生化检验常见问题及处理方法课件
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处理方法：应在2h内分离血清/血浆，尽量缩短时间；离心 时间一般5-10分钟/3000转；新采集标本 应室温（22～25℃）放置30～60分钟，使其自行 凝集后离心。不能及时做的标本分离出血清，室 温放置不超过4小时，2-4℃保存不超过8小时，在 -20℃条件下可保存较长时间。
二、检验过程常见问题及处理
（2）检验项目间的交叉污染
相邻检验项目的干扰，A项目试剂或产物中含有B项目 的测定物质或影响B项目反应，而导致B试验结果的改变。 如：Mg放在ALP项目后面测定，可能会使检测结果偏高或重 复性差。因ALP试剂中含有Mgcl2，使测定结果偏高等。
处理方法：
① 调整实验的前后顺序来消除这种影响； ② 在两个项目之间设定其他项目或设置清洗剂并设定清洗 次数。
基本概念
检测系统：一个检验项目所涉的仪器、试剂、校准品、 测量程序（操作程序、质控程序、维护保养程序、检测 用水）、操作人员、消耗品、质控品等组合。
➢ 量值溯源：是通过一条具有规定不确定度的不间断的 比较链，使测量结果能够与规定的参考标准联系起来 的一种特性。（通常是国家计量基准或国际计量基准）
检验前的质量管理是检验质量管理中最薄弱、 最易出现问题、最难控制的环节，标本质量不符合 要求占60%-80% 。
按时间顺序包括： 检验申请 患者准备和识别 原始样本采集、运送和实验室内传递。
检验前常见问题及处理
1、患者的准备的常见问题及处理: （1）饮食：餐后、饮料、烟酒等，影响患者的检测 结果。 处理方法：患者空腹（8-12小时）。 （2）药物等其他因素的影响:如含VC、抗肿瘤药物、 降脂药物、输液等。 处理方法：尽量停止使用药物。超过药物的半衰期。
1、患者的准备问题； 2、标本的采集、运输、验收等问题。
二、检验过程常见问题
1、标本处理问题；2、水质问题；3、交叉污染问题； 4、校准问题； 5、试剂问题；6、仪器问题； 7、参数问题； 8、质控问题 9、干扰物质
三、检验后常见问题
1、检验报告基本信息问题； 2、检验报告签发问题。
一、检验前常见问题及处理
（3）标本验收：标本错误、标本外观溶血、脂血、 样本留取时间过长等。 处理方法：严格核对标本、拒收严重溶血、脂血、 标本不足留取时间过长的标本。
二、检验过程常见问题
检验过程有三种说法：
实验室接收标本开始，直至获得检测结果的过程。 自仪器检测开始至获得检测结果。 标本开始处理至获得检测结果。
检验前常见问题及处理
2、标本的采集、运输、验收等问题及处理。
（1）标本的采集：止血带压迫时间过长、标本混有气泡、 溶血、污染、输液时采血、标本量不足等。 （2）标本运输：时间过长、过度震荡、污染、高温变质、 冷冻溶血、阳光照射等。 处理方法：及时送检、用标本转运箱，外委标本要求要严 格避免上述情况。
接近开瓶期，使试剂变质、挥发、PH改变等影响 该项目的化学反应。
（4）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用；
试剂稳定的情况下，进行该项目校准得到一个F(校准因 素)值，在稳定的期内，反应的吸光度变化乘以F值等于测定 结果。如果试剂的成分含量发生变化，再校准后F值就会发 生变化，如果还用上述的F值得出的结果不准确。
临床项目有ALP、r-GT、等。
ALP（AKP）的测定原理
试剂
R1：AMP缓冲液 、MgCl2 ；R2：对硝基苯磷酸盐
化学反应
ALP 磷酸对硝基苯酚+H2O → 对硝基苯酚+磷酸盐
计算
ALP(U/L)= ∆AR min/∆AS min×C=∆AR/min×F
H2O2偶联的指示系统（Trinder反应）
二、检验过程常见问题及处理
4、校准问题及处理；
仪器不定期仪器校准、检测系统不校准、校准品失效或适用不当、 校准品不匹配、更换试剂批号或仪器维修后不校准，导致结果不良。 校准的分类： 仪器校准/产品校准：由仪器工程师在仪器安装使用后定期进行，主 要校准仪器的光路系统、温控系统、加注系统（样品针、试剂针位置） 等，通常是发给校准证书或校准报告。 检测系统的校准/功能校准：由检验人员使用校准物进行的分析校准。
