凝血酶原时间测定(PT)
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凝血酶原时间测定(PT)
一、测定原理:
1、仪器自动记录血浆中加入试剂(组织促凝血酶原激酶)使凝血酶原变成
凝血酶,纤维蛋白原变成纤维蛋白的所需的凝固时间,是反映血浆中凝血酶原,因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ以及纤维蛋白原在血浆中水平的试验,是外源性凝血系统的筛选试验。
2、仪器检测原理(凝固法):
检测杯两侧独立的线圈产生相反的磁场,驱动钢珠在杯底沿弯曲的轨道运动。一旦被测血浆开始凝固(加入少激活试剂),血浆粘度增加,改变了钢珠的运动,使其减慢,并且振减小。此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。
二、标本要求:
1、凝血专用管(CTAD管,枸椽酸钠0.109M,蓝帽)抽取静脉血至刻度线,
充分混匀。1000转离心10分钟后2小时内测定完毕。
2、测定量 50ul血浆
三、试剂:
1、STAGO公司原装试剂STA®-NEOPLASTINE® CL PLUS
2、保存条件:2-8℃
3、使用条件:使用前干粉与稀释液混匀,放入搅拌珠,以保持试剂为混悬液。条码扫描后放入仪器试剂柜特定位置。试剂在试剂柜内(17±2℃)稳定48小时。
四、仪器和材料:
1、STA 全自动血凝仪
2、含有磁珠的反应杯
编写:伍海波制定日期:2011.12.1
五、标准和质控:
1、预定标,标准曲线由厂家在试剂中提供。
2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉,保存条件
2-8℃。使用前加蒸馏水1ml,混匀即可使用,试剂开启后在试剂柜内稳定8小时。
六、操作程序:
1、装卸试剂:F2键打开试剂柜,条码扫描后确认试剂量,放入特定孔(带搅拌珠混匀功能)即可。
2、定标与室内质控:更换试剂批号时仪器根据每批试剂的标准曲线自动定标,24小时室内质控自动测定一次,未通过则仪器会提示报警。
3、标本测定:F1键打开标本柜,输入号码后随机插入标本孔,选择测定项目后关闭标本柜。吸样针加50ul血浆入反应杯,预温240秒后加入100ul PT试剂并开始计时。秒数、活度和INR值计算均由仪器根据曲线自动完成换算。
4、传送并核收结果。
5、注意事项:
a、血量与抗凝剂比例适宜,离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定
结果。
b、标本无凝固。
七、计算和参考值
由仪器自动完成,正常参考值:12-15秒,百分比活度>70%,INR 0.95~1.0 INR=(病人PT秒数/ 对照PT秒数)ISI(国际敏感指数)
八、方法学特性
1、分析范围:10-120S
2、精密度:CV 0.72% (批内)CV 1.55%(批间)
编写:伍海波制定日期:2011.12.1