宫颈病变，也是导致女性死亡的主要原因[1]。
该病发生、发展过程十分漫长，宫颈上皮内瘤样病变属于宫颈癌前病变，人乳头瘤状病毒（HPV）是导致该病发生、发展的主要原因[2]。
有调查[3]指出，宫颈癌前病变及宫颈癌中有90％存在HPV感染。
早期确诊HPV感染，积极进行有效治疗，无疑可预防宫颈癌，获取理想预后，改进生命质量。
伴随着宫颈癌筛查的普及，宫颈癌防治成为临床重点问题。
HPV检查、液基细胞筛查属于宫颈癌常用筛查方法，本文主要探究两种方法联合应用的价值，报道内容如下。
1·资料与方法1.1临床资料2020.8-2021.11，选取79例疑似宫颈癌患者进行研究。
最小年龄22岁，最大年龄76岁，平均数（49.37±8.19）岁；最少孕次0次，最多孕次5次，平均数（2.64±1.49）次；最少产次0次，最多产次4次，平均数（2.31±1.09）次。
1.2方法2-HPV检测：检测期间应用第二代杂家捕获技术（美国Digenne公司）。
宫颈癌筛查方法与结果分析
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２ ８ 一 ６
医学 影像与 检验
２１年９ 第２卷 第９ ００ 月 ３ 期
医 学 信 息
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子宫 颈手术 史 者 。同时 进行 宫颈 液基 细胞学 检查 及 阴道镜 检查 。
Ｉ ２ 样 本 的采集 与处 理 ： 检者取 膀胱 截石 位 ， ． 受 暴露 子宫 颈 。 阴 器 窥 暴露 宫颈后 ， 将专 用宫 颈 细胞采 集 刷 伸入 宫 颈 管 内 ， 顺／ 肘针 方 向 旋 按 逆 转 ３ ５圈取 出 ， 速 将收 集 的 细胞 保 存在 专 用 的装 有 固定 液 Ｔ ｉ ｐｅ ～ 迅 ｈｎ ｒｐ 保存 液的 收集 管中 ， 在标 本 瓶上 写 上 姓名 、 龄 ， 贴 上条 形 码 。标 本在 年 并
张春 华
【 摘要 】 目的 ： 了解 宫颈 癌及 癌前 病 变的发 病情 况 ， 探讨 子 宫颈液 基 细胞 学（ ｉｕｄ ｂｓｄｃ ｔｌｇ ｓ， Ｃ 结合 阴道镜检 查 的诊 断价值 。 方法 ： Ｌｑ ｜ ａｅ ｙｏｏｉ ｔ ｔＴ Ｔ） — ｃｅ
对 ２０ ０ ８年在 我 院接 受体检 的妇女 １ ０ ０ ０例 ， 行 宫颈 液基 细胞 学检 查 、 进 阴道 镜及 宫颈 活检 ， 分析 Ｔ Ｔ 阳性 者 的 阴道镜 检 查及 活 检 结果 ， 定 谊检 测 方 ｃ 评 法 的临床 价值 。结果 ： 的体检 者 宫颈 液基 细胞 学异 常 ， 中 ７ 为无 明确 诊断 意义 的不 典型 鳞状 细胞 （ ｓ ｕｓ 、 度鳞 状 上皮 内病 变（ ＳＬ 覆 高 ７ 其 ５ Ａ ｃ ）低 Ｌ Ｉ） 度 鳞 状 上 皮 内 病 变 （ Ｉ 结 论 ： Ｔ 结 合 阴道 镜 检 查 是 较 好 的 宫 颈 癌 筛 查 手 段 之 一 。 ＨＳ Ｌ） ＴＣ 【 关键 词】 颈癌 ； 宫 液基 细胞 学检 查 ； 阴道 镜检 查 ； 分析 【 中图 分类 号］ ３ ． Ｒ７０ ４ 【 献标 识码】 文 Ｂ 【 章编 号３ ０ ６ ９ ９ ２ １ ） ９ ０ ６ － ０ 文 １ ０ —１ ５ （ ０ ０ ０ － ２ ８ ２
宫颈癌筛查技术极其进展
宫颈癌筛查技术极其进展摘要：宫颈癌是女性最常见的癌瘤之一，在女性生殖器官癌瘤中占第二位，1943年希腊医生Papanieolaou巴氏发明使用的宫颈细胞学被世界各个国家沿用近50年，为宫颈癌的防治作出了重要贡献但假阴性率较高，于2001年TBS分类法及液基细胞学技术法推出，从而代替传统的巴氏分级，现广泛应用于宫颈癌筛查。
阴道镜检查是评估宫颈细胞学的结果异常确定病变位置、大小、及严重程度，对于阴道镜检查不满意应进行宫颈管活检术。
宫颈癌病因学研究的突破确立了人乳头状瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌发生的必要条件，作为新的生物标记，HPVE6\E7 mRNA 与细胞病变的相关性更好，相比检测hpvdna，可以更加精准的筛查病变.关键词：宫颈癌；筛查；进展1 宫颈传统涂片细胞学检查1943年希腊医生Papanieolaou（巴氏）发明使用的宫颈涂片亦称巴氏涂片，是最早用于宫颈脱落细胞的检查，大大降低了宫颈癌的发病率。
