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1.2菌落数： 规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以
个/皿表示。
1.3原理： 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子
于培养基平皿，培养不少于2d的时间，让其繁殖到可见的菌落进行计 数，以平板培养皿中的菌落数来判定结净环境内的活微生物数，并以 此来评定洁净室的洁净度。
1.4步骤： 1.4.1 测试前培养基表面必须严格消毒； 1.4.2 将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个 打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中，在100000级，10000级按面 积大小一般放2个培养皿； 1.4.4 静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿 暴露时间不大于4h；
微生物相关知识 培训
目的
了解以下内容：
一、微生物基础知识 二、微生物污染的相关知识 三、洁净室主要微生物污染源及相关检测
一、微生物基础知识
什么是微生物 微生物的存在 微生物的益处 微生物的危害
什么是微生物
它们是非常小的单细胞或多细胞生物，不借助显微镜用肉 眼无法看到。
它们对营养的要求非常低。 它们是一类繁殖非常快的生物。 它们非常容易发生变异。 它们无处不在。 大多数微生物对人类有益。 有些微生物对人类有害。
二、微生物污染的相关知识
污染：在生产、取样、包装 或重新包装、贮存或运输等 操作过程中，原辅料、中间 产品、待包装产品、成品受 到具有化学或微生物特性的 杂质或异物的不利影响。
污染的形式和载体:
污染的形式: 尘埃粒子 微生物
污染的载体: 空气、水、表面、人。
微生物的污染途径
a)自身污染：由于患者和员工自身携带微生物而 污染。
2.霉菌
霉菌：为丝状真菌的统称。凡是在营养基质上能形成 绒毛状、网状或絮状菌丝体的真菌（除少数外），统 称为霉菌。
一般情况下，霉菌在潮湿的环境下易于生长， 特别是偏酸性的基质当中。
菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、 干燥、不透明，有的呈绒毛状或絮 状或网状等，菌体可沿培养基表面 蔓延生长，由于不同的真菌孢子含 有不同的色素，所以菌落可呈现红、 黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰 等多种颜色。
空气 水 设备 原辅料 人员
SUCCESS
THANK YOU
2019/6/15
主要的微生物污染源-空气
洁净度测定包括： 悬浮粒子 微生物
- 浮游菌 - 沉降菌 - 表面微生物
洁净区空气洁净度等级---悬浮粒子
洁净等级
≥0.5μm粒子
≥5.0μm粒子
100级
≤ 3520 个/m3
1.4 培养：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），在30-35℃培养箱中培养， 时间不少于2d 。
1.5标准:
洁净级别
100级 10,000级 1OO,000级
微生物最大允许数
浮游菌／立方米 5
100 500
2.沉降菌
1.1定义： 用GB/T16294-2010提及的方法收集空气中的活微生物粒子，
通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
b)接触污染：由于和非无菌的用具、器械或人的 接触而污染。
c)空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、附着 或被吸入而污染。
d)其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。
Biblioteka Baidu
控制微生物的污染途径
有效地阻止室外的污染侵入室内。 迅速有效地排除室内已发生的污染。 控制污染源，减少污染发生量。
微生物污染的特殊性
2. 液体培养基
3. 半固体培养
二、真菌
单细胞 真 菌
多细胞
酵母菌 类酵母菌 霉菌
效应：
引起物质变质腐烂的主要原因； 发酵、制药、食品工业等中具有重要作用； 少数致病。
黑曲霉菌
丝状真菌
1.酵母菌 固体培养 菌落特征： 菌落大而厚，圆形，光滑 湿润，粘性，颜色单调。 常见白色、土黄色、红色。
啤酒酵母菌落
