“转氨基作用”实验方法的改进

转氨酶反应后所生成 的氨基酸…。
在 过 去 的实 验 中 ， 用 纸 层 析 用 于检 测 转 氨 的 采 结果 ， 饱 和酚 做 为 展 层 剂 ， 燥 后 ， ０ ５ 的 茚 用 干 用 ．％ 三酮 显 色 。但是 苯 酚 是 一 种 有 毒 物 质 ， 有 强 烈 的 具
乙酸 、 氨 酸 标 液 （ ｍｇｍ ） 谷 氨 酸 标 液 （ ｉｇ 丙 １ ／ｇ、 １ ／ ｎ ｍＬ 、Ｈ ． ）ｐ ８ ０磷 酸 缓 冲 液 、 水 乙醇 、 素 、 三 酮 无 尿 茚
１ 材 料 与 器 材
１ １ 材 料 ．
的谷 氨 酸 一 酮 酸转 氨酶 （ Ｐ 催 化 一酮 戊 二 酸 丙 Ｇ Ｔ） 和丙 氨 酸 之 间 的 氨 基 移 换 反 应 生 成 丙 酮 酸 和 谷 氨 酸 ， 氨 酶催 化 的反 应 是 可 逆 的 。利 用 色 谱 法 鉴 定 转
新 鲜兔 肝 、％ａ 酮戊二 酸 、％丙 氨酸 、． ％碘 １ 一 １ ０５
得 了 良好 的 实 验 结 果 ，绿 色 环 保 。 关 键 词 ：展 层 剂 ；绿 色 环 保 ；实 验 教 学 中 图 分 类 号 ： ３ Ｑ３ 文献 标 识 码 ： Ｂ ｄｉ１．９ ９ ｊｉ ｎ １７ － ３ ５ ２ １． １０ ０ ｏ：０ ３ ６ ／． ｓ．６ ２ ４ ０ ．０ ２ ０ ．０ ｓ
等。
１２ 实验 器材 ．
刺激气味 ， 对皮肤有较强 的腐蚀性 ； 此外 ， 苯酚对实
验环 境 温度 的要 求很 高 ， 实验 室 温度 低 时 ， 和酚 凝 饱
结， 无法 展层 ， 达不 到预 期 的效果 。
培养皿（ ２个 ￣ ５ ｍ、 ｂ ｅ １个 ￣ ｃ 、 华 １号 滤 ｌ ｂ ｍ） 新 ５
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
纸 、 细管 、 毛 玻璃 匀浆 器 、 离心 机 、 浴锅 。 水
为 达 到绿 色 环 保 和 良好 的 实 验 效 果 ， 实 一 本
验分 别 尝试 多种 组 分 的展 层 剂 取 代 原 有 的 饱 和 酚 。
堡
！＝ 堕
实
验
室
科
学
第１卷 ５
第１ 期
２ １ 年 ２月 ０２
Ｆｂ ２ ２ ｅ ． ０１
ＣＮｌ ２—１ ５ ／ ３ ２ Ｎ
Ｌ ＢＯＲＡＴＯＲＹ Ｓ ＥＮＣＥ ＣＩ
Ｖ０ ． ５ Ｎｎ １ １１
“ 转氨基作 用 ” 实验方法 的改进
张宝珠 ，赵 玉红 ，李 欣 ，张金红 ，蔺宝珠
Ｉ ｒ ｖ ｍｅ ｔｏ ｈ ｔ ｏ ｓ ｏ ｒ ｎ ａ ｎ ｔ ｎ ｆ ｒ ｂ ｓｃ ｍｐ ｏ ｅ ｎ ｆｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｎ ｔａ ｓ ｍｉ ａ ｉ ｏ ａ ｉ ｏ ｂ ｏ ｈ ｍｉａ ｘ ｅ ｉ ｎ ｉ ｃ ｅ ｃ ｌｅ ｐ ｒｍｅ ｔ