这种方法简单，不需要过多的仪器设备，费用也低，对于经济不够发达的国家地区以及广大群体的筛查是一种非常经济实用的筛查方法。
其方法是用木制刮板在宫颈外口鳞柱上皮交界处轻轻刮取细胞，直接涂在载玻片上，立即用95％酒精固定，然后进行巴氏染色。
由病理诊断医生对细胞进行分析、评价做出诊断。
2 碘试验正常宫颈或阴道鳞状上皮含有丰富的糖原，可被碘液染为棕色，而宫颈管柱状上皮，宫颈糜烂及异常鳞状上皮区（包括鳞状上皮化生，不典型增生，原位癌及浸润癌区）均无糖原存在，故不着色。
临床上用阴道窥器暴露宫颈后，擦去表面粘液，以碘液涂抹宫颈及穹窿，如发现不正常碘阴性区即可在此区处取活检送病理检查。
碘试验阳性：在转化区内可见致密、厚的、发亮的芥末黄或土黄色不吸碘区，接近鳞柱交界。
【1】主要用于识别子宫颈病变的区域，提供活检取材部位，提高诊断率。
3 醋酸肉眼观察法用5％的醋酸溶液涂抹宫颈后进行肉眼观察，出现醋酸反应，病变处宫颈上皮呈不同程度的白色。
宫颈癌与TCT、HPV检测
宫颈癌与TCT、HPV
检测
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202X
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宫颈癌是威胁中国妇女健康的强大杀手！
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宫颈癌
宫颈癌 46.6万/年新发病例80% 在发展中国家10万/年新病例 中国宫颈癌的防治是保障妇女健康和生命的重大课题，是健康体检的重要内容之一。
中国癌症研究基金会（CCRF）宫颈癌
筛查指南
宫颈疾病细胞学检测
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02
是指从宫颈部取少量的细胞样品，然后在显微镜下观察是否异常。
宫颈刮片
是目前国际上最先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率。TCT宫颈防癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率为100%，同时还能发现部分癌前病变，微生物感染如霉菌、滴虫、病毒、衣原体等。通常方法用TCT检查专门的采样器用采集子宫颈细胞样本，将采集器置入装有细胞保存液的小瓶中进行漂洗，这样就获得了几乎全部的细胞样本，在实验室的全自动细胞检测仪将样本分散并过滤，以减少血液、粘液及炎症组织的残迹，这样就得到了一个薄薄的保存完好的细胞层，再做进一步的显微检测和诊断。
早婚、早育、多产性生活紊乱病毒感染—HPV遗传因素
发病原因
宫颈疾病主要筛查和诊断方法
宫颈脱落细胞学检查传统的宫颈涂片（假阴性率40~80%）液基细胞学检查：TCT阴道镜（放大倍数4~40倍）HPV的检测（已在发达国家用于宫颈癌的初筛）活检（活检病理为宫颈病变的金标准）
基因甲基化检测联合高危型HPV检查对子宫颈癌筛查的分流价值
基因甲基化检测联合高危型HPV检查对子宫颈癌筛查的分流价值陈敬仁① 【摘要】 目的：探讨基因甲基化检测联合高危型HPV检查对子宫颈癌筛查的分流价值。
方法：收集2020年10月—2022年10月于泉州市第一医院宫颈病变诊疗中心门诊就诊的80例机会性筛查女性的临床资料，均进行基因甲基化检测、高危型HPV检查及阴道镜下宫颈病理活检，以宫颈病理活检结果为金标准，比较基因甲基化检测、高危型HPV检查单独及联合检测与金标准的一致性、对子宫颈癌的诊断效能及子宫颈癌筛查分流情况。
结果：80例子宫颈癌筛查者中，宫颈病理活检结果检测出阳性23例，占比28.75%（23/80），阴性57例，占比71.25%（57/80）。
23例阳性中，子宫颈鳞癌（SCC）占比为43.48%（10/23），低级别鳞状上皮内病变（LSIL）占比为39.13%（9/23），高级别鳞状上皮内病变（HSIL）占比为17.39%（4/23）。
基因甲基化检测诊断为子宫颈癌的有16例，高危型HPV检查诊断为子宫颈癌的有15例，和金标准一致性较差（Kappa=0.372、0.357）；二者联合检测诊断为子宫颈癌的有19例，与金标准一致性较好（Kappa=0.784）。
