植物磷含量的测定(钼锑抗比色法)

植物磷含量的测定（钼锑抗比色法）

一、实验目的?

1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。

2．练习实际测量以及定容的操作。

3．练习分光光度计的使用。

二、实验原理?

植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。?

三、实验试剂

（1）2mol/L?NaOH溶液?

（2）0.2%二硝基酚指示剂?

（3）0.5mol/L?H2SO4硫酸溶液:28mL

（4）钼锑贮存溶液：量取153ml

不断搅拌，冷却。

（100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随

（50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml水，加5ml 浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml 于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。

四、实验步骤

1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00～5.00ml(V2,含P5～30ug)于50ml容量瓶中,?用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/L?NaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴

0.5mol/L?H2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈淡黄色,然后加入钼锑抗显色剂5.00ml,摇匀,用水定容(V3)。在室温高于15℃的条件下放置30min后,用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。?

2、校准曲线或直线回归方程:?准确吸取ρ(P)=?5mg/L标准工作溶液0,?1,?2,?4,?6,?8?ml,分别放入50mL容量瓶中,加水至20ml,同上步骤显色并定容,?即得

0,0.1,?0.2,?0.4,?0.6,?0.8?mg/L?P标准系列溶液,?与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。

五、结果计算

?W

p =

6

10

m

(V1/V2)

V3

c

⨯

⨯

⨯

×1000?

式中:??W

p

?——植物磷的质量分数,g/kg;?

????c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度,?mg/L;? V1——消煮液定容体积,?ml;?

V2——吸取测定的消煮液体积,?ml;?

V3——显色液体积,?ml;?

m——称样量,g;?

六、注意事项

1、室温低于15℃时，可在30～40

2、植物磷含量0.5g/kg为低量，

3、