实验一 变形虫、草履虫和水螅

实验一变形虫、草履虫和水螅

一、实验目的

1.通过变形虫、草履虫及其他肉足虫和纤毛虫的观察，了解肉足纲和纤毛纲的主要特点，并认识一些有经济价值或常见的种类；

2.通过眼虫和间日疟原虫生活史及其他鞭毛虫的观察，了解鞭毛纲与孢子纲的主要特征，并认识一些有经济价值或常见的种类。

3 通过水螅及其他腔肠动物的观察，了解腔肠动物门的主要特征。

二、实验内容

1. 眼虫的观察；

2. 变形虫的观察；

3. 草履虫的观察；

4. 水螅横切片、纵切片、水螅精巢、卵巢切片、薮枝虫、水母、海葵等示范标本。

三、实验仪器设备

显微镜、电脑、投影仪等。

四、主要使用材料、药品及试剂

变形虫和草履虫活体或装片、眼虫活体和间日疟原虫生活史的装片、载玻片、盖玻片、生理盐水、5%的冰醋酸等。水螅横切片、纵切片、水螅精巢、卵巢切片、5%的醋酸等。

五、实验操作与观察

(一) 眼虫的观察（制作临时装片）（视频1）

(二)变形虫的观察（学习变形虫临时装片的制作方法以及变形虫的形态结构）。（视频2）

吸一滴变形虫培养液，置于载玻片上，加盖玻片，先在低倍镜下寻找，此时，可将光线调暗些，如发现天蓝色的透明体，而体形又缓缓改变的，即确定为变形虫，再换高倍镜仔细观察以下各部分：

1．质膜(P1asma membrane)：为虫体外表极薄的一层膜，由细胞质形成。

2．细胞质(cytoplasm)：可分为两层

(1)外质(ectoplasm)：质膜周围的一层，薄而透明，较致密。

(2)内质(endoplasm)：位于外质的里面，色较暗，含有许多颗粒。 3．伪足( pseudopodium)：为细胞质突起部分，可以向任何一个方向伸出，数目不定，在运动时，可清楚见到细胞质流动，伪足形状视种而异，有指状、针状、丝状等，如能见到摄食，则可观察它是如何捕捉食物的。

4．食物泡(food vacuoles)：为内质里大小不等的圆形泡，泡内含有各种食物颗粒，可注意观察其位置是否固定。

5．伸缩泡(contractile vacuole)：为一透明的圆形液泡，生活时不断伸缩。

6．细胞核(nucleus)：较透明，位于内质中央，略呈椭圆形，如分辨不清，可以在盖玻片边缘加一滴碘液或1％醋酸或中性红均能明显可见。

(三)间日疟原虫生活史的观察（永久装片）

在间日疟原虫血液染色涂片上，加1—2滴香柏油，移至显微镜下，将油镜头对准香柏油，此时，慢慢扭转粗调节器，同时，从侧面进行注视，防止油镜头接触涂片，在油镜头接触到香柏油后，可以目镜观察一下，如看不到红色圆形的红血细胞，可旋扭细调节器，直至看清时为此，然后，在镜下寻找寄生于红血细胞内的疟原虫。红血细胞内各期疟原虫的细胞质被染成蓝色，细胞核被染成红色，找到后仔细观察以下各期形态结构。

1、环状体(rig-form)

亦称小滋养体或环状滋养体，是疟原虫钻入红血细胞1—3小时后的形态，经染色后，在显微镜下可见疟原虫纤细环状的细胞质呈蓝色，有一深红色的核偏在一边，中间为染色极淡的空胞。

2、变形虫期(amoeba stage)

亦称大滋养体或阿米巴状滋养体，为环状体的继续发育，个体增大，细胞质呈变形虫状，蓝色，生活时可向各方伸出伪足。

3、裂殖体(schizont)

在变形虫期发育成熟时，核即开始分裂，此时，称早期裂殖体。核首先一分为二，二分为四，最后达12—14个，不久细胞质也随之分裂，每一个核被部分细胞质包裹起来，成为许多椭圆形的裂殖子，裂殖子几乎占满了涨大的红细胞，此时称裂殖子(merozoite)，约48小时，红细胞破裂，裂殖子散入血流。

4、大配子母细胞(macrogametocyte)

虫体较大，几乎占满胀大了的红细胞，核偏在一边，核内染色质较致密，深红色。细胞质染成深蓝色。

5、小配子母细胞(microgametocyte)

虫体稍大于正常的红细胞，核较大，核内染色质较疏松，淡红色，位于虫体的中央．细胞质染成淡蓝色。

(四)草履虫的观察（学习草履虫临时装片的制作方法以及草履虫的形态结构）。（视频1，2，3）

1. 运动情况的观察

吸草履虫培养液一小滴于载玻片上，加盖玻片后，移至显微镜下。用低倍镜观察虫体正常运动和

遇到障碍物以后的运动情况，如虫体运动太快，可用吸水纸从盖玻片边缘吸去一些水(注意不要吸干)，即可稍减弱虫体的运动。

2．外部形态和内部结构的观察：

滴一滴稀糊状的甲基纤维素(将粉状的甲基纤维素少许置于50ml的广口瓶中，加水，用玻璃棒调成稀糊状)于载玻片上，再加上一小滴草履虫培养液于稀糊状的甲基纤维素上，盖上盖玻片，此时，虫体就不甚活动。先在低倍镜下观察外形，再换至中倍镜或高倍镜，依次观察下列各部。

(1) 表膜(pellicle)：为虫体最外一层坚韧而略具弹性的保护薄膜。

(2) 纤毛(cilium)：将光圈缩小后，可见虫体周围有许多不断摆动的纤毛，注意纤毛是否等长。

(3) 细胞质(cytoplasm)：分内质和外质，外质靠近表膜、透明而粘稠，外质里面，呈较稀颗粒状的即是内质。

(4) 口沟(oral groove)：在虫体前侧面，斜伸向后，凹入体内的纵沟。

(5) 胞口(cytostome)：为口沟底部一个椭圆形的小孔。

(6) 胞咽(cytopharynx)：连接在胞口的后端，略呈弯曲的管状，背侧有许多纵列而密集的纤毛，不停的划动而呈波动膜。

(7) 食物泡(food vacuole)：为充满体内大小不等的圆形泡，自盖玻片边缘加一滴中国墨汁或

中性红等喂草履虫，可观察到黑色或红色食物泡在虫体内形成过程和食物泡随原生质流动的情况及消化过程．

(8) 伸缩泡(contractile vacuole)：二个，位置靠近两端，呈透明的圆形泡，每个伸缩泡周围有6—11个放射管，可注意观察前后二个伸缩泡之间的关系，以及伸缩泡和放射管之间的关系。

(9) 胞肛(cytoproct)：位于口沟一侧的下端，只有在虫体排泄废物时，才能见到。

(10) 细胞核(nucleus)：生活时不易见到，用浮尔根反应法方可见到。大核(macronucleus)一个，位于虫体的中部，呈肾形；小核(micronucleus)一个，位于大核的凹陷处。

(11) 刺丝泡(trichocyst)：位于表膜周围的外质内，呈透明的棒状体，自盖玻片边缘加黑墨水或1％醋酸一滴，可以很快看到许多刺丝的放射状，如乱发。

3. 草履虫的趋性

在载玻片上分别滴二滴培养液，其间用解剖针划一桥沟通，将其中一滴加入少量氯化钠(约0.5％)，观察草履虫趋向何方。

（五）水螅活体和水螅横切片、纵切片、水螅精巢、卵巢切片的观察；薮枝虫、水母、海葵等标本（示范）。