基因甲基化检测联合高危型HPV检查筛查子宫颈癌的特异度、准确度、阴性预测值显著高于基因甲基化检测和高危型HPV检查单独检测，差异有统计学意义（P<0.05）；联合检测的敏感度、阳性预测值与二者单独检测比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
联合检测SCC的阳性检出率均高于单独检测，阴道镜转诊率低于单独检测（P<0.05），基因甲基化检测、高危型HPV检查单独及联合检测HSIL、LSIL的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：基因甲基化检测联合高危型HPV检查诊断子宫颈癌的价值较高，能够在细胞学异常中通过分流检测提高子宫颈癌阳性诊断率，降低阴道镜转诊率。
导流杂交检测法在宫颈病变筛查中临床应用的研究
HPV亚型分布存在地域性差异，我国地广人多，地区之间HPV亚型分布也有差异性。张东红和林美珊[2]采用Meta分析法综合评价1999年1月-2008年9月在国内发表的有关HPV在宫颈组织中感染及型别分布的相关研究中，发现南、北方地区HPV分型存在差异，北方地区HPV感染率（55.67%）高于南方地区（42.06%），两地区都以HPV16感染率最高，南方HPV58、18、33常见，北方58、52、33较常见。Chen等[3]通过对台湾地区10000名女性长达16年的跟踪研究发现：HPV16，52，58，18，31是最常见的导致宫颈癌的类型，细胞学正常HPV阳性宫颈癌风险大大高于HPV检测结果阴性。Chan等[4]检测533例港地区香港地区女性，发现最常见感染类型依次递减的是HPV16、58、53、18、33、45、52。江西省尚无大样本的研究报道，本研究发现最常见的5种高危HPV基因型别为HPV16、52、58、18和31，不同组织类型HPV亚型感染率稍有差异。其中宫颈癌患者中HPV16和HPV18感染率最高，本研究原位杂交法检测出HPV16/18阳性率达67.5%（27/40），与Muno?等[5]报道相符（67.74%）。Clifford等[6]研究发现HPV16和HPV18感染这更容易进展为宫颈浸润癌。美国国立综合癌症网络（NCCN）宫颈癌筛查实践指南及美国阴道镜检查和宫颈病理学会（ASCCP）指出，应特别注意HPV16、HPV 18阳性患者，尤其是是对于年龄在30岁及以上的宫颈细胞学结果为阴性的妇女，应当进行电子阴道镜检查，并进行密切随访[7]，所以明确HPV型别有利于对感染者进行进行风险分类和管理。除了HPV16、18，很多研究发现HPV58、HPV52为我国的优势型别[8-9]，本研究发现HPV52、58亚型感染率在CINII、CINIII组患者感染率分别位于第二、第四，在宫颈癌患者中仅次于HPV16、18。所以，对于HPV52、58感染与致病力不容忽视，也应高度注意和密切随访，这为我们研究适合我国HPV预防疫苗提供了临床依据，尤其是HPV58，王鹤[10]等研究报道了HPV58复合型DNA疫苗可以作为HPV58阳性相关肿瘤及癌前病变免疫治疗的候选疫苗。HPV感染大大增加了宫颈癌的风险，本研究发现随着宫颈病变级别增高其感染率呈明显升高，HPV检测对宫颈癌筛查有着重要的临床意义。
宫颈癌机会性筛查的应用研究
宫颈癌机会性筛查的应用研究目的探讨宫颈癌机会性筛查用于宫颈癌早期诊断、早期治疗的意义。
方法对2011年8月～2012年8月在我院妇科门诊就诊行宫颈癌机会性筛查5698例患者进行回顾性总结分析。
2011年8月～2012年8月在我院妇科门诊就诊5698例患者进行宫颈癌机会性筛查，为A组，对接受筛查的患者行以宫颈细胞学检查或细胞学方法和高危型HPV- DNA检查联合使用作为初步筛查，对结果可疑或阳性的患者进行阴道镜检查，进行阴道镜检查时，对有可疑的病变图像在阴道镜下取宫颈活组织检查，假如在阴道镜下见宫颈无明显癌变可疑区时，可在转化区3、6、9、12点4处取材做病理检查，所取组织应包括间质及邻近正常组织，对于宫颈光滑或宫颈活组织检查阴性，应用小刮匙搔刮宫颈管，刮出物送病理检查，组织病理学诊断最终判断宫颈病变性质。
结果5312 例患者愿意接受筛查，顺应性为93.2%；液基细胞学阳性检出率为11.35%；阴道镜检查感染率为32.61%；病理活检阳性率为20.72%。