（3）运动：剧烈的运动可使血中的一些酶类、离子等结果发生变化。 处理方法：检查前一天不要做剧烈运动。短期休息，平稳10分钟以上。 （4）情绪：情绪激动，影响神经内分泌系统，使一些检验结果偏高。 （5）体位：从立位到卧位使一些结果下降。 （6）特定时间采血：因人体生物节律的变化，不同时间采血检验结果 也会随着变化。如激素、糖耐量等。
C：标准值
F: 仪器自动换算的因数
其它显色反应（Ca2+）
Ca2+测定原理： 甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca2+形
成红色络合物，引起612nm吸光度的上升，上升程 度与Ca浓度成正比 。
碱性条件
MTB + Ca2+ → 红色络合物
二、检验过程常见问题及处理
1、标本处理问题及处理： 放置时间过长、离心不充分、血清剥离不当等。
常见检验项目：ALT、AST、CK、LDH、α-HBDH、UREA、NH4+ CO2、Glu（己糖激酶法）等
NAD+-NADH系统
பைடு நூலகம்
ALT（GPT）的测定原理：
试剂
R1：NADH 、LDH；R2：L-丙氨酸 、α-酮戊二酸
化学反应
ALT L-丙氨酸 +α-酮戊二酸 → 丙酮酸 + L-谷氨酸
LDH 丙酮酸 + NADH + H+ → L-乳酸 + NAD+ + H2O酸
人
械
本 剂拌 1
剂拌
2
工 编
臂 代
混匀
反应
比 光电感应器检测 色 吸光度变化
程
替 手 比 比比
比比
工
色 杯
色色 杯杯
色色 杯杯
传 输
打印机打印结果
传输
计算机进行计算 按仪器设定标准曲线
➢ 自动分析仪的基本分析方法
终点法： ➢ 1点终点法 ➢ 2点终点法 ➢ 多点终点法 速率法： ➢ 速率法 ➢ 2点速率法（固定时间法）
H2O2在过氧化物酶的作用下，可使无色色 素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度 的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。
临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu （氧化酶法）Cr、UA等。
GLU的测定原理（氧化酶法 ）
试剂
R1：4-氨基安替吡啉 、抗坏血酸氧化酶 R2：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）酚
处理方法： 定期进行仪器校准，当仪器维修、生化试剂 批号或质控出现异常时进行校准，正确选择 和使用校准品，（试剂生产厂家校准品）， 有良好的溯源性，注意质控品的分装和保存。
5、试剂常见问题及处理：
（1）试剂质量问题： （2）试剂是否在有效期内及开瓶稳定性： （3）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用 （4）试剂瓶长期不清洗使新倒入试剂被污染 （5）试剂空白 （6）底物耗尽：
计算
吸光度-浓度曲线
其它显色反应（TP）
测定原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子
作用产生紫红色络合物，导致540nm吸光度的增加，增加 的程度与蛋白质的含量成正比。
碱性条件
酞键 + Cu2+ → 紫红色络合物
蛋白含量（g/L）= AR/AS ×C=AR×F
AR: 测定吸光度；
AS：标准吸光度
2、水质问题及处理： 生化用水不合格。常影响血清中离子及其他生化项目的检
测，常被忽略。 处理方法：
纯水分级(GB6682-2008水标准)与应用领域
三级水：电阻率≥0.2MΩ/cm，主要用于冲洗玻璃器皿，水浴等； 二级水：电阻率≥1MΩ/cm，用于制备常用试剂、缓冲液、仪器管道和比色杯清洗
等； 一级水：电阻率≥18.25MΩ/cm，常用于HPLC、原子吸收、分子生物学、细胞和
5、试剂常见问题及处理：
（1）试剂质量问题：
试剂有效成分含量不足，导致线性范围窄，高值测定不高； 试剂底物浓度不足。反应曲线斜率下降，灵敏度变低； 试剂自身不稳定，自行分解，工具酶纯度不够，杂酶含量过
多，测定结果变化。
（2）试剂的有效期及开瓶稳定性： 试剂是否在有效期内； 试剂开瓶时间过长，超过说明书中开瓶期或
化学反应
GOD 葡萄糖 + O2 + H2O → 葡萄糖酸 + H2O2
POD 2H2O2 + 4-氨基安替吡啉+酚 → 醌亚胺 + 4H2O
