实验3卵磷脂的提取和鉴定
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由于甘油磷脂分子中磷酸部分还有一个可以电离的H+,而 胆碱或胆胺部分又有碱性基团,故甘油磷脂以偶极离子的形式 存在。 极性端 CO -CH 疏油端,亲水端
2 2
CO2-CH 非极性端 疏水端,亲油端
O + CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3 OH OH-
H-OH 磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于这种 特点,使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。
实验三 卵磷脂的提取和鉴定
1. 目的: 加深了解磷脂类物质的结构和性质; 掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。 2. 原理: 磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动 物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵 磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪 分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵 磷脂和脑磷脂分离。 新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧 化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、 胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛; 磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱 的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分 解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
R1 常为饱和脂肪 酸如C16,C18 R2 常为不饱和脂肪 酸如花生四烯酸
1 1 R -COO-CH2 2* R2-COO-C—H
Байду номын сангаас
Question 卵磷脂彻底 水解的产物是什么?
O 3 CH2 —O—P—O—R OH + R= —CH2CH2-N(CH3)3 OH 为: 卵磷脂
+ HO-CH2CH2-N(CH3)3 OH 胆 碱
3. 操作步骤 (一)卵磷脂的提取 称取约10g (两管)蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加 边搅拌均匀,冷却后过滤。如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。 将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。 (二)卵磷脂的溶解性 取干燥试管,加入少许卵磷脂,再加入2mL 乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂 溶解,逐滴加入丙酮3~5mL,观察实验现象。 (三)卵磷脂的鉴定 1.三甲胺的检验 取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氢氧化钠溶液,放 入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化, 并嗅其气味。将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验。 2.磷酸的检验 取干净试管一支,加入10滴上述滤液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加 入5~10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管放入热水浴中加热5~ 10min,观察有何变化。