血涂片染色及白细胞分类计数
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甲醇脱色 6.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。
应在具体实践中摸索合适的时间。
精品课件
2.WBC分类计数
2.1原理 2.2器材:显微镜、香柏油、拭镜纸、清洁剂 2.3操作步骤
1.采末梢血——染色 2.低倍镜下选择细胞分布均匀、着色良好的域， 滴香柏油一滴
3.油镜下分类，分类时要有秩序的连续进行
（“几” 字形），避免主观选择视野。通常分类 100个白细胞，计 数并报告各种白细胞所占百分 比。
4.计算 5.报告方式：XX细胞：XX%
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2.4 外周血正常白细胞形态特征:
10-15 μm
圆形
胞质粉红
胞质内颗粒量多、细小、均匀、紫红色
核弯曲呈杆、带状
中性粒细胞：杆+分
染色质粗糙，紫红色
分叶核：核分2-5叶
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13-15 μm
圆形
胞质着色不清
胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色
核多分2叶 染色质粗糙，紫红色
嗜酸性粒细胞+淋巴细胞
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10-12 μm
圆形
胞质着色不清
胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色，可盖核上
核形不清 染色质粗糙，紫红色
嗜碱性粒细胞
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6-15 μm 圆形/椭圆形 胞质透明、淡蓝色 胞质内多无颗粒 核形 圆/椭圆/肾形 染色质粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑
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1.3 pH对细胞染色影响
pH过低 <PI
正电荷增多——易与伊红结合——偏红
pH过高>PI 负电荷增多——易与亚甲蓝结合——偏蓝
最适环境：弱酸（pH6.4-6.8）
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判别方法
血涂片： 淡紫红色
镜 下： 成熟红细胞——粉红色
有的色彩 红色 染色质结构清楚
白细胞——胞质 呈现其特 细胞核 紫
淋巴细胞
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12-15 μm 圆/椭圆/不规则 胞质半透明、灰蓝色或灰红色 胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒 核形 不规则/山字/肾/马碲形，扭曲折叠 染色质疏松网状，淡紫红色，有膨胀感和立体起伏感
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2.5注意事项：
1.分类最佳区域为体、尾交界处 2.分类时要有秩序地连续进行 3.白细胞总数与分类个数 4.分类中如见幼红细胞，不计入100个细胞内，以分类
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1.6 操作
制备血涂片（待完全晾干）
加I液数滴覆盖整个血膜
0.5-1min
滴加等量或稍多的II液（洗耳球混匀）
5-10min
冲洗（注意）
干燥
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注意事项
1.血涂片干后方可染色 2.加染液不能过少 3.冲洗时应以流水冲洗 4.染色过淡可复染，先加缓冲液再加染液 5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间，也可用
临床检验基础实验六 血涂片染色
白细胞分类计数
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1.瑞氏染色 1.1试剂成分： 伊红——酸性——嗜碱性染料 亚甲蓝（美蓝）——碱性——嗜酸性染料 甲醇——固定 溶剂 磷酸缓冲液（pH: 6.4-6.8）
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1.2着色原理： 化学亲和作用+物理的吸附作用
伊红+细胞中的碱性物质——红色 亚甲蓝+酸性物质——蓝色 中性物质+伊红和亚甲蓝——淡紫色
Βιβλιοθήκη Baidu精品课件
染色偏酸: 红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红 白细胞核 淡紫红色或不着色
染色偏碱： 红细胞 中性粒细胞颗粒 嗜酸性粒细胞
灰蓝色 深暗、偏粗，紫黑色
暗褐色或紫黑色、蓝色
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1.4器材
载玻片、推玻片、洗耳球
1.5试剂
瑞氏染液（商品） I液：瑞特染料、纯甲醇、甘油 I液：磷酸盐缓冲液（KH2PO4 Na2HPO4）
100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来报告，并应 注明其所属阶段。 5.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态染色及 其分布情况，注意有无寄生虫（如疟原虫）及其他异 常所见。
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应在具体实践中摸索合适的时间。
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2.1原理 2.2器材:显微镜、香柏油、拭镜纸、清洁剂 2.3操作步骤
1.采末梢血——染色 2.低倍镜下选择细胞分布均匀、着色良好的域， 滴香柏油一滴
3.油镜下分类，分类时要有秩序的连续进行
（“几” 字形），避免主观选择视野。通常分类 100个白细胞，计 数并报告各种白细胞所占百分 比。
4.计算 5.报告方式：XX细胞：XX%
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2.4 外周血正常白细胞形态特征:
10-15 μm
圆形
胞质粉红
胞质内颗粒量多、细小、均匀、紫红色
核弯曲呈杆、带状
中性粒细胞：杆+分
染色质粗糙，紫红色
分叶核：核分2-5叶
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圆形
胞质着色不清
胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色
核多分2叶 染色质粗糙，紫红色
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10-12 μm
圆形
胞质着色不清
胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色，可盖核上
核形不清 染色质粗糙，紫红色
嗜碱性粒细胞
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1.3 pH对细胞染色影响
pH过低 <PI
正电荷增多——易与伊红结合——偏红
pH过高>PI 负电荷增多——易与亚甲蓝结合——偏蓝
最适环境：弱酸（pH6.4-6.8）
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判别方法
血涂片： 淡紫红色
镜 下： 成熟红细胞——粉红色
有的色彩 红色 染色质结构清楚
白细胞——胞质 呈现其特 细胞核 紫
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12-15 μm 圆/椭圆/不规则 胞质半透明、灰蓝色或灰红色 胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒 核形 不规则/山字/肾/马碲形，扭曲折叠 染色质疏松网状，淡紫红色，有膨胀感和立体起伏感
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2.5注意事项：
1.分类最佳区域为体、尾交界处 2.分类时要有秩序地连续进行 3.白细胞总数与分类个数 4.分类中如见幼红细胞，不计入100个细胞内，以分类
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1.6 操作
制备血涂片（待完全晾干）
加I液数滴覆盖整个血膜
0.5-1min
滴加等量或稍多的II液（洗耳球混匀）
5-10min
冲洗（注意）
干燥
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注意事项
1.血涂片干后方可染色 2.加染液不能过少 3.冲洗时应以流水冲洗 4.染色过淡可复染，先加缓冲液再加染液 5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间，也可用
临床检验基础实验六 血涂片染色
白细胞分类计数
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1.瑞氏染色 1.1试剂成分： 伊红——酸性——嗜碱性染料 亚甲蓝（美蓝）——碱性——嗜酸性染料 甲醇——固定 溶剂 磷酸缓冲液（pH: 6.4-6.8）
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1.2着色原理： 化学亲和作用+物理的吸附作用
伊红+细胞中的碱性物质——红色 亚甲蓝+酸性物质——蓝色 中性物质+伊红和亚甲蓝——淡紫色
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染色偏酸: 红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红 白细胞核 淡紫红色或不着色
染色偏碱： 红细胞 中性粒细胞颗粒 嗜酸性粒细胞
灰蓝色 深暗、偏粗，紫黑色
暗褐色或紫黑色、蓝色
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1.4器材
载玻片、推玻片、洗耳球
1.5试剂
瑞氏染液（商品） I液：瑞特染料、纯甲醇、甘油 I液：磷酸盐缓冲液（KH2PO4 Na2HPO4）
100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来报告，并应 注明其所属阶段。 5.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态染色及 其分布情况，注意有无寄生虫（如疟原虫）及其他异 常所见。
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