计算
GLU(mmol/L)= AR /AS×C
抗原抗体反应指示系统
特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反 应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波 长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗 原浓度成正比
➢ 生化分析仪结构组成
加样系统 比色系统 分光系统
试剂仓 进样架系统 样品取样单元 试剂取样单元 混合部件
光源 比色杯(分立式比色转盘) 恒温装置(水浴、空气浴、恒温液循环间接加热)
光栅分光式(无相差蚀刻凹面光栅), 后分光集束式 光路系统
➢ 自动生化分析仪的工作程序
机 样 试搅
试搅
生化试剂的分类
NAD（P）H系统指示反应 苯衍生物指示反应 H2O2偶联的指示系统 抗原抗体反应指示系统 其它显色反应
➢ NAD（P）H系统指示反应
NADH和NADPH在340nm有最 大吸收峰，而NAD+和NADP+在 340nm无吸收峰，利用其偶联的 脱氢酶(工具酶)反应，根据 340nm吸光度的变化，可以测定 物质的浓度或活性。
临床项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、 C3、C4、CRP等
免疫透射比浊法，抗原抗体免疫复合物形成的浊度的 大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比
试剂
R1:磷酸盐缓冲液、聚乙二醇、表面活性剂等 R2（抗血清）:羊抗人apoAl或apoB
化学反应
抗原(血清中的apoAl或apoB)+抗体(抗血清试剂) 缓冲环境 >抗原抗体免疫复合物
生化检验常见问题及处理方法
黑龙江中医药大学附属第一医院 艾民
生化检验的操作流程
标
检
检
检 验 申 请
病 人 准 备
标 本 采 集
本 运 输 与 保
标 本 核 收
标本
分
结
结
分发
析
果
果
与处
测报
发
理
定告
布
验 后 标 本 的
验 后 废 弃 物
存
保
处
存
理
检验前过程
检验过程
检验后过程
生化检验常见的问题
一、检验前常见问题
对于一些特殊试剂如：K，Na，CL，因线性范围 限制等，一般不以水作为零点，采用定值的高、 低两个标准液，建立标准曲线。
多点定标
多点定标：采用两个以上的标准液来建立一条 标准曲线。该曲线的特征一般为非线性，即吸 光度与浓度的变化不是直线关系。免疫比浊法 （胶乳增强）测定的试剂，多为此方法。因为 抗原抗体反应形成的浊度的线性范围较窄。
➢ 基质效应：处于分析物周围的基质（粘度、表面张 力、离子强度等）对分析物测定结果的影响。
➢ 摩尔消光系数(ᵋ)：在特定条件下，一定波长的光， 光径1cm时，通过所含吸光物质的浓度为1mol/L时 的吸光度。
自动化分析仪概述:
➢ 自动分析仪的主要部件
加样系统 比色系统 分光系统 供排水系统 清洗系统 操作控制与数据处理系统
➢ 定标方法
对于终点法和两点速率法，必须通过使用标准液， 建立一条标准曲线。
速率法检测的酶类可以采用理论因数法（K因数）， 但多数实验室对酶类（速率法）测试采用标准液 校正Factor的方式，以消除仪器和试剂的系统误 差。
2点定标
两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点， 建立标准曲线。
细 菌培养等。
生化用水：电阻率≥2MΩ/cm ，细菌≤10clu/ml或参考仪器说 明书规定。
电导率μs/cm（微西门子厘米）＝1/电阻率。
二、检验过程常见问题及处理
3、交叉污染问题及处理：
（1）样品针、试剂针、搅拌棒、反应杯、管路系统等清 洗不干净，导致交叉污染。
处理方法：
按仪器说明书要求进行保养、按要求及时更换零部件 定期对仪器校准。如：每日用无水乙醇擦拭样品针、试剂 针、搅拌棒，进行日保养、周保养、月保养、年保养等。
计算
ALT(U/L)= ∆AR min/∆AS min×C=∆AR min×F
∆AR: 样本A变化率 ； ∆AS：标准A变化率 ; C：标准品示值； F:校准因素或用理论因素值（F）（F）=106/ϵ×TV/SV
苯衍生物指示反应
如：p-NP(磷酸对硝基苯酚）和p-NA(硝基苯酚)指示 系统：