Ｚ ＨＡＮＧ ａ － ｈ Ｂ ｏ ｚ ｕ， Ｚ ＨＡＯ Ｙｕ ｈ ｎ － ｏ ｇ，Ｌ － ｎ，Ｚ Ｉ Ｘｉ ＨＡＮ Ｊｎ ｈ ｎ ，Ｌ Ｎ Ｂ ｏ ｚ ｕ Ｇ ｉ － ｏ ｇ Ｉ ａ－ｈ （ ｏｌ ｅｏ ｉ ｃｅｃ ，Ｎ ｎ ａ Ｕ ｉ ｒｉ ，Ｔａｊ ０ ０ ，Ｃ ｉａ） Ｃ ｌ ｇ ｆ ｆ Ｓ ｉ ｅ ａ ｋ ｉ ｎｖ ｓｙ ｉｎｉ ３ ０ ７ ｏ Ｌｅ ｎ ｅ ｔ ｎ １ ｈｎ
转 氨酶催 化 一 基 酸 的 仪一 基 与 仪 酮 酸 的 氨 氨 一
一
验步骤 ； 降低 了实验试剂对师生健康 的危害 ； 而且也
降低 了实验 成本 。
酮基 之 间 的互换 ， 氨 酶在 氨 基 酸 的代 谢 、 转 在糖 、
脂、 和氨 基酸 的 相 互 转 变 中起 重要 作 用 。肝 组 织 中
Ａｂｓ ｒ ｃ ： Ｕｓ ｉ ｍｐｒｖ ｄ ａ ｏ ｕ ｅ ａ ｃ ｈ ｌ ｗａｅ ｔａ ｔ ｅｎｇ ｉ ｏ ｅ ｂｓ ｌ ｔ ｌｏ ｏ ： ｔｒ： ｕ ｅ ｒ ａ： ａ ｍｍｏ ｉ ｔ ｒａ ｅ ｅ ｏ ｉ ｇ ｒ ａ ｅ ｔｒ — ｎ ａ ｗａｅ ｓ ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｅ ｇ ｎ ｅ ｐ ａ ｅ ｒ ｄ ｔ ｎ ｌｓ ｔ ｒ ｎ ｈ ｎ ｌｔ ｅ ｅ ｔ ｔ ｅ ｍｉ ｃｄｓ ｃ ｎｅ ｔ ｏ ｈ ｔａ ｓ ｍｉ ａｉｎ． Ｔｈ ｍ— ｌ ｃ ｓ ｔａ ｉ ｏ ａ ａ ｕ ａ ｔ ｐ ｅ ｏ ｏ ｄ ｔｃ ｈ ａ ｎｏ ａ ｉ ｏ ｔｎ ｆ ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｎ ｔｏ ｉ ｅｉ ｐ ｏ ｅ ｔ ｄ ｅ ｕｃ ｈｅ ｈ ｚ ｒ ｆｐ ｅ ｏ ． Ｉ ｓｍｐ ｉ ｅ ｘ ｅ ｍｅ ｔ ｌｐｒ ｃ ｄ ｒ ｒ ｖ ｄ ｍｅｈｏ ｓ ｒ ｄ ｅ ｔ ａ ａ ｄ ｏ ｈ ｎ １ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓｅ ｐ ｒ ｎ ａ ｏ ｅ ｕ ｅ，ｃ ｓｄ ｗｎ ｔ ｅ ｃ ｓ ｆ ｉ ｕｔ ｕ ｈ ｏ ｔ ｏ ｈ ｘ ｅ ｍｅ ｔａ ｅ ｓｖ ｒ ｏ ｄ ｒ ｓ ｌｓ ｏ ｈ ｘ ｒｍｅ ｔ Ｉ ｓ ｇ ｅ ｎ ｅ ｖ ｒ ｎ ｎ ａ ｒ ｔ ｃｉｎ． ｆｔ ｅ ｅ ｐ ｒ ｎ ｎｄ ｇ ｔ ｅ ｙ ｇ ｏ ｅ ｕ ｔ ｆｔ ｅ ｅ ｐｅ ｉ ｉ ｎ ． ｔｉ ｒ ｅ ｎ ｉｏ ｍｅ ｔｌｐ ｏｅ ｔｏ Ｋｅ ｒ ： ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｅ ｇ ｎ ；ｅ ｖｒ ｎ ｎ ａ ｒ ｔ ｃｉｎ； ｅ ｐｅ ｍｅ ｔ ｌｔ ａ ｈ ｎ ｙ ｗｏ ｄｓ ｅ ｅｏ ｉ ｇ ｒａ ｅ ｔ ｎ ｉｏ ｍｅ ｔｌｐ ｏｅ ｔｏ ｘ ｒ ｎ ａ ｅ ｃ ｉ ｇ ｉ
３０７ ） ００ １ （ 开大 学 生命 科 学学 院 ，天 津 南
摘 要 ：用 改进的无水乙醇 ： ： 素 ： 水 尿 氨水配方做为展 层剂代 替传统 的展层 剂— —饱和 酚来检测 氨基移换 作用后 的氨基酸含量 。改进后 的实 验方 法降低 了苯 酚对人体 的危 害 ，简化 了实验步 骤 ，降低 了实验成本 ，取