将此次数据与2009～2010年我院对社区进行组织性筛查共5262例患者的数据进行比较，为B组，顺应性和液基细胞学阳性检出率存在明显差异（P＜0.05），阴道镜检查感染率和病理活检阳性率无明显差异。
结论通过对妇科门诊患者进行宫颈癌机会性筛查，可以更好地提高防治效果及广大妇女对宫颈癌的认知度，对宫颈癌的早期诊断与早期治疗有着非常重要的意义。
[Abstract] Objective To investigate the significance of cervical cancer opportunistic screening for the early diagnosis and early treatment. Methods The cervical cancer opportunistic screening data of 5698 patients treated in the outpatient department of our hospital from August 2011 to August 2012 were analyzed retrospectively.5698 patients treated in the outpatient department of our hospital from August 2011 to August 2012 were given cervical cancer opportunistic screening，which was group A.These patients received the cervical cytological examination or the combined cytological method and high-risk HPV-DNA examination as the primary screening.The patients with suspicious or positive results were given the colposcopical examination.During the colposcopical examination，for patients with suspicious lesion images，the cervical biopsy was conducted under colposcopy.If no obvious suspicious canceration area was observed under cloposcopy，the tissues of point 3，6，9 and 12 in the transformation zone could be used for pathological examination. The selected tissues should include mesenchyma and adjacent normal tissues.For the patients with smooth cervix or negative cervical biopsy results，the cervical canal should be scratched using a small curet. Then the scatched tissue was sent for pathological examination. The histopathological disgnosis judged the quality of cervical lesions eventually. Results 5312 patients were willing to accept the screening，with the compliance of 93.2%；The positive detection rate of liquid based cytology was 11.35%；The infection rate of colposcopy was 32.61%；The positive rate of pathological biopsy was 20.72%.The data were