p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据 405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。
二、检验过程常见问题及处理
（2）检验项目间的交叉污染
相邻检验项目的干扰，A项目试剂或产物中含有B项目 的测定物质或影响B项目反应，而导致B试验结果的改变。 如：Mg放在ALP项目后面测定，可能会使检测结果偏高或重 复性差。因ALP试剂中含有Mgcl2，使测定结果偏高等。
处理方法：
① 调整实验的前后顺序来消除这种影响； ② 在两个项目之间设定其他项目或设置清洗剂并设定清洗 次数。
基本概念
检测系统：一个检验项目所涉的仪器、试剂、校准品、 测量程序（操作程序、质控程序、维护保养程序、检测 用水）、操作人员、消耗品、质控品等组合。
➢ 量值溯源：是通过一条具有规定不确定度的不间断的 比较链，使测量结果能够与规定的参考标准联系起来 的一种特性。（通常是国家计量基准或国际计量基准）
检验前的质量管理是检验质量管理中最薄弱、 最易出现问题、最难控制的环节，标本质量不符合 要求占60%-80% 。
按时间顺序包括： 检验申请 患者准备和识别 原始样本采集、运送和实验室内传递。
检验前常见问题及处理
1、患者的准备的常见问题及处理: （1）饮食：餐后、饮料、烟酒等，影响患者的检测 结果。 处理方法：患者空腹（8-12小时）。 （2）药物等其他因素的影响:如含VC、抗肿瘤药物、 降脂药物、输液等。 处理方法：尽量停止使用药物。超过药物的半衰期。
1、患者的准备问题； 2、标本的采集、运输、验收等问题。
二、检验过程常见问题
1、标本处理问题；2、水质问题；3、交叉污染问题； 4、校准问题； 5、试剂问题；6、仪器问题； 7、参数问题； 8、质控问题 9、干扰物质
三、检验后常见问题
1、检验报告基本信息问题； 2、检验报告签发问题。
一、检验前常见问题及处理
（3）标本验收：标本错误、标本外观溶血、脂血、 样本留取时间过长等。 处理方法：严格核对标本、拒收严重溶血、脂血、 标本不足留取时间过长的标本。
二、检验过程常见问题
检验过程有三种说法：
实验室接收标本开始，直至获得检测结果的过程。 自仪器检测开始至获得检测结果。 标本开始处理至获得检测结果。
检验前常见问题及处理
2、标本的采集、运输、验收等问题及处理。
（1）标本的采集：止血带压迫时间过长、标本混有气泡、 溶血、污染、输液时采血、标本量不足等。 （2）标本运输：时间过长、过度震荡、污染、高温变质、 冷冻溶血、阳光照射等。 处理方法：及时送检、用标本转运箱，外委标本要求要严 格避免上述情况。
接近开瓶期，使试剂变质、挥发、PH改变等影响 该项目的化学反应。
（4）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用；
试剂稳定的情况下，进行该项目校准得到一个F(校准因 素)值，在稳定的期内，反应的吸光度变化乘以F值等于测定 结果。如果试剂的成分含量发生变化，再校准后F值就会发 生变化，如果还用上述的F值得出的结果不准确。
临床项目有ALP、r-GT、等。
ALP（AKP）的测定原理
试剂
R1：AMP缓冲液 、MgCl2 ；R2：对硝基苯磷酸盐
化学反应
ALP 磷酸对硝基苯酚+H2O → 对硝基苯酚+磷酸盐
计算
ALP(U/L)= ∆AR min/∆AS min×C=∆AR/min×F
H2O2偶联的指示系统（Trinder反应）
二、检验过程常见问题及处理
4、校准问题及处理；
仪器不定期仪器校准、检测系统不校准、校准品失效或适用不当、 校准品不匹配、更换试剂批号或仪器维修后不校准，导致结果不良。 校准的分类： 仪器校准/产品校准：由仪器工程师在仪器安装使用后定期进行，主 要校准仪器的光路系统、温控系统、加注系统（样品针、试剂针位置） 等，通常是发给校准证书或校准报告。 检测系统的校准/功能校准：由检验人员使用校准物进行的分析校准。
（3）运动：剧烈的运动可使血中的一些酶类、离子等结果发生变化。 处理方法：检查前一天不要做剧烈运动。短期休息，平稳10分钟以上。 （4）情绪：情绪激动，影响神经内分泌系统，使一些检验结果偏高。 （5）体位：从立位到卧位使一些结果下降。 （6）特定时间采血：因人体生物节律的变化，不同时间采血检验结果 也会随着变化。如激素、糖耐量等。
