试验30子宫兴奋药对离体大鼠子宫的作用
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子宫兴奋药对离体大鼠子宫平滑肌的作用
【目的】
本实验利用成年未孕的大鼠子宫,观察不同剂量的缩宫素对子宫的兴奋作用。
【原理】
缩宫素又名催产素,对子宫平滑肌有选择性兴奋作用,是临床常用的子宫兴奋药。小剂量缩宫素可促进子宫底部节律性收缩,增加子宫收缩力量和收缩频率,其收缩性质与自然分娩类似;大剂量则引起子宫强直性收缩。子宫平滑肌对缩宫素的敏感性与体内雌激素有密切关系。雌激素可提高其敏感性。
【预习要求】
1.仪器设备知识参见第二章第三节RM6240微机生物信号采集处理系统(或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统)。
2.实验理论实验动物知识参见第二章第一节生理科学实验常用实验动物的种类;第四章第一节动物实验的基本操作;统计学知识参见第5章第四节常用统计指标和方法。阅读药理学教材中子宫兴奋药的相关内容,检索全文数据库中的有关的研究论文。
3.预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。
【材料】
160~240g雌性大白鼠;张力换能器,微机生物信号采集处理系统;20ml麦氏浴槽,20~200u1加样器,1ml加样器,0.01U/ml、0.1U/ml、1U/ml、10U/ml缩宫素,乐氏液,95%O2+5%CO2混合气体。
【方法】
1.实验系统连接和仪器参数设置
(1)按图1连接装置。将张力换能器固定于微距调节器上,换能器输出线接微机生物信号处理系统一输入通道。麦氏浴槽中充以乐氏液至固定水平面,调节超级恒温器的温度至32℃,保证麦氏浴槽内恒温于32±0.5℃。通气管接95%O2+5%CO2气瓶管道。调节通气管气流,通气速度以麦氏浴槽中的气泡一个个逸出为宜。
(2)仪器参数设置
PcLab或MedLab系统仪器参数:张力换能器输入通道信号名称为张力,放大倍数200~500、直流耦合(下限频率DC)、上限频率10Hz,采样间隔5ms。
2.标本制备
(1)取160~240g健康雌性大白鼠,实验前24小时腹腔注射1g/L雌二醇0.2ml。
(2)用击打法或脊椎脱臼法处死大白鼠,剖腹找出子宫(呈“V”字型,图2),取出子宫,立即置于盛有4℃乐氏液的培养皿中,培养皿内放少许棉花,将子宫平放在浸湿的棉花上,仔细剥离附着于子宫壁上的结缔组织和脂肪(图3),然后将子宫的两角在其相连处剪开,取下一条子宫角约1.5~2cm,两端分别用线结扎。
图1
图2
图3
(3)移入麦氏浴槽,两结扎线一端固定于固定钩上,另一端与张力换能器相连。
(4)前负荷1g,稳定15~30min,待收缩张力和频率规则后,记录正常数据。
【观察项目】
1.0.01U/ml缩宫素,按0.02ml、0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液,观察对子宫的收缩作用,记录子宫收缩产生的最大收缩张力和最大频率。每次加入缩宫素须待反应稳定后再加药;
2.0.1U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液;
3.1U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液;
4.10U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液。
【注意事项】
1.把子宫一角取出及固定于灌流装置时不要损伤或过度牵拉子宫。
2.通气时要控制好速度,以免气泡太大,太急,冲击子宫而影响实验。
3.给药前应描计一段基础曲线,以便与用药后对照。
4.严格按照上述给药顺序给药。
【实验报告要求】
1.题目。
2.署名作者和合作者姓名及单位。
3.结构式摘要(目的,方法,结果,结论)。
4.材料和方法主要实验材料,标本制备方法,仪器装置连接和仪器参数,实验数据记录条件,观察指标。
5.结果实验结果的文字性描述,作量效曲线。
6.讨论回答思考题。
【思考题】
1.缩宫素对子宫作用及临床应用。
2.为什么实验前用雌二醇处理动物?
3.缩宫素与麦角新碱对子宫平滑肌的作用特点有何不同?