灭菌验证控制程序

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1目的

为了满足MDD 93/42/EEC的要求,依据EN550和ISO11135标准的要求,确保环氧乙烷灭菌过程和程序的有效性以及常规监控的标准化。

2适用范围

适用于所有带有CE标志产品的环氧乙烷灭菌确认。

3职责

3.1生技部负责灭菌确认工作及设备性能的确认。

3.2质管部负责组织指标菌数测定与检测EO残留量，并形成灭菌验证报告。

4工作程序

4.1灭菌原理

4.1.1无菌保证水平（SAL）

无菌保证水平（SAL）10-6是国际上采用的值。这表明一个产品中微生物存活的概率为10-6，即100万个产品只有一个产品带菌；而通过无菌试验确认产品中微生物存活的概率为10-6的无菌保证水平是不可能做到的，因此需要有科学的、恰当的过程验证来保证理论上的产品是无菌的，我们将这一过程称为灭菌确认。

4.1.2物理参数

灭菌过程的周期参数根据灭菌装置和产品种类决定。灭菌温度、湿度、EO浓度、作用时间等详细内容包含在灭菌验证报告中。

4.1.3 微生物学参数

作为指标菌的微生物（ATCC9372）的灭菌保证水平为10-6。

4.2负责的设置以及产品的选择

进行物理性能适合性评价以及微生物性能适合性评价时，原则上用产品或被认为与产品同等的替身样品将灭菌柜内装满。

4.3验证方法

4.3.1灭菌确认顺序图如下：

4.3.2试运行

证明设备和规格一致。（试运行需要在空转时确认设备的运行状况）

4.3.2.1检测仪器的校准

a)对象仪器：温度传感器、压力传感器、温度传感器、记录仪。

b)校准方法与标准：遵照各校准顺序书进行。

◆温度传感器（日常管理用）

◆温度传感器（灭菌管理用）

◆压力传感器

◆湿度传感器（日常管理用）

◆记录仪

4.3.2.2运转条件

灭菌柜按设定条件运行，设定条件在确认前确定。

4.3.2.3灭菌过程中灭菌柜内部的温度分布

将温度传感器按照ISO11135标准规定的要求进行设置，用记录仪记录EO处理中的温度。柜内各点的温度应在设定温度+30C以内（稳定温度）。

4.3.2.4达到的真空度以及到达速度

对灭菌柜减压到真空度的值及到达的时间进行确认。

4.3.2.5加压后的气密性检验

在确认灭菌过程中的温度分布的同时测定压力变化。

4 3.2.6 EO导入后的压力，从导入到达设定值所用的时间。

4 3.2.7排气时的减压速度与减压度

测定排气时的减压度及到达减压度所需的时间。

4.3.2.8压力上升以及速度

测定负压时到达所定压力时间。

4.3.3物理性能适合性评价

4 3.3.1灭菌过程中的产品温度分布

按照ISO11135标准规定的要求进行布点，将温度传感器设置在单位箱内，在设定的灭菌条件下运行时，测定产品的温度分布，全部作用时间内，灭菌负责载应达到所规定的最低温度。

定期的再确认时在设定的条件范围内进行。

4 3.3.2测定灭菌过程中的压力。

4.3.3.3处理过程以及灭菌过程中的产品湿度分布

确认处理过程以及灭菌过程的湿度。

按照ISO11135标准规定的要求布点，将湿度传感器设置在单位箱内。在设定的灭菌条件下，测定产品的湿度分布。

定期的再确认时在设定的条件范围内进行。

4 3.3.4灭菌过程中的EO浓度

灭菌过程中的EO浓度用（重量/体积）换算的方法计算。

4.3.3.5到达真空度及到达速度

确认灭菌柜到达的真空度及所需的时间。

4.3.3.6 EO导入后的压力上升以及到达速度

测定EO导入后的压力，从导入到达到设定值所用的时间。

4 3.3.7排气时的减速压速度与减压度

测定排气时的减压度及到达减压度所城的时间。注：每一次减压时都应该确认。

4.3.3.8复压时压力上升及速度

测定复压时到达所定压力的时间。注：每一次复压都应该确认。

4.3.3.9 导入EO时的温度

导入时EO温度通过温度传感器测定并在记录纸上记录。

4.3.4微生物性能适合性评价

4.3.4.1方法——半周期法

利用指标菌测定D值的分布，根据最大的D值计算106个菌致死的时间（为半周期），以这一处理时间确认指标菌106个菌的死灭情况。若适合要求时则设定这一时间的2倍作为灭菌时间。

4.3.2.2生物指标（BI）

◆BI的数量及设置

按ISO11135规定的要求布点，设置于单位箱内。

◆BI和产品内设置位置

设置于各产品最难灭菌的部位，用各产品的包装袋进行包装并封口。

◆EO处理

除以下的参数外，按通常的灭菌条件进行运转；在初始条件下的参数变更时，有必要时变更湿度设定进行实施。

暴露时间：半周期以及短时间

温度、气体压力：设定值的下限

◆BI培养

a)D值测定

EO处理后，2小时内将BI取出，用琼脂培养基进行混释培养，30—370C，3天以下。

b)半周期确认

EO处理后，2小时内将BI取出，用肉汤（真菌）培养基进行培养，30—350C，7天。

4.3.4产品适合性评价

在暴露时间、温度、气体压力的各设定上限处理的制品，或者在通常条件下进行二次灭菌的制品按以下的项目评价：

a)产品机能试验

b)残留EO测定

4.4频度

首次确认在新设备导入时或产品品种追加时进行。

变更时确认在产品规格变更追加、装载方式变更、灭菌条件变更或设备变更时进行确认。

定期再确认每个条件每年至少一次。

4.5过程管理与监督检查

对每一批灭菌负荷，都必须证明其符合要求，所以，对每一批灭菌负荷的下列数据都需记录和保管。

a)整个周期灭菌柜内的温度、湿度、压力

b)暴露时间中的EO浓度

c)灭菌开始以及终了时间

d)空气转换次数

e)BI试验结果

f)导入时的EO浓度

4.6报告与文件保管

灭菌确认的报告书至少要包含以下内容：

a)校准记录

b)全记录、计算法、引用

c)负荷的详细情况

d)灭菌过程的规定

e)——处理

◆初期真空度与到达时间

◆真空持续时间

◆产品温度以及湿度

◆灭菌柜内温度

f)——灭菌

◆气体导入时的压力上升、导入时间

◆EO浓度（间接测定）

◆灭菌柜内温度

◆灭菌柜内湿度