全反式维甲酸ATRA

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NBT还原实验
台盼蓝染色结合细胞计数
* Nutlin-1仅对HL60或NB4细胞株（p53突变或缺失）具有一定的
增强ATRA分化诱导能力的作用，而对U937 （p53野生型）无增强作 用。
？Nutlin-1增强ATRA分化诱导能力的作用是否必须在p53无功能的
细胞株中才能体现？
研究结果及结论3
Western Blotting法
* Nutlin-1与ATRA均为p-gp的底物，Nutlin-1与ATRA共同作用时
能够抑制ATRA的外排，增强ATRA的分化诱导作用。
研究结论
ATRA
p-gp
ATRA Nutlin-1
ATRA
HL60/NB4 cells
Nutlin-1增强分化能力 的作用仅在经ATRA诱导 高表达p-gp的细胞株中 发挥，而与p53通路无关。
p53野生型或p53缺失的U937细胞中诱导p-gp的高表达。
？ATRA诱导p-gp高表达的现象是否与Nutlin-1增强ATRA分化诱导
能力的作用相关？
研究结果及结论5
p-gp ATPase 活性检测
Nutlin-1a
Nutlin-1b
Western Blotting法
Real Time PCR法
CD11b表面抗原检测
* Nutlin-1增强ATRA分化诱导能力的作用与p53无关。 ？Nutlin-1增强ATRA分化诱导能力的作用机制是什么？
研究结果及结论4
Real Time PCR法
JC1、Rhodamine123外排实验
MTT法
Western Blotting法
* ATRA能够在HL60及NB4细胞中诱导p-gp的高表达，但不能在
研究背景——ATRA
肿瘤的诱导分化疗法是肿瘤治疗学研究的新领域。诱导分化 (induction of differentiation)是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导 剂的作用下，向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象。 全反式维甲酸(ATRA)诱导分化治疗已成为治疗急性早幼粒细胞 白血病的首选手段。 维甲酸耐药的机制可能与维甲酸分解代谢作用增强、与胞浆维 甲酸结合蛋白的结合增强等作用相关。
研究背景——Nutlins
Stratege1
MDM2Biblioteka Baidu
1
p53
2
3
Degradation Nuclear export
Apoptosis Cell cycle arrest
DNA repair …
MDM2
p53
Stratege3 （Nutlins）
Stratege2
研究结果及结论1
MTT法
PI单染结合流式细胞术
* Nutlin-1仅对p53野生型的白血病细胞具有一定的增殖抑制及凋亡
诱导作用，对p53突变或缺失的白血病细胞无细胞毒作用。
？Nutlin-1是否与ATRA具有协同诱导白血病细胞分化的作用？若有，
则其分子机制是否与p53相关？
研究结果及结论2
Counts
CD11b% CD11b表面抗原检测
CD11b表面抗原检测