机能学实验 氨在肝性脑病发生中的作用

乙兔不结扎肝叶，找 到十二指肠，穿牵 引线
√
×
向肠腔注射复方NH4Cl（5ml/5min)
甲兔
迅速
乙兔
与甲兔出现大抽搐时注射 的复方NH4Cl量和时间相同 时，从颈总动脉再次放血 1ml测血氨。
出现大抽搐时再次放 血1ml测血氨。记录所 用复方NH4Cl总量和时 间。
小结 第一次取血时间 继续推注复方NH4Cl直至乙 第二次取血时间、弃掉肝素 兔出现大抽搐，记录所用 停止注射复方NH4CL 复方NH4Cl总量和时间。 注射器的使用 大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬
观察项目
氨在肝性脑病发生中的作用观察
组
出现大抽搐所需 别 NH4Cl用量(ml)
甲兔
乙兔
出现大抽搐 所需时间(min)
血氨浓度 第1次 第2 次
呼吸
肌张力
注意事项
• 原则上选择体重相差不超过250g的家兔进行对照
• 专人测定血氨
• 肝叶结扎线置于肝叶根部，避免勒破肝脏
• 复方NH4Cl切勿漏入腹腔
称重、分组----甲兔和乙兔重量相同/相近 固定----------四肢伸展仰卧位？ 剪毛、麻醉（各2ml）----颈部、上腹部局部麻醉？
提前取
颈总动脉插管---取血1mL测血氨(取血后肝素化)
胶布
剪口 游离长度
剑突下做一6-8cm长切口------避免气胸
甲兔结扎肝叶，找到 十二指肠，穿牵引 线
• 乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔？？
• 发生大抽搐时迅速放血
0 5ml 5min 10ml 10min 15ml 15min 20ml 20min 25ml 25min 30ml 30min 35ml
大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬
讨论要点
1.肝性脑病的概念 2.模ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ是如何复制的（氨中毒学说） 3.实验数据横纵向对比分析 4.实验现象的分析（氨对脑的毒性作用）
血氨测定方法(纳氏试剂显色法)
提前
饱和碳酸钾溶液1ml 血液1ml
立即以玻璃棒蘸硫酸1滴 迅速盖上扩散瓶 ※蘸液约1cm
※玻棒用前调整好高度 ※勿使玻棒与血液及瓶内壁接触
倾斜扩散瓶将血液及碳酸钾充分混匀 （45度角旋转10分钟，放置１0分钟）
取出玻棒,取纳氏试剂3ml将玻棒上含氨硫酸洗入试管中 肉眼观察液体颜色,颜色深浅反映血液氨的浓度高低 (可用—、±、+、++、+++、++++表示颜色深浅)
家兔急性手术器械一套，兔固定台，粗棉线，细丝 线，1ml、 2ml、5ml、 10ml注射器各1具 ，婴儿秤、 扩散瓶2个
药品
1％利多卡因，1％肝素，2.5%复方氯化铵溶液， 0.5mol/L硫酸，纳氏试剂，饱和碳酸钾
实验方法
甲兔：结扎大部肝叶＋注射复方NH4Cl 乙兔：不结扎肝叶 ＋注射复方NH4Cl
明显的精神错乱、昏睡等症状
昏迷期
神志丧失、不能唤醒，没有扑翼样震颤
肝性昏迷 (hepatic coma)
肝性脑病的发生机制
假性神经递质学说
氨中毒学说
肝性脑病
血浆氨基酸失衡 学说
γ -氨基丁酸学说
氨中毒学说
在严重肝病时，机体内氨生成过多而肝脏
对氨的清除能力下降，致使血氨水平显著
升高，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组
氨在肝性脑病 发生中的作用
（hepatic encephalopathy HE） 继发于严重肝病的神经精神综合症
肝性脑病
前驱期
欣快、反应迟缓、睡眠节律的变化，有轻度的扑翼样震颤
扑翼样震颤
Flapping tremor
昏迷前期
行为异常、嗜睡 、定向
理解力减退及精神错乱，
经常出现扑翼样震颤
昏睡期
观察项目
• 呼吸运动、肌张力、抽搐。 氨在肝性脑病发生中的作用观察
组 出现大抽搐所需 别 NH4Cl用量(ml)
甲兔 乙兔
出现大抽搐 所需时间(min)
血氨浓度 第1次 第2次
氨对脑代谢功能的影响
• 1、干扰脑细胞能量代谢
• 2、使脑内神经递质改变
• 3、氨对神经细胞膜的抑制作用
参考结论：
血氨增高是肝性脑病的重要诱因 甲兔为肝性脑病，乙兔为急性氨中毒 肝脏具有解氨毒的作用，但有一定限度 氨对大脑具有毒性作用
织，引起脑功能障碍。
如何复制肝性脑病的动物模型？？
氨的来源增多 肠腔注射复方氯化胺
氨的清除减少
肝叶结扎
实验目的
• 学习复制肝功能障碍时氨代谢异常的动 物模型的方法 • 观察肝性脑病时机体的典型表现及血氨 水平的变化 • 掌握肝性脑病的概念及发病机制
实验动物
家兔，体重 甲兔： 乙兔： 雌/雄
实验器材