compared to those of the 5262 patients who received community screening organized by our hospital from 2009 to 2010，which was group B.The two groups were significantly different in thecompliance and positive detection rate of liquid based cytology （P＜0.05），but were not significantly different in the infection rate of colposcopy and positive rate of pathological biopsy. Conclusion The implementation of cervical cancer opportunistic screening among gynecological outpatients can better improve the prevention and control effects and the women’s awareness of cervical cancer，which is of very important significance to the early diagnosis and early treatment of cervical cancer.[Key words] Cervical cancer；Opportunistic screening；Cytology；HPV-DNA宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤[1]，其发病率仅低于乳腺癌，在女性恶性肿瘤中排第2位。
HPV检测方法
HPV E6/E7 mRNA检 测
• 高灵敏度 • 改善的特异性
HPV病毒的检测方法
现有的国产HPV检测方法
其它（凯杰、达安等）
广东凯普23荧光分型
6管反应，一次处理16个样本
上海之江13荧光分型
8管反应，一次处理14个样本
江苏硕世21荧光分型
8管反应，一次处理14个样本
FDA认证的三种HPV检测技术
2009年 Cervista HPV-Invader 酶切信号放大法 Cobas 4800-实时荧光定量PCR技术 2012年 Aptima-RNA 逆转录扩增法
Cervista HPV-DNA检测
在等温反应，有Cleavase酶特异性识别并切割分子 结构， 通过分子杂交和化学信号放大，从而直接检 测特定的HPV-DNA核苷酸序列。
HPV DNA 阳性
HPV E6、E7 mRNA 阳性
有效减少对一过性HPV 病毒感染的检出 (20-40%)
HPV 感染
宫颈癌前病变
Quest全球最大第三方实验室推荐
Aptima HPV 检测 符合美国2012 ACS,
ASCCP, ASCO, ACOG 和 USPSTF 的宫颈癌筛查指南 与DNA试剂相比，能提供相 同的敏感性和更好的特异性 FDA 批准
所谓既往筛查结果充分阴性被定义为，在过去10 年间，连续3次细胞学阴性，或2次联合筛查阴性 ，最近的一次检查在5年之内。
在CIN2、CIN3和AIS病史的女性，应该在CIN2、 CIN3和AIS自然消退或妥善治疗后持续筛查20年 ，即使超过65岁。
关于HPV病毒
逆转录区域包括 控制病毒基因组 复制的基因序列
在报告高危阳性的同时，14种型别的分组检测，其中 A9组对亚洲人群可能有一定意义。
经阴道超声成像在诊断宫颈癌中的应用进展
经阴道超声成像在诊断宫颈癌中的应用进展宫颈癌是女性生殖系统发病率最高的恶性肿瘤之一，早期诊断和治疗预后较好。
经阴道超声成像在诊断宫颈癌中的敏感度、特异度和准确度均较高，是诊断宫颈癌较好的方式。
本文通过对近几年国内外文献资料的梳理，从经阴道超声成像的基本原理和优点、诊断宫颈癌的应用、鉴别诊断与局限性等方面，分析经阴道超声成像在宫颈癌中的应用进展。
标签：经阴道超声成像；宫颈癌；鉴别诊断；应用进展子宫颈癌习称宫颈癌，是最常见的妇科恶性肿瘤。
随着社会和时代的变迁，宫颈癌的发病人群有年轻化的趋势。