C：标准值
F: 仪器自动换算的因数
其它显色反应（Ca2+）
Ca2+测定原理： 甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca2+形
成红色络合物，引起612nm吸光度的上升，上升程 度与Ca浓度成正比 。
碱性条件
MTB + Ca2+ → 红色络合物
二、检验过程常见问题及处理
1、标本处理问题及处理： 放置时间过长、离心不充分、血清剥离不当等。
常见检验项目：ALT、AST、CK、LDH、α-HBDH、UREA、NH4+ CO2、Glu（己糖激酶法）等
NAD+-NADH系统
பைடு நூலகம்
ALT（GPT）的测定原理：
试剂
R1：NADH 、LDH；R2：L-丙氨酸 、α-酮戊二酸
化学反应
ALT L-丙氨酸 +α-酮戊二酸 → 丙酮酸 + L-谷氨酸
LDH 丙酮酸 + NADH + H+ → L-乳酸 + NAD+ + H2O酸
人
械
本 剂拌 1
剂拌
2
工 编
臂 代
混匀
反应
比 光电感应器检测 色 吸光度变化
程
替 手 比 比比
比比
工
色 杯
色色 杯杯
色色 杯杯
传 输
打印机打印结果
传输
计算机进行计算 按仪器设定标准曲线
➢ 自动分析仪的基本分析方法
终点法： ➢ 1点终点法 ➢ 2点终点法 ➢ 多点终点法 速率法： ➢ 速率法 ➢ 2点速率法（固定时间法）
H2O2在过氧化物酶的作用下，可使无色色 素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度 的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。
临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu （氧化酶法）Cr、UA等。
GLU的测定原理（氧化酶法 ）
试剂
R1：4-氨基安替吡啉 、抗坏血酸氧化酶 R2：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）酚
处理方法： 定期进行仪器校准，当仪器维修、生化试剂 批号或质控出现异常时进行校准，正确选择 和使用校准品，（试剂生产厂家校准品）， 有良好的溯源性，注意质控品的分装和保存。
5、试剂常见问题及处理：
（1）试剂质量问题： （2）试剂是否在有效期内及开瓶稳定性： （3）不同试剂批号混合、新旧试剂混使用 （4）试剂瓶长期不清洗使新倒入试剂被污染 （5）试剂空白 （6）底物耗尽：
计算
吸光度-浓度曲线
其它显色反应（TP）
测定原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子
作用产生紫红色络合物，导致540nm吸光度的增加，增加 的程度与蛋白质的含量成正比。
碱性条件
酞键 + Cu2+ → 紫红色络合物
蛋白含量（g/L）= AR/AS ×C=AR×F
AR: 测定吸光度；
AS：标准吸光度
2、水质问题及处理： 生化用水不合格。常影响血清中离子及其他生化项目的检
测，常被忽略。 处理方法：
纯水分级(GB6682-2008水标准)与应用领域
三级水：电阻率≥0.2MΩ/cm，主要用于冲洗玻璃器皿，水浴等； 二级水：电阻率≥1MΩ/cm，用于制备常用试剂、缓冲液、仪器管道和比色杯清洗
等； 一级水：电阻率≥18.25MΩ/cm，常用于HPLC、原子吸收、分子生物学、细胞和
5、试剂常见问题及处理：
（1）试剂质量问题：
试剂有效成分含量不足，导致线性范围窄，高值测定不高； 试剂底物浓度不足。反应曲线斜率下降，灵敏度变低； 试剂自身不稳定，自行分解，工具酶纯度不够，杂酶含量过
多，测定结果变化。
（2）试剂的有效期及开瓶稳定性： 试剂是否在有效期内； 试剂开瓶时间过长，超过说明书中开瓶期或
化学反应
GOD 葡萄糖 + O2 + H2O → 葡萄糖酸 + H2O2
POD 2H2O2 + 4-氨基安替吡啉+酚 → 醌亚胺 + 4H2O
计算
GLU(mmol/L)= AR /AS×C
抗原抗体反应指示系统
