北师大版生物选修1：2.4.2 【实验】检测牛奶中乳糖的分解 课件(共11张PPT)

3．实验现象
两只试管中，砖红色较深的是__A__，说明固定的乳糖酶能 分解乳糖，产生_还__原__性___糖。
4．固定化酶应用的常见方式
(1)间歇式：每次反应完后，经_离__心__或__过__滤___法
收集酶后再重复利用。
(2)连续式：用固定化酶制成的_反__应__柱___进行不
间断的重复利用，如图。
解析 鲜牛奶处理中是在 85 ℃～90 ℃温度下巴氏灭菌； 加酶分解是用预先灭过菌的玻璃棒每隔一段时间轻轻搅 拌；固定化酶回收用的是缓冲液反复冲洗固定化酶。所 以 C 正确。 答案 C
2．下列关于牛奶中乳糖的分解的检测的相关叙述，错误的是( B ) A．乳糖酶可以将乳糖分解为半乳糖和葡萄糖 B．还原糖可与双缩脲试剂反应产生砖红色沉淀 C．根据化合物颜色的深浅变化，可以了解乳糖酶的作用活性 D．实验步骤：鲜牛奶处理→加酶分解→检测乳糖的分解→固 定化酶的回收 解析 牛奶中乳糖分解的检测原理是乳糖酶可以将乳糖 分解为半乳糖和葡萄糖；还原糖可与斐林试剂反应产生 砖红色沉淀；根据化合物颜色的深浅变化，可以了解乳 糖酶的作用活性。实验步骤：鲜牛奶处理→加酶分解→ 检测乳糖的分解→固定化酶的回收。
活学活用 1．下列有关检测牛奶中乳糖的分解的实验过程正确的是 ( )
A．取新鲜牛奶 0.5 kg 放入 1000 mL 干净烧杯中，100 ℃沸 水灭菌。将灭菌后的牛奶冷却至 45 ℃～50 ℃，过滤后 平均分为两部分，一部分放入 A 烧杯，另一部分放至 B 烧杯内作对照
B．向 A 烧杯内加入适量的固定化酶制剂，45 ℃～50 ℃条 件下保温 45 min，保温过程中要用普通玻璃棒不停用力 搅拌
灭过菌的玻璃棒每隔一段时间轻轻搅拌。 (3)检测乳糖的分解：保温到时后，将牛奶__过__滤__。用移 液管分别取 A 烧杯和 B 烧杯内的牛奶滤液各 2 mL，放 到两支试管中，用移液管取_斐__林___试剂各 2 mL 分别放 入被检试管中，然后把试管放入装有__热__水___的烧杯中， 摇动试管，观察试管中溶液颜色的变化。 (4)固定化酶的回收：实验完成后，用__缓__冲__液__反复洗涤 固定化酶，再用体积分数为 0.05%的__双__氧__水__洗涤，然 后于__0_～__4___℃下保存。
【实验】检测牛奶中乳糖的分解
探究点 固定化酶的应用
固定化酶在工业生产和医学等方面有着重要的用途，下面我
们就利用固定化酶来检测牛奶中乳糖的分解。
1．实验原理 乳糖酶可以将牛奶中的乳糖分解为__半__乳__糖__和__葡__萄__糖___， 还原糖可和__斐__林__试剂反应生成__砖__红__色化合物，根据 化合物颜色的深浅变化，可以了解乳糖酶的作用活性。
C．保温到时后，将牛奶过滤。用移液管分别取 A 烧杯和 B 烧杯内的牛奶滤液各 2 mL，放到两支试管中，用移液 管取斐林试剂各 2 mL，分别放入被检试管中，然后把
试管放入装有热水的烧杯中，摇动试管，观察试管 中溶液颜色的变化 D．实验完成后，用蒸馏水反复洗涤固定化酶，再用体 积分数为 0.05%的双氧水洗涤，以防固定化酶被微 生物污染，然后于 0 ℃～4 ℃下保存
图中①是反应柱，②是固定化酶，③是分布着 小孔的筛板，不允许酶颗粒通过，而反应液可 以自由流出。
归纳提炼 检测牛奶中乳糖的分解实验的注意事项 (1)检测乳糖酶对牛奶的分解时，为了使实验现象更明 显，可以适当减少底物鲜牛奶的量或增加固定化酶的 含量，或适当延长保温时间。 (2)加酶分解时，温度不宜过高或过低，否则酶变性失 活或活性太低，得不到实验结果或不明显。 (3)酶回收要用缓冲液反复洗涤固定化酶，维持酶的活 性；再用体积分数为 0.05%的双氧水洗涤，达到消毒 目的，以防固定化酶被微生物污染；然后于 0～4 ℃下 保存，以备下次再使用。
2．方法步骤 (1)鲜牛奶的处理：取新鲜牛奶 0.5 kg 放入 1 000 mL 干净 烧杯中，__8_5_～__9_0__ ℃巴氏灭菌。将灭菌后的牛奶冷却至 __4_5_～__5_0___ ℃，__过__滤__后平均分为两部分，一部分放入 A 烧杯，另一部分放到 B 烧杯内作对照。
(2)加酶分解：向 A 烧杯内加入适量的__固__定__化__酶___制剂， _4_5_～__5_0___ ℃条件下保温 45 min，保温过程中要用预先
谢谢
1．固定化酶技术通常采用 A．包埋法
(B)
B．化学结合和物理吸附固定法
Hale Waihona Puke BaiduC．活化法
D．微囊化法
解析 酶的体积较小，容易从包埋的材料中漏出来，
所以一般采用化学结合和物理吸附固定法。
2．关于固定化酶和一般酶制剂在应用效果上的说法，错误的是
(A ) A．固定化酶生物活性强，可长久使用 B．一般酶制剂应用后和产物混合在一起，产物的纯度不高 C．一般酶制剂参加反应后不能重复利用 D．固定化酶可以反复利用，降低生产成本，提高产量和质量 解析 该题主要考查了固定化酶的优点，即应用后易与产 物分离，提高产品质量；可以反复利用，降低生产成本； 但是固定化酶作为生物催化剂，具有一定的生物活性，随 着时间的推移，酶的活性会降低，甚至消失，即固定化酶 不能长久使用。例如：生产高果糖浆的固定化酶一般只能 连续使用半年。