实验四 组织兴奋性的观察

图示：不同频率的连续刺激对骨骼肌收缩的影响
实验步骤
1、 破坏脑和脊髓
左手握住蟾蜍，用食指压住头部前端，拇指按压背部， 使头前俯。右手持探针由头前端沿中线向尾方滑触，触及 凹陷处即枕骨大孔，将探针由此刺入，再将探针插入颅腔， 左右搅动，毁脑。而后，探针再由枕骨大孔向后刺入脊椎 管，毁脊髓。待四肢紧张性完全消失，即表示脑和脊髓已 完全破坏。
六、注意事项
蟾酥对人无甚损害，若不慎溅入眼内，可立即用 生理盐水冲洗。制作标本时，可先在耳后腺挤压， 以促使其排尽。 不要损伤坐骨神经及腓肠肌，尤其是两者相接处。 分离神经及肌肉时，只用玻璃分针，不可用手或 金属器械触摸，且不要过度牵拉。 尽可能短时间内完成，否则神经肌接头处易疲劳。 经常用任氏液润湿标本，以免干燥死亡。
二、原理
单收缩：用单个刺激来刺激肌肉或支配 肌肉的神经引起肌肉一次快速收缩。 不完全强直收缩：后来的刺激在前一次 收缩的舒张期结束之前到达肌肉形成的 收缩。 完全强直收缩：后来的刺激在前一次收 缩的收缩期结束之前到达肌肉，肌肉维 持稳定、持续的收缩状态。
每组曲线中，上方曲线是肌 肉等长收缩的记录，下方曲 线是肌肉动作电位的记录。 结论：刺激频率依次增加时 ，机械收缩可出现逐渐融合 ，表现不完全和完全强直收 缩，但动作电位始终彼此分 离。
5.坐骨神经－腓肠肌标本固定
股骨固定于肌板上电极旁的小孔内，并使腓肠肌 在股骨上面，肌腱扎线与换能器相连，坐骨神经 置于刺激电极上。
6仪器连接：电极刺激器输出与肌板 上刺激电极相连。
五、观察项目
阈强度、顶强度的测定 “单脉冲”触发方式“外”，波宽2-5ms（总共 20ms）。粗Байду номын сангаас为2V，细调由零逐渐增大，手动单 次记录肌肉收缩曲线，确定阈刺激、阈上刺激及 最大刺激强度。 腓肠肌单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩 记录 顶强度下刺激，连续持续时间约2秒。触发方式 为“内”。调节频率由小到大。 普鲁卡因麻醉坐骨神经结构观察 1％普鲁卡因棉花条包裹于神经中段，1-2min后， 用上述同样刺激，观察肌肉收缩反应。
七、讨论：
刺激强度、频率与肌肉收缩的关系及刺激 神经引起肌肉收缩的原理。
组织兴奋性的观察
一、实验目的
利用蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本， 观察电刺激引起肌肉反应，印证神 经肌肉组织的生理特性。
二、原理
兴奋性：机体受到周围环境发生改变的刺激时具 有发生反应的能力。 阈刺激：能引起组织产生兴奋的最小刺激。 阈强度：阈刺激所达到的刺激强度。 顶刺激：能引起组织产生最大兴奋的最小刺激。 顶强度：顶刺激时相应的刺激强度。 阈上刺激：介于阈刺激和顶刺激之间的刺激。 阈上刺激强度：阈上刺激相对的刺激强度。 一个刺激能否使组织兴奋，与刺激形式、刺激时 间、刺激强度、强度－时间变化率有关系。
3. 游离坐骨神经
先背位固定标本于蛙板上，于坐骨神经根部穿线 结扎并剪断，轻轻提起扎线，剪去神经分支。 再将标本腹位置于蛙板上，用玻璃分针划开梨状 肌及及其附近的结缔组织，小心分出坐骨神经大 腿部分，剪断分支，并游离至膝关节。
4.制成坐骨神经－腓肠肌标本
在膝关节周围剪断全部大腿肌肉，并将股骨刮净 保留2/3股骨。 跟腱处用线结扎，剪断并游离腓肠肌至膝关节处， 并剪断小腿部分。 标本置于任氏液中浸泡10min，使其兴奋性稳定。
2、 剪除躯干上部及内脏并剥皮
第一、二剪：用 手术剪从上肢下 缘开始，沿两侧 将腹部侧面肌肉 及皮肤剪开，直 至下肢上部。
第三剪：沿上肢下缘剪一环口，并且向腹面将内 脏及腹部皮肤全部向下剥下。
第四剪：剪去已剥下的内脏及皮。
第五剪：剪去肛周一圈皮肤。用镊子夹住上肢下 缘的皮，左手握住蟾蜍头部，将蟾蜍下部皮全部 剥下，剪断脊柱（自上肢下缘）。将标本放在蛙 板上并滴上任氏液，再将手及用过的器械洗净。