项目：维生素B12注射液含量测定[优质PPT]

表2 维生素B12注射液含量测定所需仪器
仪器名称
规格型号
紫外-可见分光光度计 北京通用T6
数量 1台
石英比色皿 移液管 容量瓶 洗瓶 小烧杯 胶头滴管 大烧杯 洗耳球
石英 10ml 100ml 500ml 100ml 2ml 500ml 塑料
1套 1支 2支 1支 7 1个 1支 1个 1个
用途 含量测定
11 （通则0401）
11
P55-56
三、实验实施
（一）.使用前仪器的校正和检定
1.2 波长准确度检定方法 1.用低压汞灯检定 2.用仪器固有的氘灯检定 3.用氧化钬玻璃检定 4.用高氯酸钬溶液检定 12
（通则0401）
12
P55-56
三、实验实施
（一）.使用前仪器的校正和检定
2.吸光度准确度
精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg
表1 分光光度法允差范围
波长 235 257 313 350
吸收强度 最小 最大 最小 最大
吸收系数 E 1 % 1cm
124.5 144.0 48.6 106.6
允差范围 123.0～126.0 142.8～146.2
47.0～50.3 105.5～108.5
14
（通则0401） P56
14
三、实验实施
（通则0401） P56
15
三、实验实施
（二）. 供试品溶液的配制
维生素 B12注射液 水 10.00ml
平行配制2份
100ml
16
16
三、实验实施
1.移液管使用
17
17
三、实验实施
1.移液管使用
移液管、刻度吸管 移液管的1的8 拿持
润洗
18
三、实验实施
1.移液管使用
吸液
调节1液9 面
放出液体
7.记录与计算 1.计算供试品的百分含1量0 % 2.计算平均百分含量%
标示量%= 平均百分含量%
8.结果与判定 1.将测得的含量与药典规定值比较，得出 结论。 2.相对偏差均应在±0.5%以内。
相对偏差= 结论：
10
三、实验实施
（一）.使用前仪器的校正和检定
1.波长准确度 1.1 波长准确度的允差范围 紫外-可见分光光度计波长准确 度允许误差，紫外区为±1nm，500nm处±2nm。
1 ml
ml
5
二、 任务分解
3. 制定计划
(1)填写所需溶液、药品及仪器
表1 维生素B12注射液含量测定所需药品
药品名称
规格
数量
用途及可用量
维生素B12注射液 2ml：0.5mg/2盒
2盒
药品，1人
水
纯化水
500ml，1人 仪器清洗、溶剂
6
6
二、 任务分解
3. 制定计划
(1)填写所需溶液、药品及仪器
4
计算稀释倍数
4
以下均以规格2ml：0.5mg为例
样品溶液：实际使用的维生素B12注射液 供试品溶液：按要求配制的每1mL中约含维生
素B12 25μ g的溶液。
稀释 供 样 倍试 品 数品 溶 5 0 2 .溶 5 液 m u52 g m g 液 浓 l0 0 .0 .2 浓 度 m m 2 5m 5 度 g g l10
吸收光度
数据记录 溶剂空白吸收=
5.确定测定波 长
除另有规定外，在规定的吸收峰±2nm处， 测定波长= nm 再测几点的吸光度，吸光度最大的波长应 在规定的波长±2nm以内，并以吸光度最 大的波长作为测定波长。
6.吸光度测定 1.将参比液、测定液装于吸收池中。
A1=
2.以参比液为空白，测定吸光度，记录。 A2=
含量测定 溶液配制 溶液配制 洗涤、稀释
稀释 定容 废液杯 移液
7
二、 任务分解
8
8
二、 任务分解
3. 制定计划 (3)操作步骤
测定步骤
操作内容
数据记录
1. 杂散光的检查
定期检查
1.仪器检定
2.波长准确度、吸光度准确度检定。
3. 杂散光的检查
2.配制供试品溶液
精密量取一定体积定量稀释成规定浓度 的溶液。
维生素B12注射液含量测定
一、 任务依据
【中国药典】2015版 二部 P1236
维生素B12注射液
本品为维生素B12的灭菌水溶液。含维生素B12（ C63H88CoN14O14P）应为标示量的90.0%~110.0%
【含量测定】避光操作。精密量取本品适量，用水定
量稀释成每1mL中约含维生素B12 25μ g的溶液，照紫 外-可见分光光度法（通则02401），在361nm的波长处
，置1000ml量瓶中，用0.005mol/L硫酸液溶解并稀释至
1000ml，用配对的1cm石英池，以0.005mol/L硫酸液为空
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
白，在235、257、313、350nm分别测定吸光度，然后换
算成
E
1 1
% cm
，测得值应符合表1中1规3 定的允差范围。
（通则0401） P56
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三、实验实施
（一）.使用前仪器的校正和检定
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三、实验实施
测定吸光度，按C63H88CoN14O14P的吸收系数（
E
1% 1cm
）为
207计算，即得。
2
1. 实验原理
二、 任务分解
紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度法是通过被测物质在紫 外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范 围内的的吸光度，对该物质进行定性和定量分 析的光学分析方法。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长处 测出吸光度，然后用对3照品或吸收系数求算出 被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。
3
二、 任务分解
2.计算
根据维生素B12注射液【含量测定】中内容要求 描述，“用水定量稀释成每1mL中约含维生素B12 25μg的溶液”。
【规格】（1）1ml：0.05mg （2）1ml：0.1mg （3）1ml：0.25mg （4）1ml：0.5mg （5）1ml：1mg （6）2ml：0.5mg
供试品的名称、批号、 生产厂家。
3.比色皿配对
使用的石英吸收池必须洁净。当吸收池 中装入同一溶剂，在规9定波长测定各吸 收池的透光率，如透光率相差在0.3%以 下者可配对使用，否则必须加以校正。
9
二、 任务分解
3测. 定制步定骤 计划操作内容 (34收.)溶操剂空作白步吸 骤将白溶（剂即置空白1c光m路石中英不吸置收任池何中物，质以）空测气定为其空
（一）.使用前仪器的校正和检定
3 .杂散光的检查 可按表2所列的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石
英池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表2中规定。
试剂
碘化钠 亚硝酸钠
表2 杂散光的检查及限度
浓度（%，g/ml） 测定用波长（nm） 透光率（%）
1.00 5.00
220
15
340
<0.8 <0.8