活化部分凝血酶时间(APTT)测定
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出凝血3.1活化部分凝血酶时间(APTT测定(第四版
出凝血3.2 原理:
在37℃条件下用激活剂(糅花酸激活因子XII和XI,以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在因子IX的参与下,测定贫血小板血浆的凝固时间。部分活化凝血酶时间测定(APTT是内源性凝血系统的筛选实验。
标本处理:
患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外。采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20℃冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。
出凝血3.4 试剂:
APTT试剂:试剂购于天津威士达公司。德灵Actin试剂(试剂盒代号B4218-1。每瓶试剂内含磷脂(从兔脑中提取,1.0×104mol/L糅花酸,稳定剂共2ml。
0.025M氯化钙:实验室自制。
试剂从冰箱中取出,室温平衡15min后上机分析。
出凝血3.5 仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。出凝血3.6 操作:按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血3.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血3.6.2检查消耗品:
1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000 个杯子
2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。
3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶
出凝血3.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。
出凝血3.6.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入APPT项目。
出凝血3.6.5输入样本号:按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。
出凝血 3.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。
出凝血3.7质量控制:使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。每批质控品的值不超过2SD。(详见出凝血1质量控制
出凝血3.8 计算:仪器自动计算出结果。
出凝血3.9 参考值:23s~33s,由DADE BEHRING公司推荐。
出凝血3.10 临床意义:APTT是内源性凝血系统的筛选实验。
APTT延长:见于凝血因子VIII、IX、XI、XII、V、II减低或缺乏,纤维蛋白原缺乏症,抗凝物质存在等。
APTT缩短:见于高凝状态、血栓性疾病等。
出凝血3.11 参考文献:
1主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6上海科
学技术出版社.
2主编李家增王鸿利韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10上
海科学技术出版社.
3主编邓家栋杨崇礼杨天楹.临床血液学.(第一版1985上海
科学技术出版社.
4主编邓家栋杨天楹杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985
天津出版社.
5中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第
一版 1991.东南大学出版社.