亲和层析的原理
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亲和层析的原理
生物分子与亲和层析介质上的配体通过共价键、范德华力、疏水力、静电力等作用发生生物学专一性结合形成复合物,共价链接在载体表面的功能团配体上。
蛋白质亲和层析技术通过目标蛋白质与配体间通过特异性亲和力吸附而达到分离纯化的目的,具有生物专一性的特点,纯化效率高。
亲和层析是一种根据生物分子之间的特异相互作用来分离蛋白的层析方法,如酶和底物、受体和配体、抗体和抗原。
这种作用是特异性的也是可逆的,通过这种可逆的结合和分离来达到蛋白纯化的目的。
亲和层析介质的特点
➤基于配体和分离物间的特异性亲和作用,分离选择性强,效果好,纯化倍数高。
➤能完成一步方法很难完成的分离,如变性和非变性的,功能不同的蛋白。
➤通常一步纯化就可达到>90%的纯度
➤速度快,操作简单。