临床诊断讲稿 1、实验室检查--血液、红细胞

第四章实验室检查

实验室检验就是运用物理学、化学和生物学等实验技术和方法，对病畜的血液、尿液、粪便、体液（如胃液、脑脊髓液、胸腹腔穿刺液）、组织细胞及病理产物，在实验室特定的设备和条件下，测定其物理性状，分析其化学成分，或借助于显微镜观察其有形成分的方法，以获取反映机体功能状态，病理变化或病因等客观资料，配合临床资料进行综合分析。

实验室检验是一种复杂而细致的工作，为了得到正确的结果，必须遵守严格的操作规程和次序。采取的样本必须有代表性，检验所有的试剂与器材，应符合要求，并定期进行检查和校正。要注意消毒工作，污染的器皿应先消毒后洗涤，以防传染性物质的扩散。

第一节血液检查

血液检验是临床医学检验中应用最广，对辅助诊断最有价值，最常用的基本内容之一。血液是由血浆和血细胞两部分组成，是通过循环系统与全身各个组织器官密切联系，参与机体呼吸、运输、防御，调节生理，维持正常新陈代谢和内外环境平衡的。

一、血液样品采集与处理

（一）采血

采血的部位和方法，根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同，可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。

1、毛细血管采血实验项目需要的血量不多时使用，多用于血糖检查，或者血涂片。采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精挥发后，用消毒的干燥的针头迅速刺入2~3mm深（多在耳、唇、足垫部位），让血液自然流出，且勿挤压以免混入过多组织液。

2、静脉采血

部位：前臂头静脉（最常用），后肢隐外静脉，颈静脉（幼小动物或者脱水动物其他部位不宜采出有效血量时使用），后肢隐内静脉（猫常用）。

方法：局部剪毛消毒，用止血带（颈静脉多用手指压）扎住采血部上端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头（一般供血、血生化检查或者凝血试验，需要较多血量时连接注射器，而对血涂片或者血常规往往不需要，头皮针即可），针头斜上面刺入静脉（颈静脉向远心端刺入，其余向近心端刺入）采血，待抽至所需量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口（颈静脉需要按压止血），拔出针头。除去针头，将血液缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。

3、心脏采血为其他需要输血的供血动物采血时多用。

多选择左心室采血，右侧卧保定、麻醉。左侧胸廓下三分之一与中三分之一交界处的水平线与第五肋间隙交叉点处垂直刺入，见血，说明刺入心脏，继续进针入左心室。

4、注意事项

（1）尽量在动物平静时采血，并且操作者要有良好的采血技术，可有效地降低动物的紧张及避免医源性溶血。紧张可使血糖升高，也可引起天门冬酸转氨酶、肌酸磷酸活酶、乳酸脱氢酶、无机磷、镁离子测定值升高；

（2）采血前尽量禁食至少5个小时，因饮食可造成测定结果升高的项目有：胆固醇、血糖、无机磷、三甘油酯和血尿素氮；

（3）选择合适的针头，如无必要使用注射器抽吸尽量不用，用的话抽吸不宜过强，防治负压过大，引起血细胞破裂；

（4）每次采血均需使用新的无菌的针头与针管；

（5）根据采血检测目的使用建议的采血管；

（6）取正确得采血量，采血量在采血管指示的范围内，防止抗凝剂对血液的影响；

（7）充分的混合血液与抗凝剂，但是不宜过于用力，防止溶血。

（二）血液的抗凝

抗凝剂作用量（g/mg）特点用途乙二胺四乙酸

脱钙

1-2

1．对细胞形态影响不大

2.防止血小板凝集，对血红蛋白、

血小板计数，血涂片染色均无影响

适用于血常规，不

适用于生化、血气

的检查枸橼酸钠

5

（3.8﹪溶液）

1.对凝血酶V因子有保护作用

2.毒性小

血凝试验及输血草酸钾 2

红细胞缩小，血清钾升高不宜作红细胞压积

及血清钾的测定草酸盐合剂

草酸铵+草酸钾

1-2

草酸铵可使红细胞膨胀不能做血清钾、血

清氮的测定，也不

能用于输血肝素钠（锂）

抗凝

血酶

0.1-1

不影响红细胞大小，引起白细胞的

聚集及形态改变；对血液化学分析

干扰少，做血涂片染色时背景呈现

淡蓝色（干扰）

用于血气、生化，

不宜用于血常规及

涂片

注：宠物医院常用商品化采血管

1、EDTA抗凝管紫色头盖，乙二胺四乙酸（EDTA，分子量292）及其盐是一种氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液标本中钙离子，螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝过程，从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验，不适用于凝血试验及血小板功能检查，亦不适用于钙离子，钾离子，钠离子，铁离子，碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。

2、血浆分离管浅绿色头盖，在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂，可达到快速分离血浆的目的，是电解质检测的最佳选择，也可用于常规血浆生化测定和ICU等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48小时稳定。

3、枸橼酸钠凝血试验管浅蓝头盖，枸橼酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验。

4、快速血清管橘红色头盖，采血管内有促凝剂，可激活纤维蛋白酶，使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体，进而形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在5分钟内使采集的血液凝固，适用于急诊血清系列化试验。

（三）样本处理

1、全血主要用于血涂片（形态检查）及血常规（计数检查）。

2、血浆用于血液生化检验、凝血试验、内分泌激素及电解质检查。

加入抗凝剂的的血液置于离心管内，静置后在2000-3000的转速范围（过速易导致红细胞破裂而出现溶血）离心5-10分钟。

3、血清用于生化与免疫学检查

未加抗凝剂的或加入促凝剂的血液静置一定时间后，血液凝固成块，析出淡黄澄清的液体即为血清，不含有纤维蛋白，为获取更多，可进一步离心。血液一经凝固，应尽快离心。

（四）保存

1、全血形态学检查应立即涂片镜检或者是图片固定，做血液物理学和细胞学检查而又不能立即检查的，加入EDTA抗凝管放入冰箱保存，各种细胞的检查保存时间见下表：

检查项目保存时间（小时）

白细胞计数（WBC）2-3

红细胞计数（RBC）24

血细胞容积测定24