多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个 /L。 1.3测试步骤：（参照GB/T 16293-2010） 1.3.1采样器、培养皿进入被测房间消毒灭菌； 1.3.2 采用仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器， 使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min,并检查流量并根 据采样量调整设定采用时间； 1.3.3关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子；置采样口于 采样点后，开启采样。
≤ 0个/m3
10,000级
≤ 352000 个/m3
≤2900个/m3
100,000级
≤ 3520000个/m3
≤29000个/m3
微生物检测
1.浮游菌
1.1定义：
菌落：微生物培养后，由一个或几个
微生物繁殖而形成的微生物集落，简称 CFU，通常用个数表示。
1.2浓度： 单位体积空气中含浮游菌菌落的
微生物的存在---- 无处不在！
水 土壤 空气 衣服 地板 海水 油膜 废水 排水口 洗手池 汽油罐
嘴 头发 皮肤 鼻子 肠道 食物 昆虫 动物 南极 (<00C) 火山口(>2500C)
微生物的益处
啤酒，葡萄酒的生产 面包酵母的生产 奶酪的生产 醋的生产 酸奶的生产 维生素的生产 类固醇的生产 抗菌素、干扰素的生产
细菌 原核生物：
（由原核细胞构成的）
放线菌
具有细胞结
微
构的微生物
生
真菌
物
的 种 类
真核微生物 显微藻类
（由真核细胞构成的）
水绵
没有细胞结构的
微生物：病毒
原生动物 草履虫
一、细菌： 分为杆菌、 球菌和螺 形菌三类
螺旋菌
弧状菌
链球菌
四联球菌
细菌群体形态
1. 固体培养 菌落：在固体培养基上,由单个 细胞繁殖形成的肉眼可见的子细 胞群体。 菌苔:大量细胞密集生长,结果长 成的各“菌落”连接成一片。
分解废物，循环利用 帮助肠道中的食物消化 除虫
微生物的害处
1、可引起局部感染----葡萄球菌 2、胆道和尿道感染----大肠杆菌 3、化脓性感染、中耳炎、肺炎----绿脓杆菌 4、 结膜炎----枯草杆菌 5、 使糖分解，药液产生有机酸----酵母菌 6、 使制剂霉坏，酸败变质----霉菌
是能繁殖的活细胞生物。 数量少而分布不均匀。 多数处于受损伤状态。 生存环境的多样性及复杂性。
防止交叉污染 ？
有需要时要洗手及消毒； 尽量减少直接以双手接触药品； 接触产品的表面及用具
用后清洗 转换产品时清洗
三、洁净室主要微生物污染源 及相关检测
洁净室主要微生物污染源
个/皿表示。
1.3原理： 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子
于培养基平皿，培养不少于2d的时间，让其繁殖到可见的菌落进行计 数，以平板培养皿中的菌落数来判定结净环境内的活微生物数，并以 此来评定洁净室的洁净度。
1.4步骤： 1.4.1 测试前培养基表面必须严格消毒； 1.4.2 将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个 打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中，在100000级，10000级按面 积大小一般放2个培养皿； 1.4.4 静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿 暴露时间不大于4h；
微生物相关知识 培训
目的
了解以下内容：
一、微生物基础知识 二、微生物污染的相关知识 三、洁净室主要微生物污染源及相关检测
一、微生物基础知识
什么是微生物 微生物的存在 微生物的益处 微生物的危害
什么是微生物
它们是非常小的单细胞或多细胞生物，不借助显微镜用肉 眼无法看到。
它们对营养的要求非常低。 它们是一类繁殖非常快的生物。 它们非常容易发生变异。 它们无处不在。 大多数微生物对人类有益。 有些微生物对人类有害。
二、微生物污染的相关知识
污染：在生产、取样、包装 或重新包装、贮存或运输等 操作过程中，原辅料、中间 产品、待包装产品、成品受 到具有化学或微生物特性的 杂质或异物的不利影响。
污染的形式和载体:
污染的形式: 尘埃粒子 微生物
污染的载体: 空气、水、表面、人。
微生物的污染途径
a)自身污染：由于患者和员工自身携带微生物而 污染。
2.霉菌
霉菌：为丝状真菌的统称。凡是在营养基质上能形成 绒毛状、网状或絮状菌丝体的真菌（除少数外），统 称为霉菌。
一般情况下，霉菌在潮湿的环境下易于生长， 特别是偏酸性的基质当中。
菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、 干燥、不透明，有的呈绒毛状或絮 状或网状等，菌体可沿培养基表面 蔓延生长，由于不同的真菌孢子含 有不同的色素，所以菌落可呈现红、 黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰 等多种颜色。