自20世纪50年代以来，由于子宫颈细胞学筛查的普遍应用，子宫颈癌和癌前病变得以早期发现和治疗，子宫颈癌的发病率和死亡率已有明显下降[1]。
经阴道超声是一种无创性检查，近年来设备更新迅速，已经成为一种重要的辅助诊断技术。
1 经阴道超声成像的基本原理和优点美国德州大学Ophir[2]最先提出“弹性成像”这一概念，它主要利用探头对组织加压，计算机分析受压后位移变化，并在智能系统下编码弹性图。
良恶性组织在探头加压下的弹性图有较为明显的区别，恶性肿瘤弹性系数大，受压后组织位移变化小，表现为蓝色，而良性组织弹性系数小，受压后组织位移变化大，表现为红色；显示为绿色的可能是交界性肿瘤。
超声弹性技术通过观察感兴趣区域与周围组织位移的大小，判断硬度的差异，从而判断良恶性。
Taylor等[3]提出的分类法是目前认同度最高的超声弹性技术分类方式：压迫性超声弹性成像技术、间歇性超声弹性成像技术和振动性弹性成像技术。
弹性成像评估标准则一般采用筑波大学植野教授提出的5分法[4]：①1 分：肿瘤变形很明显，范围很大，图像绿色；②2 分：肿瘤变形较明显，范围较大，图像绿黄混杂；③3 分：肿瘤中央正常形态，周边变形，中间蓝色，周边绿色；④4 分：肿瘤无变形，图像蓝色；⑤5 分：肿瘤及周边组织均无变形且均为蓝色。
阴道超声近年来在临床的应用逐渐广泛，越来越多的基层医疗工作者也认识到它的优越性。
2022年无锡市锡山区两癌筛查结果分析
2022年无锡市锡山区两癌筛查结果分析摘要：目的：分析2022年无锡市锡山区两癌筛查的结果。
方法：以2022年1月至12月为背景，做全区统计，以接受宫颈癌、乳腺癌筛查的32049例女性为研究对象。
结果：项目完成率高达104.58%；就宫颈癌而言，HPV阳性3726例（中有16、18高危型640例），有94.07%HPV阳性者做了TCT检查，检出宫颈癌前病变275例、宫颈癌15例，早期诊断率为91.49%；就乳腺癌而言，0类、3类2001例且有80.26%做乳腺钼靶检查，乳腺癌20例、早诊率87.5%；均接受治疗。
结论：两癌筛查有助于尽早预防、尽早诊断、尽早发现、尽早治疗宫颈癌及乳腺癌。
关键词：两癌筛查；感染症状；病理变化女性两癌筛查工作持续推进，即指针对乳腺癌以及宫颈癌这两种疾病的筛查工作[1]，前者的筛查通常会用到彩超与乳腺钼靶检查，用于确定乳腺组织有否异常，后者的筛查通常会用到高危型HPV 检测、阴道镜检查及组织病理学检查，目的在于减少假阴性结果，从而聚焦高风险人群，且对于癌症及癌前病变的确认有重要意义，有利于女性的身心健康。
为了进一步分析2022年无锡市锡山区两癌筛查结果，此次研究对全区32049例女性做了调查及统计分析。
1.资料与方法1.1一般资料以2022年1月至同年的12月为背景，以全区35-64岁的女性为筛查对象，均经现场宣传，均对本次研究知情、同意。
1.2方法（1）宫颈癌筛查：由相关部门进行各种形式宣传，登记信息，通知检查时间，做盆腔检查及阴道分泌物湿片显微镜检查，同时做HPV检测取材并加强保存及转运管理，进一步分型，阴性需要于3年后再次复查，阳性（除16、18外）需做宫颈液基细胞学检查，正常者需在1年后复查，异常及可疑者、16、18 阳性者需要做阴道镜检查，正常者在1年后复查，异常与可疑者需做组织病理学检查。
（1）乳腺癌筛查：筛查前的宣传及前期准备工作参考宫颈癌筛查，登记信息后做常规乳腺视诊和触诊，再做乳腺彩色超声检查，乳腺彩超检查 BI-RADS 分类结果为1类或 2 类者，建议 2-3 年复查；结果为0 类或 3 类者，进行乳腺X线检查；结果为 4类或 5 类者，进行活检及组织病理学检查。
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针对男性样本或女性疣体样本（棉拭子样本），先用细胞保存液/ 生理盐水洗脱，收集沉淀，而后与上述操作一致
优点：简单、快捷、方便。 缺点：HPV DNA纯度较差，含有血红素、蛋白、脂类等PCR抑制剂。
PCR试剂配制
HPV12+2 1人份量 10人份量
PCR MIX（μl） 17.5 175
Taq 酶（μl） 0.5 5
5
0
基线时HPV16/18阳性者相比其它12种高危HPV型别阳性者，有更高风险进展为高度宫颈病变
Khan MJ, et al. J Natl Cancer Inst 2005; 97:1072–1079.
