实验二 槐米中芸香苷的精制、水解与检识

实验二槐米中芸香苷的精制、水解与检识

【实验目的】

1、学会运用重结晶的方法精制芸香苷,并进行水解.

2、学会用显色反应检识黄酮类化合物.

【实验原理】

采用碱溶酸沉法提取,其原理是芸香苷结构中含有酚羟基,具酸性,能溶于碱水,当加入酸溶液后,则芸香苷沉淀析出.芸香苷的精制是利用其可溶于热水,难溶于冷水的性质与杂质分离.

【实验材料】

设备:电炉、托盘天平、500 ml烧杯、量筒、玻璃棒、滴管、抽滤装置、研钵、250 ml圆底烧瓶、冷凝管、新华色谱滤纸、试管、试管架。

药品:芸香苷粗品、浓盐酸、蒸馏水、2%硫酸、95%乙醇、氨水、三氯化铝、浓硫酸、α–萘酚、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、镁粉醋酸镁

【实验步骤】

1. 芸香苷的精制:

称一定重量的粗品，按约1∶200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使其全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。抽滤，置空气中晾干或60℃～70 ℃干燥，得精制芸香苷，称重。计算得率。

2. 芸香苷的水解:

取芸香苷1 g,研细后置于250 ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸溶液100 ml，直火微沸回流约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇(95%乙醇约15 ml)重结晶即得精制槲皮素。

4、检识：

(1)Molish反应：

取芸香苷少许置小试管中，加乙醇0.5 ml，加10%α-萘酚溶液1 ml振摇使溶解，沿管壁徐徐加入浓硫酸约0.5 ml，静置。观察两层溶液的界面变化，出现紫色环者为阳性。以同法试验槲皮素，比较二者的不同。

(2)酸性实验：

取小试管四支为一组，共二组，第一组每管中加入芸香苷1 mg，第二组每试管中加入槲皮素1 mg，每组分别加稀氨水、5% 碳酸氢钠溶液、5% 碳酸钠溶液和1% 氢氧化钠溶液各2 ml，振摇后，观察各管溶解情况，溶解的溶液应呈黄色。再加盐酸数滴，黄色应褪去或变浅，并有沉淀或浑浊析出。

(3)镁粉-盐酸反应:

取芸香苷1 mg，加乙醇1～2 ml在水浴上加热溶解，加镁粉约50mg，滴加几滴浓盐酸，溶液由黄色渐变红色者，表示有黄酮类化合物。以同法试验槲皮素。

(4)三氯化铝反应:

取芸香苷1 mg，加甲醇1～2 ml在水浴上加热溶解，加入1% 三氯化铝甲醇溶液2～3滴，呈鲜黄色，以同法试验槲皮素。

(5)醋酸镁反应:

取芸香苷1 mg，加甲醇1～2 ml水浴中加热溶解，加1% 醋酸镁甲醇溶液2～3滴，呈黄色荧光反应。以同法试验槲皮素。

【实验装置图】【实验结论】【实验注意】