特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反 应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波 长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗 原浓度成正比
➢ 生化分析仪结构组成
加样系统 比色系统 分光系统
试剂仓 进样架系统 样品取样单元 试剂取样单元 混合部件
光源 比色杯(分立式比色转盘) 恒温装置(水浴、空气浴、恒温液循环间接加热)
光栅分光式(无相差蚀刻凹面光栅), 后分光集束式 光路系统
➢ 自动生化分析仪的工作程序
机 样 试搅
试搅
生化试剂的分类
NAD（P）H系统指示反应 苯衍生物指示反应 H2O2偶联的指示系统 抗原抗体反应指示系统 其它显色反应
➢ NAD（P）H系统指示反应
NADH和NADPH在340nm有最 大吸收峰，而NAD+和NADP+在 340nm无吸收峰，利用其偶联的 脱氢酶(工具酶)反应，根据 340nm吸光度的变化，可以测定 物质的浓度或活性。
临床项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、 C3、C4、CRP等
免疫透射比浊法，抗原抗体免疫复合物形成的浊度的 大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比
试剂
R1:磷酸盐缓冲液、聚乙二醇、表面活性剂等 R2（抗血清）:羊抗人apoAl或apoB
化学反应
抗原(血清中的apoAl或apoB)+抗体(抗血清试剂) 缓冲环境 >抗原抗体免疫复合物
生化检验常见问题及处理方法
黑龙江中医药大学附属第一医院 艾民
生化检验的操作流程
标
检
检
检 验 申 请
病 人 准 备
标 本 采 集
本 运 输 与 保
标 本 核 收
标本
分
结
结
分发
析
果
果
与处
测报
发
理
定告
布
验 后 标 本 的
验 后 废 弃 物
存
保
处
存
理
检验前过程
检验过程
检验后过程
生化检验常见的问题
一、检验前常见问题
对于一些特殊试剂如：K，Na，CL，因线性范围 限制等，一般不以水作为零点，采用定值的高、 低两个标准液，建立标准曲线。
多点定标
多点定标：采用两个以上的标准液来建立一条 标准曲线。该曲线的特征一般为非线性，即吸 光度与浓度的变化不是直线关系。免疫比浊法 （胶乳增强）测定的试剂，多为此方法。因为 抗原抗体反应形成的浊度的线性范围较窄。
➢ 基质效应：处于分析物周围的基质（粘度、表面张 力、离子强度等）对分析物测定结果的影响。
➢ 摩尔消光系数(ᵋ)：在特定条件下，一定波长的光， 光径1cm时，通过所含吸光物质的浓度为1mol/L时 的吸光度。
自动化分析仪概述:
➢ 自动分析仪的主要部件
加样系统 比色系统 分光系统 供排水系统 清洗系统 操作控制与数据处理系统
➢ 定标方法
对于终点法和两点速率法，必须通过使用标准液， 建立一条标准曲线。
速率法检测的酶类可以采用理论因数法（K因数）， 但多数实验室对酶类（速率法）测试采用标准液 校正Factor的方式，以消除仪器和试剂的系统误 差。
2点定标
两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点， 建立标准曲线。
细 菌培养等。
生化用水：电阻率≥2MΩ/cm ，细菌≤10clu/ml或参考仪器说 明书规定。
电导率μs/cm（微西门子厘米）＝1/电阻率。
二、检验过程常见问题及处理
3、交叉污染问题及处理：
（1）样品针、试剂针、搅拌棒、反应杯、管路系统等清 洗不干净，导致交叉污染。
处理方法：
按仪器说明书要求进行保养、按要求及时更换零部件 定期对仪器校准。如：每日用无水乙醇擦拭样品针、试剂 针、搅拌棒，进行日保养、周保养、月保养、年保养等。
计算
ALT(U/L)= ∆AR min/∆AS min×C=∆AR min×F
∆AR: 样本A变化率 ； ∆AS：标准A变化率 ; C：标准品示值； F:校准因素或用理论因素值（F）（F）=106/ϵ×TV/SV
苯衍生物指示反应
如：p-NP(磷酸对硝基苯酚）和p-NA(硝基苯酚)指示 系统：
p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据 405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。