对204例宫颈癌患者前瞻性研究发现，HPV18型感染者是预后不良的重要指标，HPV18阳性5年存
常见问题及解决方案
1 扩增曲线出现交叉 扩增曲线出现交叉，主要是因 为多引物、多探针反应体系中，每 种型别的扩增效率不一样所致。同 时，样本本身的原因也可能造成荧 光曲线的差异。 2 单个临床样本扩增曲线底部上坡式 不断抬高 加入的样本DNA含有很多杂质。重做 ，加样前，样本DNA 13000rpm离心 10分钟，移液时取上清，移液器枪头浸 入液面2mm处。
若肉眼未见沉淀，可增加取样量， 再次离心收集沉淀； 若沉淀杂质较多，可用细胞保存液 洗涤1-2次； 血液多样本，用蒸馏水洗涤1-2次； 粘液多样本，取样时尽量去除粘液。
↓ 加入细胞裂解液50ul，煮沸10min
↓ 12000离心10min即可上机
应注意防止爆盖： 金属浴可压重物（冰盒、冰袋等） 水浴应采用螺旋管盖的离心管 确保离心管质量合格
创新专业 追求卓越
常见问题及解决方案
3 个别荧光曲线突然(较大)下降 反应管内留有气泡，由于温度升高 后可能会造成气泡破裂，使荧光值突变 降低，加入模板DNA后混匀离心，把 反应管放置仪器内时要检查管内是否有 气泡。 4 阴性对照产生较高荧光 反应MIX被污染；反应管不干净， 有杂物；反应过程中探针降解。 5 标准曲线的线性关系不佳 加样存在误差，使得标准品不呈梯 度； 标准品出现降解，应避免标准品反 复冻融，或重新制备并稀释标准品。
检查 调整 阈值
结果分析
定性报告单上，定量结果栏及参考 范围设置为N/A（无效栏）
1 定性结果判读
1）阴性对照Ct值均应显示为Undet。 阳性对照Ct值≤36。 符合以上两个条件，此反应是为有效。 2）样品的Ct值显示为Undet，判断为阴性。 3）样品的Ct值≤40，判断为阳性； 4）若为40＜Ct值＜45的样本建议重做，重做结果Ct值＜ 40者为阳性，否则为阴性。 5）如果出现Ct值＜15的强阳性样本，可直接报告为阳性或 自动分析，并将其从样品表中剔除，再按上面步骤分析其他 样本，或建议进行1/100稀释重做。
• 在PCR反应体系中有上下游引物， 在荧光PCR体系中也有上下游引物， 还加入了一个荧光基团-探针 荧光 • 猝灭
在PCR扩增过程中,特异性引物和探 针分别与靶序列结合，由于此时荧 光基团与猝灭基团离的很近，猝灭 基团对荧光基团的发光起到了抑制 作用，因此荧光基团不发光。
•
Taq酶在引物的引导下复制靶序列； 当遇到结合在两条引物之间的探针 时，发挥5′端外切酶功能，将探针 水解，水解下来的荧光基团受激发 发射荧光，每合成一条DNA链发射一 次荧光信号。
案 例 分 析
44岁女性，2008年10月24日，妇检宫颈光滑，滴虫（+）HPV16，52（+）
ห้องสมุดไป่ตู้
，TCT：炎细胞中度。未行阴道镜检查，2010年10月18日。阴道镜下宫颈活检
病理:鳞状细胞癌（中分化）。未按规范筛查及随访，导致宫颈癌发生。 广东省妇幼保健院
二、凯普HPV12+2检测试剂盒
荧光PCR原理
在全封闭体系中完成扩增与检测，有效 控制污染
70%-80%的宫颈癌都 是由HPV16、18型感染 引发的，可见在HPV荧光 分型的产品中，对HPV16、 18分型的重要性
•
•
•
•
操作简便，自动化操作，完成整个过 程只需要2-3个小时。 检测区域设计在HPV基因组E区，避
DNA提取
取800ul样本离心得沉淀
15
HPV16/18阳性的短 期风险也明显高于其 它致癌型HPV阳性
10 3.0% (1.9–4.2) 其它高危型 HPV阳性 0.8% (0.6–1.1) 高危型 HPV阴性 0 4.5 15 27 39 51 63 75 87 Follow-up time (months) 99 111 119.5
常见问题及解决方案
7 检测方法中“定性”和“定量”的问题 目前，尚没有任何一种检测方法可以达到“定量”检测HPV病毒的目的。这是由于 采样方法本身的局限性所造成的： 在采集宫颈脱落细胞的过程中，虽然反复强调要采集“HPV易感区——转化带”的 脱落细胞，但由于不同操作人员对“易感区”部位的判断以及取样手法的不同，我们 不能准确评估出取得的细胞样品中携带病毒分子的细胞数量。 比如：在第一次采集细胞样品时，取得了500个携带病毒分子的细胞，经过检测后 ，我们得出患者携带病毒数量是500；而对同一位患者进行第二次采集细胞时，由于 多刷了一圈或者恰恰取到了“病灶区”，所以取得了1000个携带病毒分子的细胞，经 过检测，又得出携带病毒数量是1000。因为采样操作本身的问题，使得前后这两个数 字已经失去了它所具有的含义，因此，再将这两个数字放在一起比较也就不具有任何 实际意义。而且，因为病毒载量与病变程度之间的关系尚没有完全阐明，所以HPV病 毒的定量检测对临床治疗没有任何指导意义。 如果一定要使用“定量”这个词语，那也只能在前面再加上“相对”二字。因为， 这个“定量”仅仅是将采集到的细胞样品中的病毒数量进行了“定量”，而不是对患 者本身所携带的病毒数量进行“定量”。