空气 水 设备 原辅料 人员
SUCCESS
THANK YOU
2019/6/15
主要的微生物污染源-空气
洁净度测定包括： 悬浮粒子 微生物
- 浮游菌 - 沉降菌 - 表面微生物
洁净区空气洁净度等级---悬浮粒子
洁净等级
≥0.5μm粒子
≥5.0μm粒子
100级
≤ 3520 个/m3
1.4 培养：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），在30-35℃培养箱中培养， 时间不少于2d 。
1.5标准:
洁净级别
100级 10,000级 1OO,000级
微生物最大允许数
浮游菌／立方米 5
100 500
2.沉降菌
1.1定义： 用GB/T16294-2010提及的方法收集空气中的活微生物粒子，
通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
b)接触污染：由于和非无菌的用具、器械或人的 接触而污染。
c)空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、附着 或被吸入而污染。
d)其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。
Biblioteka Baidu
控制微生物的污染途径
有效地阻止室外的污染侵入室内。 迅速有效地排除室内已发生的污染。 控制污染源，减少污染发生量。
微生物污染的特殊性
2. 液体培养基
3. 半固体培养
二、真菌
单细胞 真 菌
多细胞
酵母菌 类酵母菌 霉菌
效应：
引起物质变质腐烂的主要原因； 发酵、制药、食品工业等中具有重要作用； 少数致病。
黑曲霉菌
丝状真菌
1.酵母菌 固体培养 菌落特征： 菌落大而厚，圆形，光滑 湿润，粘性，颜色单调。 常见白色、土黄色、红色。
啤酒酵母菌落
多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个 /L。 1.3测试步骤：（参照GB/T 16293-2010） 1.3.1采样器、培养皿进入被测房间消毒灭菌； 1.3.2 采用仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器， 使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min,并检查流量并根 据采样量调整设定采用时间； 1.3.3关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子；置采样口于 采样点后，开启采样。
≤ 0个/m3
10,000级
≤ 352000 个/m3
≤2900个/m3
100,000级
≤ 3520000个/m3
≤29000个/m3
微生物检测
1.浮游菌
1.1定义：
菌落：微生物培养后，由一个或几个
微生物繁殖而形成的微生物集落，简称 CFU，通常用个数表示。
1.2浓度： 单位体积空气中含浮游菌菌落的
微生物的存在---- 无处不在！
水 土壤 空气 衣服 地板 海水 油膜 废水 排水口 洗手池 汽油罐
嘴 头发 皮肤 鼻子 肠道 食物 昆虫 动物 南极 (<00C) 火山口(>2500C)
微生物的益处
啤酒，葡萄酒的生产 面包酵母的生产 奶酪的生产 醋的生产 酸奶的生产 维生素的生产 类固醇的生产 抗菌素、干扰素的生产
细菌 原核生物：
（由原核细胞构成的）
放线菌
具有细胞结
微
构的微生物
生
真菌
物
的 种 类
真核微生物 显微藻类
（由真核细胞构成的）
水绵
没有细胞结构的
微生物：病毒
原生动物 草履虫
一、细菌： 分为杆菌、 球菌和螺 形菌三类
螺旋菌
弧状菌
链球菌
四联球菌
细菌群体形态
1. 固体培养 菌落：在固体培养基上,由单个 细胞繁殖形成的肉眼可见的子细 胞群体。 菌苔:大量细胞密集生长,结果长 成的各“菌落”连接成一片。
分解废物，循环利用 帮助肠道中的食物消化 除虫
微生物的害处
1、可引起局部感染----葡萄球菌 2、胆道和尿道感染----大肠杆菌 3、化脓性感染、中耳炎、肺炎----绿脓杆菌 4、 结膜炎----枯草杆菌 5、 使糖分解，药液产生有机酸----酵母菌 6、 使制剂霉坏，酸败变质----霉菌
是能繁殖的活细胞生物。 数量少而分布不均匀。 多数处于受损伤状态。 生存环境的多样性及复杂性。
防止交叉污染 ？
有需要时要洗手及消毒； 尽量减少直接以双手接触药品； 接触产品的表面及用具
用后清洗 转换产品时清洗
三、洁净室主要微生物污染源 及相关检测
洁净室主要微生物污染源