宫颈癌筛查技术— HPV12+2分型检测
一、HPV12+2检测的意义及临床应用
HPV的型别
目前已发现超过200种型别的人乳头瘤病毒（HPV）。 依据与生殖道肿瘤相关性，将HPV分为：
低危型 常引起外生殖道湿疣等良性病变；6、11、42、43、44等。 高危型 与子宫颈癌及子宫颈上皮内瘤变（CIN2/3）的发生相关； 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等。
高危型的HPV感染 宫颈癌的必要条件 HPV持续感染
（3）针对不同型别的感染采取不同的处理方案
相同细胞及组织学类型HPV阳性与阴性要区别对待
不同HPV感染型别要区别对待
例如：建议HPV16,18型的患者直接进行阴道镜检查；而对于其 他型别的感染，要结合细胞学诊断，一般不需要采取任何治疗 方法，但需要按时随访。
3
HPV分型检测的意义
（1）预测受检者发病的风险度，确定最佳的治疗时期
提示：不同的高危型促进LSIL（低度鳞状上皮内病变）向SCC（鳞状细胞癌） 转变的能力有差异。 HPV16，18 的致宫颈癌风险性大于其他高危型HPV。
Gary M. Clifford et al ; Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2005;14(5):1157 –64
基线筛查细胞学阴性/高危HPV阳性的女性10年内≥CIN3病变的累积发病率
HPV16+ 20 Cumulative incidence rate of ≥CIN3 (%) HPV18+ Other high-risk HPV+ High-risk HPV– 17.2% (11.5–22.9) HPV16+ 13.6% (3.6–23.7) HPV18+
常见问题及解决方案
6 阈值设置不同，是否会导致阴阳性结果判断的不统一？ 结果的判读不能只依赖于Ct值的大小，还要看是否出现明显的扩增曲线。二者 结合才能判断试验结果。 阈值设置的高低会使Ct值有一定的变化，但变化一般都比较小。只有很少的样 本会出现在Ct=40左右波动。这样的样本如扩增曲线明显可以判读为阳性，如扩 增曲线不明显或荧光增长值不高则建议重做。
当靶序列呈指数增长时，发射的荧 光信号量相应增长，因此只要标本 中含相应型别的HPV病毒就会有荧光 信号的积累，从而达到检测HPV DNA 的目的。
•
HPV系列产品
13种高危型HPV检测试剂盒
（HPV16、18、31、33、35 、39、45、51、52、56、 58、59、68） 不分型
14种高危型HPV检测试剂盒
（HPV16、18、31、33、35 、39、45、51、52、56、 58、59、66、68） 对HPV16、18分型
14种高危型人乳头状瘤病毒联合16/18基因分型检测（12+2）试剂盒
资质
• SFDA与欧盟的CE 认证
产品特点
至少需要四通道以上的荧光PCR检测 仪器，一次检测出14种高危HPV型 别：HPV-31，HPV-33，HPV-35， HPV-39，HPV-45，HPV-51， HPV-52，HPV-56， HPV-58， HPV-59 , HPV-66和HPV-68，同 时能对HPV16和HPV18进行分型检 测。 具有β-globin基因内对照，可以监测 所检测样本的可靠性。
DNA 模板（μl） 2/人份 2/人份
按样本数加入所需溶液的对应量，充分混匀再分装
仪器检测通道选择
HPV12+2 12种高危型 HPV16 HPV18 β-globin
报告荧光 FAM HEX/JOE ROX/Red 610 Cy5
淬灭荧光 None None None None
结果分析
检查 调整 基线 我们一般把荧光PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号（ baseline，基线期） ，即样本的荧光背景值和阴性对照的荧光值， 扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖。 荧光阈值的缺省设置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10 倍（仪器自动设置，auto）。但我们通常采用手动设置（manual ），手动设置的原则是该阈值要大于样本的荧光背景值和阴性对 照的荧光最高值，同时要尽量选择进入指数期的最初阶段，真正 的信号出现在荧光信号超过阈值后。